核酸化學(xué)中醫(yī)中藥

核酸(DNA和RNA)核苷酸核苷和脫氧核苷磷酸戊糖堿基嘌呤嘧啶核糖脫氧核糖核酸組成核酸一級結(jié)構(gòu)DNA雙螺旋蛋白質(zhì)α-螺旋螺股雙股右手螺旋單股右手螺旋主鏈磷酸與脫氧核糖交替構(gòu)成，在雙螺旋外側(cè)由-C-Ca-N-重復(fù)構(gòu)成，在螺旋內(nèi)側(cè)側(cè)鏈堿基，在雙螺旋內(nèi)側(cè)，以氫鍵形成配對氨基酸側(cè)鏈，在螺旋外側(cè)螺距每一螺距3.6nm，含10.5個堿基對每一螺距0.54nm，含3.6個氨基酸殘基穩(wěn)定因素堿基堆積力、氫鍵氫鍵DNA的三級結(jié)構(gòu)原核生物及真核生物線粒體中環(huán)狀DNA的三級結(jié)構(gòu)是超螺旋結(jié)構(gòu)。串珠纖維真核生物染色體DNA組裝染色單體螺旋管玫瑰花環(huán)袢環(huán)30nm纖維DNA雙螺旋從DNA分子到染色體，在長度上壓縮了近10000倍，組裝在直徑只有為數(shù)微米的細胞核內(nèi)。RNA（核糖核酸）是核苷酸分子連接在一起形成的鏈狀分子。第二節(jié)核糖核酸的分子結(jié)構(gòu)信使RNA（messengerRNA，mRNA）轉(zhuǎn)移RNA（transferRNA，tRNA）核糖體RNA（ribosomalRNA，rRNA）四、RNA的種類和分子結(jié)構(gòu)RNA分子結(jié)構(gòu)第二節(jié)核酸的分子結(jié)構(gòu)

RNA通常以單鏈的形式存在，但有復(fù)雜的局部二級結(jié)構(gòu)或三級結(jié)構(gòu)?？梢酝ㄟ^鏈內(nèi)互補構(gòu)成局部雙螺旋，堿基配對原則是A對U，G對C，但配對不像DNA那么嚴格，有較多G-U配對?？梢孕纬晒呐荨⑴蛎洯h(huán)和發(fā)夾結(jié)構(gòu)。1.mRNA種類多、含量少，占細胞內(nèi)總RNA的10%以下。mRNA編碼蛋白質(zhì)，并且完成使命后即被降解。mRNA結(jié)構(gòu)特點：5’堿基5’①大多數(shù)真核生物mRNA的5′末端均在轉(zhuǎn)錄后加上一個7-甲基鳥苷酸，形成帽子結(jié)構(gòu)-m7GpppNmp。mRNA結(jié)構(gòu)特點：②大多數(shù)真核mRNA的3′末端有一個多聚腺苷酸(polyA)結(jié)構(gòu)，稱為多聚A尾。帽子結(jié)構(gòu)：可阻礙RNA5’外切酶的水解，又是蛋白質(zhì)合成起始因子識別的一種標志。多聚A尾：延長mRNA壽命，并引導(dǎo)mRNA向細胞質(zhì)轉(zhuǎn)運。帽子結(jié)構(gòu)和多聚A尾的功能*

mRNA的功能—蛋白質(zhì)合成的模板（包含氨基酸密碼子）2.tRNA轉(zhuǎn)運RNA約占細胞中RNA總量的10%~15%，是分子量最小的一類核酸。tRNA的功能是轉(zhuǎn)運氨基酸，按照mRNA上的遺傳密碼的順序?qū)⑻囟ǖ陌被徇\到核糖體進行蛋白質(zhì)的合成。由74～93核苷酸組成；含7-15個稀有堿基；3′末端為—CCA-OH(氨基酸臂),5′是鳥苷酸；tRNA的二級結(jié)構(gòu)呈三葉草形結(jié)構(gòu)，有4臂三環(huán)；三級結(jié)構(gòu)呈“倒L”形。tRNA的結(jié)構(gòu)特征：氨基酸臂tRNA的二級結(jié)構(gòu)—三葉草形四臂三環(huán)：氨基酸臂反密碼子臂和反密碼環(huán)TψC臂和TψC環(huán)二氫尿嘧啶臂(D臂)

