食品質(zhì)量與安全實驗

11食品質(zhì)量與安全》課程課程編號：419014生命科學(xué)系二O一二年四月00目 錄前言

前言 1蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測〕方法 2

食品中次硫酸氫鈉甲醛的測定〔乙酰丙酮比色法〕 4食品中亞硫酸鹽含量測定〔鹽酸副玫瑰苯胺比色法〕 6二乙胺基二硫代甲酸鈉法測定飲料中銅含量 9調(diào)味品摻假摻雜的鑒別檢驗 11酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定黃曲霉毒素B 1311前 言試驗總體目標(biāo): 對食品中有害成分分析檢測進展綜合訓(xùn)練試驗。適用專業(yè)年級: 食品科學(xué)與工程二年級第五學(xué)期序號試驗工程要求序號試驗工程要求類型每組人數(shù)試驗學(xué)時方法蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測〕必綜合2412 食品中次硫酸氫鈉甲醛的測定〔乙酰丙酮比色法〕必驗證243 〔鹽酸副玫瑰苯胺比色法〕必驗證244 二乙胺基二硫代甲酸鈉法測定飲料中銅含量必驗證245 調(diào)味品摻假摻雜的鑒別檢驗必綜合246 酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定黃曲霉毒素B必驗證24試驗環(huán)境要求每次可供給至少10套可正常使用的試驗裝置，試驗室面積為60平方米以通道正常。試驗總體要求實踐性環(huán)節(jié)中。本課程的重點、難點及教學(xué)方法建議1、重點:試驗原理與試驗操作的對應(yīng)關(guān)系，測量數(shù)據(jù)的處理方法，理論與試驗之間的差異。分光光度計的實際操作和應(yīng)用。2、難點：分光光度法和酶聯(lián)法的試驗原理與試驗技能。性及爭論性試驗內(nèi)容或試驗工程。10試驗1蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測方法一、試驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)快速卡法測定有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢驗法的試驗原理，2、生疏檢驗結(jié)果評定。3、嫻熟試驗操作及測定方法。二、試驗設(shè)備及材料要求1、恒溫水浴或恒溫培育箱。2、①固化有膽堿脂酶和靛酚乙酸脂試紙卡片；。②pH7.515.0g磷酸氫二鈉[NaHPO?12HO]1.59g無水磷酸2 4 2二氫鉀[KHPO500mL蒸餾水溶解。2 4三、試驗原理膽堿脂酶可催化靛酚乙酸脂〔紅色〕水解為乙酸與靛酚〔藍色〕，有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥對膽堿脂酶有抑制作用，使催化、水解、變色的過程發(fā)生轉(zhuǎn)變，由此可推斷出樣品中是否有高劑量有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥的存在。四、試驗內(nèi)容與步驟〔一〕整體測定法〔1〕選取具有代表性的蔬菜樣品〔小白菜、四季豆、茄子，擦去外表泥土，剪成1cm右方形碎片,5g10mL502min以上.(2)取一片快速卡，用白色藥片沾取提取液，放置10min以上進展預(yù)反響，有條件時在3710min。預(yù)反響后的藥片外表必需保持潮濕?！?〕將快速卡對折，用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反響。留意：每批測定應(yīng)設(shè)一個緩沖液的空白比照?！捕惩獗頊y定法〔粗篩法〕擦去蔬菜外表泥土，滴2~3滴緩沖液在蔬菜外表，用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。