基因毒性雜質(zhì)培訓(xùn)及討論20151025

基因毒性雜質(zhì)培訓(xùn)及討論2015.10.20一、基因毒性雜質(zhì)基本信息

基因毒性雜質(zhì)介紹

基因毒性雜質(zhì)文件二、ICHM7介紹及實例討論

M7適用范圍介紹

基因毒性雜質(zhì)評估及分類

基因毒性雜質(zhì)控制策略三、問題討論目錄基因毒性雜質(zhì)基本信息雜質(zhì)的分類：Q3A/B/C/D：有機(jī)雜質(zhì)：起始物料、副產(chǎn)物、中間體、降解產(chǎn)物等無機(jī)雜質(zhì)：重金屬或其他殘留金屬、無機(jī)鹽；其他（如濾紙、活性炭）殘留溶劑M7&M7Addendum：基因毒性雜質(zhì)ICH外的雜質(zhì)：外源性污染物：微生物，內(nèi)毒素等。多晶型：晶型雜質(zhì)。什么是基因毒性雜質(zhì)是指能直接或間接損傷細(xì)胞DNA，產(chǎn)生致突變和致癌作用的物質(zhì)。基因毒性包括致癌性和致突變性：致癌性主要指誘變性致癌：第一級(Group1)致癌物：對人類為確定致癌物。第二級，對動物致癌性明確，對人類致癌性不確定致突變致突變性和致癌性緊密相關(guān)?，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)的毒物，致癌性強(qiáng)的，70%都有比較強(qiáng)的致突變性致癌物分成兩大類：1、遺傳毒性致癌物，通過化學(xué)鍵合直接破壞遺傳物質(zhì)產(chǎn)生致癌性；2、非遺傳毒性致癌物，通過遺傳物質(zhì)外的間接機(jī)制引起致癌作用（如促進(jìn)細(xì)胞過度增殖等）。什么是基因毒性雜質(zhì)1970年代，James和ElizabethMiller夫婦在研究“烷化劑”和“?；瘎钡闹掳┬缘幕A(chǔ)上，提出了“親電性致癌論”。成為多個商業(yè)化和非商業(yè)化的毒性預(yù)測軟件的理論基礎(chǔ)。常見的基因毒性物質(zhì)苯并芘、黃曲霉素、亞硝胺化療藥物，不良反應(yīng)是化療藥物對正常細(xì)胞的基因毒性所致，如順鉑、卡鉑、氟尿嘧啶等。氨基糖甙類抗生素為什么研究基因毒性雜質(zhì)呀？。甲磺酸奈非那非（維拉賽特錠）事件一種用于HIV治療的抗病毒藥物，1997年FDA批準(zhǔn)，羅氏1998年歐洲上市羅氏2007年6月接到6名患者投述DNA序列異常羅氏2007年6月召回產(chǎn)品，EMEA暫停上市發(fā)現(xiàn)儲存罐中乙醇?xì)埩簦胖?個月導(dǎo)致甲磺酸乙酯達(dá)到2300ppm去掉存儲罐，增加對甲磺酸乙酯的控制要求低于0.5ppmEMA對新工藝重新進(jìn)行了評估、對工廠進(jìn)行現(xiàn)場檢查2007年10月，Roche重新獲得上市許可甲磺酸奈非那非（維拉賽特錠）事件后續(xù)2008.01.24EMEA關(guān)于要求進(jìn)行基因毒性雜質(zhì)評估的函件函件內(nèi)容針對所有藥品中含以甲磺酸鹽，羥乙基磺酸鹽，對甲苯磺酸鹽或苯磺酸鹽形式存在之藥物活性成分之上市許可持有人以TTC法對該類雜質(zhì)進(jìn)行限度控制哪些化合物是基因毒性雜質(zhì)歐盟發(fā)布的警示結(jié)構(gòu)《Developmentofstructurealertsfortheinvivomicronucleusassayinrodents》?