標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 19915.9-2005 豬鏈球菌2型溶血素基因PCR檢測(cè)方法》是一項(xiàng)由中國(guó)發(fā)布的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，旨在為豬鏈球菌2型中特定的溶血素基因提供一種標(biāo)準(zhǔn)化的檢測(cè)手段。這份標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了使用聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase Chain Reaction, PCR）技術(shù)來識(shí)別和檢測(cè)豬鏈球菌2型中溶血素基因的方法步驟、所需材料、操作條件以及質(zhì)量控制等方面的要求。下面是該標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容的具體闡釋：

  1. 適用范圍：本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬及其相關(guān)產(chǎn)品中豬鏈球菌2型溶血素基因的存在與否及含量的檢測(cè)，對(duì)豬鏈球菌病的診斷、疫情監(jiān)測(cè)及防控具有重要意義。

  2. 檢測(cè)原理：利用PCR技術(shù)的高靈敏度和特異性，通過設(shè)計(jì)針對(duì)豬鏈球菌2型溶血素基因的特異性引物，在體外條件下對(duì)目標(biāo)DNA序列進(jìn)行選擇性擴(kuò)增，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)該基因的定性或定量檢測(cè)。

  3. 試劑與材料：標(biāo)準(zhǔn)明確了實(shí)施PCR檢測(cè)所需的各類化學(xué)試劑、酶制劑、引物序列以及質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品的具體要求，確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

  4. 樣本采集與處理：詳細(xì)說明了如何從豬的組織樣本、血液或其他相關(guān)產(chǎn)品中正確采集樣本，并介紹樣本預(yù)處理、核酸提取和純化的方法，以保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

  5. PCR反應(yīng)條件：具體規(guī)定了PCR擴(kuò)增的循環(huán)參數(shù)，包括變性溫度、退火溫度、延伸溫度以及每個(gè)階段的時(shí)間設(shè)置，這些參數(shù)是根據(jù)豬鏈球菌2型溶血素基因的特點(diǎn)優(yōu)化得出的。

  6. 結(jié)果判定：描述了通過凝膠電泳或熒光定量PCR等方法觀察和分析PCR產(chǎn)物，以判斷樣本中目標(biāo)基因是否存在及大致濃度的過程。同時(shí)，提供了陽(yáng)性和陰性對(duì)照的標(biāo)準(zhǔn)，以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的有效性和排除假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果。

  7. 質(zhì)量控制：強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)采取的質(zhì)控措施，如使用已知結(jié)果的對(duì)照樣本、定期校準(zhǔn)儀器、監(jiān)控實(shí)驗(yàn)過程中的污染風(fēng)險(xiǎn)等，以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

  8. 實(shí)驗(yàn)室要求：對(duì)執(zhí)行該檢測(cè)方法的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境、設(shè)備、人員資質(zhì)等提出了具體要求，確保實(shí)驗(yàn)條件滿足檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的需要。


如需獲取更多詳盡信息，請(qǐng)直接參考下方經(jīng)官方授權(quán)發(fā)布的權(quán)威標(biāo)準(zhǔn)文檔。

....

查看全部

  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2005-09-27 頒布
  • 2005-11-01 實(shí)施
?正版授權(quán)
GB/T 19915.9-2005豬鏈球菌2型溶血素基因PCR檢測(cè)方法_第1頁(yè)
GB/T 19915.9-2005豬鏈球菌2型溶血素基因PCR檢測(cè)方法_第2頁(yè)
GB/T 19915.9-2005豬鏈球菌2型溶血素基因PCR檢測(cè)方法_第3頁(yè)
GB/T 19915.9-2005豬鏈球菌2型溶血素基因PCR檢測(cè)方法_第4頁(yè)
免費(fèi)預(yù)覽已結(jié)束，剩余4頁(yè)可下載查看

下載本文檔

GB/T 19915.9-2005豬鏈球菌2型溶血素基因PCR檢測(cè)方法-免費(fèi)下載試讀頁(yè)