取一速片測卡，將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。10min3710min10min，預(yù)反響后的藥片外表必需保持潮濕。3min3min，使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反響。留意：每批測定應(yīng)設(shè)一個緩沖液的空白比照?！踩?、檢測結(jié)果推斷：1、結(jié)果推斷結(jié)果以酶被有機磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥抑制〔為陽性、未抑制〔陰性〕表示。與空白比照卡比較，白色藥片不變色或略有淺藍色均為陽性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{色或與空白比照卡一樣，為陰性結(jié)果。對陽性結(jié)果的樣品，可用其他方法進一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。2試驗結(jié)果各組小白菜陰性四季豆陽性茄子陽性五、思考題為什么要恒溫3min？時間過長或過短對試驗結(jié)果有什么影響？六、留意事項1、速測卡靈敏度指標(biāo)如下表所示。局部農(nóng)藥檢出限參考表農(nóng)藥名稱檢出限〔mg/kg〕農(nóng)藥名稱檢出限〔mg/kg〕農(nóng)藥名稱檢出限〔mg/kg〕甲氨磷1.7乙酸甲胺磷3.5久效磷2.5對硫磷1.7敵敵畏0.3甲萘盛25水胺硫磷3.1敵百蟲0.3好年冬1.0馬拉硫磷2.0樂果1.3呋喃丹0.5氧化樂果2.32、速測卡法符合率：在檢出的30份以上陽性樣品中，經(jīng)氣相色譜法驗證，陽性結(jié)果的符80%以上。3、蔥、蒜、蘿卜、韭菜、香菜、茭白、蘑菇和番茄汁液中，含有對酶有影響的植物次生物質(zhì)，簡潔產(chǎn)生假陽性，處理樣品時，可實行整株〔體〕蔬菜浸提或承受外表測定法。對一些含葉綠素較高的蔬菜，也可實行整株〔體〕蔬菜浸提法，削減色素的干擾。4、當(dāng)溫度條件低于37℃，酶反響速度隨之放慢，藥片加液后放置反響的時間也應(yīng)相對延長，延長時間確實定，應(yīng)以空白比照卡用手指〔體溫〕捏3min時可以變藍，即可往下操作。留意樣品放置的時間應(yīng)與空白比照卡放置的時間全都才有可比性。空白比照卡不變色的緣由：一是藥片外表緩沖溶液加得少、預(yù)反響后的藥片外表不夠潮濕；二是溫度太低。53min為準(zhǔn)，3min后的藍色會漸漸加深，24h后顏色回漸漸退去。2食品中次硫酸氫鈉甲醛的測定〔乙酰丙酮比色法〕一、試驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)乙酰丙酮比色法測定食品中次硫酸氫鈉甲醛的試驗原理，把握試驗的操作要點及測定方法。3、了解分光光度法的工作原理，正確嫻熟使用分光光度計。二、試驗設(shè)備及材料要求1、分光光度計；水蒸氣蒸餾裝置。2、試劑均為分析純，水均為蒸餾水：(1)10mL(85%)，100mL。(2)硅油。I18g100mL沸水，隨加隨攪拌，煮沸，放冷備用，此溶液臨用時現(xiàn)配。100mL25g3mL0.40mL，1個月。碘溶液：C(1/2I

)=0.1mol/L。2硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液：C(NaS22

