第九節(jié)其他病原性細(xì)菌

第九節(jié)其他病原性細(xì)菌一、炭疽芽胞桿菌

（Bacillusanthracis，B.anthraci)炭疽芽胞桿菌俗稱(chēng)炭疽桿菌，是引起人類(lèi)、各種家畜和野生動(dòng)物炭疽（Anthrax）的病原。

炭疽是人畜共患的急性傳染病，主要是牛、羊等食草類(lèi)動(dòng)物的傳染病，人可通過(guò)接觸或攝食病畜及畜產(chǎn)品而感染。皮膚炭疽、腸炭疽、肺炭疽等，并發(fā)敗血癥，甚至炭疽性腦膜炎2形態(tài)及染色革蘭氏陽(yáng)性大桿菌，菌體平直，兩端平截，無(wú)鞭毛，不運(yùn)動(dòng)。形成芽孢、莢膜。動(dòng)物組織和血液:單在或短鏈，經(jīng)培養(yǎng)后形成長(zhǎng)鏈，呈竹節(jié)狀。在組織中或含血液的培養(yǎng)基中可形成莢膜。人工培養(yǎng)物:形成長(zhǎng)鏈，形成芽胞，一般不形成莢膜芽孢在有氧條件下形成，25～30℃，橢圓形，位于菌體中央，小于菌體，不膨出菌體。在培養(yǎng)基中、土壤內(nèi)、動(dòng)物尸體解剖后暴露在空氣中，都易形成芽胞。在活體或完整未解剖尸體內(nèi)不形成芽胞，尸體嚴(yán)禁解剖培養(yǎng)特性需氧菌或兼性厭氧，最適生長(zhǎng)溫度30℃-37℃，營(yíng)養(yǎng)要求不高，普通培養(yǎng)基中即能生長(zhǎng)良好。干燥、邊緣不整的粗糙型菌落，低倍鏡下邊緣呈“卷發(fā)狀”普通肉湯：37℃，24h培養(yǎng)，上層液透明，形成白色絮狀沉淀普通瓊脂：大而扁平、灰白色，不透明、表面干燥、邊緣不整齊 ，火焰狀菌落。低倍鏡觀察菌落邊緣呈卷發(fā)狀，不溶血。

強(qiáng)毒菌株形成灰白色不透明、大而扁平、表面干燥；無(wú)毒或弱毒菌株形成稍小而隆起、表面較為光滑濕潤(rùn)、邊緣比較整齊的光滑型菌落。

強(qiáng)毒株菌落2.在血瓊脂上一般不溶血，但個(gè)別菌株也可輕微溶血。3.液體培養(yǎng)基中呈絮狀沉淀生長(zhǎng)4.明膠穿刺培養(yǎng)，37℃18～24h表面液化成漏斗狀，由于細(xì)菌沿穿刺線向四周擴(kuò)散形成倒松樹(shù)狀。5.在含青霉素的培養(yǎng)基中，可形成串珠反應(yīng)，與其它需氧芽孢桿菌區(qū)別。

串珠反應(yīng)：在含青霉素0.5U/ml的培養(yǎng)基中，幼齡炭疽桿菌因細(xì)胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生質(zhì)體相互連接成串。生化特性分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、蕈糖，有些菌能遲緩發(fā)酵甘油和水楊素產(chǎn)酸不產(chǎn)氣水解淀粉、還原硝酸鹽不產(chǎn)生吲哚和硫化氫、不利用檸檬酸鹽、不分解尿素在牛乳中生長(zhǎng)2～4天牛乳凝固→緩慢胨化觸酶（+）、卵磷脂酶弱（+）抗原結(jié)構(gòu)

（一）結(jié)構(gòu)抗原

1.莢膜抗原：多肽，僅見(jiàn)于有毒菌株，與毒力和抗吞噬有關(guān)，無(wú)保護(hù)作用不穩(wěn)定，反應(yīng)性特異—可用于血清學(xué)鑒定

2.菌體抗原：細(xì)胞壁及菌體內(nèi)的半抗原（多糖），與細(xì)菌毒力無(wú)關(guān)。性質(zhì)穩(wěn)定，經(jīng)加熱煮沸甚至高壓蒸汽處理，抗原性不被破壞。

在病畜皮毛或腐敗臟器中經(jīng)長(zhǎng)時(shí)間煮沸仍能與特異性抗體發(fā)生反應(yīng)形成環(huán)狀沉淀，稱(chēng)為Ascoli反應(yīng)。

3.芽胞抗原：是芽胞的外膜和皮質(zhì)組成，具有免疫原性。具有免疫原性和血清學(xué)診斷價(jià)值。（二）保護(hù)性抗原（PA）

炭疽毒素保護(hù)性抗原（PA)、致死因子（LF）、水腫因子（EF）三個(gè)組分，單獨(dú)皆無(wú)致病性，與PA結(jié)合才顯示出致病性保護(hù)性抗原（PA）是炭疽毒素的組成成分之一，具有免疫原性。免疫保護(hù)抵抗力繁殖體的抵抗力不強(qiáng)60℃30-60min即可殺死常用消毒劑均能將其殺死青霉素等多種抗生素高度敏感芽胞的抵抗力特別強(qiáng)干燥背光處可存活40年以上煮沸1h或干熱140℃3h可殺滅芽胞對(duì)碘特別敏感0.04％-10min耐藥性本菌對(duì)青霉素、氨基糖甙類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)、環(huán)丙沙星敏感致病性本菌可引致各種家畜、野獸和人類(lèi)的炭疽易感性最強(qiáng)—牛、綿羊、鹿等其次—馬、駝、豬、山羊等次之犬、貓、食肉獸等則有相當(dāng)大的抵抗力禽類(lèi)一般不感染感染途徑：消化道、呼吸道、皮膚創(chuàng)傷或通過(guò)吸血昆蟲(chóng)傳播食草動(dòng)物炭疽常表現(xiàn)為急性敗血癥豬炭疽多表現(xiàn)為慢性的咽部局限感染犬、貓和食肉獸則多表現(xiàn)為腸炭疽感染表現(xiàn)

人類(lèi)腸炭疽、肺炭疽或皮膚炭疽實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠、豚鼠、家兔易感莢膜多肽：莢膜抗吞噬，抑制抗體的作用，使易于擴(kuò)散，引起

感染乃至敗血癥。動(dòng)物無(wú)保護(hù)作用，可用于細(xì)菌鑒定致病物質(zhì)：炭疽毒素：水腫毒素(edemafactor,EF)致死毒素(lethalfactor,LF)保護(hù)性抗原（PA）三種成分單獨(dú)無(wú)生物學(xué)活性（毒性），三種相結(jié)合時(shí)，表現(xiàn)毒性作用增強(qiáng)微血管的通透性，改變血液循環(huán)，損害腎功能，干擾糖代謝導(dǎo)致動(dòng)物死亡具有免疫原性，有保護(hù)作用16免疫性患過(guò)炭疽的動(dòng)物，能獲得堅(jiān)強(qiáng)的免疫力。菌苗有第二號(hào)炭疽芽胞苗無(wú)毒炭疽芽胞苗抗炭疽血清保護(hù)性抗原炭疽毒素刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體抗感染作用標(biāo)本采集病人血液、痰、糞便、滲出液、腦脊液等死亡病畜標(biāo)本：死亡牲畜嚴(yán)禁宰殺污染物品：皮革、獸毛、土壤等標(biāo)本處理：無(wú)雜菌污染標(biāo)本直接接種，有雜菌污染標(biāo)本先加熱殺死繁殖體和雜菌再接種微生物學(xué)診斷

