第三章 實驗動物飼養(yǎng)與應用條件的標準化標準

第三章實驗動物飼養(yǎng)與應用條件的標準化教學目的：通過教學，讓學生掌握影響實驗動物的環(huán)境因素、各等級動物生活的基本設施、飼料營養(yǎng)素對實驗結果的影響，理解飼養(yǎng)與應用條件標準化的意義、控制實驗動物環(huán)境的重要性，了解實驗動物環(huán)境和飼料質量監(jiān)測的內(nèi)容教學重點：環(huán)境因素對實驗動物的影響、實驗動物設施的分類及特點、飼料營養(yǎng)素對實驗結果的影響教學難點：環(huán)境因素對實驗動物的影響教學方法：多媒體第一節(jié)實驗動物的環(huán)境第二節(jié)實驗動物設施第五節(jié)實驗動物環(huán)境監(jiān)測和飼料質量的監(jiān)測第四節(jié)實驗動物的飼料、飲水及墊料第三節(jié)實驗動物的籠器具第一節(jié)實驗動物的環(huán)境一、實驗動物環(huán)境的概念二、控制實驗動物環(huán)境的重要性三、環(huán)境因素對實驗動物的影響四、我國實驗動物環(huán)境標準一、實驗動物環(huán)境的概念指圍繞該動物的所有外界條件。主要包括自然因素和人為因素。溫度、濕度、氣流速度、噪聲、粉塵、光照周期及照度、墊料、籠器具等?？諝狻嬎?、飼料、氨濃度、消毒藥品、殺蟲劑、有毒物質等。物理因素化學因素生物因素同種生物因素（社會地位、勢力范圍、咬斗、飼養(yǎng)密度等）和異種生物因素（微生物、病毒、寄生蟲、其他動物品種等）。自然因素人為因素房屋、設施、飼養(yǎng)、調教、管理、實驗處理等。

演出型學說

(Russell和Burch1959年)

發(fā)育環(huán)境developmental

表現(xiàn)型phenotype周圍環(huán)境

proximate演出型dramatype實驗結果實驗處理基因型genotype二、控制實驗動物環(huán)境的重要性

實驗動物的性狀主要由遺傳和環(huán)境因素決定。20世紀50年代Russll和Burch提出演出型學說，即動物最初是從父母獲得遺傳因子形成了表型，表型因受到各種環(huán)境因素的影響而形成演出型。動物實驗是對演出型進行各種有控制的處理而獲得實驗結果。

實驗動物環(huán)境設施是控制實驗動物質量和保證動物實驗結果科學性的首要條件。溫度濕度氣流光照噪音籠具墊料飼養(yǎng)密度設飼管調實驗施養(yǎng)理教處理人為因素飼料

飲水

臭氣殺蟲劑消毒劑有機物質遺傳品質控制化學因素動物的咬斗各種病原體（細菌病毒寄生蟲）生物因素物理因素環(huán)境因素影響實驗動物質量

R=(A+B+C)×D±EEA實驗動物種的反應B動物品種或品系特有的反應CR實驗動物總的反應個體的反應（個體差）D環(huán)境影響實驗誤差遺傳因素決定動物對實驗處理的反應對決定演出型的遺傳和環(huán)境條件加以控制，可獲得重復性好的實驗結果。嚴格監(jiān)控實驗動物環(huán)境設施的原因可保證實驗動物的健康和質量可保障實驗研究獲得正確的結果標準的環(huán)境能為實驗動物及動物實驗工作人員提供合適的條件三、環(huán)境因素對實驗動物的影響

環(huán)境因素包括對實驗動物個體發(fā)育、生長繁殖、生理、生化平衡和有關反應性產(chǎn)生影響的一切外界條件，具

有“有利”和“有害”兩方面的作用。為了控制環(huán)境條件，保證實驗動物健康以達到實驗要求，我國頒布了實驗動物環(huán)境指標國家標準。1、溫度環(huán)境溫度偏離動物最適溫度過多，動物產(chǎn)生不良反應，從而影響實驗結果。影響演出型。如冬季戶外（<15℃）成長的幼兔耳朵比室內(nèi)（20~27℃）成長的幼兔耳朵短。影響雌性動物的性周期、產(chǎn)仔率、死胎率、泌乳量。如小鼠在21℃環(huán)境下可繁殖3代/年，而-3℃僅繁殖2代。影響動物的代謝水平。如將9~10周齡ICR小鼠放置在10~30℃環(huán)境下，可觀察到，隨氣溫的升高，小鼠的脈搏數(shù)、呼吸數(shù)和發(fā)熱量都呈直線下降。影響動物健康和抗感染力。環(huán)境溫度過高或過低時，動物機體的抵抗力下降，某些條件致病菌將引發(fā)疾病。如在冬季較易暴發(fā)流行的小鼠脫腳病、仙臺病毒病和小鼠肝炎，與低溫條件下動物抵抗力下降有密切關系。激發(fā)實驗動物產(chǎn)生應激反應。通過神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)引起腎上腺素分泌增加。長期處于溫度過高或過低的環(huán)境中，動物臟器可發(fā)生實質改變。影響實驗動物對化學物質毒性的反應。Wistar大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉時，如溫度低于18℃或高于30℃，則死亡率明顯升高。不同氣溫條件下，同一藥品對動物的LD50有較大差異。動物體溫調節(jié)同時受到濕度、環(huán)境溫度及氣流速度的共同影響。高溫高濕情況下，蒸發(fā)散熱受到抑制，容易引起代謝紊亂及機體抵抗力下降，動物的發(fā)病率和死亡率明顯增加。濕度過高，微生物易于繁殖，飼料、墊料易于霉變；濕度過低，易致灰塵飛揚，引起動物呼吸道疾病，影響動物健康。當溫度為27℃、濕度為20%時，可致大鼠發(fā)生壞尾癥，當濕度為40%時，此癥發(fā)生率為25%~30%，當濕度大于60%時則不發(fā)生此癥。2、濕度