O)=0.1000mol/L。3氫氧化鉀溶液：C(KOH)=1mol/L。10%硫酸溶液：取90mL10mLH2SO4(濃)。1g5mL100mL至刻度，從該溶液中吸取10.0mL0.1mol/L50.0mL，1mol/LKOH20mL，15H2SO410%溶液15mL，0.1000mol/LNa2S2O3標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液1mL10.0mL進展空白試驗。計算：X=(V0-V1)×C×15×1000/(10×1000)X—甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲藏液的濃度，mg/mL;V0—滴定空白溶液消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL;V1—滴定樣品溶液消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的體積，mL;C—標(biāo)準(zhǔn)硫代硫酸鈉溶液的摩爾濃度;15—甲醛(1/2HCHO)的摩爾質(zhì)量，g/moL;10—滴定時吸取甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲藏液的體積，mL。甲醛標(biāo)準(zhǔn)使用液：將標(biāo)定后的甲醛標(biāo)準(zhǔn)儲藏液用蒸餾水稀釋至5μg/mL。三、試驗原理435nm處進展分光光度測定。四、試驗內(nèi)容與步驟〔一〕樣品處理：10g500mL20mL2滴～310mL，馬上連通水蒸氣蒸餾裝置，進展20mL250mL250mL〔二〕測定：2mL～10mL25mL10mL00.50mL1.00mL3.00mL、5.00mL、7.00mL、10.00mL0.00、2.50μg、5.00μg、15.00μg、25.00μg、35.00μg、50.00μg25mL10mL。1mL31cm色杯以零管溶液調(diào)整零點，于波長435nm處測吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并記錄樣品吸光度值，扣除空白液吸光度值，查標(biāo)準(zhǔn)曲線計算結(jié)果?！踩硵?shù)據(jù)處理及計算結(jié)果X=(A×1000×V2)/(m×V1×1000×1000)X—樣品中游離甲醛的含量，g/kg;A—測定用樣品液中甲醛的質(zhì)量，μg;m—樣品質(zhì)量，g;V1—測定用樣品溶液體積，mL;V2—蒸餾液總體積，mL。試驗結(jié)果各組略有偏差X=(A×1000×V2)/(m×V1×1000×1000)=(15×1000×250)/(10×30×1000×1000)=0.0125g/kg五、思考題該試驗結(jié)果以游離甲醛計，假設(shè)以次硫酸氫鈉甲醛計，該怎么換算？六、留意事項(1)水蒸氣蒸餾過程中，回收瓶底部要稍稍加熱，促使樣品酸化過程中反響完全。(2)平行測定結(jié)果用算術(shù)平均值表示，保存兩位有效數(shù)字。(3)2mg/kg(以游離甲醛計)。試驗3食品中亞硫酸鹽含量測定〔鹽酸副玫瑰苯胺比色法〕一、試驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)鹽酸副玫瑰苯胺顯色比色法測定食品中亞硫酸鹽的試驗原理，2、把握試驗的操作要點及測定方法。二、試驗設(shè)備及材料要求1、分光光度計。2、試劑均為分析純，水均為蒸餾水：、四氯汞鈉吸取液：稱取13.6g6.0g1000mL放置過夜，過濾后備用。、1.2%氨基磺酸銨溶液(12g/L)。、甲醛溶液〔2g/L：吸取0.55mL無聚合沉淀的甲醛〔36%，加水稀釋至100mL，混勻。1g100mL拌煮沸，放冷備用，此溶液臨用時配制。10.6g100mL22g3mL100mL。、鹽酸副玫瑰苯胺溶液：稱取0.1g鹽酸副玫瑰苯胺〔CHNCL.4HO:p-rosaniline19 18 2 2hydrochlo-ride〕100mL20mL，100mL容量瓶中，加鹽酸〔1+1〕充分搖勻后使溶液由紅變黃，如不變黃再滴加少量鹽酸至消滅黃色，再加水稀釋至刻度，混勻備用。8、碘溶液[(1/2I)=0.100mol/L]。2、硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液[c(NaSO·5HO)=0.100mol/L]。223 20.5g200mL置過液，上清液用定量濾紙過濾備用。10.0mL250mL100mL20.00mL碘溶液〔0.1mol/L，5mL冰乙酸，搖勻，放置于暗處，2min后快速以0.100mol/L0.5mL100mL0.1mol/L20.0mL、5mL二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度按下式下式進展計算：(VX