1.細(xì)菌學(xué)檢查（1）涂片鏡檢：堿性美藍(lán)瑞氏染色姬姆薩染色有莢膜竹節(jié)狀大桿菌組織病料堿性美藍(lán)革蘭氏染色

具有芽胞的鏈桿菌培養(yǎng)物（2）分離培養(yǎng)：普通瓊脂血液瓊脂碳酸氫鈉瓊脂觀察生長(zhǎng)特性生物學(xué)特性檢測(cè)被檢材料強(qiáng)度株形成莢膜動(dòng)物機(jī)體內(nèi)含碳酸氫鈉或血清培養(yǎng)基（在CO2條件下培養(yǎng)）炭疽桿菌與γ噬菌體具有高度的特異性裂解炭疽桿菌形成噬菌斑被檢菌含青霉素培養(yǎng)基形成串珠生長(zhǎng)抑制穿刺接種于明膠培養(yǎng)基18-20℃培養(yǎng)4-7d呈倒置松樹(shù)狀*莢膜檢查：*噬菌體裂解試驗(yàn)：*串珠試驗(yàn)：*明膠穿刺試驗(yàn)：細(xì)菌噬菌斑細(xì)菌噬菌體裂解試驗(yàn)串珠試驗(yàn)串珠細(xì)菌2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：在內(nèi)臟、血液中有大量帶莢膜的竹節(jié)狀菌體剖檢變化：注射部位呈膠樣水腫脾臟腫大3.血清學(xué)檢查：熱沉淀反應(yīng)（Ascoli氏沉淀反應(yīng)）間接血凝試驗(yàn)串珠熒光抗體檢查被檢抗原炭疽芽孢串珠試驗(yàn)與熒光抗體法結(jié)合病料(1:5乳懸液)或培養(yǎng)物皮下接種：小鼠0.1ml兔0.2-0.3ml敗血癥而死亡炭疽痊愈動(dòng)物可獲得堅(jiān)強(qiáng)的免疫，再次感染者很少

預(yù)防重點(diǎn)應(yīng)放在控制家畜的感染和牧場(chǎng)的污染上。病畜必須嚴(yán)格隔離或處死深埋，死畜嚴(yán)禁剝皮或煮食，必須焚毀或深埋2m以下。對(duì)疫區(qū)家畜應(yīng)進(jìn)行預(yù)防接種。特異性預(yù)防用炭疽減毒活疫苗進(jìn)行皮上劃痕接種，免疫力可維持1年。治療以青霉素為首選，也可選用其他廣譜抗生素。免疫防治二、布魯菌屬（Brucella）布魯菌屬是一類(lèi)革蘭染色陰性短小桿菌。有6個(gè)生物種(牛布魯菌，羊布魯菌，豬布魯菌，犬布魯菌，綿羊附睪布魯菌，沙林鼠布魯菌)、19個(gè)生物型，使人致病的是前四個(gè)生物種，因最早由美國(guó)醫(yī)師DavidBruce首先分離出，故得名。哺乳動(dòng)物中牛、羊、豬等家畜最易感染，常引起母畜流產(chǎn)。人類(lèi)與病畜接觸或食用其染菌肉類(lèi)、乳制品等可引起感染，稱(chēng)為布魯菌病。我國(guó)流行的主要是羊布魯菌(B.melitensis)、牛布魯菌(B.abortus)和豬布魯菌(B.suis)，尤以羊布魯菌最常見(jiàn)。馬爾他布氏桿菌(羊型）：生物型1-3流產(chǎn)布氏桿菌（牛型）：生物型1-9豬布氏桿菌：生物型1-5綿羊布氏桿菌：沙林鼠布氏桿菌：犬布氏桿菌：三、種和生物型該屬包括6個(gè)種20個(gè)生物型生物特性革蘭陰性短小球桿菌，兩端鈍園，偶見(jiàn)兩極濃染無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞，光滑型菌株有莢膜。革蘭染色經(jīng)常著色不佳，吉姆染色呈紫色。馬爾他布魯菌革蘭染色細(xì)菌專(zhuān)性需氧初次分離培養(yǎng)時(shí)需5%~10%CO2。營(yíng)養(yǎng)要求較高生長(zhǎng)緩慢（5~7天）最適生長(zhǎng)溫度為35℃~37℃最適pH為6.6~6.8。培養(yǎng)特性:馬爾他布魯菌血平板菌落在血瓊脂平板或肝浸液瓊脂平板上，37℃培養(yǎng)48h長(zhǎng)出透明、無(wú)色、光滑型(S型)小菌落。血瓊脂平板上無(wú)溶血現(xiàn)象。能分解尿素和產(chǎn)生H2S。根據(jù)產(chǎn)生H2S的多少和在含堿性染料培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況，可鑒別三種布魯菌

