阿司匹林腸溶片

實(shí)訓(xùn)四阿司匹林腸溶片的含量測(cè)定高效液相色譜法基本理論知識(shí)高效液相色譜儀的組成高效液相色譜儀的操作實(shí)訓(xùn)操作：高效液相色譜法測(cè)定阿司匹林腸溶片的含量液相色譜：經(jīng)典液相色譜法

高效液相色譜法高效液相色譜法經(jīng)典柱色譜法高壓輸送流動(dòng)相無(wú)外加壓力固定相粒度小、分布均勻固定相粒度大、分布不均色譜柱長(zhǎng)度固定，內(nèi)徑小色譜柱長(zhǎng)度差別大，內(nèi)徑大安裝了在線檢測(cè)器未安裝在線檢測(cè)器分離效能高，分析速度快分離效能低，分析速度慢高效液相色譜法的特點(diǎn)一、固定相：填充劑1.特點(diǎn)：顆粒細(xì)且均勻傳質(zhì)快機(jī)械強(qiáng)度高，能耐高壓化學(xué)穩(wěn)定性好，不與流動(dòng)相發(fā)生化學(xué)反應(yīng)高效液相色譜的基本原理2.化學(xué)鍵合相：用化學(xué)反應(yīng)的方法將固定液的官能團(tuán)鍵合在載體表面，多用硅膠作為載體。（1）非極性鍵合相非極性烴基，如C18﹑C8﹑C1與苯基等鍵合在硅膠表面。用于反相色譜。ODS鍵合相（2）弱極性鍵合相醚基和二羥基等鍵合相用于反相或正相色譜（3）極性鍵合相：常用氨基﹑氰基鍵合相（氰乙硅烷基≡Si(CH2)2CN)鍵合硅膠一般用于正相色譜3.化學(xué)鍵合相的特點(diǎn)使用過(guò)程中不流失化學(xué)穩(wěn)定性好適于梯度洗脫載樣量大注意：流動(dòng)相的pH一般應(yīng)在2-8，否則會(huì)引起硅膠溶解。二、流動(dòng)相：洗脫劑1.要求與固定相不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)對(duì)試樣有適宜的溶解度純度高，粘度小。與檢測(cè)器相適應(yīng)。2.流動(dòng)相對(duì)分離的影響n由色譜柱（固定相）性能決定α主要受溶劑種類的影響，α=K2/K1=k2/k1k受溶劑配比的影響。

3.洗脫方式等度洗脫（等濃度洗脫）

流動(dòng)相所用的溶劑種類與配比恒定。梯度洗脫

在一定分析周期內(nèi)，按一定程序，不斷改變流動(dòng)相的濃度配比。提高分離效果。4.流動(dòng)相的強(qiáng)度和選擇性流動(dòng)性的極性與洗脫能力正相色譜：溶劑極性越強(qiáng)，洗脫能力越強(qiáng)反相色譜：極性弱的溶劑洗脫能力強(qiáng)反相色譜首選純?nèi)軇杭状?、乙腈和水的組合。三、反相鍵合相色譜的分離條件固定相非極性鍵合相，如ODS流動(dòng)相以水為基礎(chǔ)溶劑，加入甲醇、乙腈等極性調(diào)節(jié)劑弱酸、弱堿或緩沖鹽作為離子抑制劑加入0.1%－1%的醋酸鹽、磷酸鹽可減少殘余硅醇基的作用儲(chǔ)液罐控制系統(tǒng)脫氣泵進(jìn)樣閥色譜柱檢測(cè)器收集器數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)樣儀器的重要組件高壓輸液泵輸送流動(dòng)相柱塞往復(fù)泵多元梯度洗脫裝置進(jìn)樣器六通進(jìn)樣閥自動(dòng)進(jìn)樣器色譜柱高效液相色譜系統(tǒng)中最重要的組件包括柱管和固定相主要柱參數(shù)：柱長(zhǎng)、柱內(nèi)徑、粒徑檢測(cè)器紫外檢測(cè)器（UV）：應(yīng)用最為普遍固定波長(zhǎng)、可變波長(zhǎng)、二極管陣列（DAD）蒸發(fā)光散射檢測(cè)器：ELSD儀器的操作過(guò)濾溶劑、流動(dòng)相并超聲脫氣排氣（開(kāi)關(guān)、溶劑沖洗、Drain旋鈕、Purge）溶劑、流動(dòng)相沖柱（更換溶劑時(shí)要重新排氣）打開(kāi)檢測(cè)器和色譜工作站（設(shè)置參數(shù)）進(jìn)樣（過(guò)濾、反復(fù)潤(rùn)洗進(jìn)樣針、旋轉(zhuǎn)手柄）記錄數(shù)據(jù)（保留時(shí)間、峰面積）平衡系統(tǒng)關(guān)閉儀器溶劑過(guò)濾裝置PowerDrain(Open)PurgePumpPower實(shí)訓(xùn)操作腸溶片：查閱藥典（色譜條件；方法）乙腈沖柱0.5h，流動(dòng)相沖柱0.5h，進(jìn)樣供試品，對(duì)照品的配制記錄峰面積乙腈：水（10：90）沖柱1h，乙腈沖柱0.5h實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)測(cè)定波長(zhǎng)（nm）流速（ml/min）進(jìn)樣量（μl）停止時(shí)間（min）流動(dòng)相組成27611015保留時(shí)間（min）峰面積對(duì)照品

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供試品

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