V)c32.3110式中 X——二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度〔mg/mL；V——測定用亞硫酸氫鈉-四氯汞鈉溶液消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積〔mL；1V——試劑空白消耗代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積〔mol/L；2——硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度〔mol/L；32.03——每毫升硫代硫酸鈉[c(NaSO·5HO)=1.000mol/L]標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于二氧化硫的質(zhì)量(mg)。

223 2、二氧化硫使用液：臨用前將二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液以四氯汞鈉吸取液稀釋成每毫升相2μg、氫氧化鈉溶液〔20g/L。、硫酸三、試驗原理亞硫酸鹽與四氯汞鈉反響，生成穩(wěn)定的絡(luò)合物，再與甲醛及鹽酸副玫瑰苯胺作用生成紫紅550nm的濃度成正比，可以比色定量。結(jié)果以試樣中二氧化硫的含量表示。四、試驗內(nèi)容與步驟〔一、樣品處理10.00g〔試樣量可視含量凹凸而定100mL容量瓶中，參加4mL氫氧化鈉溶液20g/L5min后參加4mL硫酸1+71，然后參加四氯汞鈉吸取液，以水稀釋至刻度?！捕?、測定0.50ml～5.0mL25mL0.8、1.2、1.6、2.0、3.0、4.0μg二氧化硫，分別置于25mL帶塞比色管中。于試樣及標(biāo)準(zhǔn)管中各參加四氯汞鈉吸取液至10mL，然后再參加1mL氨基磺酸銨溶液12g/L、1mL甲醛溶液〔2g/L〕及1mL鹽酸副玫瑰苯胺溶液，搖勻，放置20min。用1cm550nm〔三〕數(shù)據(jù)處理及計算結(jié)果X A1000 m100

V10001000式中 X——測試樣中二氧化硫的含量〔g/kg；A——測定用樣液中二氧化硫的質(zhì)量〔μm——試樣質(zhì)量〔；V——測定用樣液的體積〔mL。計算結(jié)果表示到三位有效數(shù)字。試驗結(jié)果各組略有偏差X A1000 m100

V10001000X=(3×1000)/(10×1×1000×100)=0.003g/kg五、思考題1、二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液使用時為何要對其濃度進展標(biāo)定？2、餅干、粉絲等樣品處理時，參加亞鐵氰化鉀溶液以及乙酸鋅溶液的目的是什么？六、留意事項11mg/kg。210%。3、亞硫酸和食品中的醛、酮和糖相結(jié)合，以結(jié)合型的亞硫酸存在于食品中。加堿是將食品中的二氧化硫釋放出來，加硫酸是為了中和堿，這是由于總的顯色反響是在微酸性條件下進展的。4、顯色時間時顯色有影響，所以在顯色時要嚴(yán)格掌握顯色時間。5、鹽酸副玫瑰苯胺的精制方法如下：稱取20g400mL50mL保溫漏斗趁熱過濾1000mL乙醚-乙醇〔10:1〕的混合液中，振搖3min～5min，以布氏漏斗抽濾，再用乙醚反復(fù)洗滌至醚層不帶色為止，于硫酸枯燥器中枯燥，研細后貯于棕色瓶中保存。