布魯氏菌的生化特性菌種觸酶氧化酶

糖分解精氨酸脫羧硝酸鹽還原尿素酶H2S產(chǎn)生染料的耐受葡萄糖半乳糖阿拉伯糖硫廑

(40μg)復(fù)紅

(20μg)羊布魯菌+++---+V-++牛布魯菌+++++-+++-+豬布魯菌++++++++(-)+-森林鼠布魯菌+-+++-+++--綿羊布魯菌+--------+(-)犬布魯菌+++--+++-+-注：V不定;(-)大部分菌株陰性抗原性A抗原與M抗原：*抗原決定簇位于細(xì)胞壁的脂多糖蛋白復(fù)合物上*光滑型布氏桿菌具有A和M兩種表面抗原*三種布魯菌所含的A抗原與M抗原量在比例上不同。用A血清與M血清進(jìn)行凝集試驗(yàn)對(duì)三種布魯菌有鑒別作用?！ˋ、M及R抗原（表面抗原）屬外抗原屬內(nèi)抗原羊—1:20?！?0:1豬—2:1A:M*細(xì)胞壁低蛋白含量的脂多糖復(fù)合物R抗原：*非光滑型布氏桿菌的共同抗原決定簇。抵抗力本菌對(duì)外界環(huán)境的抵抗力較強(qiáng)在污染的土壤和水中可存活1-4個(gè)月皮毛2-4個(gè)月，乳、肉食品中約2個(gè)月，糞便中120d咸肉中40日，羊毛中1.5-4月對(duì)日光、濕熱、常用消毒劑的抵抗力不強(qiáng)，對(duì)常用的廣譜抗生素較敏感。日光照射10~20min即死亡。濕熱60℃-30min或70℃-5min即殺死、煮沸立即死亡在普通濃度的來(lái)蘇溶液中數(shù)分鐘即被殺死。致病性致病因素：內(nèi)毒素是主要的致病物質(zhì)莢膜侵襲酶（透明質(zhì)酸酶和過(guò)氧化氫酶等）布魯菌引起的Ⅳ型超敏反應(yīng)也能參與致?。ǜ腥静剪斁?，患者布魯菌素皮膚試驗(yàn)常呈陽(yáng)性。因此認(rèn)為布魯菌的致病與遲發(fā)型超敏反應(yīng)有關(guān)）所致疾病動(dòng)物感染*一般無(wú)明顯臨床癥狀，多屬隱性傳染*病變多局限于生殖器官流產(chǎn)、睪丸炎、乳腺炎、子宮炎、關(guān)節(jié)炎等人類(lèi)感染主要通過(guò)接觸病畜及其分泌物或被污染的畜產(chǎn)品，經(jīng)皮膚粘膜和消化道、呼吸道等多種途徑受染，引起布魯菌病。易感人群：發(fā)病以青壯年為主，從事獸醫(yī)、皮毛加工、屠宰的工人發(fā)病率較高潛伏期：5~21日，亦可高達(dá)數(shù)月癥狀：長(zhǎng)期發(fā)熱，多汗，關(guān)節(jié)疼痛及全身乏力，疼痛人感染病理：布魯菌侵入機(jī)體后，即被吞噬細(xì)胞吞噬，因其莢膜能抵抗吞噬細(xì)胞的裂解而成為胞內(nèi)寄生菌，并經(jīng)淋巴管到達(dá)局部淋巴結(jié)，生長(zhǎng)繁殖形成感染灶。當(dāng)布魯菌在淋巴結(jié)中繁殖到一定數(shù)量后，突破淋巴結(jié)屏障侵入血流，出現(xiàn)發(fā)熱等菌血癥癥狀。此后，布魯菌隨血流侵入肝、脾、淋巴結(jié)及骨髓等處，形成新的感染灶。血液中的布魯菌逐漸消失，體溫也逐漸正常。細(xì)菌在新感染灶內(nèi)繁殖到一定數(shù)量時(shí)，再度入血，又出現(xiàn)菌血癥而致體溫升高。如此反復(fù)使患者呈現(xiàn)不規(guī)則的波浪狀熱型，臨床上稱(chēng)為波浪熱。因布魯菌為胞內(nèi)寄生菌，抗菌藥物及抗體等均不易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，因此，本病較難根治，易轉(zhuǎn)為慢性，反復(fù)發(fā)作。布氏桿菌病木乃伊胎兒（四月齡）布氏桿菌病流產(chǎn)胎兒（7月齡），皮下水腫母豬子宮內(nèi)死胎布氏桿菌病流產(chǎn)胎盤(pán)，水腫及子葉出血、壞死免疫性機(jī)體對(duì)布魯菌的免疫，主要是巨噬細(xì)胞的殺菌作用。機(jī)體感染布魯菌后可產(chǎn)生一定免疫力，且各菌種有交叉感染。一般認(rèn)為此免疫力為無(wú)菌免疫，隨著病程的延續(xù)和機(jī)體免疫力的增強(qiáng)，體內(nèi)的布魯菌不斷被殺滅，體內(nèi)變成無(wú)菌免疫。即當(dāng)體內(nèi)有布魯菌存在時(shí)，對(duì)再次感染有較強(qiáng)免疫力。同時(shí)血液中也有抗體產(chǎn)生，發(fā)揮調(diào)理作用。此外感染布魯菌也可引起Ⅳ型超敏反應(yīng)，故病程中免疫保護(hù)和病理?yè)p傷往往交織存在。布魯菌以細(xì)胞免疫為主，病后產(chǎn)生IgM、IgG類(lèi)抗體。急性期取血，慢性期取骨髓。將材料接種雙相肝浸液培養(yǎng)基(一半為斜面，一半為液體)置37℃、5%~10%C02環(huán)境中培養(yǎng)。大多在4~7d形成菌落，若30d時(shí)仍無(wú)菌生長(zhǎng)可報(bào)告為陰性?？赏ㄟ^(guò)菌落特點(diǎn)、涂片染色鏡檢、CO2的要求、H2S產(chǎn)生、染料抑菌試驗(yàn)及玻片凝集等確定型別。微生物學(xué)診斷病后1周后，可用試管凝集試驗(yàn)測(cè)定血清IgM抗體。抗體效價(jià)≧1:160~1:320為陽(yáng)性，1:200有診斷意義，但當(dāng)大于或等于1:100時(shí)應(yīng)重復(fù)進(jìn)行試管凝集試驗(yàn)，需要在37℃水浴16~20小時(shí)后觀察結(jié)果。用乳膠凝集試驗(yàn)可在6分鐘內(nèi)判定結(jié)果?？骨虻鞍自囼?yàn)(Coombs試驗(yàn))針對(duì)布魯菌感染者出現(xiàn)不完全抗體者，在病程中凝集效價(jià)出現(xiàn)增長(zhǎng)者有診斷意義。對(duì)慢性患者可進(jìn)行補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)測(cè)IgG，一般以1:10為陽(yáng)性診斷標(biāo)準(zhǔn)，一般發(fā)病三周后出現(xiàn)IgG抗體。將布魯菌素0.1ml注入受試者前臂掌側(cè)皮內(nèi)24~48h觀察結(jié)果。局部出現(xiàn)紅腫，直徑1~2cm為弱陽(yáng)性，大于2cm~3cm者為陽(yáng)性，大于3~6cm為強(qiáng)陽(yáng)性。若紅腫在4~6h內(nèi)消退者為假陽(yáng)性。皮試陽(yáng)性可診斷慢性或曾患過(guò)布魯菌病。防治原則控制和消滅家畜布魯菌病，切斷傳播途徑和免疫接種是三項(xiàng)主要的預(yù)防措施。免疫接種以畜群為主。人群接種對(duì)象是牧場(chǎng)，屠宰場(chǎng)工作人員及有關(guān)職業(yè)的人群，如獸醫(yī)等。用凍干減毒104M株活疫苗作皮上劃痕法接種，有效期約1年。急性期患者以抗生素治療為主，慢性期患者除繼續(xù)用抗生素治療外，可用特異性菌苗進(jìn)行脫敏治療。三、鼠疫耶爾森菌?耶爾森菌屬(Yersinia)現(xiàn)歸入腸桿菌科，原系動(dòng)物感染性疾病的病原菌，人通過(guò)接觸感染動(dòng)物或污染食物而患病。目前耶爾森菌屬大致分11種，為鼠疫耶爾森菌(Yersiniapestis)、假結(jié)核耶爾森菌(Y.pseudotuberculosis)，小腸結(jié)腸炎耶爾森菌(Y.enterocolitica)及中間耶爾森菌(Y.intermedia)等，前3種對(duì)人類(lèi)有較強(qiáng)致病性。鼠疫耶爾森菌（Y.pestis），俗稱(chēng)鼠疫桿菌，是鼠疫的病原菌。鼠疫是一種人獸共患的自然疫源性烈性傳染病，人類(lèi)鼠疫多為疫鼠的跳蚤叮咬而感染，是我國(guó)法定的甲類(lèi)傳染病。直至十九世紀(jì)末，鼠疫耶爾森菌才被分離和命名。此菌引起的是嚙齒動(dòng)物中的自然疫源性疾病，傳染性強(qiáng)，病死率高，易釀成大流行，從公元6～19世紀(jì)發(fā)生過(guò)3次大流行。此菌主要累及皮膚和淋巴結(jié)，其次為敗血癥、肺炎、腦膜炎。目前我國(guó)僅在青海等個(gè)別地區(qū)有少數(shù)散在病例。第二次世界大戰(zhàn)期間，日本侵略軍曾利用鼠疫耶爾森菌制造細(xì)菌武器，我國(guó)東北地區(qū)發(fā)生過(guò)流行。目前世界各地仍有散發(fā)病例。印度、越南、緬甸等少數(shù)國(guó)家每年有數(shù)百散發(fā)病例發(fā)生。1994年印度發(fā)生了鼠疫的爆發(fā)流行，死亡率高達(dá)10%～30%。在美國(guó)，統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)表明，每年約有20例耶爾森菌感染，其中20%累及肺部。未治療病人病情兇險(xiǎn)，病程早期進(jìn)行治療可大大降低病死率。生物學(xué)特性形態(tài)與染色革蘭氏染色陰性，球狀、卵圓或桿狀，菌體兩端鈍圓且濃染，亦易被苯胺染料著色。大小為0.5～1.0μm×1.0～2.0μm。一般分散存在，偶爾成雙或呈短鏈排列。無(wú)鞭毛，不能活動(dòng)，可與本屬其它細(xì)菌相區(qū)別。不形成芽胞。在死于鼠疫的新鮮動(dòng)物內(nèi)臟制備的涂片或印片中，可見(jiàn)吞噬細(xì)胞內(nèi)、外形態(tài)典型的菌體，且有莢膜。在腐敗材料或化膿性、潰瘍性材料中，菌體常膨大呈球形，并且著色不良。如在陳舊培養(yǎng)物或在含3%氯化鈉的高鹽培養(yǎng)基中，菌體呈明顯多形性，有球形、桿形、啞鈴形等，并可見(jiàn)著色極淺的菌影（ghost）。培養(yǎng)特性兼性厭氧。最適生長(zhǎng)溫度27℃～30℃，最適pH為6.9～7.1。