生物制品學(xué)生物制品的質(zhì)量管理、檢定與標(biāo)準(zhǔn)化ppt

第三章生物制品的質(zhì)量管理、檢定與標(biāo)準(zhǔn)化01二月20231第一節(jié)生物制品的GMP管理一、GMP概況即（GoodManufacturingPracticesforDrugs,GMP）是用科學(xué)、合理、標(biāo)準(zhǔn)化的條件和方法來(lái)控制藥品生產(chǎn)的全過(guò)程，將差錯(cuò)發(fā)生的可能性降到最低，從而保證生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)藥品的一套管理制度。GMP根據(jù)適用范圍可分為三類：國(guó)際性的GMP國(guó)家性質(zhì)的GMP行業(yè)性的GMP01二月20232第一節(jié)生物制品的BMP管理二、GMP的基本內(nèi)容不同國(guó)家和組織頒布的GMP在具體條款上有差異，但基本內(nèi)容是一致的，涉及到以下三個(gè)方面的內(nèi)容：人員硬件軟件01二月20233第一節(jié)生物制品的BMP管理三、GMP的作用和特點(diǎn)：1、GMP的實(shí)施涉及兩個(gè)方面：1）政府藥政管理部門從管理角度把GMP看成是政府對(duì)制藥廠提出的最低要求，并作為藥品質(zhì)量監(jiān)督員檢查藥廠和藥品質(zhì)量的依據(jù)；2）生產(chǎn)單位應(yīng)把GMP視為本廠所必須具備的技術(shù)水平，即生產(chǎn)管理、質(zhì)量管理和質(zhì)量監(jiān)測(cè)應(yīng)達(dá)到的必需水平。01二月20234第一節(jié)生物制品的BMP管理三、GMP的作用和特點(diǎn)：2、GMP是根據(jù)通用性的規(guī)定，針對(duì)本國(guó)所有藥廠而制定的。各藥廠應(yīng)按GMP的要求，制定更具體的實(shí)施條例。3、GMP是為了防患于未然，應(yīng)把管理的重點(diǎn)放在生產(chǎn)過(guò)程中，通過(guò)對(duì)生產(chǎn)過(guò)程的嚴(yán)格控制來(lái)保證生產(chǎn)出安全有效的藥品。4、GMP強(qiáng)調(diào)有效性的證實(shí)。對(duì)一個(gè)工序或一件用具、設(shè)備在用于生產(chǎn)之前，要經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，證明是符合要求的、有效的，以確保產(chǎn)品質(zhì)量。01二月20235第一節(jié)生物制品的BMP管理三、GMP的作用和特點(diǎn)：5、在管理系統(tǒng)上，GMP要求有生產(chǎn)管理部門和質(zhì)量管理部門兩權(quán)分立的特點(diǎn)，在組織上兩者的地位是惡行的，在人事上兩部門的負(fù)責(zé)人不能互相兼任。6、GMP強(qiáng)調(diào)人員素質(zhì)、衛(wèi)生要求、無(wú)菌要求、核對(duì)制度以及質(zhì)量監(jiān)督檢查制度。01二月20236第一節(jié)生物制品的BMP管理四、實(shí)施GMP的目的和意義實(shí)施GMP是我國(guó)醫(yī)藥產(chǎn)品進(jìn)入國(guó)際市場(chǎng)的先決條件。實(shí)施GMP是企業(yè)及其產(chǎn)品增強(qiáng)競(jìng)爭(zhēng)力的重要保證實(shí)施GMP，才能使藥品質(zhì)量得到最大限度的保證。01二月20237第一節(jié)生物制品的BMP管理五、生物制品GMP檢查要點(diǎn)保護(hù)環(huán)境和操作者防止交叉污染，嚴(yán)格分區(qū)，獨(dú)立空調(diào)局部負(fù)壓盡可能一個(gè)產(chǎn)品、一個(gè)車間徹底消毒和清場(chǎng)嚴(yán)格動(dòng)物使用及動(dòng)物管理環(huán)境溫度01二月20238第一節(jié)生物制品的BMP管理六、生物制品GMP認(rèn)證檢查要點(diǎn)1．強(qiáng)毒與弱毒“強(qiáng)毒”系指生物制品生產(chǎn)及檢定用細(xì)菌株及病毒株，其致病力強(qiáng)，傳染性強(qiáng)，感染的機(jī)率高，感染后癥狀較重，可危及生命健康，甚至引起傳染病爆發(fā)流行的細(xì)菌菌株及病毒株?！叭醵尽毕抵干镏破飞a(chǎn)及檢定用細(xì)菌株及病毒株，經(jīng)過(guò)天然或人工改造方法，去除或封閉其毒力因子，使其致病力減弱，一般不引起感染或發(fā)病的細(xì)菌菌株及病毒株。強(qiáng)毒株與弱毒株，不允許混放在一起，其生產(chǎn)及檢定操作場(chǎng)所須嚴(yán)格分開(kāi)，并有專用設(shè)備。