；蜻M(jìn)入TheCarcinogenicPotencyDatabase(CPDB)，里面有1547種致癌物質(zhì)的列表，結(jié)構(gòu)式，CAS號，作用部位，TTC值等一系列信息。Ashby等人總結(jié)出來18種警示結(jié)構(gòu)的模型，并將這些結(jié)構(gòu)特征整合到一個“超級致癌物”虛擬分子結(jié)構(gòu)中哪些化合物是基因毒性雜質(zhì)—警示結(jié)構(gòu)基因毒性雜質(zhì)基本信息基因毒性雜質(zhì)控制相關(guān)文件及指南介紹遺傳毒性雜質(zhì)指南：控制，檢驗和風(fēng)險評估指南類別指南名稱遺傳毒性雜質(zhì)控制指南PhRMA意見書：測定、檢驗和控制藥物中特定潛在遺傳毒性雜質(zhì)的基本原理(2006)。EMA：遺傳毒性雜質(zhì)限度指南。EMA安全工作組(SWP)：關(guān)于遺傳毒性雜質(zhì)限量指南的問答FDA行業(yè)指南（草案）：原料藥和成品藥中遺傳毒性和致癌性雜質(zhì)：推薦方法(2008)。ICHM7：誘變性雜質(zhì)評估和控制遺傳毒性試驗指南ICHS2：人用藥物的遺傳毒性試驗和數(shù)據(jù)解釋。EMA：草藥物質(zhì)/制劑遺傳毒性評估指南(2008)。遺傳毒性和致癌性物質(zhì)的風(fēng)險評估歐盟委員會健康與消費者保護(hù)局：遺傳毒性和致癌性物質(zhì)一般風(fēng)險評估的方法學(xué)和途徑(2009)。有關(guān)基因毒性雜質(zhì)的指南EMEA（歐洲藥品局）2006年首先頒布了《基因毒性雜質(zhì)限度指南》，并自2007年1月1日起正式實施。該指南為限制新活性物質(zhì)中的基因毒性雜質(zhì)提供了解決問題的框架和具體做法。彌補(bǔ)了ICHQ3不足引入了毒理學(xué)關(guān)注閾值(TTC)的概念及其取值提出了遺傳毒性雜質(zhì)可接受性評估的決策樹FDA2008年12月正式簽發(fā)：原料藥和成品藥中遺傳毒性和致癌性雜質(zhì)，推薦方法(2008)。繼EMEA指南發(fā)表的適用于美國的文件，內(nèi)容和EMEA指南基本一致主要內(nèi)容包括：原料藥和制劑中的基因毒性雜質(zhì)生成的預(yù)防辦法基因毒性雜質(zhì)的分析方法、處理方法和減少方法上市申請和臨床研究申請的可接受限度草藥原料藥和制劑中基因毒性雜質(zhì)評估指南有關(guān)基因毒性雜質(zhì)的指南有關(guān)基因毒性雜質(zhì)的指南ICHM7：二、ICHM7介紹及實例討論M7適用范圍介紹基因毒性雜質(zhì)評估及分類基因毒性雜質(zhì)控制策略情景原料藥制劑備注新原料藥和制劑是是M7基本意圖新化合物及制劑的臨床申請是是M7基本意圖M7適用范圍介紹上市后變更原料藥研發(fā)、生產(chǎn)和控制起始物料后的合成路線、試劑、溶劑或工藝條件變更時特別是，變更評估要確定其是否會導(dǎo)致任何新的誘變性雜質(zhì)或已知誘變性對原料藥、中間體或起始物料的生產(chǎn)場所的變更，或變更原料供應(yīng)商則不需要對誘變性雜質(zhì)風(fēng)險重新進(jìn)行評估。