在普通培養(yǎng)基中能夠生長(zhǎng)，但生長(zhǎng)較緩慢，在含血液或組織液的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中，經(jīng)24小時(shí)～48小時(shí)形成可見(jiàn)菌落。菌落細(xì)小，圓形，無(wú)色半透明，中央厚而致密，邊緣薄而不規(guī)則。有毒菌株形成灰白色，粘液性菌落。在肉湯培養(yǎng)基中沉淀生長(zhǎng)和形成菌膜，液體一般不混濁，稍加搖動(dòng)，菌膜下沉呈鐘乳石狀，此特征有一定鑒別意義。生化反應(yīng)不同菌株有一定差異。該菌所有菌株均發(fā)酵葡萄糖，多數(shù)菌株能發(fā)酵阿拉伯糖、木糖和甘露糖，只有個(gè)別菌株能發(fā)酵乳糖和蔗糖。多數(shù)菌株還原硝酸鹽。觸酶陽(yáng)性。一般不分解尿素，不產(chǎn)生硫化氫?？乖笠咭疇柹乖瓨?gòu)造復(fù)雜，至少有18種。除染色體基因可編碼部分抗原以外，有些與毒力有關(guān)的重要抗原則由鼠疫耶爾森菌攜帶的幾種質(zhì)粒所編碼。1．F1抗原（fraction1Antigen）：是一種糖蛋白，不耐熱，100℃15分鐘失去活性。F1抗原具有抗吞噬作用，是該菌重要的毒力成分。F1抗原特異性高，免疫原性強(qiáng)，其相應(yīng)抗體具有免疫保護(hù)作用，故F1抗原也是鼠疫耶爾森菌的保護(hù)性抗原。2．V/W抗原：V抗原為可溶性蛋白，存在于菌細(xì)胞質(zhì)中，W抗原為脂蛋白，位于菌體表面，二者總是同時(shí)出現(xiàn)。V/W抗原具有抗吞噬、形成局部肉芽腫以及促細(xì)菌在細(xì)胞內(nèi)存活等作用，與細(xì)菌侵襲力有關(guān)，也是重要的毒力成分。3．pH6抗原：是在哺乳動(dòng)物體內(nèi)（35℃～37℃），局部酸化的微環(huán)境中（pH6.0），如巨噬細(xì)胞溶酶體或膿腫中，由細(xì)菌染色體DNA編碼的一種表面蛋白（菌毛結(jié)構(gòu)），對(duì)熱不穩(wěn)定，56℃30分鐘喪失活性。具有介導(dǎo)粘附和抑制吞噬等作用。4．外膜抗原：鼠疫耶爾森菌具有多種外膜蛋白（yersiniaoutermembraneprotein，Yop），共同構(gòu)成外膜抗原，能夠促進(jìn)細(xì)菌在宿主體內(nèi)擴(kuò)散，抵抗吞噬作用，并且具有細(xì)胞毒性等作用。5．T抗原：即毒素抗原。為可溶性蛋白，具有外毒素性質(zhì)，對(duì)鼠類(lèi)具有強(qiáng)烈的毒性作用，又稱(chēng)為鼠毒素（murinetoxin，MT），免疫原性強(qiáng)，可用0.4%甲醛脫毒制成類(lèi)毒素，用于免疫動(dòng)物制備抗毒素。T抗原只有在細(xì)菌自溶或用膽鹽溶解、超聲波破碎菌體后，才能釋放出來(lái)。抵抗力鼠疫耶爾森菌對(duì)理化因素抵抗力較弱，濕熱70℃～80℃10分鐘或100℃1分鐘死亡，干熱160℃1分鐘死亡，5%來(lái)蘇或石炭酸、0.2%的升汞可在20分鐘內(nèi)殺死痰液中的病菌。在自然環(huán)境的痰液中能存活36天，在蚤糞、土壤中能存活一年左右。變異性鼠疫耶爾森菌除形態(tài)易發(fā)生變異外，其生化反應(yīng)特性、毒力、抗原結(jié)構(gòu)和耐藥性等均可出現(xiàn)變異。與其它腸道桿菌不同，其野生株菌落呈R型，毒力強(qiáng)，經(jīng)人工傳代培養(yǎng)后，轉(zhuǎn)變?yōu)镾型菌落，毒力也隨之減弱。致病性致病物質(zhì)鼠疫耶爾森菌毒力很強(qiáng)，少數(shù)幾個(gè)細(xì)菌即可使人致病。動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果表明，鼠毒素可阻斷動(dòng)物腎上腺能神經(jīng)，引起全身外周血管及淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，出現(xiàn)炎癥、壞死、出血，導(dǎo)致血液濃縮和致死性休克，以及肝、腎、心肌纖維損害等。1微克鼠毒素即可致鼠死亡。對(duì)人的損傷機(jī)制尚不清楚。F1抗原、V/W抗原，外膜蛋白以及內(nèi)毒素、擴(kuò)散因子、RNA酶等與致病性有密切關(guān)系，表現(xiàn)為在37℃宿主體內(nèi)的抵抗吞噬細(xì)胞吞噬和細(xì)胞殺菌作用，引起細(xì)胞變性、壞死等細(xì)胞毒性等。所致疾病鼠疫是自然疫源性傳染病，鼠疫耶爾森菌主要寄生于嚙齒類(lèi)動(dòng)物，傳播媒介以鼠蚤為主。蚤因吸吮了受染動(dòng)物的血液而變?yōu)橛袀魅拘?。病菌在蚤腸內(nèi)大量繁殖，直至蚤前胃腔全被菌堵塞，而使食物無(wú)法通過(guò)，餓蚤極力吸血時(shí)，先將前胃內(nèi)容物從吻注入宿主傷口，然后吸血，由此造成傳播。在人類(lèi)鼠疫流行之前，往往先有鼠類(lèi)鼠疫流行，當(dāng)大批病鼠死亡，鼠蚤失去原宿主而轉(zhuǎn)向人類(lèi)，引起人類(lèi)鼠疫。人患鼠疫后，尚可通過(guò)人蚤或呼吸道途徑在人群間流行。臨床上常見(jiàn)的有腺型、敗血癥型和肺型三種類(lèi)型。①腺型鼠疫：最常見(jiàn)，多發(fā)生于流行初期。病菌通過(guò)疫蚤叮咬的傷口進(jìn)入人體后，被吞噬細(xì)胞吞噬，在細(xì)胞內(nèi)繁殖，并沿淋巴管到達(dá)局部淋巴結(jié)，引起出血壞死性淋巴結(jié)炎。多見(jiàn)于腹股溝淋巴結(jié)。②敗血癥型鼠疫：可原發(fā)或繼發(fā)。前者常因機(jī)體抵抗力弱，病原菌毒力強(qiáng)，侵入體內(nèi)菌量多所致；后者多繼發(fā)于腺型鼠疫，病菌侵入血流所致。此型病情兇險(xiǎn)，發(fā)病初期體溫高達(dá)39℃～40℃，皮膚粘膜出現(xiàn)出血點(diǎn)，若搶救不及時(shí)，可在數(shù)小時(shí)至2～3天發(fā)生休克而死亡。③肺鼠疫：由于吸入帶菌塵埃飛沫可直接造成肺部感染（原發(fā)型），或由腺鼠疫、敗血癥型鼠疫繼發(fā)而致。患者高熱，咳嗽，痰中帶血及大量病菌，可在2～3天內(nèi)死于休克、心力衰竭等。死者皮膚常呈黑紫色，故有“黑死病”之稱(chēng)。免疫性被鼠疫耶爾森菌感染后，能夠獲得牢固持久免疫力，再次感染者罕見(jiàn)。病菌的消滅主要依靠吞噬細(xì)胞的吞噬作用、相應(yīng)抗體的調(diào)理吞噬和中和毒素等作用。持久的免疫則主要依靠細(xì)胞免疫作用。微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本因鼠疫傳染性極強(qiáng)，采集標(biāo)本時(shí)必須嚴(yán)格無(wú)菌操作。根據(jù)病型采取淋巴結(jié)穿刺液、腫脹部位組織液、膿汁，血液和痰等。人和動(dòng)物尸體可取肝、脾、肺、病變淋巴結(jié)以及心血等。陳舊尸體取骨髓。將采集標(biāo)本送至有嚴(yán)密防護(hù)措施的專(zhuān)門(mén)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢查，禁止在一般實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行操作。直接涂片鏡檢除血液標(biāo)本外，一般均需涂片或印片，干燥后用甲醇固定，革蘭染色或呂氏美蘭染色，鏡檢。在不同材料中，菌體大小、形態(tài)有很大差異，除典型形態(tài)外,往往可見(jiàn)菌體呈多形態(tài)性，需加以注意。分離培養(yǎng)與鑒定血液標(biāo)本需先置肉湯中進(jìn)行增菌培養(yǎng)。分離培養(yǎng)一般選用血瓊脂平板，28℃24小時(shí)后,可見(jiàn)較小的露滴狀菌落，繼續(xù)培養(yǎng)則菌落增大至1mm～2mm，中央厚而致密，周邊逐漸變薄。取可疑菌落進(jìn)行涂片染色鏡檢，噬菌體裂解試驗(yàn)，血清凝集試驗(yàn)，特異熒光抗體染色等作出鑒定。防治原則預(yù)防：預(yù)防措施包括土埋病死動(dòng)物，噴殺疫區(qū)跳蚤，提醒人們不要進(jìn)入疫區(qū)。確診患者應(yīng)立即以“緊急疫情”向衛(wèi)生防疫機(jī)構(gòu)報(bào)告。對(duì)可疑病人應(yīng)立即隔離，對(duì)接觸了病人的任何人員，尤其是面對(duì)面接觸過(guò)患此病伴咳嗽患者的人員，應(yīng)給予預(yù)防性治療，即用四環(huán)素口服，每天2g，用藥5～10天。病人隔離應(yīng)直至痰細(xì)菌培養(yǎng)陰性為止。對(duì)于常和此菌接觸的工作人員，預(yù)防接種是有效的，并且必須。嚴(yán)格隔離病室滅鼠、滅蚤。病人排泄物徹底消毒，醫(yī)務(wù)人員應(yīng)有嚴(yán)密的防護(hù)措施?？股刂委熓笠咭疇柹腥緫?yīng)早期足量使用抗菌藥物治療。氨基糖甙類(lèi)抗生素及磺胺類(lèi)藥物均有效。腺鼠疫可選用鏈霉素，每天2g，肌內(nèi)注射。加用四環(huán)素，口服，每天2g。肺鼠疫，敗血型鼠疫宜聯(lián)合用藥。慶大霉素可替代鏈霉素作為靜脈注射。對(duì)于腎功能損害或其他原因不能使用鏈霉素、慶大霉素的病人，可用氯霉素靜脈注射，每天3g。用藥3天內(nèi)迅速熱退，但淋巴結(jié)內(nèi)細(xì)菌仍有存活，熱退后藥物可適當(dāng)減量，持續(xù)用藥10天。單一藥物有效，無(wú)需聯(lián)合用藥。