01二月20239第一節(jié)生物制品的BMP管理六、生物制品GMP認(rèn)證檢查要點(diǎn)2．死毒與活毒“活毒”是制備滅活疫苗的第一階段或減毒活疫苗生產(chǎn)時(shí)，將生產(chǎn)用細(xì)菌或病毒株進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)制備，其生產(chǎn)過(guò)程和生產(chǎn)場(chǎng)所、生產(chǎn)設(shè)備、器材含有大量活的細(xì)菌或活的病毒生物體，稱之為“活毒”?！八蓝尽笔侵苽錅缁钜呙鐣r(shí)，第一階段生產(chǎn)出大量活細(xì)菌或或病毒后，到第二階段，對(duì)活生物體加入一定量甲醛或適宜滅活劑，將全部細(xì)菌或病毒殺死，稱之為“死毒”?！盎疃尽迸c“死毒”的生產(chǎn)場(chǎng)所、生產(chǎn)設(shè)備及器材，須嚴(yán)格分開(kāi)。01二月202310第一節(jié)生物制品的BMP管理六、生物制品GMP認(rèn)證檢查要點(diǎn)3．“脫毒前”與“脫毒后”“脫毒前”系指破傷風(fēng)梭狀菌、白喉?xiàng)U菌繁殖培養(yǎng)時(shí)，生產(chǎn)大量破傷風(fēng)毒素及白喉毒素，對(duì)人體有致病性，這一階段為“脫毒前”?！懊摱竞蟆毕抵付舅刂屑尤胍欢考兹┗蜻m宜脫毒劑，將毒素去掉毒性，不再具有致病性，仍保留其抗原性和免疫原性，稱之為“脫毒后”。“脫毒前”與“脫毒后”的生產(chǎn)場(chǎng)所、生產(chǎn)設(shè)備及器材須嚴(yán)格分開(kāi)。01二月202311第一節(jié)生物制品的BMP管理六、生物制品GMP認(rèn)證檢查要點(diǎn)4．血液制品、抗血清、人和動(dòng)物組織制備的制品，其生產(chǎn)所用的原材料，為人血漿、動(dòng)物免疫血清、人和動(dòng)物器官、組織及組織液等，均含有大量的人和動(dòng)物的異種蛋白質(zhì)或細(xì)胞活性物質(zhì)，具有較強(qiáng)的致敏原物質(zhì)，不經(jīng)過(guò)相應(yīng)處理和加工，可致人體過(guò)敏反應(yīng)或血清病。因此，血液制品、抗血清、人和動(dòng)物組織生產(chǎn)制備制品時(shí)，須有專用生產(chǎn)場(chǎng)所、生產(chǎn)設(shè)備及器材，不可與其他生物制品混用。01二月202312第一節(jié)生物制品的BMP管理六、生物制品GMP認(rèn)證檢查要點(diǎn)5．芽孢菌制品，系用炭疽桿菌、破傷風(fēng)梭菌、肉毒梭菌等含有芽孢菌來(lái)生產(chǎn)制備的制品，芽孢菌是微生物對(duì)外周環(huán)境抵抗力最強(qiáng)的生命單位。芽孢菌在自然界可存活數(shù)十年及百年之久，100℃可耐受2小時(shí)以上，在70％酒精中存活20年，低溫和干燥對(duì)其毫無(wú)作用。生產(chǎn)芽孢菌制品的生產(chǎn)場(chǎng)所、生產(chǎn)設(shè)備和器材須專用，與其他制品生產(chǎn)嚴(yán)格分開(kāi)。01二月202313第一節(jié)生物制品的BMP管理六、生物制品GMP認(rèn)證檢查要點(diǎn)6．卡介苗與結(jié)核菌制品生產(chǎn)場(chǎng)所，必須嚴(yán)格分開(kāi)，其生產(chǎn)設(shè)備、器材、生產(chǎn)用菌種必須專用，不能混用。01二月202314第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定生物制品的基本屬性和特點(diǎn)其起始材料均為生物活性物質(zhì)；生物制品生產(chǎn)加工全過(guò)程是生物學(xué)過(guò)程，是無(wú)菌操作過(guò)程；有些生物制品的生產(chǎn)過(guò)程是有毒或有菌的過(guò)程;生物制品多為蛋白質(zhì)或多肽類物質(zhì)，分子量較大，并具有復(fù)雜的分子結(jié)構(gòu),較不穩(wěn)定，易失活，易被微生物污染，易被酶解破壞。01二月202315第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定生物制品的基本屬性和特點(diǎn)其質(zhì)量控制和質(zhì)量檢定是采用生物學(xué)分析方法，其效價(jià)或生物活性檢定有其變異性；生物制品原材料、中間品、成品、運(yùn)輸、貯存、甚至使用保持在“冷鏈”系統(tǒng)中；特別是預(yù)防制品使用對(duì)象不是病人，而是健康人群；生物制品的質(zhì)量控制實(shí)行生產(chǎn)全過(guò)程監(jiān)控;