合理的氣流和風速能調節(jié)溫度和濕度，降低室內(nèi)粉塵及有害氣體污染。氣流主要影響動物皮膚的體表蒸發(fā)和對流散熱。當室內(nèi)氣溫較高時，氣流有利于對流散熱，當室溫較低時，氣流增加動物的散熱量，加劇寒冷的影響。實驗動物飼養(yǎng)間的氣流值一般為≤0.2m/s。飼養(yǎng)室內(nèi)的通風程度，一般以單位時間的換氣次數(shù)（即舊空氣被新風完全置換的次數(shù)）為標志，一般為10~20次/h。3、氣流4、光照包括強度、波長、光照時間或明暗交替時間三個因素。光照過強會導致雌性動物窩性差，甚至出現(xiàn)哺乳不良和食仔現(xiàn)象。雌性動物敏感性較高。光線波長可影響動物的生殖功能，藍光比紅光更能促進大鼠的性成熟。光照時間或明暗交替時間對動物肌體有多種調節(jié)功能，對其生理活動調節(jié)尤其重要。實驗動物在采食、排糞活動方面有周期性變化，在血液學、生化學及生理功能上也有相應變化。持續(xù)黑暗使大鼠卵巢和子宮的重量減輕，生殖過程受到抑制。持續(xù)光照則會過度刺激動物的生殖系統(tǒng)，可連續(xù)發(fā)情，大鼠、小鼠可出現(xiàn)持久性陰道角化，并阻礙卵細胞成熟。光照應符合動物活動和休眠的規(guī)律。

5、噪音噪音對動物的影響與噪音的性質、動物的種類、體重、習性、年齡、性別等生理和心理狀態(tài)有關。噪聲影響實驗動物的繁育。如：造成大鼠、小鼠生育力減退，妊娠障礙和流產(chǎn)，甚至出現(xiàn)食仔現(xiàn)象。噪音會引起動物生理異常。如DBA小鼠，噪音刺激5min，其心跳數(shù)、呼吸數(shù)和血壓數(shù)都有明顯升高。長時間的噪音可造成動物中樞神經(jīng)和聽覺器官損害以及腎上腺分泌明顯增加、白細胞總數(shù)增多，攝食量增加而體重減輕。噪音還可造成動物聽源性痙攣。室內(nèi)噪音一般應控制在60dB以下。6、空氣潔凈度包括塵埃顆粒、微生物及有害氣體三個方面。動物糞、尿等排泄物產(chǎn)生的有害氣體主要有氨、硫化氫、甲基硫醇、硫化甲基等。氨是濃度最高的一種，通常以氨濃度為指標來監(jiān)測飼養(yǎng)室污染狀況。氨可刺激動物的眼結膜、鼻粘膜和呼吸道粘膜而引起流淚、咳嗽，嚴重者甚至產(chǎn)生急性肺水腫而致動物死亡。實驗動物氨濃度應控制在14mg/m3以下。

清潔級以上實驗動物及設施，空氣須過濾，要求屏障環(huán)境空氣潔凈度達到10000級，隔離環(huán)境達到100級。我國<潔凈廠房設計規(guī)范(GBJ73-84)>的空氣潔凈度分級

等級每立方米(每升)空氣中每立方米(每升)空氣中≥O.5μm塵粒數(shù)≥5μm塵粒數(shù)100級≤35×100(3.5)1000級≤35×1000(35)≤250(O.25)10000級≤35×10000(350)≤2500(2.5)100000級≤35×100000(3500)≤25000(25)四、我國實驗動物環(huán)境標準GB14922-2010動物實驗設施（設備3）環(huán)境指標（靜態(tài)）回主菜單第二節(jié)實驗動物設施一、實驗動物設施分類二、實驗動物設施的組成三、實驗設施的布局四、實驗動物設施的維護一、實驗動物設施分類

按微生物控制程度按設施平面布局按設施功能開放環(huán)境（系統(tǒng)）屏障環(huán)境（系統(tǒng)）隔離環(huán)境（系統(tǒng)）無走廊式單走廊式雙走廊式三走廊式生產(chǎn)設施實驗設施特殊設施{{{1.開放環(huán)境開放環(huán)境（系統(tǒng)）只用于普通級動物的飼養(yǎng)繁殖。開放環(huán)境不要求作高效凈化，但也需安裝送排風（雖不要求壓差，但要有8～10/h換氣，落下菌落數(shù)＜30/皿）和防野鼠、防昆蟲等裝置，基本上與外界不相通，設施內(nèi)環(huán)境，特別是溫濕度、氨濃度、噪音、照度等都必需滿足國標要求。動物人微生物（多）空氣人員動物飼料物品2.屏障環(huán)境

