經(jīng)典的抗原抗體反應(yīng)_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

病原生物與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則一.進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須穿護(hù)士服,不必需的物品不要攜帶入室,嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)食、飲水。

二.保持實(shí)驗(yàn)室的安靜和秩序,實(shí)驗(yàn)要嚴(yán)肅認(rèn)真。三.如有傳染性材料的污染,及時(shí)報(bào)告老師。四.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中有儀器和器材的損壞要報(bào)告老師并登記。五.實(shí)驗(yàn)后的材料要放到指定的位置。六.離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前,要用肥皂洗手,接觸過(guò)傳染性強(qiáng)的實(shí)驗(yàn)材料要用0.1%的新潔爾滅泡手1-2分鐘七.值日生要作好值日工作,關(guān)好水,電,門窗,作好實(shí)驗(yàn)記錄本的登記方可離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室??乖贵w反應(yīng)Ab-Agreactions實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆昭丸b定實(shí)驗(yàn)、免疫膠體金技術(shù)實(shí)驗(yàn)的操作及結(jié)果的正確觀察、判斷;熟悉血型鑒定實(shí)驗(yàn)、免疫膠體金技術(shù)實(shí)驗(yàn)的原理;了解血型鑒定實(shí)驗(yàn)、免疫膠體金技術(shù)實(shí)驗(yàn)的用途。抗原抗體反應(yīng)的基礎(chǔ)

basisofAb-Agreaction抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)

charactersofAb-Agreaction特異性

Specificity

抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)

charactersofAb-Agreactions可逆性reversibility凝集反應(yīng)

Agglutinationreactions在一定濃度的電解質(zhì)環(huán)境中,顆粒性抗原(紅細(xì)胞、細(xì)菌、乳膠顆粒等)和相應(yīng)抗體反應(yīng)能夠產(chǎn)生肉眼可見(jiàn)的凝集塊。直接凝集(directagglutination)間接凝集(indirectagglutination)間接凝集抑制試驗(yàn)(inhibition

of

indirectagglutination)直接凝集

directagglutination----ABO血型的鑒定

identificationofABObloodtype概述overview血型系統(tǒng)Bloodgroupsystem

1901年發(fā)現(xiàn)的人類第一個(gè)血型系統(tǒng)----ABO血型系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)者----

奧地利細(xì)菌學(xué)家KarlLandsteinerABO血型系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)DiscoveryofABObloodtype【實(shí)驗(yàn)原理】

Experiment’smechanism

血型是指紅細(xì)胞的血型,是根據(jù)紅細(xì)胞膜外表面存在的特異性抗原(鑲嵌于紅細(xì)胞膜上的糖蛋白和糖脂)來(lái)確定的,這種抗原或凝集原是由遺傳決定的YYY+【實(shí)驗(yàn)器材】

Experiment’sequipments

1:載玻片、采血針、牙簽2:抗A和抗B單克隆抗體、碘伏、棉簽?!静僮鞑襟E】

Experiment’sMethods1.在潔凈的玻片兩端用記號(hào)筆分別標(biāo)上A、B,然后在A端滴一滴抗A單克隆抗體,B端滴一滴抗B單克隆抗體;2.用碘伏消毒手指;3.取無(wú)菌采血針,采血;4.用牙簽一端蘸取少量血液,置于抗A單克隆抗體攪勻,換取另一根牙簽蘸取少量血液,置于抗B單克隆抗體攪勻;5.輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)玻片,使其充分混勻,靜置數(shù)分鐘后,觀察結(jié)果。注意:兩次取血的牙簽一定不能混用。(單克隆抗體+被檢者紅細(xì)胞)被檢者血型抗A抗B

+--+++--A【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】Experiment’sresultsBABO【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】Experiment’sresults

免疫標(biāo)記技術(shù)

immunolabelingtechniques簡(jiǎn)介免疫標(biāo)記技術(shù)是指用熒光素、酶、放射性同位素等對(duì)抗體或抗原進(jìn)行標(biāo)記,然后再通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記物來(lái)觀察抗原抗體反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。分類

classification

免疫膠體金技術(shù)

膠體金試紙條診斷是采用膠體金免疫層析技術(shù)研制而成,該技術(shù)是90年代初在免疫滲濾技術(shù)的基礎(chǔ)上建立的一種簡(jiǎn)易快速的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù),最先用于人絨毛膜促性腺激素(HCG)的測(cè)定和乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)等檢測(cè)。膠體金(Colloidalgold)是氯金酸(HAuCl4)的水溶膠,氯金酸在還原劑的作用下,聚合成特定大小的金顆粒,并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)。膠體金標(biāo)記的原理:膠體金在堿性條件下帶負(fù)電荷,與蛋白質(zhì)分子的正電荷基團(tuán)藉靜電吸引而形成牢固結(jié)合。膠體金標(biāo)記技術(shù)(Immunogoldlabelingtechnique)是以膠體金作為示蹤標(biāo)記物應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種新型免疫標(biāo)記技術(shù)。膠體金試紙條診斷技術(shù)的原理以硝酸纖維素膜為載體,利用了微孔膜的毛細(xì)血管作用,滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移,通過(guò)抗原抗體結(jié)合,并利用膠體金呈現(xiàn)顏色(紅色)反應(yīng),檢測(cè)抗原/抗體。最常用的是雙抗夾心法檢測(cè)抗原膠體金試紙條示意圖檢測(cè)線質(zhì)檢線吸收墊樣品墊硝酸纖維素膜連接墊(膠體金墊)背襯(底板)【實(shí)驗(yàn)原理】

Experiment’smechanism原理圖膠體金標(biāo)記的鼠抗人α—hCG抗體抗人β—hCG抗體抗鼠IgG抗體hCG【操作步驟】

Experiment’sMethods1.待測(cè)樣品、檢測(cè)試紙和其它檢測(cè)材料等在室溫后檢測(cè)2.將測(cè)試紙有箭頭的一端插入尿液標(biāo)本容器中,5秒鐘后取出平放,5分鐘內(nèi)觀察結(jié)果注意:測(cè)試

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