6、如無鹽酸副玫瑰苯胺可用鹽酸品紅代替。7、氯化高汞試劑有毒，使用時應(yīng)留意。8、氨基磺酸銨溶液不穩(wěn)定，宜隨配隨用，隔絕空氣保存，可穩(wěn)定一周。4二乙胺基二硫代甲酸鈉法測定飲料中銅含量一、試驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)二乙胺基二硫代甲酸鈉法測定飲料中銅含量的試驗原理，2、把握試驗的操作要點及測定方法。二、試驗設(shè)備及材料要求1、紫外可見分光光度計，20mm比色皿、125ml錐形分液漏斗〔具有磨口玻璃塞且活塞上不能涂油性潤滑劑。2、①鹽酸、硝酸、高氯酸、氨水：優(yōu)級純。②四氯化碳、三氯甲烷。③〔1+1〕氨水。④0.2%0.2g100ml，用棕色玻璃瓶貯存，放在暗處可以保存兩周。⑤0.4g/L0.02g95%50ml中。⑥EDTA-5gEDTA20g100ml，參加4滴甲酚紅指示液，用〔1＋1〕氨水調(diào)至PH8－8.5〔由紅色變?yōu)闇\紫色〕，參加少量0.2%二乙胺基二硫代酸鈉溶液，用四氯化碳萃取提純。⑦氯化銨-70g570ml氨水，用水稀1000ml。1.00mg銅。⑨銅標(biāo)準(zhǔn)溶液：吸取5.00ml1L容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，此溶液5.00微克銅。三、試驗原理在堿性溶液中〔PH9—10，銅與二乙胺基二硫代甲酸鈉作用，生成摩爾比為1:2的黃棕色絡(luò)合物，該絡(luò)合物可被四氯化碳或氯仿萃取，其最大的吸取波長為440nm，在測定條件下有1h，1.4.四、試驗內(nèi)容與步驟〔一〕試樣制備清潔地表水可直接進展測定〔二〕顯色萃?、傥∵m量的試樣〔30μg50ml〕125ml50ml。②清潔水樣可參加10mlEDTA-檸檬酸銨溶液，5ml氯化銨-氫氧化銨緩沖溶液，搖勻。對消解后的試樣可參加10mlEDTA-檸檬酸銨溶液，2滴甲酚紅指示液，用〔1+1〕氨水調(diào)至由紅色經(jīng)黃色變成紫色。0.2%5ml，5min。④準(zhǔn)確參加10ml四氯化碳，用力振蕩不少于2min〔假設(shè)用振蕩器振蕩，應(yīng)不少于4min，靜置待分層。⑤測量：用濾紙吸去漏斗頸部的水分，塞入一小團脫脂棉，棄去最初流出的有機相1~2ml，20mm440nm50ml水代替試樣，按上述步驟同時進展空白試驗，以試樣的吸光度減去空白試驗的吸光度后，從校準(zhǔn)曲線查出銅含量?！踩承?zhǔn)曲線125ml0、0.20、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00、6.00ml的銅標(biāo)準(zhǔn)使用溶液，加水至體積為50ml，配成一組標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。②按上述操作步驟進展顯色萃取和測量，將測得的吸光度作空白校正后，再與相應(yīng)的銅含量繪制校準(zhǔn)曲線?！菜摹硵?shù)據(jù)處理及計算結(jié)果：C〔mg/L〕由以下公式計算：M(g)C(mg/L) 5V(ml)銅〔Cu,mg/L〕=m/V式中，m－山校準(zhǔn)曲線的銅量〔μg；V－萃取用的水樣體積〔ml。試驗結(jié)果各組略有偏差M(g)C(mg/L)