四、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌生物學(xué)特性形態(tài)與染色本菌為革蘭氏陰性桿菌或球桿菌，，有毒菌株多呈球桿狀，無(wú)毒株以桿狀多見(jiàn)。大小為1-3.5×0.5-1.3μm，多單個(gè)散在，有時(shí)排列成短鏈或成堆。本菌不形成芽胞，無(wú)莢膜，有周鞭毛;但其鞭毛在30℃以下培養(yǎng)條件形成，溫度較高時(shí)即喪失，因此表現(xiàn)為30℃以下有動(dòng)力，而35℃以上則無(wú)動(dòng)力。培養(yǎng)特性對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求不高，能在麥康凱瓊脂上生長(zhǎng)，菌落淡黃色，如若微帶紅色，則菌落中心的紅色常稍深。但較其他腸道桿菌生長(zhǎng)緩慢培養(yǎng)的最適宜溫度為28℃最適pH值為7~8。本菌世代時(shí)間長(zhǎng)，最短亦需40分鐘左右。在SS或麥康凱瓊脂上于25℃經(jīng)24小時(shí)培養(yǎng)，菌落細(xì)小，至48小時(shí)直徑才增大成0.5-3.0mm。菌落圓整、光滑、濕潤(rùn)、扁平或稍隆起，透明或半透明在麥康凱瓊脂上。本菌在肉湯中生長(zhǎng)呈均勻混濁，一般不形成菌膜。本菌具有"嗜冷性"，在水中和低溫下(4℃)能生長(zhǎng)，為腸道中能在4℃生長(zhǎng)繁殖的少數(shù)細(xì)菌之一。因此，食品冷藏保存時(shí)，應(yīng)防止被該菌污染。生化反應(yīng)①動(dòng)力（26℃）陽(yáng)性；②素酶陽(yáng)性；③VP試驗(yàn)（26℃）陽(yáng)性；④鳥(niǎo)氨酸脫羧酶陽(yáng)性；⑤蔗糖有不同生化型；⑥棉子糖陰性；⑦山梨醇陽(yáng)性；⑧甘露醇陽(yáng)性；⑨鼠李糖陰性。致病性致病因素小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌分布很廣，可存在于生的蔬菜、乳和乳制品、肉類(lèi)、豆制品、沙拉、牡蠣、蛤和蝦。也存在于環(huán)境中，如湖泊、河流、土壤和植被。已從家畜、狗、貓、山羊、灰鼠、水貂和靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物的糞便中分離出該菌。在港灣周?chē)?，許多鳥(niǎo)類(lèi)包括水禽和海鷗可能是帶菌者。本菌可產(chǎn)生耐熱腸毒素，121℃30分鐘不被破壞，對(duì)酸堿穩(wěn)定，pH1~11不失活。腸毒素產(chǎn)生迅速，在25℃下培養(yǎng)12小時(shí)，培養(yǎng)基上清液中即有腸毒素產(chǎn)生，24~48小時(shí)達(dá)高峰。腸毒素是引起腹瀉的主要因素。毒力型菌株均有VW抗原(蛋白脂蛋白復(fù)合物)，為毒力的重要因子，與侵襲力有關(guān)，侵襲力可能是耶爾森菌感染腸道表現(xiàn)的病理基礎(chǔ)。所致疾病小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌是30年代引起注意的急性胃腸炎型食物中毒的病原菌，為人畜共患病。潛伏期約攝食后3-7天，也有報(bào)導(dǎo)11天才發(fā)病。病程一般為1-3天，但有些病例持續(xù)5-14天或更長(zhǎng)。主要癥狀表現(xiàn)為發(fā)熱、腹痛、腹瀉、嘔吐、關(guān)節(jié)炎、敗血癥等。耶爾森氏菌病典型癥狀常為胃腸炎癥狀、發(fā)熱、亦可引起闌尾炎。有的引起反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎，另一個(gè)并發(fā)癥是敗血癥，即血液系統(tǒng)感染，盡管較少見(jiàn)，但死亡率較高。本菌對(duì)易染人群為嬰幼兒，常引起發(fā)熱、腹痛和帶血的腹瀉。微生物學(xué)診斷標(biāo)本：取糞便，剩余食物進(jìn)行培養(yǎng)分離培養(yǎng)生化鑒定法：從營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上挑取單個(gè)菌落做生化實(shí)驗(yàn)，所有的反應(yīng)皆在26℃±1℃培養(yǎng)。血清凝集法：小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌的抗原結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜，現(xiàn)已知有84個(gè)O抗原因子和19個(gè)Ｈ抗原因子，在同一血清型的菌株中，可含兩種或更多的O抗原。小腸耶爾森氏菌在我國(guó)分布很廣，菌群復(fù)雜，目前主要占優(yōu)勢(shì)的血清型為O：3，O：5，O：8和O：9型。某些O抗原同其他細(xì)菌有共同性，如O：9與布氏菌有交叉反應(yīng)，O：12血清與沙門(mén)氏菌有交叉反應(yīng)等，在流行病學(xué)調(diào)查中，血清學(xué)診斷起著較為重要的作用.防治原則癥狀較輕時(shí)，本病多為自限性，無(wú)需抗菌治療。宜進(jìn)行適當(dāng)隔離，糞便及排泄物要消毒，以免疾病傳播。有失水者及時(shí)補(bǔ)液，以糾正水、電解質(zhì)、酸堿紊亂。對(duì)病程較長(zhǎng)，有并發(fā)癥或呈暴發(fā)型者，應(yīng)給予抗菌治療。本菌對(duì)所有氨基糖甙抗生素、多粘菌素、復(fù)方新諾明、四環(huán)素、呋喃唑酮和喹諾酮類(lèi)等均敏感。