生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)檢查時(shí)要充分考慮這些特點(diǎn)01二月202316第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定生物制品實(shí)行國(guó)家批簽發(fā)

《藥品管理法實(shí)施辦法》中規(guī)定，國(guó)家對(duì)所規(guī)定的生物制品實(shí)行國(guó)家批簽發(fā)制度。國(guó)家批簽發(fā)——國(guó)家藥品監(jiān)督管理部門授權(quán)國(guó)家藥品檢定機(jī)構(gòu)，對(duì)所規(guī)定的生物制品，在出廠前或進(jìn)口時(shí)，按批進(jìn)行審查和簽發(fā)，凡審查或檢定不合格的不允許銷售或者進(jìn)口。01二月202317第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定生物制品國(guó)家批簽發(fā)分為三種類型一、僅對(duì)某種制品每批的批記錄摘要進(jìn)行審查，符合要求發(fā)給批簽發(fā)證；二、審查批記錄摘要＋對(duì)部分批次制品進(jìn)行抽檢檢定、審查和檢定符合要求發(fā)給批簽發(fā)證；三、審查批記錄摘要＋批批檢定，審查和批批檢定符合要求發(fā)給批簽發(fā)證。01二月202318第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定

生物制品必須具備兩個(gè)重要條件，即安全性和有效性。為保證生物制品質(zhì)量，世界衛(wèi)生組織要求各國(guó)生產(chǎn)的制品必須有專門的檢定機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)成品的質(zhì)量檢定，并且規(guī)定檢定部門有熟練的高級(jí)技術(shù)人員和精良的設(shè)備條件，以保證檢定工作的質(zhì)量。未經(jīng)檢定審批發(fā)給正式檢定合格證的制品，不準(zhǔn)出廠。生物制品檢定的依據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》《中國(guó)生物制品規(guī)程》01二月202319第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定生物技術(shù)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的依據(jù)一、主要依照《重組DNA產(chǎn)品質(zhì)量控制要點(diǎn)》、《中國(guó)生物制品規(guī)程》、《中國(guó)藥典》等要求進(jìn)行。二、參考世界衛(wèi)生組織（WHO）和美國(guó)FDA頒布的指南、ICH文件和《歐洲藥典》。檢定標(biāo)準(zhǔn)、檢定方法：準(zhǔn)確可靠、切實(shí)可行；保證產(chǎn)品安全、有效。01二月202320生物技術(shù)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的內(nèi)容1、目標(biāo)產(chǎn)品的均一性2、建立目標(biāo)產(chǎn)品生物學(xué)活性或免疫學(xué)效價(jià)測(cè)定方法3、研究建立目標(biāo)產(chǎn)品的免疫學(xué)活性的測(cè)定方法及質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)4、研究建立國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品或參考品5、建立目標(biāo)產(chǎn)品生產(chǎn)相關(guān)雜質(zhì)的限量分析方法和標(biāo)準(zhǔn)6、制定出保證上述生物技術(shù)產(chǎn)品臨床安全、有效、與WHO標(biāo)準(zhǔn)相一致的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范化的檢定方法第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定01二月202321第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定

研究建立靈敏、穩(wěn)定的理化性質(zhì)、純度、含量的測(cè)定方法及質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。研究建立目標(biāo)產(chǎn)品的生物學(xué)功效的測(cè)定方法及質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)；建立用于藥物生物學(xué)功效檢定用的細(xì)胞系和動(dòng)物模型。

運(yùn)用生化標(biāo)準(zhǔn)化原則，以WHO國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品為對(duì)照，研制出國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品或參考對(duì)照品。在效價(jià)定義上要求與國(guó)際單位一致；沒(méi)有國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品的新藥，則根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品要求自行研制國(guó)家參比品。