二氫尿嘧啶環(huán)(D環(huán))反密碼子環(huán)tRNA的三級結(jié)構(gòu)—倒L形tRNA的功能：轉(zhuǎn)運氨基酸，識別mRNA的密碼子3-末端的氨基酸臂與氨基酸共價連結(jié)。不同的tRNA可以結(jié)合不同的氨基酸。

tRNA的反密碼子環(huán)上有反密碼子，可識別mRNA上的密碼子。mRNA密碼子反密碼子環(huán)反密碼子氨基酸臂3.rRNA核糖體RNA(ribosomalRNA，rRNA)是細胞內(nèi)含量最多的RNA(>80％)。rRNA與核糖體蛋白結(jié)合組成核糖體(ribosome)/核蛋白體，為蛋白質(zhì)的合成提供場所。原核及真核生物核糖體的組成原核及真核生物核糖體的組成核糖體亞單位rRNA蛋白質(zhì)原核生物(70S)小亞基(30S)大亞基(50S)16SrRNA5SrRNA23SrRNA21種31種真核生物(80S)小亞基(40S)大亞基(60S)18SrRNA5.8SrRNA5SrRNA28SrRNA33種49種4.核酶定義：由活細胞合成的、具有催化活性的RNA(ribozyme)核酶特點

以RNA作為底物催化磷脂鍵上的轉(zhuǎn)移或水解反應(yīng)5.其他RNA核內(nèi)小RNAsnRNA核仁小RNAsnoRNA胞質(zhì)小RNAscRNA非mRNA小RNA動物細胞內(nèi)主要RNA的種類及功能種類細胞核和胞液功能核蛋白體RNArRNA核蛋白體組成成分(不均一核RNA)hnRNA成熟mRNA的前體信使RNAmRNA蛋白質(zhì)合成模板轉(zhuǎn)運RNAtRNA轉(zhuǎn)運氨基酸細胞內(nèi)小RNA

核內(nèi)小RNAsnRNA參與hnRNA的剪接、轉(zhuǎn)運

核仁小RNAsnoRNA參與rRNA的加工和修飾

胞質(zhì)小RNAscRNA蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位合成信號等核酸的理化性質(zhì)第二節(jié)1.核酸的紫外吸收特征2.變性與復(fù)性3.雜交1.核酸的紫外吸收特征

堿基的共軛雙鍵在260nm波長有最大吸收峰決定的。這一特性常用作核酸的定性、定量分析。2.變性與復(fù)性（1）DNA變性(denaturation)

在某些理化因素作用下，DNA雙鏈氫鍵解開成兩條單鏈的過程。部分變性DNA的電鏡圖像2.變性與復(fù)性變性因素：高溫化學(xué)試劑（如酸、堿、乙醇、尿素）變性后理化性質(zhì)改變：本質(zhì)：維持雙螺旋穩(wěn)定性的氫鍵斷裂，堿基間的堆積力遭到破壞，但不涉及到其一級結(jié)構(gòu)的改變。

黏度下降紫外吸收增加沉降速度加快DNA的紫外吸收光譜增色效應(yīng)：DNA變性時其紫外吸收增加的現(xiàn)象。

解鏈溫度使DNA變性解鏈達到50%時的溫度，即紫外光吸收值達到最大增加值50%時的溫度，又稱變性溫度、融解溫度(meltingtemperature,Tm)。雙鏈DNA單鏈DNAG+C含量越高，解鏈溫度就越高。A+T含量高的序列則Tm值低，往往是轉(zhuǎn)錄和復(fù)制起始點。GC含量對Tm值的影響(G-C)%=(Tm－69.3)×2.44%非雙鏈核酸變性雙鏈RNA也可以變性，其Tm要比同樣條件下的DNA高出20℃；DNA-RNA雜交雙鏈也會變性，其Tm介于雙鏈RNA和DNA之間。（2）DNA復(fù)性(renaturation)