原料藥用于新劑型，不需要重新評估上市后變更制劑研發(fā)、生產(chǎn)和控制上市后申報涉及制劑（例如、成分、生產(chǎn)工藝、劑型），則應(yīng)對所有新的誘變性降解產(chǎn)物或已有誘變性降解產(chǎn)物更高的可接受標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評估。制劑生產(chǎn)場所變更不需要重新評估。復(fù)方制劑使用已上市成分和新成分，已上市不需要重新評估，新成分需要評估上市后變更臨床使用臨床使用劑量的顯著增加、用藥時長的增加，需重新評估在病情較嚴(yán)重或危及生命的病患狀態(tài)下采用較高可接受攝入量的情況，變成不那么嚴(yán)重的病患，原有的雜質(zhì)可接受攝入量可能不再適當(dāng)。已上市藥品的臨床應(yīng)用變更包涵：使用新的給藥途徑，或擴(kuò)大使用患者群，（孕婦和/或小兒），需重新評估以下類型的原料藥和制劑：生物/生物技術(shù)制品、肽類、寡核苷酸、放射藥物、發(fā)酵產(chǎn)品、草藥制品和動物或植物來源的粗品本指南不適用于ICHS9中所定義的晚期癌癥指征用原料藥和制劑。不適用于已上市藥物中使用的輔料、調(diào)味劑、著色劑和香料。不適用于藥物包材中的可浸出雜質(zhì)。如果輔料首次使用，且是化學(xué)合成的，則本指南適用。M7不適用范圍介紹二、ICHM7介紹及實例討論M7適用范圍介紹基因毒性雜質(zhì)評估及分類基因毒性雜質(zhì)控制策略第1類：已知的、具有基因毒性（突變性）和致癌性的雜質(zhì)第2類：已知的、具有基因毒性（突變性），但致癌性未知的雜質(zhì)第3類：具有警示結(jié)構(gòu)、與API無關(guān)、基因毒性（突變性）未知的雜質(zhì)第4類：具有警示結(jié)構(gòu)、與API有關(guān)、基因毒性（突變性）未知的雜質(zhì)第5類：沒有警示結(jié)構(gòu)，沒有基因毒性（突變性）的雜質(zhì)基因毒性雜質(zhì)分類基因毒性雜質(zhì)分類及控制B．N．Ames等經(jīng)十余年努力，于1975年建立并完善的沙門氏菌回復(fù)突變試驗（亦稱Ames試驗）。原理：鼠傷寒沙門氏菌（Salmonellatyphimurium）的組氨酸營養(yǎng)缺陷型（his－）菌株，在含微量組氨酸的培養(yǎng)基中，一般只能分裂幾次，形成在顯微鏡下才能見到的微菌落。受誘變劑作用后，大量細(xì)胞發(fā)生回復(fù)突變，自行合成組氨酸，發(fā)育成肉眼可見的菌落。Ames試驗（埃姆斯實驗）污染物致突變性檢測Ames試驗（埃姆斯實驗）污染物致突變性檢測決策路線圖雜質(zhì)的分類、驗證和風(fēng)險評估