文檔簡(jiǎn)介

ICS07.100.30C53中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T19915.9-2005豬鏈球菌2型溶血素基因PCR檢測(cè)方法DetectionmethodofthehemolysingeneforSireptococcussuistype2byPCR2005-09-27發(fā)布2005-11-01實(shí)施中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)豬鏈球菌2型溶血素基因PCR檢測(cè)方法GB/T19915.9-2005中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行北京西城區(qū)復(fù)興門外三里河北街16號(hào)郵政編碼：100045電話：63787337637874472005年12月第一版2005年12月電子版制作書號(hào)：155066·1-26848版權(quán)專有侵權(quán)必究舉報(bào)電話：（010)68533533

GB/T19915.9-2005豬鏈球菌2型是鏈球菌屬的成員，其致病菌株可致豬鏈球菌病,引起豬敗血癥、腦膜炎等。近年來隨著我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展.該病流行日趨嚴(yán)重.給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大損失。人可通過傷口感染該菌,并導(dǎo)致死亡。溶血素是豬鏈球菌2型一種重要毒力因子。通過檢測(cè)豬及其產(chǎn)品中分離菌林是否含有豬鏈球菌2型溶血素基因，可以作為區(qū)分豬鏈球菌2型無毒菌株與致病菌株的一個(gè)指標(biāo)，特制定本標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A為規(guī)范性附錄本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)提出本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)動(dòng)物防疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位：中華人民共和國(guó)江蘇出入境檢驗(yàn)檢疫局、中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：陳國(guó)強(qiáng)、唐泰山、張敬友、姜炭、王凱民、張常印、林祥梅、吳紹強(qiáng)、劉建、韓雪清賈廣樂、梅琳、

GB/T19915.9-2005豬鏈球菌2型溶血素基因PCR檢測(cè)方法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豬鏈球菌2型溶血素基因PCR檢測(cè)的操作方法本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬及其產(chǎn)品中分離菌株的豬鏈球菌2型溶血素基因的檢測(cè)2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn),然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T6682—1992分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)3.1褚鏈球菌2型Srreplococcussuistype2豬鏈球菌是屬于鏈球菌屬的一種細(xì)菌,根據(jù)其莢膜多糖抗原的差異.可分為1～34及1/2共35個(gè)血清型。豬鏈球菌2型是豬鏈球菌的一個(gè)血清型.不僅對(duì)豬致病性很強(qiáng)，而且可以感染特定的人群.是·種重要的人畜共患病病原菌?？s略語(yǔ)PCRPolymerasechainreaction·聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)DNAdeoxyribonucleicacid,脫氧核糖核酸dNTPdeoxyribonucleosidetriphosphate.脫氧核苔酸三磷酸bpbasepair·堿基對(duì)5測(cè)定方法5.1方法提要以可疑細(xì)菌培養(yǎng)物提取的核酸,作為DNA模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物,與標(biāo)準(zhǔn)分子量標(biāo)記比較，來確定擴(kuò)增產(chǎn)物的大小5.2試劑和材料除另有規(guī)定，所用試劑均為分析純，水為符合GB/T6682-1992的滅菌雙蒸水5.2.1豬鏈球菌2型溶血素基因PCR反應(yīng)混合物：10×PCR緩沖液2.5gL、25mmol/LMgCl2.0gL、2.5mmol/LdNTP2gL、上下游引物各1gL,用雙蒸水補(bǔ)至20L。引物序列如下.其目的片段長(zhǎng)度為495bp。slyl:5'CCC.AAG.TTC.A

溫馨提示

  • 1. 本站所提供的標(biāo)準(zhǔn)文本僅供個(gè)人學(xué)習(xí)、研究之用，未經(jīng)授權(quán)，嚴(yán)禁復(fù)制、發(fā)行、匯編、翻譯或網(wǎng)絡(luò)傳播等，侵權(quán)必究。
  • 2. 本站所提供的標(biāo)準(zhǔn)均為PDF格式電子版文本（可閱讀打?。?，因數(shù)字商品的特殊性，一經(jīng)售出，不提供退換貨服務(wù)。
  • 3. 標(biāo)準(zhǔn)文檔要求電子版與印刷版保持一致，所以下載的文檔中可能包含空白頁(yè)，非文檔質(zhì)量問題。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論