外源DNA、菌體蛋白質(zhì)、細(xì)菌內(nèi)毒素以及病毒、支原體、細(xì)菌等在工藝中加入有害物質(zhì)的檢測(cè)。

01二月202322重組產(chǎn)品質(zhì)量控制上存在的難點(diǎn)建立重組藥物的生物學(xué)活性測(cè)定方法；理化測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品的穩(wěn)定性；人源化單抗中的人源化程度檢測(cè)方法及標(biāo)準(zhǔn)研究；重組人白蛋白等大劑量重組產(chǎn)品安全性評(píng)價(jià)問(wèn)題；反義核酸藥物理化特性測(cè)定和效力測(cè)定，即如何評(píng)價(jià)反義核酸的體內(nèi)及體外活力；基因治療藥物的安全性評(píng)價(jià)包括反轉(zhuǎn)錄病毒、生物分布和效力測(cè)定；DNA疫苗的安全性和效力檢測(cè)方法研究；干細(xì)胞治療產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立（干細(xì)胞鑒定及活力測(cè)定）。01二月202323我國(guó)基因工程產(chǎn)品安全管理

法規(guī)和技術(shù)指南《傳代細(xì)胞系生產(chǎn)生物制品的規(guī)程》《人用鼠源性單克隆抗體質(zhì)量控制要點(diǎn)》《預(yù)防用新生物制品臨床研究的技術(shù)要求》《人用重組DNA制品質(zhì)量控制要點(diǎn)》《人的體細(xì)胞治療申報(bào)臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則》《人基因治療申報(bào)臨床試驗(yàn)指導(dǎo)原則》《藥理毒理檢查指導(dǎo)原則》《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理辦法》《藥品注冊(cè)管理辦法》01二月202324生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制生物技術(shù)藥物的特點(diǎn)：1、來(lái)源：活的生物體（細(xì)菌或細(xì)胞）；2、結(jié)構(gòu)：復(fù)雜（包括組成、空間結(jié)構(gòu)）；3、生產(chǎn)：涉及生物材料和生物學(xué)過(guò)程（發(fā)酵、細(xì)胞培養(yǎng)，分離純化等），有其固有的易變性。01二月202325生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制質(zhì)量控制包括兩個(gè)方面：1、生產(chǎn)過(guò)程中質(zhì)量控制GMP（硬件、軟件）2、最終目標(biāo)產(chǎn)品的質(zhì)量控制（方法學(xué)研究）01二月202326質(zhì)量控制方法學(xué)研究具體內(nèi)容一、生物學(xué)活性測(cè)定和比活性二、蛋白質(zhì)純度檢查三、蛋白質(zhì)含量測(cè)定四、蛋白質(zhì)藥物理化性質(zhì)的鑒定五、蛋白質(zhì)的二硫鍵分析六、對(duì)糖蛋白的特殊要求七、殘余雜質(zhì)檢查八、安全性及其他檢測(cè)項(xiàng)目九、生物技術(shù)藥物待測(cè)樣品保存01二月202327一、生物學(xué)活性測(cè)定和比活性

1、意義：1）基因工程產(chǎn)品的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)、多肽，其活性由產(chǎn)品的氨基酸序列或其空間結(jié)構(gòu)所形成的活性中心所決定的，與其絕對(duì)質(zhì)量不一致。2）基因工程產(chǎn)品的生物學(xué)活性與藥效學(xué)基本相一致。3）利用生物學(xué)活性建立的測(cè)定效價(jià)體系，是給藥品定量的依據(jù)，保證產(chǎn)品藥效的重要手段。01二月202328效價(jià)測(cè)定一般原則1、國(guó)際通用方法；2、測(cè)定結(jié)果須用國(guó)際或國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品校正，以國(guó)際單位表示。01二月202329生物學(xué)活性測(cè)定方法分類1）體外細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)定法

a、促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)作用（G-CSF:NFS-60）

b、抑制細(xì)胞生長(zhǎng)作用(TNF:L929)

c、間接保護(hù)細(xì)胞作用(IFN:VISH;VSV)2）離體動(dòng)物器官測(cè)定法采用家兔主動(dòng)脈條測(cè)定重組腦利鈉肽生物活性。3）體內(nèi)測(cè)定法4）生化酶促反應(yīng)測(cè)定法5）免疫學(xué)活性測(cè)定法01二月202330