五、彎曲菌屬

彎曲菌屬細(xì)菌是一類(lèi)微需氧菌，不分解糖類(lèi)、氧化酶陽(yáng)性，菌體彎曲呈逗點(diǎn)狀、S形或螺旋狀，有動(dòng)力的革蘭氏陰性菌。包括5個(gè)種和5個(gè)亞種。對(duì)人類(lèi)致病的主要是空腸彎曲菌和胎兒彎曲菌胎兒亞種。前者是人類(lèi)腹瀉最常見(jiàn)的病原菌之一，后者在免疫功能低下時(shí)可引起敗血癥、腦膜炎等。生物學(xué)特性：形態(tài)與染色為革蘭氏陰性、細(xì)長(zhǎng)、螺旋形或海鷗展翅狀、S形的彎曲桿菌。陳舊培養(yǎng)物可呈球形或長(zhǎng)絲狀。大小為(0.5~8)μm×(0.2~0.5)μm。一端或兩端具有單鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑，有時(shí)呈螺旋狀運(yùn)動(dòng)。一端單鞭毛多見(jiàn)于胎兒亞種，兩端單鞭毛多見(jiàn)于空腸彎曲菌，無(wú)芽孢、無(wú)莢膜，一端或兩端著生單根無(wú)鞘鞭毛，長(zhǎng)度為菌體的2~3倍。培養(yǎng)特性1.微需氧菌，初次分離時(shí)需在含5%O2、85%N2、10%CO2氣體環(huán)境中生長(zhǎng)，傳代培養(yǎng)時(shí)能在10%CO2環(huán)境中生長(zhǎng)。2.該菌屬最適生長(zhǎng)溫度隨菌種而異?？漳c彎曲菌、大腸彎曲菌在43℃生長(zhǎng)，25℃不生長(zhǎng);胎兒彎曲菌在25℃生長(zhǎng)，而43℃不生長(zhǎng);簡(jiǎn)明彎曲菌在25℃和43℃均不生長(zhǎng)。但各種菌在37℃皆可生長(zhǎng)。生長(zhǎng)溫度的差異可用于菌種的鑒別。3.營(yíng)養(yǎng)要求高，在普通培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)，需加血液、血清。常用的選擇培養(yǎng)基有Skirrow瓊脂、Butzler培養(yǎng)基和Campy-BAP培養(yǎng)基。這些培養(yǎng)基以血瓊脂為基礎(chǔ)，加入多種抗生素，能抑制腸道正常菌群，而有利于本菌分離。空腸彎曲菌屬初次分離時(shí)，經(jīng)48小時(shí)培養(yǎng)可形成兩種菌落:一種為扁平濕潤(rùn)、灰白色半透明、邊緣不整齊、常延接種線擴(kuò)散生長(zhǎng)的菌落;另一種為圓形凸起、半透明、針尖狀、有光澤、單個(gè)細(xì)小菌落。兩種菌落均不溶血。在布氏肉湯內(nèi)呈均勻渾濁生長(zhǎng)。生化反應(yīng)該菌屬生化反應(yīng)不活潑。不分解糖類(lèi)、不液化明膠、不分解尿素，V-P和甲基紅試驗(yàn)均陰性。氧化酶均為陽(yáng)性，大多數(shù)彎曲菌還能還原硝酸鹽，觸酶試驗(yàn)為陽(yáng)性，空腸彎曲菌馬尿酸水解試驗(yàn)陽(yáng)性?？乖Y(jié)構(gòu)有菌體(O)抗原、熱不穩(wěn)定抗原和鞭毛(H)抗原。根據(jù)O抗原可將空腸彎曲菌分為42個(gè)血清型。抵抗力較弱，56℃5分鐘即被殺死。干燥環(huán)境中僅能存活3小時(shí)。對(duì)一般消毒劑敏感。致病性致病因素主要與腸毒素、細(xì)胞毒素、內(nèi)毒素和黏附、定植能力有關(guān)。主要引起人類(lèi)腸道感染和各種腸道外感染。其中空腸彎曲菌是引起散發(fā)性細(xì)菌性腸炎最常見(jiàn)的菌種之一。胎兒彎曲菌主要引起腸道外感染，其中胎兒亞種為主要的人類(lèi)致病菌，致菌血癥、膽囊炎、腹膜炎、肺部感染等空腸/大腸彎曲菌是禽類(lèi)腸道的正常菌群，人接觸或通過(guò)食物、水而傳染，可引起急性腸類(lèi)、亦可引起腹瀉的暴發(fā)流行和食物中毒，是人類(lèi)腹瀉的重要病原菌。該菌亦可導(dǎo)致敗血癥、其他感染及胎兒感染。

致病因素：1.腸毒素： 霍亂樣腸毒素。

致死性腫脹毒素

2．細(xì)胞毒素

志賀樣毒素

溶血毒素

3．內(nèi)毒素

胎兒彎曲菌主要引起腸外感染，其中胎兒亞種為主要的人類(lèi)致病菌，可致人類(lèi)菌血癥、心內(nèi)膜炎、血栓性靜脈炎、活動(dòng)性關(guān)節(jié)炎、腦膜炎、心包炎、肺部感染、胸膜炎、腹膜炎、膽囊炎等。微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本的采集1．新鮮糞便、肛拭子及剩余食物。2．血液及腦脊液直接涂片(1)懸滴標(biāo)本檢查:取新鮮糞便于載玻片上，加生理鹽水混合后，上覆蓋玻片置顯微鏡下觀察有無(wú)投鏢式或螺旋狀運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌。腦脊液經(jīng)3000r/min離心沉淀15min后，制成涂片做懸滴檢查。(2)革蘭染色檢查:為革蘭氏陰性逗點(diǎn)狀、S形或螺旋狀小桿菌。分離培養(yǎng)糞便和肛拭子標(biāo)本直接接種于改良彎曲菌瓊脂平板，如改良的Skirrow血瓊脂平板和Campy-BAP平板;血液或腦脊液標(biāo)本接種布氏肉湯增菌后，轉(zhuǎn)種彎曲菌分離培養(yǎng)基，置43℃、37℃，在微需氧環(huán)境下培養(yǎng)24~72小時(shí)，觀察菌落特征。鑒定革蘭氏陰性細(xì)小彎曲桿菌，單鞭毛具有投鏢樣或螺旋樣動(dòng)力，需氧環(huán)境不生長(zhǎng)，微需氧條件下，在彎曲菌選擇培養(yǎng)基上形成兩種類(lèi)型菌落。不分解葡萄糖。彎曲菌屬的鑒定要點(diǎn)為氧化酶陽(yáng)性、革蘭氏陰性、菌體彎曲或呈S形。最常用的鑒定試驗(yàn)有生長(zhǎng)溫度(25℃、37℃、42℃)試驗(yàn)、過(guò)氧化氫試驗(yàn)、馬尿酸鹽水解試驗(yàn)、硝酸鹽和亞硝酸鹽還原試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)等等。診斷與防治

目前,尚無(wú)有效的預(yù)防措施,疫苗正在研制中。預(yù)防:1.注意飲水和食品衛(wèi)生2.加強(qiáng)糞便管理治療:紅霉素、氨基糖苷類(lèi)抗生素、氯霉素等六、幽門(mén)螺桿菌

（H.pylori）

生物學(xué)特性：螺旋形、S型一端或兩端有2～6根鞭毛運(yùn)動(dòng)活潑，呈魚(yú)群樣排列微需氧菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求高，生長(zhǎng)緩慢在含血液、血清或心腦浸液瓊脂培養(yǎng)基，需要3～5天或更長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)，形成細(xì)小、無(wú)色透明菌落最適溫度：37℃致病性與免疫性：慢性胃炎、消化性潰瘍及十二指腸炎關(guān)系密切與胃腺癌、粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤發(fā)生有關(guān)七、銅綠假單胞菌（P.aeruginosa）銅綠假單胞菌(P.Aeruginosa)原稱(chēng)綠膿桿菌。在自然界分布廣泛，為土壤中存在的最常見(jiàn)的細(xì)菌之一。各種水、空氣、正常人的皮膚、呼吸道和腸道等都有本菌存在。是一種常見(jiàn)的條件致病菌，本菌存在的重要條件是潮濕的環(huán)境。生物學(xué)特性：革蘭陰性細(xì)菌，菌體細(xì)長(zhǎng)且長(zhǎng)短不一，直或微彎桿菌，有時(shí)呈球桿狀或線狀，成對(duì)或短鏈狀排列，似白喉棒狀桿菌，應(yīng)注區(qū)別（∵白喉為G+菌）。不形成芽胞及莢膜，單端有1～3根鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑培養(yǎng)特性本菌為專(zhuān)性需氧菌生長(zhǎng)溫度范圍25~42℃，最適生長(zhǎng)溫度為25~30℃，特別是該菌在4℃不生長(zhǎng)而在42℃可以生長(zhǎng)的特點(diǎn)可用以鑒別。營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上可以生存并能產(chǎn)生水溶性的色素，如綠膿素（pyocynin）與帶熒光的水溶性熒光素（pyoverdin）等。在血平板上會(huì)有透明溶血環(huán)。

普通肉湯：生長(zhǎng)迅速，混濁菌膜，黃綠色色素。普通平板：35℃,24h形成光滑，濕泣柔軟，大而扁平，邊緣不整的菌落，常常菌落間相互融合呈彌漫性生長(zhǎng)。

