實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和一般技術(shù)

實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和一般技術(shù)第一頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日

實(shí)驗(yàn)室是細(xì)胞工程研究的主要場(chǎng)所，應(yīng)能滿足清洗、培養(yǎng)基制備、儲(chǔ)藏、無(wú)菌操作、培養(yǎng)、鑒定等多方面的工作需要。第二頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日第一節(jié)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)洗滌間培養(yǎng)基配制間消毒間無(wú)菌操作間培養(yǎng)室鑒定室第三頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日洗滌間面積:30-50m2配置：在實(shí)驗(yàn)室的一側(cè)設(shè)置專用的洗滌水槽，用來(lái)清洗玻璃器皿。中央實(shí)驗(yàn)臺(tái)還應(yīng)配置2個(gè)水槽，用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大，可以購(gòu)置一臺(tái)洗瓶機(jī)。準(zhǔn)備1-2個(gè)洗液缸，專門用于洗滌對(duì)潔凈度要求很高的玻璃器皿。此外還應(yīng)配置落水架、干燥箱、柜子、超聲波清洗器等，地面應(yīng)耐濕并排水良好。第四頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日超聲波清洗機(jī)全自動(dòng)洗瓶機(jī)第五頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日培養(yǎng)基配制間

面積60平方米左右配備的主要儀器設(shè)備有：冰箱、天平、微波爐、pH計(jì)、培養(yǎng)基分裝器、藥品柜、器械柜、抽氣泵、電爐、各種規(guī)格的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、移液管、燒杯、量筒、容量瓶、儲(chǔ)藏瓶等。冰箱以體積180-200L為宜(最好冷藏容積大于冷凍容積），用于儲(chǔ)存培養(yǎng)基母液、激素維生素等貴重藥品、彩色膠卷、及保存植物材料。天平應(yīng)有不同感量。

第六頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日消毒間

配備實(shí)驗(yàn)臺(tái)、高壓滅菌鍋、排風(fēng)滅火設(shè)備、細(xì)菌過(guò)濾設(shè)備、干熱消毒柜、電爐等。滅菌鍋的選擇應(yīng)根據(jù)不同的要求選擇不同型號(hào)的滅菌鍋。一般實(shí)驗(yàn)室可選用小型的醫(yī)用手提式高壓滅菌鍋，較大的實(shí)驗(yàn)室可選用立式自動(dòng)控制壓力和溫度的滅菌鍋。生產(chǎn)性的實(shí)驗(yàn)室可選用大型的臥式滅菌鍋。如果沒(méi)有條件的話，可以將上述工作間合并成一個(gè)準(zhǔn)備間，要求是設(shè)備的安裝和排列要合理、房間要寬敞、明亮、透風(fēng)，地面要便于清潔、防滑。

第七頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日無(wú)菌操作室（接種室）

通常由里外兩間組成，外間是緩沖間，用于準(zhǔn)備工作，還有防止污染的作用。緩沖間的門應(yīng)該與接種室的門錯(cuò)開(kāi)，兩個(gè)門也不要同時(shí)開(kāi)啟，以保證無(wú)菌室不因開(kāi)門和人的進(jìn)出帶進(jìn)雜菌。緩沖間內(nèi)應(yīng)該設(shè)有水槽、實(shí)驗(yàn)臺(tái)、鞋帽架、和柜子、紫外燈。無(wú)菌操作室的內(nèi)壁應(yīng)當(dāng)用塑鋼板或瓷磚裝修，工作人員進(jìn)入操作間前要穿上消過(guò)毒的工作服和拖鞋。室內(nèi)應(yīng)配有超凈工作臺(tái)，紫外燈、解剖鏡、各種接種器械等。第八頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日第九頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日培養(yǎng)室

為了控制培養(yǎng)室的溫度和光照時(shí)間及其強(qiáng)度，培養(yǎng)室的房間不要窗戶，但應(yīng)當(dāng)留一個(gè)通氣窗，并安上排氣扇。室內(nèi)溫度由空調(diào)控制，光照由日光燈控制。天花板和內(nèi)墻最好用塑料鋼板裝修，地面用水磨石或瓷磚鋪設(shè)，一般要分兩間，一為光照培養(yǎng)室，一為暗培養(yǎng)室。培養(yǎng)室外應(yīng)有一預(yù)備間或走廊。培養(yǎng)室應(yīng)配有培養(yǎng)架、轉(zhuǎn)床、搖床、光照培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、自動(dòng)控時(shí)器等。日光燈一般用40W，固定在培養(yǎng)架的側(cè)面或擱板的下面，每層有兩支日光燈，距離在20cm，光照強(qiáng)度為2000-3000lx。