實驗動物生活在與外界隔離的系統(tǒng)內(nèi)，所有進入空氣都須經(jīng)過初、中、高三級過濾器的凈化處理，潔凈度為1萬級；系統(tǒng)內(nèi)應保持空氣壓差，不低于20~50Pa，出風口有防止空氣倒流的裝置；空氣、人、物流嚴格按單向移動；凡進入設施的物品（含動物）均須經(jīng)嚴格的消毒滅菌處理，經(jīng)特制的傳遞裝置送入；人員要淋浴，更換無菌衣帽。屏障系統(tǒng)適用SPF動物和清潔級動物飼養(yǎng)繁殖和實驗。動物人微生物（少）人員排氣（防逆）空氣（濾過）SPF以上動物物品動物（剖宮產(chǎn)）圖12-2三走廊式屏障環(huán)境（引自：鐘品仁《哺乳類實驗動物》）3.隔離環(huán)境隔離器為主體及其附屬裝置組成的飼養(yǎng)系統(tǒng)，用于無菌動物和已知菌動物的飼養(yǎng)和動物實驗。送入隔離器的空氣須超高效過濾，并維持一定壓差，潔凈度達到100級；飼料、飲水、墊料、籠具等，須經(jīng)過嚴格滅菌之后經(jīng)傳遞窗送入；工作人員不直接接觸動物，而是通過手套進行操作。排氣（防逆）動物（剖宮產(chǎn)）動物物品飼料（經(jīng)滅菌）空氣（濾過）動物人OO圖13-1隔離器（引自：鄒移?！吨嗅t(yī)實驗動物學》）圖12-3感染性動物飼養(yǎng)間、實驗室的排氣處理（引自方喜業(yè)《醫(yī)學實驗動物學》）特殊動物實驗設施

（感染性動物實驗屏障設施）環(huán)境空氣污染的空氣HEPA過濾的空氣負壓的污染空氣二、實驗動物設施的組成

主要由飼育室或動物實驗室、檢疫室、洗刷消毒室、廢棄污物處理設施四大部分組成，其他為輔助設施。飼育室或動物實驗室最重要部分，關系到實驗動物的生存、健康和質量，有保種室、生產(chǎn)繁殖室、清潔物品存放室等。檢疫室用于引進實驗動物的隔離觀察和檢疫，實驗前動物的觀察和適應實驗環(huán)境等。廢棄物處理設施有焚化設備，處理污染氣體、液體、放射性物質等設施，用于處理動物尸體、固體污物和其他污物。輔助設施遺傳檢測室、微生物檢測室、環(huán)境檢測室、營養(yǎng)檢測室等，儲存飼料、墊料、藥品、籠架具等的庫房，辦公室、值班室、更衣室等，還包括空氣凈化與空調機房、自動監(jiān)控室等。三、實驗設施的布局1.設施布局原則總原則：有利于防止疾病的傳播和避免動物相互干擾、相互感染；方便工作人員操作；人員、動物、空氣按單向路線移動。實驗動物繁殖飼養(yǎng)區(qū)和動物實驗區(qū)應分開，各成獨立系統(tǒng)，專區(qū)（室）專用；一般將低級別的實驗動物放在低樓層，高級別的實驗動物安排在高樓層；不同等級的設施應嚴格隔離，避免將不同等級實驗動物置于同一樓層；不同品種、品系的實驗動物要獨立飼養(yǎng)，不可混養(yǎng)。2.選址要求

選擇自然環(huán)境較好，大氣含塵及化學污染程度都較低的區(qū)域。如不能遠離嚴重空氣污染區(qū)域時，則應位于其最大頻率風向的上風側，或全年最小頻率風向的下風側建設實驗動物設施；設施要遠離有噪音干擾的鐵路、機場、交通要道；水電供應有保障；交通便利。開放系統(tǒng)可分為三個區(qū)：3、工藝平面布局前區(qū)包括辦公室、檢疫室、一般用品庫房；控制區(qū)包括清潔走廊、清潔物品儲存室、繁育室或動物實驗室、育成待發(fā)室等。后勤處理區(qū)包括亞清潔走廊、洗刷消毒室、污物處理設施等。人員、動物、品種原則上按前區(qū)→控制區(qū)→后勤處理區(qū)方向移動，空氣按控制區(qū)→后勤處理區(qū)移動。清潔區(qū)包括清潔走廊、隔離檢疫室、觀察室、繁育室或動物實驗室、育成待發(fā)室、清潔物品準備室等；

屏障系統(tǒng)分為兩個區(qū)：非清潔區(qū)包括亞清潔走廊、洗刷消毒室等。人員、物品必須按清潔區(qū)→污染區(qū)方向移動，空氣按壓差由清潔走廊→飼育室→亞清潔走廊→室外方向流動。屏障系統(tǒng)平面布置圖（二走廊式）

4、房屋設施內(nèi)結構要求地面

宜用水磨石表面涂環(huán)氧樹脂漆或加地板膠，平而不滑，無滲漏。墻壁

光滑平整，易于清潔消毒。屏障系統(tǒng)的陰陽墻角呈弧形。天花板應耐水、耐腐蝕，表面平整光滑，高度適宜。門窗

有足夠的寬度，有利于保持壓差，注意氣密性。走廊寬不應少于1.5m，屏障設施通常設清潔與亞清潔走廊。SPF級潔凈走廊實驗室5.空調凈化設備與送排風系統(tǒng)空氣凈化設備包括空氣過濾器、層流架、空氣洗滌器、靜電除塵器、活性炭過濾器、紫外線滅菌燈。空氣調節(jié)設備