血平板—有溶血環(huán)扁平，濕潤(rùn)會(huì)更光澤氣味灰綠或藍(lán)綠色菌落。SSA平板—易于沙門(mén)菌或志賀菌相混。銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)血平板上毛玻璃樣，金屬光澤，生姜味可產(chǎn)生多種色素：熒光素與綠膿素銅綠假單胞菌（P.aeruginosa)綠膿素生化反應(yīng)分解Pr能力很強(qiáng)，發(fā)酵糖的能力很差，在O-F培養(yǎng)基上，可分解等以擴(kuò)，乳、麥、甘露糖、蔗(—)氧化酶+、明膠+、尿素+、C+、I-、精氨酸雙水解酶+?？乖摼蠴抗原（菌體抗原）以及H抗原（鞭毛抗原）。O抗原包含兩種成分：一種是其外膜蛋白，為保護(hù)性抗原；另一種是脂多糖，有特異性。O抗原可用以分型。抵抗力銅綠假單胞菌對(duì)外界環(huán)境抵抗力較強(qiáng)，在潮濕處能長(zhǎng)期生存，對(duì)紫外線不敏感，濕熱55℃1h才被殺滅。本菌對(duì)化學(xué)藥物的抵抗力比一般革蘭氏陰性菌強(qiáng)大。有些菌株對(duì)磺胺,鏈霉素,氯霉素敏感，但極易產(chǎn)生耐藥性。青霉素對(duì)此菌無(wú)效，但慶大霉素和多粘菌素B、E，氨基甙類(lèi)、第三和第四代頭孢菌素等抗生素作用較明顯，一些半合成的青霉素類(lèi)抗生素，比如阿洛西林和哌拉西林對(duì)綠膿桿菌也有很強(qiáng)的抗菌作用，其有效率約為80%。磷霉素對(duì)其也有效，但效果不如以上的抗生素。聯(lián)合用藥可減少耐藥菌株的產(chǎn)生。致病性銅綠假單胞菌有多種產(chǎn)物有致病性，其內(nèi)毒素是引起膿毒綜合征或系統(tǒng)炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)的關(guān)鍵因子，不過(guò)由于銅綠假單胞菌內(nèi)毒素的含量較低，故在發(fā)病上的作用要小于腸桿菌科細(xì)菌。其分泌的外毒素A(ExoA)是最重要的致病、致死性物質(zhì)，進(jìn)入敏感細(xì)胞后被活化而發(fā)揮毒性作用，使哺乳動(dòng)物的蛋白合成受阻并引起組織壞死，造成局部或全身疾病過(guò)程。銅綠假單胞菌尚能產(chǎn)生蛋白酶，有外毒素A及彈性蛋白酶同時(shí)存在時(shí)則毒力最大;胞外酶S是銅綠假單胞菌所產(chǎn)生的一種不同于外毒素A的ADP核糖轉(zhuǎn)移酶，它可以破壞細(xì)胞骨架，從而促進(jìn)銅綠假單胞菌的侵襲擴(kuò)散，感染產(chǎn)此酶的銅綠假單胞菌患者，可有肝功能損傷而出現(xiàn)黃疸。此外，如堿性蛋白酶、磷酸酶、細(xì)胞毒素等銅綠假單胞菌外毒素亦常是造成組織破壞、細(xì)菌散布的重要原因。銅綠假單胞菌為條件致病菌，完整皮膚是天然屏障，活力較高的毒素亦不能引起病變，正常健康人血清中含有調(diào)理素及補(bǔ)體，可協(xié)助中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞吞噬及殺滅銅綠假單胞菌，故亦不易致病;但如改變或損傷宿主正常防御機(jī)制，如皮膚黏膜破損、留置導(dǎo)尿管、氣管切開(kāi)插管，或免疫機(jī)制缺損如粒細(xì)胞缺乏、低蛋白血癥、各種腫瘤患者、應(yīng)用激素或抗生素的患者，在醫(yī)院環(huán)境中?？蓮膸Ьl(fā)展為感染。燒傷焦痂下，嬰兒和兒童的皮膚、臍帶和腸道，老年人的泌尿道，常常是銅綠假單胞菌敗血癥的原發(fā)灶或入侵門(mén)戶。微生物學(xué)檢查標(biāo)本采集根據(jù)疾病的種類(lèi)不同而異?；颊叩难骸⒛X脊液、胸腹水、膿汁、分泌液、痰液、尿、糞便等，醫(yī)院療區(qū)或手術(shù)室的空氣、水、地面、門(mén)把手、醫(yī)療器械及生活用品等。染色鏡檢：初步判斷為革蘭陰性菌，菌體大?。?.5～5.0)um×寬(0.5～1)um，細(xì)長(zhǎng)且長(zhǎng)短不一，有時(shí)呈球桿狀或線狀，成對(duì)或短鏈狀排列。菌體的一端有單鞭毛，無(wú)芽胞。①普通瓊脂平板圓形、大小不一，邊緣不整、扁平、光滑、濕潤(rùn)常呈融合狀之菌落。綠、黃綠水溶性色素。②血平板扁平、濕潤(rùn)、金屬光澤生姜味，灰綠/藍(lán)綠色菌落。β溶血。③選擇性培養(yǎng)基（如麥康凱）微小，半透明、無(wú)光澤菌落48h后菌落中心常呈棕綠色。37℃18～24h37℃18～24h37℃18～24h分離培養(yǎng)生化鑒定該菌氧化酶陽(yáng)性，能氧化分解葡萄糖和木糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，但不分解乳糖和蔗糖。液化明膠、可分解尿素，還原硝酸鹽為亞硝酸鹽并產(chǎn)生氮?dú)?，吲哚陰性，利用枸櫞酸鹽，精氨酸雙水解酶陽(yáng)性。血清學(xué)試驗(yàn)防治原則銅綠假單胞菌廣泛存在于自然界，通過(guò)多種途徑在醫(yī)院內(nèi)傳播;因此，必須嚴(yán)格消毒器械、敷料，醫(yī)務(wù)人員及護(hù)理員勤洗手，認(rèn)真執(zhí)行無(wú)菌操作，患者應(yīng)予隔離，其敷料應(yīng)予焚毀。同時(shí)積極治療原發(fā)疾患，去除誘發(fā)因素等。治療可選慶大霉素，多粘菌素B等八、流感嗜血桿菌（H.influenzae）名稱(chēng)由來(lái)→于1892年由費(fèi)佛博士在流行性感冒的瘟疫中發(fā)現(xiàn)?！`認(rèn)為它是1889年流感大流行的原因?！敝?933年，發(fā)現(xiàn)流行性感冒的病毒性病原后，才消除了這種誤解。但流感嗜血桿菌這一錯(cuò)名卻仍沿用至今生物學(xué)特性：

革蘭陰性小桿菌，常呈多形態(tài)性（球桿、長(zhǎng)桿或絲狀）多有菌毛，無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛，不能運(yùn)動(dòng);正常菌群無(wú)莢膜，毒株培養(yǎng)后有莢膜。生長(zhǎng)需要X和V因子（新鮮血液）抵抗力：弱

培養(yǎng)特性需氧或兼性厭氧人工培養(yǎng)必須有新鮮血液成分（主要是X因子和V因子）才能生長(zhǎng)，故名嗜血桿菌X因子是細(xì)菌合成過(guò)氧化氫酶、過(guò)氧化物酶、細(xì)胞色素氧化酶等呼吸酶的輔基V因子在血液中，是輔酶1和2，遞氫體衛(wèi)星現(xiàn)象金黃色葡萄球菌提供V因子巧克力色平板上培養(yǎng)：經(jīng)35℃，18～24h培養(yǎng)形成微?。?.5～0.8mm）無(wú)色透明，不溶血，呈露滴樣小菌落。48h后形成灰白色較大的菌落。