在適當條件下，變性DNA的兩條互補鏈重新配對，恢復(fù)天然的雙螺旋構(gòu)象，這一現(xiàn)象稱為復(fù)性。熱變性的DNA經(jīng)緩慢冷卻后即可復(fù)性，這一過程稱為退火(annealing)

。減色效應(yīng)：DNA復(fù)性時其紫外吸收減少的現(xiàn)象。

不同來源的DNA之間或DNA與RNA因存在互補堿基序列而形成雜化雙鏈的現(xiàn)象。3.雜交核酸分子雜交包括：

DNA與DNA雜交

DNA與RNA雜交

RNA與RNA雜交核酸分子雜交的應(yīng)用研究DNA分子中某一種基因的位置定兩種核酸分子間的序列相似性檢測某些專一序列在待檢樣品中存在與否探針一段序列已知與待檢測核酸分子互補的寡核苷酸鏈，一般用放射性核素32P、生物素或熒光染料等標記。1975年英國牛津大學(xué)的E.M.Southern利用核酸雜交原理發(fā)明了印跡技術(shù)-blotting。印跡雜交技術(shù)

如何檢測染色質(zhì)DNA中是否存在某些序列限制性酶切后電泳印記轉(zhuǎn)移探針雜交、洗膜放射自顯影膜膠分離小結(jié)RNADNA存在部位細胞質(zhì)、細胞核細胞核、線粒體結(jié)構(gòu)單位AMP,GMP,CMP,UMPdAMP,dGMP,dCMP,dTMP化學(xué)組成戊糖核糖脫氧核糖堿基A,G,C,UA,G,C,T磷酸磷酸磷酸二級結(jié)構(gòu)單鏈結(jié)構(gòu)；存在鏈內(nèi)局部雙螺旋；堿基配對原則是A和U,G和C雙螺旋結(jié)構(gòu)；堿基配對原則是A和T，G和C功能參與蛋白質(zhì)生物合成貯存、攜帶遺傳信息核酸的最大紫外光吸收值一般在哪一波長附近？A.200nmB.220nmC.240nmD.260nmE.280nm練習(xí)下列關(guān)于tRNA的敘述，錯誤的是：A.含有密碼子環(huán)B.通常由73~93個核苷酸組成C.參與蛋白質(zhì)生物合成D.三級結(jié)構(gòu)呈“倒L形”E.含有大量的稀有堿基下列幾種DNA分子的堿基組成比例不同，哪一種DNA的Tm值最高？A.DNA中A-T占15%B.DNA中G-C占25%C.DNA中G-C占40%D.DNA中A-T占80%E.DNA中G-C占55%核小體串珠狀結(jié)構(gòu)的珠狀核心蛋白質(zhì)是：A.H2A，H2B，H3和H4各一分子B.H2A，H2B，H3和H4各二分子C.H1組蛋白與140-145堿基對DNAD.非組蛋白E.H2A，H2B，H3和H4各四分子

核酸分子雜交可發(fā)生在DNA與DNA之間、DNA與RNA之間，那么對于單鏈DNA5'-GCCTACG-3'，可與下列哪一種RNA發(fā)生雜交？A.5'-CGGATGC-3'B.5'-CGTAGGC-3'C.5'-CGGAUGC-3'D.5'-CGUAGGC-3'E.5'-CGGTUGC-3'真核細胞染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位是：A.組蛋白B.核心顆粒C.核小體D.超螺旋筒E.-螺旋DNA的解鏈溫度（Tm）指的是：A.A260達到最大值時的溫度B.A260達到最大增加值的50%時的溫度C.DNA開始解鏈時的溫度D.DNA完全解鏈時所需要的溫度E.A280達到最大值時的溫度A.氫鍵B.磷酸二酯鍵C.范德華力D.