系統(tǒng)的工作流程及運行調節(jié)新風→初效過濾器→溫度、濕度調節(jié)→加壓→中效過濾器→送風管網(wǎng)→高效過濾器→房間→排風管網(wǎng)→排風機→廢氣?？諝饨?jīng)過初、中、高效三級過濾后，0.3um以上微生物微粒被濾掉99.7%以上。6.防衛(wèi)設施及監(jiān)控與通訊設備防衛(wèi)設施

電力線路防動物咬破。房舍出入口防野鼠進入、防室內(nèi)動物逃逸。防蚊蟲進入室內(nèi)。監(jiān)控系統(tǒng)

電視監(jiān)控系統(tǒng)。

通訊系統(tǒng)

電話或對講機。四、實驗動物設施的維護空氣過濾系統(tǒng)的維護初效過濾器1-2周水清洗1次；中效過濾器15-30天更換濾器1次（有的可水清洗）；高效過濾器1-1.5年更換單元1次（不可水清洗）?？照{系統(tǒng)的維護清洗熱交換部件。滅菌系統(tǒng)的維護壓力蒸汽滅菌器?；刂鞑藛蔚谌?jié)實驗動物籠器具一、隔離器二、層流架三、籠具四、飲水設備

呈長方形箱狀，由隔離室、過濾器、送風機、傳遞倉及架體組成，隔離室潔凈度高達100級，空氣壓差不低于20-50Pa。隔離器一側裝有橡皮手套，供隔離器內(nèi)部操作使用，隔離器另一側有滅菌渡槽，供傳入、傳出物料及動物使用。隔離器用于無菌動物飼養(yǎng)繁殖、實驗操作和處理后觀察、動物剖宮產(chǎn)凈化。

一、隔離器圖13-1隔離器（引自：鄒移海《中醫(yī)實驗動物學》）二、層流架層流架本身帶有空氣凈化和通風系統(tǒng)，可作實驗動物觀察專用設備，它由架體、風機、靜壓箱、過濾器組成，一般為四周封閉、前后開啟的柜形構造。較多情況下，層流架為正壓層流架，如作感染研究為負層流架。層流架置于普通房間內(nèi)，可用作清潔級動物的短時間飼養(yǎng)、實驗操作和處理后觀察；置于清潔級房間，能直接作SPF級設施使用，用于SPF級動物飼養(yǎng)和實驗觀察。層流架在靜態(tài)時潔凈度應至少達到10萬級，氣流速度為0.1~0.2m/s，噪音低于60dB。三、籠具

動物籠帶金屬網(wǎng)罩的塑料盒，不銹鋼籠等。

飼料盒塑料盒，金屬盒，瓦罐等。質量要求無毒、耐腐蝕、耐高溫、耐磨損、耐沖擊，舒適、安全，操作方便、經(jīng)濟實用。IVC籠恒溫恒濕潔凈動物飼養(yǎng)間四、飲水設備

包括飲水瓶、飲水盆和自動飲水裝置等。大鼠、小鼠、兔等小型實驗動物多使用不銹鋼或無毒塑料制造的飲水瓶，規(guī)格有250mL和500mL兩種，不宜用易碎的玻璃瓶。犬、羊等大型動物則多使用飲水盆。飲水器應定期清洗、消毒。無菌水生產(chǎn)設備如臭氧滅菌水裝置?；刂鞑藛蔚谒墓?jié)飼料、飲水及墊料一、實驗動物的營養(yǎng)需要與飼料標準二、飼料配合技術三、飼料營養(yǎng)素對動物實驗結果的影響四、飲水五、墊料一、實驗動物的營養(yǎng)需要與飼料標準營養(yǎng)需要：指實驗動物對蛋白質、糖類、脂肪、礦物質、維生素等營養(yǎng)素的日平均需求量。可分為維持營養(yǎng)、生長營養(yǎng)和繁殖營養(yǎng)需要等。飼料標準：規(guī)定了飼料水分、加工質量、營養(yǎng)成分、衛(wèi)生指標、檢驗方法、標簽、包裝、運輸、儲存等。飼養(yǎng)標準：特定動物的成套的營養(yǎng)定額，主要包括相應動物每日營養(yǎng)需要量、每千克飼糧養(yǎng)分含量、飼料營養(yǎng)成分和營養(yǎng)價值、典型飼糧配方等。1.飼料中的營養(yǎng)成分蛋白質構建機體組織細胞的主要原料，機體內(nèi)功能物質的主要成分，組織更新、修補的主要原料，可供能和轉化為糖、脂肪。糖類主要能量來源，可轉化為糖原和脂肪貯存。包括無氮浸出物和粗纖維兩大類。脂肪由甘油和脂肪酸構成，含能最高的營養(yǎng)素（是蛋白質和碳水化合物的2.25倍左右），動物體內(nèi)主要的能量貯備形式，脂溶性維生素的溶劑。維生素動物代謝所必須而需要量極小的低分子有機化合物，以輔酶和催化劑的形式廣泛參與體內(nèi)代謝的多種化學反應。礦物質