當(dāng)流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在同一血平板上培養(yǎng)時(shí)，由于金黃色葡萄球菌能合成較多的V因子，并彌散到培養(yǎng)基里，可促進(jìn)流感嗜血桿菌生長(zhǎng)，故在金黃色葡萄球菌菌落周?chē)漭^大，而離金黃葡萄球菌越遠(yuǎn)者則流感嗜血桿菌的菌落越小。衛(wèi)星現(xiàn)象（satellitephenomenon）：生化反應(yīng)：流感嗜血桿菌能分解葡萄糖，不發(fā)酵乳糖﹑甘露醇,對(duì)半乳糖﹑果糖﹑麥芽糖的發(fā)酵不穩(wěn)定。抗原構(gòu)造與分型：主要抗原為莢膜多糖抗原（b型最強(qiáng)）和菌體抗原。流感嗜血桿菌的抗原物造與肺炎鏈球菌相似。對(duì)熱敏感：５６℃３０ｍｉｎ可殺死抵抗力—弱對(duì)干燥敏感對(duì)常用消毒劑敏感致病性呼吸道常見(jiàn)菌對(duì)人有致病作用的代表菌種是流感嗜血桿菌杜克嗜血桿菌、埃及嗜血桿菌也是致病其余菌種多為條件致病菌致病物質(zhì)莢膜：抗吞噬菌毛：粘附、定植內(nèi)毒素：致病作用尚不清IgA蛋白酶：水解sIgA

*原發(fā)感染：引起急性化膿性感染

化膿性腦膜炎、鼻咽炎、咽喉會(huì)厭炎、心包炎

化膿性關(guān)節(jié)炎等，嚴(yán)重的引起菌血癥，以小兒

多見(jiàn)。

*

繼發(fā)感染：多是內(nèi)源性感染，以成人多見(jiàn)。流行性感冒麻疹百日咳結(jié)核病繼發(fā)于臨床表現(xiàn)慢性支氣管炎中耳炎鼻竇炎所致疾病

：免疫性體液免疫為主3個(gè)月內(nèi)的嬰兒由母體獲得血清抗體成人后主要作用抗體：

1.莢膜多糖特異性抗體

2.菌體外膜蛋白抗體微生物學(xué)檢查方法直接檢測(cè)：根據(jù)臨床癥狀采集標(biāo)本——腦脊液、痰、膿汁等直接涂片染色鏡檢——診斷腦膜炎、下呼吸道感染、關(guān)節(jié)炎等分離培養(yǎng)：接種于巧克力色瓊脂平板、含腦心浸液的血瓊脂乳膠凝集試驗(yàn)、免疫熒光、莢膜腫脹試驗(yàn)檢測(cè)莢膜抗原以診斷腦膜炎選用廣譜抗生素治療預(yù)防莢膜多糖菌苗防治原則九、百日咳鮑特菌(B.

pertussis)百日咳桿菌(Bordetellapertussis)是人類(lèi)百日咳的病原菌。生物學(xué)性狀

形態(tài)與染色（1）G-，卵圓形短小桿菌（2）無(wú)芽胞,無(wú)鞭毛（支氣管鮑特菌和鳥(niǎo)鮑特菌有）有莢膜（新分離菌株）（3）衰老者常出現(xiàn)多形性。百日咳鮑特菌鏡下形態(tài)（革蘭染色）培養(yǎng)特點(diǎn)（1）專(zhuān)性需氧菌，最適溫度35℃～37℃最適pH6.8～7.0。（2）初次分離營(yíng)養(yǎng)要求較高，常用含有血液、甘油、馬鈴薯的鮑-金（Bordet-Gengou）培養(yǎng)基。（3）鮑-金

（Bordet-Gengou）培養(yǎng)基

細(xì)小、光滑、凸起、銀灰色水銀滴狀菌落，菌落周?chē)歇M窄的溶血環(huán)。（4）液體培養(yǎng)基：均勻混濁生長(zhǎng)，管低有少量沉淀。35℃～37℃2～3d百日咳鮑特菌菌落特征（CCBA瓊脂）生化反應(yīng)弱，一般不發(fā)酵糖類(lèi)，但分解蔗糖和乳糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不產(chǎn)生H2S和吲哚，過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)陽(yáng)性。生化反應(yīng)抗原結(jié)構(gòu)O抗原菌體抗原K抗原表面抗原，又稱(chēng)為凝集原包括凝集因子1~6

凝集因子1為Ⅰ相菌的共同抗原，是種的特異性抗原。

WHO推薦在菌苗中應(yīng)含有1、2、3因子血清型的菌株。變異性：光滑型Ｓ粗糙型ＲⅠ相為光滑型，菌落光滑，有莢膜，毒力強(qiáng)Ⅱ、Ⅲ相為過(guò)渡相Ⅳ相為粗糙型，菌落粗糙，無(wú)莢膜，無(wú)毒力一般在疾病急性期分離的細(xì)菌為Ⅰ相，疾病晚期和多次傳代培養(yǎng)可出現(xiàn)Ⅱ、Ⅲ或Ⅳ相的變異。發(fā)生這種變異時(shí)，細(xì)菌形態(tài)、菌落、溶血性、抗原結(jié)構(gòu)和致病力等均出現(xiàn)變異。抵抗力——弱

對(duì)熱、日光照射、一般消毒劑敏感。56℃30分鐘、日光照射1小時(shí)可致死亡。干燥塵埃中能存活３ｄ。對(duì)多粘菌素、氯霉素、紅霉素、氨芐青霉素等敏感，對(duì)青霉素不敏感。致病物質(zhì)：與致病性有關(guān)的物質(zhì)除莢膜、菌毛、內(nèi)外毒素外，尚有多種生物學(xué)活性因子（百日咳毒素、皮膚壞死毒素等）。百日咳外毒素是主要的致病因子，能誘發(fā)機(jī)體的持久免疫力，并有多種生物活性，如提高小鼠對(duì)組織胺、5~羥色胺和敏感性，促進(jìn)白細(xì)胞增多，抑制巨噬細(xì)胞功能，損傷呼吸道纖毛上皮細(xì)胞導(dǎo)致陣發(fā)性痙攣咳嗽等。細(xì)菌破裂后還能在宿主細(xì)胞漿中查到一種熱不穩(wěn)定性毒素和其他幾種抗原成份，可引起纖毛上皮細(xì)胞炎癥和壞死。所致疾病百日咳桿菌引起人類(lèi)百日咳。病人，尤其是癥狀輕微的非典型病人是重要的傳染源。主要經(jīng)飛沫傳播。易感兒童接觸病人后發(fā)病率接近90%，一歲以下患兒病死率高。百日咳潛伏期1~2周。發(fā)病早期(卡他期)僅有輕度咳嗽。細(xì)菌此時(shí)在氣管和支氣管粘膜上大量繁殖并隨飛沫排出，傳染性最大。1~2周后出現(xiàn)陣發(fā)性痙攣性咳嗽(痙攣期)，這時(shí)細(xì)菌釋放毒素，導(dǎo)致粘膜上皮細(xì)胞纖毛運(yùn)動(dòng)失調(diào)，大量粘稠分泌物不能排出，刺激粘膜中的感受器產(chǎn)生強(qiáng)烈痙咳，呈現(xiàn)出特殊的高音調(diào)雞鳴樣吼聲。形成的粘液栓子還能堵塞小支氣管導(dǎo)致肺不張和呼吸困難、紫紺。此外可伴有嘔吐、驚厥。4~6周后逐漸轉(zhuǎn)入恢復(fù)期，陣咳減輕，趨向痊愈，但有1~10%病人易繼發(fā)溶血性鏈球菌、流感桿菌等的感染。本病病程較長(zhǎng)，故名百日咳。在致病過(guò)程中，百日咳桿菌始終在纖毛上皮細(xì)胞表面，并不入血。免疫力：感染百日咳后可出現(xiàn)多種特異性抗體，免疫力較為持久。僅少數(shù)病人可再次感染，再發(fā)的病情亦較輕。粘膜局部的分泌型lgA具有阻止細(xì)菌粘附氣管粘膜細(xì)胞纖毛的作用，其抗感染作用比血清中的抗體更重要。細(xì)胞免疫在百日咳桿菌感染中的作用還不甚明了。微生物學(xué)檢查法1.分離鑒定取鼻咽拭子接種于鮑-金培養(yǎng)基可疑菌落涂片鏡檢2.生化反應(yīng)鑒定3.血清型鑒定用Ⅰ相免疫血清作凝集試驗(yàn)。4.快速鑒定（1）熒光抗體查抗原（2）ELISA法檢測(cè)患者血清中的抗PT、抗