利用動(dòng)物體內(nèi)某些指標(biāo)變化，定出產(chǎn)品的單位，如EPO活性測(cè)定，體內(nèi)注射EPO后，計(jì)算小鼠網(wǎng)織紅細(xì)胞增加的數(shù)量與標(biāo)準(zhǔn)品比較，確定其活性單位。01二月202331生物學(xué)活性測(cè)定方法選擇體內(nèi)測(cè)定和體外測(cè)定方法

a、體內(nèi)測(cè)定：即整體動(dòng)物測(cè)定，能為較大范圍的重組產(chǎn)品的效價(jià)提供有用信息，但費(fèi)時(shí)、昂貴、難操作及同時(shí)存在倫理問(wèn)題，大多數(shù)情況下傾向于選擇體外測(cè)定方法。

b、體外測(cè)定：可使用分離的器官或組織、原代細(xì)胞或傳代細(xì)胞系，目前最常用方法是連續(xù)生長(zhǎng)、因子依賴的、克隆化的細(xì)胞系的方法，其測(cè)定結(jié)果比較準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好、經(jīng)濟(jì)、容易使用和便于統(tǒng)計(jì)分析。01二月202332生物學(xué)活性測(cè)定方法選擇2、定量、半定量、定性方法

a、通過(guò)研究首先選擇能夠定量評(píng)價(jià)的方法，最好的選擇是背景較低的反應(yīng)，并且對(duì)相關(guān)產(chǎn)品有陡峭的、可重復(fù)的劑量-反應(yīng)曲線；其次考慮半定量方法（如NGF），最后考慮定性（如BMP）方法。

b、對(duì)生產(chǎn)工藝穩(wěn)定，生物學(xué)活性測(cè)定方法復(fù)雜，可采用其他替代方法（如重組人生長(zhǎng)激素用HPLC定量方法代替復(fù)雜生物活性測(cè)定方法）。01二月202333第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定一、生物制品的理化檢定(附常規(guī)的檢定方法)生物制品的檢定一般分理化檢定、安全檢定和效力檢定三個(gè)方面1、物理性狀檢定1）外觀檢定：通過(guò)特定的人工光源檢測(cè)生物制品的外觀，其顏色、狀態(tài)及加入蒸餾水后的澄清度應(yīng)符合藥物的規(guī)程要求。（1）透明液制品：不得含有異物、白點(diǎn)、凝塊、渾濁或搖不散的沉淀物。01二月202334第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定一、生物制品的理化檢定(附常規(guī)的檢定方法)1、物理性狀檢定1）外觀檢定：（2）懸濁液制品：應(yīng)為乳白色渾懸液，不得有搖不散的菌塊或其他異物。（3）凍干制品：應(yīng)為淡黃色或白色疏松體，呈海綿狀或結(jié)晶狀，應(yīng)無(wú)融化現(xiàn)象。01二月202335第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定2）真空度凍干制品進(jìn)行真空封存，可進(jìn)一步保證制品的生物活性和穩(wěn)定性?？捎酶哳l火花真空測(cè)定器檢查其真空程度，凡有真空度者瓶?jī)?nèi)應(yīng)出現(xiàn)藍(lán)紫色光輝。3）溶解時(shí)間按規(guī)程要求，加適量溶劑，檢查溶解時(shí)間，其溶解速度應(yīng)在規(guī)定時(shí)限內(nèi)。01二月202336第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定2、化學(xué)檢定：除水分檢定外，按規(guī)定加入一定量無(wú)菌注射用水后進(jìn)行檢定1）pH值測(cè)定：常用電極法2）水分含量測(cè)定：常用卡爾.費(fèi)休水分測(cè)定法，一般水分不能高于3％，卡爾.費(fèi)休法的基本原理是：依據(jù)卡爾非休法測(cè)定水份含量時(shí)，在存在甲醇和堿的情況下，水會(huì)按照下列化學(xué)反應(yīng)式與碘和二氧化硫進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)：

H2O+I2+SO2+CH30H+3RN→[RHN]SO4CH3+2[RHN]I

方法：卡爾費(fèi)休容量法測(cè)定樣品中的水含量是根據(jù)滴定過(guò)程中消耗的卡氏試劑的量，計(jì)算出樣品中的水含量。該方法具有操作簡(jiǎn)單、速率快、精度高等優(yōu)點(diǎn)。01二月202337第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定3）蛋白質(zhì)含量測(cè)定（1）凱氏定氮法（2）酚試劑法（3）雙縮脲法（4）紫外分光光度法（5）考馬斯亮藍(lán)法4）防腐劑含量測(cè)定（1）氣相色譜法（2）液相色譜法（3）薄層層析法2、化學(xué)檢定01二月202338第二節(jié)生物制品的質(zhì)量檢定2、化學(xué)檢定5）等電點(diǎn)的測(cè)定用等電聚焦電泳法6）分子量的測(cè)定a、滲透壓法b、超速離心法c