第十頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日第十一頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日輔助實(shí)驗(yàn)室鑒定室溫室第十二頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日鑒定室細(xì)胞學(xué)鑒定室其功能是對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定和研究。要求清潔、明亮、干燥，使各種光學(xué)儀器不受潮濕和灰塵污染。應(yīng)配置各種顯微鏡、照相系統(tǒng)等。生化分析室在以培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)物為主要目的的實(shí)驗(yàn)室中，應(yīng)建立相應(yīng)的分析化驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，以便于對(duì)培養(yǎng)物的有效成分隨時(shí)進(jìn)行取樣檢查。離心機(jī)、酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀、天平、PCR儀等。第十三頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日溫室為試管苗提供滿足生長(zhǎng)的適宜環(huán)境條件。

第十四頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日第二節(jié)常用設(shè)備和器材準(zhǔn)備室裝置：水純化裝置超聲波清洗器蒸汽壓力消毒器電熱干燥箱過(guò)濾除菌裝置操作室裝置：超凈工作臺(tái)移液器培養(yǎng)室裝置：培養(yǎng)箱搖床檢測(cè)設(shè)備：顯微鏡顯微操作儀血球計(jì)數(shù)板細(xì)胞冷凍存儲(chǔ)設(shè)備第十五頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日一、水純化裝置

細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)水的要求：純水(重蒸水、三蒸水）蒸餾式水純化裝置過(guò)濾式水純化裝置第十六頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日二、超聲波清洗器原理：利用超聲波在液體中的“空化”作用，使污物剝落。第十七頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日三、蒸汽壓力消毒器作用：滅菌種類：手提式、臥式、立式手提式滅菌鍋操作步驟：注水－裝鍋－加熱－排冷氣－到規(guī)定氣壓時(shí)維持滅菌時(shí)間－自然降溫－開(kāi)閥－取物第十八頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日四、電熱干燥箱作用：烘干、干熱滅菌使用方法：第十九頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日五、過(guò)濾除菌裝置玻璃漏斗式濾器Zeiss濾器針頭式濾器正壓式金屬濾器第二十頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日六、超凈工作臺(tái)作用：分類：結(jié)構(gòu)組成：鼓風(fēng)機(jī)、濾板、操作空間、照明設(shè)備、滅菌設(shè)備使用第二十一頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日七、培養(yǎng)箱光照培養(yǎng)箱人工氣候箱第二十二頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日八、搖床作用：第二十三頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日九、移液器單通道移液器多通道移液器連續(xù)加樣器電動(dòng)加樣器第二十四頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日十、顯微鏡體視顯微鏡透射顯微鏡倒置顯微鏡熒光顯微鏡相差顯微鏡第二十五頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日十一、細(xì)胞冷凍存儲(chǔ)設(shè)備第二十六頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日第三節(jié)常用器皿選擇及清洗

一、器皿選擇二、器皿清洗第二十七頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日1、培養(yǎng)用器皿培養(yǎng)皿培養(yǎng)瓶培養(yǎng)板第二十八頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日2金屬器械鑷子剪刀解剖刀接種針第二十九頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日二、常用器材的清洗1玻璃器材的清洗2橡膠制品的清洗3除菌濾器的清洗4塑料器皿的清洗5金屬器械的清洗6常用洗滌液的種類和配制方法

第三十頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日1玻璃器材的清洗主要包括培養(yǎng)瓶、試管、培養(yǎng)皿、移液管的清洗新玻璃器材的清洗：浸泡－－刷洗－－浸酸－－沖洗－－蒸餾水沖洗使用過(guò)的玻璃器材的清洗浸泡－－刷洗注意：1.量器不可刷洗

2.有毒物容器處理第三十一頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日2橡膠制品的清洗新橡膠制品清洗：堿煮沸－－沖洗－－酸煮沸－－沖洗－－自來(lái)水煮沸－－蒸餾水沖洗－－烘干使用過(guò)的膠塞按照玻璃器材方法清洗第三十二頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日3除菌濾器的清洗新的G6除菌濾器的清洗

清潔液中浸泡24h－－流水沖洗至pH5.5－－4倍體積蒸餾水緩慢沖洗－－三蒸水沖洗－－烤干－－包裝消毒用過(guò)的G6除菌濾器的清洗立即浸泡水中過(guò)夜－－流水沖洗24h－－濾面基本疏通時(shí)50℃烤干－－清潔液中浸泡24h－－流水沖洗至pH5.5－－4倍體積蒸餾水緩慢沖洗－－三蒸水沖洗－－烤干－－包裝消毒蔡式濾器清洗第三十三頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日4塑料器皿的清洗注意：防止劃痕，防止附著物干結(jié)過(guò)程：脫脂棉擦拭－－流水沖洗－－晾干－－2%NaOH浸泡過(guò)夜－－自來(lái)水沖洗－－5%鹽酸浸泡30min－－自來(lái)水沖洗－－蒸餾水沖洗第三十四頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日5金屬器械的清洗金屬用品一般不宜用各種洗滌液洗滌（新的可以用熱洗衣粉水洗凈），需要清洗時(shí)，一般用酒精擦洗，然后火焰干燥。

第三十五頁(yè)，共三十七頁(yè)，2022年，8月28日6常用洗滌液的種類和配制方法鉻酸洗液濃