常量元素：Ca,P,Na,K,Cl,Mg,S；微量元素：Fe,Zn,Cu,Mn,Co,Mo等。水機體主要組成成分（體重70%以上）溶劑，化學反應的介質，可調節(jié)體溫。

飼料營養(yǎng)素功能

供給動物所需能量；動物機體生命過程的調節(jié)物質；動物產(chǎn)品的原料；建造和修復動物機體的物質。2.飼料的種類和質量要求飼料的種類按物理性狀分按來源分按營養(yǎng)特性分粉狀料、顆粒料、膨化料等。動物性飼料、植物性飼料等。粗飼料、青綠飼料、青貯飼料、能量飼料、蛋白質飼料、礦物質飼料、維生素飼料、添加劑等。我國和國際飼料分類依據(jù)原則飼料類別飼料類名劃分飼料類別依據(jù)（%）自然含水量干物質中纖維含量干物質中粗蛋白含量1粗飼料<45≥18

2青綠飼料≥453青貯飼料≥454能量飼料<45<18<205蛋白質飼料<45<18≥206礦物質飼料7維生素飼料8添加劑質量要求

原料來源要清楚，無蟲害、細菌及霉菌污染；儲存?zhèn)}庫需保持通風、干燥及防氧化；選擇新鮮原料加工，注意加工前后的消毒滅菌；成品料包裝要嚴密；配方比例要計算準確，加工時要混勻。二、飼料配合技術

1.名詞概念飼料：能被動物利用，且在合理飼喂下不發(fā)生有害現(xiàn)象，有利于動物營養(yǎng)的物質。日糧：一只實驗動物一晝夜所采食的飼料總量。日糧配合：擬定飼料配方的過程。飼糧：指按日糧中各種飼料的合理配比制成的混合飼料。配合飼料：按一定比例的飼料配方配制的多種飼料混合料。全價配合飼料：各種營養(yǎng)素均衡全面，能滿足動物營養(yǎng)需要的配合飼料。2.日糧配合的原則依據(jù)動物的飼養(yǎng)標準，滿足動物的營養(yǎng)需要。因地制宜，選用適宜的原料。注意飼料的體積和飼料的適口性。盡量降低成本價格。有利于加工、儲藏和運輸。3.日糧配合方法查詢飼養(yǎng)標準、飼料標準。選擇飼料原料，查詢其營養(yǎng)成分和營養(yǎng)價值以及來源與價格。計算確定配合比例，即配方。計算方法有試差法、交叉法、聯(lián)立方程法等，可采用電子計算機進行計算。加工及飼喂實驗。三、飼料營養(yǎng)素

對動物實驗結果的影響

1.影響動物采食量而影響實驗結果

動物為能需求而食，飼料的適口性、添加劑、能量含量等，均影響動物的采食量。藥物經(jīng)飼料給予時，給予量隨采食量變化而變化。2.影響動物生長發(fā)育而影響實驗結果飼料中營養(yǎng)素是否全面、平衡、充足，直接影響動物的生長發(fā)育，從而影響以生長發(fā)育為指標（如體重、臟器重量等）的動物實驗結果。如大鼠日糧蛋白水平低于14%時，則顯著降低大鼠肝臟重量。蛋白質缺乏時，可導致生長期大鼠生長緩慢、貧血、低蛋白血，肌肉消瘦；成年大鼠則水腫，發(fā)情無規(guī)律，新生仔鼠衰弱或死胎，雄性大鼠生殖能力受損。

3.影響動物生理生化指標

而影響實驗結果當飼料中某種營養(yǎng)素含量改變時，將導致動物血液、臟器或組織中該種營養(yǎng)素含量的改變，與之相關的生理生化指標必然受到影響，從而影響實驗結果。如低蛋白日糧導致大鼠血紅蛋白、血清總蛋白、血清白蛋白值均降低。

4.影響動物營養(yǎng)而影響實驗結果

營養(yǎng)與免疫營養(yǎng)與癌癥營養(yǎng)與衰老維生素A缺乏將影響動物淋巴組織，導致淋巴細胞分化成T和B細胞的胸腺發(fā)生萎縮，抗體抗原的應答下降，使免疫系統(tǒng)機能減弱，病原體易于入侵。四、飲水普通級實驗動物飲水：符合城市生活飲用水的衛(wèi)生標準。清潔級以上實驗動物飲水：滅菌水。飲水量：小鼠4-7mL/d，大鼠20-45mL/d。無須蒸餾、離子交換和反滲透。五、墊料種類：鋸末、木屑、電刨花、粉粹玉米芯、吸水紙、棉花等。要求：①無毒、無異味、無刺激性、無塵埃、不干擾動物實驗。②具有一定的柔軟性，吸水和吸附臭氣性能好，不被動物所吃，且便于清掃。③使用方便，容易獲得，價格低廉。作用：接納動物排泄物、動物保暖與繁殖做窩。一般每周更換墊料1-2次，墊料使用前要消毒、滅菌、除蟲?；刂鞑藛蔚谖骞?jié)實驗動物

環(huán)境監(jiān)測和飼料質量的監(jiān)測一、實驗動物環(huán)境監(jiān)測1.溫度、濕度的測定儀器棒狀溫度計、熱敏電阻溫度計、簡易干濕球溫度計、自動記錄溫度、濕度計等。測定點的選擇一般50m2房間3-5個測點。測定方法測定前空調系統(tǒng)應運轉24h以上，溫濕度的測定一般連續(xù)8h，每次測定間隔為15-30min。2.噪音的測定儀器:

普通噪音計積分型噪音計測定方法測點一般應選在被測環(huán)境的中央?yún)^(qū)。面積<10m2的房間，測點離地1.2m；面積>10m2的房間，在室內(nèi)離墻1.0m及中心位置，距地面

1.2m高度布點。

3.照度的測定儀器:便攜式照度計測定方法:開啟照明設備,選幾個有代表性的點，距地面0.9m，離開墻面1.0m處測定。4.氨濃度的測定儀器:GCK—2型個體采樣器分光光度計測定方法:

納氏試劑比色法5.空氣中下落菌的測定儀器直徑9cm的玻璃培養(yǎng)皿測定方法每5~10m2設1個測定點，將培養(yǎng)皿暴露于空氣中30min，加蓋，放于37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48h后計算菌落數(shù)。二、實驗動物飼料質量監(jiān)測1.飼料的監(jiān)測感官性狀的檢測形態(tài)，色澤，氣味，顆粒大小，硬度，成分，混合均勻，新鮮，無雜質，無異味，無霉變，無蟲蛀及鼠咬。營養(yǎng)成分的檢測飼料衛(wèi)生指標

2.飲用水的監(jiān)測

無異色、異味，pH值:5.5-8.5，細菌總數(shù)<1000個/L，氰化物<0.05g，As<0.04mg，Hg<0.01mg。3.墊料的監(jiān)測水分吸濕性有毒有害物質微生物、寄生蟲再見練習題一、名詞解釋1.實驗動物的環(huán)境——指圍繞實驗動物的所有外界條件，包括飼養(yǎng)盒(籠)內(nèi)的對實驗動物產(chǎn)生影響的各種物理、化學、生物等因素構成的小環(huán)境和飼養(yǎng)室內(nèi)外的對實驗動物產(chǎn)生影響的各種物理、化學、生物等因素構成的大環(huán)境。※2.演出型——一定表型的實驗動物受到環(huán)境因素的影響而重新表現(xiàn)的性狀特征，稱為演出型。

3.實驗動物設施——廣義的實驗動物設施指用于實驗動物飼養(yǎng)繁殖和動物實驗的建筑物、設備、機構及經(jīng)營管理。狹義的實驗動物設施僅指實驗動物建筑物。4.開放系統(tǒng)——是一種無空氣凈化裝置的實驗動物建筑設施。該設施雖然具備空調、排風和防野鼠、昆蟲的裝置，但基本上與大自然相通，溫度、濕度、空氣塵埃等都受外界環(huán)境的影響。開放系統(tǒng)只用于普通動物的飼養(yǎng)繁殖。

5.屏障系統(tǒng)——是一種具備空氣凈化裝置且有隔離屏障的實驗動物建筑設施，進入該設施內(nèi)的空氣經(jīng)過初、中、高效三級過濾，潔凈度達10000級，設施內(nèi)各單元保持著一定的空氣壓差；進入設施的物品均需經(jīng)嚴格的消毒滅菌處理；人員進入需經(jīng)淋浴、更換無菌衣帽；人員、動物、物品、空氣均按一定路線流動。這種屏障系統(tǒng)用于無特定病原體動物的飼養(yǎng)繁殖。

6.隔離系統(tǒng)——是以隔離器為主體及其附屬裝置組成的實驗動物設施，送入隔離器的空氣需經(jīng)高效過濾，并維持一定的壓差，潔凈度達到100級；送入隔離器的飼料、墊料、飲水等均需經(jīng)非常嚴格的消毒滅菌處理；人員不直接接觸動物，而是通過隔離手套進行操作。隔離系統(tǒng)用于飼養(yǎng)無菌動物和悉生動物。

7.實驗動物的營養(yǎng)需要——指實驗動物對蛋白質、糖類、脂肪、礦物質、維生素等營養(yǎng)素的日平均需求量。8.飼料——指能被動物利用，且在合理飼喂下不發(fā)生有害現(xiàn)象，有利于動物營養(yǎng)的物質。9.配合飼料——指按一定飼料配方配制的多種飼料的混合料。10.全價配合飼料——指各種營養(yǎng)素均衡全面，能滿足動物營養(yǎng)需要的配合飼料。

二、填空題1.按實驗動物環(huán)境及設施國家標準，實驗動物飼養(yǎng)室的溫度為18～29℃，相對濕度為40%～70%，噪聲在60dB以下，每小時換氣次數(shù)為10～20次，每立方米空氣中的氨濃度在14mg以下，工作照度為150～300lx，無菌動物、無特定病原體動物和清潔動物的飼養(yǎng)環(huán)境的空氣潔凈度分別為100級、10000級、100000級。2.實驗動物設施按微生物控制程度分為開放系統(tǒng)、屏障系統(tǒng)和隔離系統(tǒng)三種類型，分別用于飼養(yǎng)普通動物、無特定病原體動物或清潔動物和無菌動物。

