標準解讀
《GB/T 14926.52-2001 實驗動物 免疫熒光試驗》作為一項國家標準,旨在規(guī)定實驗動物免疫熒光試驗的方法、要求及結果判定標準,以確保實驗的準確性和可重復性。然而,您提供的信息中并未直接給出另一個特定的標準或版本進行對比。通常,標準的更新或修訂會涉及以下幾個方面來提升其適用性和科學性:
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技術方法的更新:新標準可能會引入更先進的免疫熒光技術,如改進的標記物、更敏感的檢測儀器或優(yōu)化的染色步驟,以提高檢測的靈敏度和特異性。
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實驗動物種類與模型的擴展:隨著生物醫(yī)學研究的進展,新標準可能會增加適用于不同種類實驗動物或特定疾病模型的免疫熒光試驗指導,以滿足更廣泛的研究需求。
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安全與倫理規(guī)范的加強:考慮到動物福利和實驗安全性,新標準可能會加強對實驗動物的管理和操作規(guī)范,包括麻醉、鎮(zhèn)痛的使用指導,以及實驗后動物的處理規(guī)定。
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質量控制與結果判定標準的細化:為了保證實驗結果的一致性和可靠性,新標準可能會提供更詳細的質量控制指標和結果判定準則,包括陽性對照、陰性對照的設置要求,以及如何評估背景熒光干擾等。
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術語定義與標準引用的更新:隨著科學領域的發(fā)展,相關術語和參考標準也可能發(fā)生變化,新標準會進行相應的更新,確保所有提及的概念和引用的其他標準均為最新有效版本。
由于沒有具體的對比標準提供,以上內容是基于一般標準修訂趨勢的概述。如果需要針對兩個具體版本之間的差異進行分析,請?zhí)峁┝硪粋€版本的標準號或名稱。
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- 現行
- 正在執(zhí)行有效
- 2001-08-29 頒布
- 2002-05-01 實施
文檔簡介
ICS65.020.30B44中華人民共和國國家標準GB/T14926.52-2001實驗動物免疫熒光試驗Laboratoryanimal2001-08-29發(fā)布2002-05-01實施華中:民:共和發(fā)布國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局
GB/T14926.52-2001前本標準修訂了GB/T14926.18—1994《實驗動物淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒檢測方法》中的免疫熒光試驗方法,將其作為一個獨立標準列出。本標準由中華人民共和國科學技術部提出并歸口本標準起草單位:中國實驗動物學會。本標準主要起草人:賀爭鳴。
中華人民共和國國家標準免疫熒光試驗實驗動物GB/T14926.52—2001Laboratoryanimal-mmunofluorescenceassay(IFA)范圍本標準規(guī)定了免疫熒光試驗(IFA)所用試劑、器材和操作步驛等。本標準適用于實驗動物病毒抗體的檢測2原理含有病毒抗原的細胞(組織培養(yǎng)細胞或動物組織細胞)固定于玻片上.遇相應抗體形成抗原抗體復合物。此抗原抗體復合物仍保持其抗原活性·可與相應的第二抗體熒光素結合物結合。熒光素在紫外光或藍紫光的照射下,可激發(fā)出可見的熒光。因此,在熒光顯微鏡下以熒光的有無和強弱判定結果。主要試劑與器材3.1試劑3.1.1抗原片的制備將病毒接種于敏感細胞上(見表1).待細胞出現病變或確知細胞內含有豐富的病毒抗原后,用胰酶消化下細胞,PBS洗滌三次·用適量PBS懸浮細胞,將細胞懸液滴于玻片孔中。同時消化未感染病毒的同批細胞.滴加同一玻片另一孔內.作為正常細胞對照。孔內滴加的細胞以細胞鋪開、不重疊為宜。室溫干燥后.冷丙酮(4C)固定10min。PBS漂洗后.充分干燥,置于-20℃?zhèn)溆谩T冢?0C條件下可保存一年。3.1.2羊或兔抗小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠、兔、犬或猴1gG異硫氰酸熒光素結合物,使用時用含0.01%~0.02%伊文思藍PBS稀釋至適當濃度3.1.3陽性血清用用病毒抗原免疫清潔或SPF小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠或普通級免、犬、猴所獲得的抗血清;或自然感染恢復后的犬、猴血清。3.1.4陰性血清清潔或SPF小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠血清;或確認無相應病毒感染的免、犬、猴血清3.1.5PBS(O.01mol/L,pH7.4)氯化鈉88氯化鉀0.28磷酸二氫鉀0.28磷酸氫二鈉(Na.HPO,·12H.O)2.838蒸水加至1000mL3.1.650%甘油PBS甘油5mLPBS(O.01mol/
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