GB/T 18640-2002家畜日本血吸蟲病診斷技術(shù)

ICS.11.220B41中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18640—2002家畜日本血吸蟲病診斷技術(shù)DiagnostictechniquesfordomesticanimalsschistosomoiasisJaponicum2002-02-19發(fā)布2002-05-01實(shí)施中華：人民共；和國發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局

GB/T18640-2002日本血吸蟲病(schistosomoiasisJaponicum)是牛、馬、豬、羊、犬、貓等幾十種哺乳動(dòng)物和人的一種共患寄生蟲病，流行于亞洲部分國家，在我國發(fā)生于淮河以南有釘螺生長的地區(qū).是人的主要寄生蟲病之一，家畜中主要發(fā)生于牛，其次是豬、羊。本病的病原是日本分體吸蟲(schistosomaJaponicum）亦稱日本血吸蟲簡稱血吸蟲。診斷本病的方法有檢查糞便中蟲卵、糞便手勤孵化、環(huán)卵沉淀試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)、乳膠凝集試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、斑點(diǎn)酶標(biāo)記等改進(jìn)的糞便毛勤孵化法和間接血凝試驗(yàn)可作為該病首選檢疫技術(shù)。前者是病原檢查諸法中檢出率較高的方法·后者屬血清學(xué)診斷，操作簡便、省時(shí)、敏感性高、結(jié)果判定容易。兩法均可用于家畜血吸蟲病檢疫、診斷和流行病學(xué)調(diào)查，后者還可用于血吸蟲病基本消滅和消滅地區(qū)的監(jiān)測.本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國動(dòng)物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海家畜寄生蟲病研究所本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：沈杰、錢承貴

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)家畜日本血吸蟲病診斷技術(shù)GB/T18640-2002DiagnostictechniquesfordomesticanimalsschistosomoiasisJaponicum1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了糞便毛勤孵化法和間接血凝試驗(yàn)技術(shù)本標(biāo)準(zhǔn)適用于家畜日本血吸蟲病的診斷、檢疫、流行病學(xué)調(diào)查，間接血凝試驗(yàn)還可用于基本消滅和消滅地區(qū)血吸蟲病的監(jiān)測2糞便毛孵化法2材料準(zhǔn)備2.1.1水水:pH值6.8～7.2,無水蟲和化學(xué)物質(zhì)污染（包括氯氣)的澄清水.否則需先分別作如下處理。2.1.1.1有氯氣的自來水應(yīng)在盛具中存放8h以上。2.1.1.2河水、池水、井水、雨水等混有水蟲的水加溫至60C.冷后再用。或在每5萬mL水中加含30%有效氯漂白粉0.35g·攪勾.存放20h.待氯氣逸盡;也可在放漂白粉后加入硫代硫酸鈉0.2g～0.4g脫氯,0.5h后用。2.1.1.3對渾濁的水，于每5萬mL水中加明礬3g～5g,充分?jǐn)嚢璐吻搴笥?.1.2器材、試劑：竹筷、40～80孔的銅篩濾杯、260孔的尼龍篩兜、500mL量杯、糞桶、放大鏡、顯微鏡、吸管、載玻片、蓋玻片、爐、水溫計(jì)、盆、水缸、水桶、剪刀、桐鐘、天平、200mL～250mL三角燒瓶、500mL～1000mL長頸平底燒瓶、脫脂棉、食鹽。2.1.3送糞卡：包括村名、組名、飼養(yǎng)員或畜主姓名、畜別、畜名或畜號、性別、年齡、有無孕、采糞日期2.1.4孵育室(箱)。室溫低于20C時(shí)需有保持20C～25C的環(huán)境條件.如溫箱或有取暖設(shè)備的房間2.2操作方法2.2.1采糞和送檢：采糞季節(jié)宜于春、秋兩季，其次是夏季，不宜于冬季。采糞時(shí)間最好于清晨從家畜直腸中采取·或新排出的糞便。采糞量：牛、馬糞200g·豬糞100g.羊和狗糞(農(nóng)家)40g。每份糞樣需附上填好的送糞卡，于采糞當(dāng)天送到檢驗(yàn)室。2.2.2洗糞和孵化：將每頭家畜的糞便分三份，每份糞量牛、馬50g.豬20g，羊、犬10g。然后根據(jù)實(shí)際情況選用下列一種方法進(jìn)一步操作。2.2.2.1尼龍篩淘洗孵化(25C)后·放在銅篩中淘洗，棄去濾杯.濾液倒入尼龍篩兜中用水淘洗干凈，最后將洗糞渣倒入三角燒瓶或平底長頸燒瓶中加滿25C左右清水。為便于觀察毛勤·在瓶頸下二分之一處加一塊2cm～3cm厚的脫脂棉，再加滿水.2.2.2.2塑料杯頂管孵化：置糞于銅篩濾杯中·在盛滿水的特別塑料杯內(nèi)充分淘洗后，棄去濾杯，沉淀30min,倒去三分之二.加25℃水，蓋上中間有孔的塑料杯蓋，再加滿水，再將盛滿水的試管口塞一塊2cm～3cm厚的脫脂棉·倒插人塑料杯的孔中。2.2.2.3直孵：將糞置于量杯中加少量水?dāng)噭?再加滿水,沉淀30min左右,倒去三分之一至二