3.層流架在靜態(tài)時的空氣潔凈度應至少達到100000級，將層流架置于普通動物飼養(yǎng)室內(nèi)可用來飼養(yǎng)清潔動物，置于清潔動物飼養(yǎng)室內(nèi)可用來飼養(yǎng)無特定病原體動物?！?.當環(huán)境溫度低于體溫時，實驗動物主要通過輻射、對流、蒸發(fā)方式散熱；當環(huán)境溫度接近體溫時，實驗動物主要通過蒸發(fā)方式散熱?？諝鉂穸冗^高，實驗動物蒸發(fā)散熱受到抑制。氣流主要影響實驗動物對流散熱和蒸發(fā)散熱。

5.大氣中的水分含量稱之為濕度，在特定溫度下，空氣中的實際含水量與該溫度的飽和含水量的百分比值，稱為相對濕度。實驗動物飼養(yǎng)室常用相對濕度作為濕度控制指標?！鳌?.在飼養(yǎng)室溫度為27℃的情況下，當空氣相對濕度大于60%時，大鼠不發(fā)生壞尾癥；相對濕度為20%時，幾乎所有大鼠都發(fā)生壞尾癥。

☆※7.按照我國《潔凈廠房設計規(guī)范(GBJ73-84)》中關于空氣潔凈度的分級標準，當每立方米空氣中大于或等于0.5μm的塵埃粒子數(shù)和大于或等于5μm的塵埃粒子數(shù)分別少于或等于350000和2500時，該空氣潔凈度為10000級。8.屏障系統(tǒng)設施中，人員、物品必須由清潔區(qū)向污染區(qū)方向移動，空氣由清潔走廊向飼養(yǎng)室、向亞清潔走廊、再向室外方向流動。

※9.實驗動物的性狀表現(xiàn)受遺傳因素和環(huán)境因素共同影響，其中遺傳因素起決定性作用，在一定條件下環(huán)境因素起主要作用。

三、判斷是非

1.實驗動物有適應環(huán)境變化并做出反應的能力，如改變體溫、新陳代謝，增加或減少攝食量、活動量等，盡管這種適應是行為性或生理性的，但都會影響動物實驗的結果。(√)2.喜馬拉雅兔在10℃的環(huán)境里鼻端和四肢末端的毛色為黑色；在20℃的環(huán)境里鼻端和四肢末端的毛色為白色。這個例子說明動物性狀的表現(xiàn)受環(huán)境因素的影響。(√)3.溫度的變化不會影響實驗動物的代謝水平。

(×)

※4.將9-10周齡ICR小鼠放置在10℃-30℃氣溫環(huán)境下觀察其生理反應，發(fā)現(xiàn)隨著氣溫的升高，小鼠的脈膊數(shù)、呼吸數(shù)和發(fā)熱量都呈直線上升。(×)※5.研究藥品毒性反應時，環(huán)境溫度不同，同一藥品對同一實驗動物的LD50有較大差異。(√)6.濕度過高，微生物易于繁殖，易引起實驗動物某些傳染病發(fā)生。(√)※7.光照時間的長短不會影響大、小鼠卵母細胞發(fā)育和性周期。

(×)

※7.光照時間的長短不會影響大、小鼠卵母細胞發(fā)育和性周期。(×)※8.藍光比紅光更能促進大鼠的性成熟(√)?！鳌?.噪聲能影響實驗動物的繁育和生理功能(√)△※10.噪聲可造成實驗小鼠聽源性痙攣。(√)△※11.長期處于高濃度氨的環(huán)境中，實驗動物上呼吸道粘膜可出現(xiàn)慢性炎癥。(√)△※12.懸浮于飼養(yǎng)室空氣中的塵埃顆粒除本身對實驗動物產(chǎn)生不良影響外，還可成為各種病原微生物的載體。

(√)

☆※13.實驗動物設施布局的原則是：有利于防止疾病的傳播和避免實驗動物相互干擾、相互感染；方便工作人員操作；人員、實驗動物、物品、按單向路線移動。(√)14.從微生物控制和管理方便的角度考慮，實驗動物集中于一幢實驗動物大樓時，宜將大型實驗動物安排在大樓的下層，小型實驗動物安排在大樓的上層。(√)15.從微生物控制和管理方便的角度考慮，宜將高級別實驗動物安排在低樓層，低級別的實驗動物安排在高樓層。

(×)

16.相同級別但不同品種的實驗動物可以飼養(yǎng)在同一房間內(nèi)。(×)17.相同品種但不同級別的實驗動物不能飼養(yǎng)在同一房間內(nèi)。(√)☆18.屏障系統(tǒng)內(nèi)實驗動物飼養(yǎng)室的通風應采用頂棚送風、接近地面的四角回風的方式。(√)19.屏障系統(tǒng)內(nèi)實驗動物飼養(yǎng)室內(nèi)墻陰陽角均為圓弧形。(√)20.屏障系統(tǒng)內(nèi)實驗動物飼養(yǎng)室地面必須貼防滑地板磚。(×)21.實驗動物籠具必須用無毒、耐高溫、耐腐蝕、耐磨損、耐沖擊的材料制作。(√)

22.實驗動物全價配合飼料的感官指標應達到：新鮮、混合均勻、無雜質、無異味、無霉變、無發(fā)酵、無蟲蛀鼠咬。(√)23.飼料營養(yǎng)素是否全面，直接影響實驗動物的生長發(fā)育，但不會影響動物實驗結果。(×)24.普通級實驗動物飲水的水質要求，一般按城市生活飲用水的衛(wèi)生標準要求即可。(√)25.清潔級實驗動物飲水的水質要求，一般按城市生活飲用水的衛(wèi)生標準要求即可(×)。26.無特定病原體實驗動物可直接飲用市售礦泉水(×)。27.實驗動物標準化管理對實驗動物墊料不作要求，只要是柔軟性的材料，能使實驗動物保溫即可。