5V(ml)C=M×5/V=5×5/50=0.5〔mg/L〕五、思考題為什么分液漏斗的活塞不得涂沫油性潤滑劑？六、留意事項1、為了防止銅離子吸附在采樣容器壁上，采樣后樣品應(yīng)盡快進展分析，假設(shè)需要保存，100ml〔1+1〕0.5ml。2、水樣中銅含量高時，也可直接在水相中進展比色，并用明膠或淀粉溶液作穩(wěn)定劑，不必用四氯化碳萃取，但校準(zhǔn)曲線要按同樣操作步驟。3、萃取和比色時，避開日光直射，以免銅-DDTC5調(diào)味品摻假摻雜的鑒別檢驗一、試驗?zāi)康?、通過試驗學(xué)習(xí)檢測調(diào)味品摻假的試驗原理2、把握調(diào)味品的快速檢測法。把握碘液法和高錳酸鉀法鑒別檢驗釀造醋和人工合成醋的試驗操作二、試驗設(shè)備及材料要求1、分液漏斗；納氏比色管等。2、試劑均為分析純，水均為蒸餾水：①剛果紅試紙②0.01％甲基紫溶液；③20④戊醇；⑤0.1mol/L碘液；⑥10%硫酸⑦33g8515mL20mL蒸餾水混合，100mL；⑨亞硫酸品紅溶液：取0.1g8060mL，待其溶解后放入100mL10mL10％亞硫酸鈉和１mL鹽酸，加水至刻度混勻，放置過液，如有顏色可用活性炭脫色，假設(shè)消滅紅色應(yīng)重配制。三、試驗原理1、游離礦酸〔硫酸、鹽酸、硝酸及硼酸等〕存在時，氫離子濃度增大，可轉(zhuǎn)變指示劑的顏色。GB2719-81規(guī)定了食醋的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，醋酸〔%，以醋酸計〕≥3.5，并規(guī)定游離礦酸規(guī)定為不得檢出。因游離礦酸對人體都有損害作用。2、釀造醋中除了含醋酸，還含有酯類、復(fù)原糖、固形物、灰分、氨基酸態(tài)氮等，釀造醋遇碘液在酸堿性條件下可形成褐色的碘仿沉淀，而人工合成促不發(fā)生此反響3、釀造醋中含有復(fù)原性物質(zhì)，能使氧化劑高錳酸鉀褪去顏色，而兌制醋對氧化劑比較穩(wěn)定，不能使高錳酸鉀褪色。四、試驗內(nèi)容與步驟〔一〕食醋中游離礦酸的檢驗：1、用剛果紅試劑沾少許樣品，觀看其顏色變化狀況，假設(shè)試紙變?yōu)樗{色表示有游離礦酸存在。25mL22~30.01％甲基紫溶液，溶液呈綠色表示有游離礦酸存在?！捕翅勗齑缀腿斯ず铣纱椎蔫b別檢驗1、碘液法50mL20％氫氧化鈉溶液至呈堿性，參加戊醇15mL，振搖，靜置。分出戊醇，用濾紙過濾，收集濾液于蒸發(fā)皿內(nèi)，置水浴上蒸干殘渣用少量水溶解，再滴加數(shù)滴硫酸使呈顯著酸性。滴加碘液，如為釀造醋，則溶液消滅渾濁，并產(chǎn)生明顯褐色沉淀。2.高錳酸鉀法〔1〕10mL25mL0.5mL3％高錳酸鉀——磷酸液，觀看其顏色變化；5min2mL，搖勻。最終再加亞硫酸品紅溶液5mL，20min觀看它的變化狀況。觀看結(jié)果：樣品加高錳酸鉀加亞硫酸品紅釀造醋很快變色深紫色蒸餾酒醋變色較慢淡紫色人工合成醋無變化〔或紫紅色〕無色或幾乎無色試驗結(jié)果〔一〕食醋中游離礦酸的檢驗：1、剛果紅試紙 山西白醋有藍色，其他均無藍色，表示只有山西白醋有游離礦酸存在。2、甲基紫溶液，山西白醋有綠色，其他無?！捕翅勗齑缀腿斯ず铣纱椎蔫b別檢驗高錳酸鉀試驗結(jié)果記錄與評價。檢測樣品名稱溶液顏色變化狀況檢驗結(jié)果評價山西白醋紫紅色人工合成醋海天食用醋很快變色釀造醋家家調(diào)味醋很快變色釀造醋五、思考題1、碘液檢驗法中，滴加碘液前為何將溶液調(diào)整呈酸性？2、簡述高錳酸鉀鑒別法的試驗原理，為何人工合成醋無此反響。六、留意事項食醋中游離礦酸的檢驗試驗中：1、假設(shè)樣品顏色很深時，用活性炭脫色過濾后再測試。2、乙酸是弱酸，pH值不能到達使剛果紅試紙和甲基紫溶液變色的程度。但假設(shè)有游離的酒石酸及草酸，則甲基紫溶液也呈陽性反響，必需進一步按以下法做確證明驗：5mL52mL，有白色混濁或沉淀產(chǎn)生證明有硫酸或其鹽存在。5mL12滴，假設(shè)有白色混濁或沉淀產(chǎn)生證明有鹽酸或氯化物存在。5滴，再加濃硝酸1滴，假設(shè)有硝酸存在時則呈藍色。6偶氮試劑比色法檢測水產(chǎn)品中的組胺一、試驗?zāi)康?、了解偶氮試劑比色法測定水產(chǎn)品中組胺的方法原理；2、把握正戊醇提取組胺的操作技術(shù)；3二、試驗設(shè)備及材料要求1、分光光度計。2、正戊醇；三氯乙酸溶液〔100g/L；碳酸鈉溶液〔50g/L；氫氧化鈉溶液〔鹽酸〔1+11。3、偶氮試劑0.55ml200ml，置于冰箱中。②乙液