(×)

四、單項選擇※1.將R表示實驗動物總的反應、E表示實驗誤差，則動物實驗中實驗動物對實驗處理的反應可用“R=(A+B+C)×Ｄ±E”表示，其中A表示(A)A、實驗動物種的反應B、實驗動物品種或品系特有的反應C、實驗動物個體的反應D、環(huán)境因素的影響※2.將R表示實驗動物總的反應、E表示實驗誤差，則動物實驗中實驗動物對實驗處理的反應可用“R=(A+B+C)×Ｄ±E”表示，其中B表示(B)A、實驗動物種的反應

B、實驗動物品種或品系特有的反應

C、實驗動物個體的反應

D、環(huán)境因素的影響

※3.將R表示實驗動物總的反應、E表示實驗誤差，則動物實驗中實驗動物對實驗處理的反應可用“R=(A+B+C)×Ｄ±E”表示，其中C表示(C)A、實驗動物種的反應B、實驗動物品種或品系特有的反應C、實驗動物個體的反應D、環(huán)境因素的影響※4.將R表示實驗動物總的反應、E表示實驗誤差，則動物實驗中實驗動物對實驗處理的反應可用“R=(A+B+C)×Ｄ±E”表示，其中D表示(D)A、實驗動物種的反應

B、實驗動物品種或品系特有的反應

C、實驗動物個體的反應

D、環(huán)境因素的影響

※5.一種對實驗動物的心跳數(shù)、呼吸數(shù)、發(fā)熱量、免疫機能、藥物的毒性反應起主要影響作用的環(huán)境因素是(A)A、溫度B、濕度C、光照D、噪聲※6.一種對實驗動物姿式、攝食量、飲水量、母性行為有主要影響作用的環(huán)境因素是(A)A、溫度B、濕度C、光照D、噪聲※7.一種對實驗動物散熱、實驗動物傳染病發(fā)生有主要影響作用的環(huán)境因素是

(B)A、溫度

B、濕度

C、光照

D、噪聲

※8.一種對實驗大鼠壞尾病發(fā)生有顯著影響的環(huán)境因素是(B)A、溫度B、濕度C、光照D、噪聲△※9.一種引起實驗動物流淚、咳嗽、呼吸道粘膜炎癥、嚴重者肺水腫的環(huán)境因素是(C)A、溫度B、濕度C、氨濃度D、噪聲△※10.一種對實驗動物發(fā)情、排卵、育仔有主要影響的環(huán)境因素是(D)A、濕度B、空氣潔凈度C、氣流D、光照△※11.可影響小鼠生殖的環(huán)境因素是(D)A、溫度、濕度

B、噪聲

C、光照

D、以上都是

12.國家標準規(guī)定實驗動物飼養(yǎng)室的溫度為(D)A、22℃～24℃B、20℃～24℃C、18℃～26℃D、18℃～29℃13.國家標準規(guī)定實驗動物飼養(yǎng)室的濕度為(B)A、50%～60%B、40%～70%C、30%～80%D、20%～90%14.國家標準規(guī)定實驗動物飼養(yǎng)室的氨氣濃度和噪聲分別少于或等于(A)A、14mg/m３和60dBB、20ppm和70dBC、20ppm和60dBD、14mg/m３和70dB15.國家標準規(guī)定實驗動物飼養(yǎng)室的濕度，指(B)A、絕對濕度B、相對濕度

C、飽和濕度

D、不飽和濕度

16.光照對實驗動物的生殖影響很大，其關鍵在于每日光照的(D)A、波長B、照度

C、光通量D、明暗交替時間17.清潔級實驗動物飼養(yǎng)室內(nèi)空氣潔凈度應為(D)A、100級B、1000級

C、10000級D、100000級18.空氣潔凈度達10000級的實驗動物設施是(C)A、開放系統(tǒng)B、亞屏障系統(tǒng)

C、屏障系統(tǒng)

D、隔離系統(tǒng)

19.SPF動物飼養(yǎng)在(C)A、開放系統(tǒng)B、亞屏障系統(tǒng)C、屏障系統(tǒng)D、隔離系統(tǒng)20.一種可置于開放系統(tǒng)，配有空氣過濾裝置和送風設備，空氣潔凈度達100級，適合于無菌小鼠飼養(yǎng)的設備是(D)A、懸掛式鼠架B、帶有空氣過濾帽的鼠盒C、層流架D、隔離器21.一種可置于開放系統(tǒng)，配有空氣過濾裝置和送風設備，空氣潔凈度達10000級，適合于清潔小鼠飼養(yǎng)的設備是(C)A、懸掛式鼠架B、帶有空氣過濾帽的鼠盒C、層流架D、隔離器22.下列說法哪一項是錯誤的(D)A、空氣按氣壓差由清潔走廊→飼養(yǎng)室→亞清潔走廊B、物品由潔凈物品貯藏室→清潔走廊→飼養(yǎng)室→亞清潔走廊C、動物由清潔走廊→飼養(yǎng)室→亞清潔走廊D、人員由風淋室→亞清潔走廊→飼養(yǎng)室