第一類No第二類TTC法NoorunknowYesPDE法YesNottested第三類第四類普通雜質(zhì)控制第五類NoNo清除雜質(zhì)？風(fēng)險評估用閾值控制該雜質(zhì)是否有基因毒性？該原料是否有基因毒性？基因毒性雜質(zhì)的限度計算：具有陽性致癌數(shù)據(jù)的誘變雜質(zhì)（第1類）計算可接受攝入量（AI）

M7Addendum中列出的15種化合物中有10個為該計算方法計算CarcinogenicityPotencyDatabase(CPDB）中列明了1574種致癌物質(zhì)的TD50值毒理學(xué)關(guān)注門檻TTC法(第2/3類)

ICHM7主要討論的方法，主要針對第2/3類基因毒性雜質(zhì)，比如低級磺酸酯類等。

有些化合物可能顯示出非常高的誘變性（關(guān)注的隊列），例如，黃曲霉毒素類、N-亞硝基化合物、以及烷基-氧化偶氮結(jié)構(gòu)。則要顯著低于TTC法可接受攝入量。

有實際閾值證據(jù)的誘變性雜質(zhì)使用不確定性因子（ICHQ3C計算允許日暴露量（PDE）

即非線性響應(yīng)的，M7Addendum中列出的15種化合物中有3個為該計算方法計算ICHQ3C殘留溶劑計算采用該法。

比如雙氧水（M7Addendum）1、具有陽性致癌數(shù)據(jù)的誘變雜質(zhì)（第1類）計算可接受攝入量（AI）ThresholdofToxicologicalConcern(TTC，毒理學(xué)關(guān)注閾值)：從給定的50%腫瘤發(fā)生率（TD50）簡單線性外推到十萬分之一發(fā)生率（終生暴露情況下），采用的數(shù)據(jù)是來自于最敏感物種和最敏感腫瘤部位的TD50數(shù)據(jù)。值為1.5ug/day?；赥TC的方法一般被認(rèn)為是非常保守的。該法最早用于食品及食品包材控制，EMEA指南中引入該法。相關(guān)概念介紹-TTC相關(guān)概念介紹-M7Addendum中AI介紹acceptableintakes(AI，可接受攝入量)：通過從給定的50%腫瘤發(fā)生率（TD50）簡單線性外推到十萬分之一發(fā)生率（終生暴露情況下），每日可以接受的攝入量。該法主要針對TD50確定的化合物，計算原理和TTC法一樣。CarcinogenicityPotencyDatabase(CPDB）中列明了1574種致癌物質(zhì)的TD50值。AI的TD50選擇，基于保守的目的，采用最敏感部位的TD50值，以及權(quán)威機(jī)構(gòu)的報道值（CPDB、NTP等）另外，有的物質(zhì)在特定部位有很強(qiáng)的敏感性，也是人體主要接觸方式（吸入），故通常會針對吸入有一個可接受攝入量，值一般很低。AI的計算方法M7Addendum中使用AI計算的10種化合物黃曲霉毒素（1402-68-2）：基本結(jié)構(gòu)為二呋喃環(huán)和香豆素,該類目前已經(jīng)鑒定出12種。其他致癌性已知雜質(zhì)的毒性計算黃曲霉素CPDB查詢顯示：采用最敏感部位的TD50，即大鼠(rat)肝（liv）:TD50=0.00299mg/kg/天=0.00299ug/天假如每天服用的藥物為100mg，則該藥物中控制黃曲霉素的濃度限度為：C=AI/100mg=0.00000299%=0.0299ppm其他致癌性已知雜質(zhì)的毒性計算亞硝胺、苯并芘

Benzo[a]pyreneCASNo.50-32-8AlsoknownasB[a]P毒理學(xué)關(guān)注門檻TTC法(第2/3類)ICHM7中主要介紹方法根據(jù)TTC計算可接受攝入量時，一個具有誘變性的雜質(zhì)每天每人攝入1.5μg時其風(fēng)險被認(rèn)為是可以忽略的，可以通用于大部分藥物，作為默認(rèn)的可接受限度控制標(biāo)準(zhǔn)。該方法一般用于長期治療用藥物中的誘變性雜質(zhì)（>10年），且沒有致癌數(shù)據(jù)時（第2類和3類）。在不同的服藥時間周期，TTC值可以不同在不同的試驗階段（臨床試驗），TTC值不同。多個基因毒性雜質(zhì)，需要合并考慮限度結(jié)算如下：=1.5ug/day/劑量（g/day）低于生命周期（LTL）暴露對已知致癌物（第1類）的標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)險評估，長期低劑量暴露于短期高劑量暴露有同樣風(fēng)險可以依據(jù)暴露時長進(jìn)行調(diào)整。TTC計算的可接受日攝入量1.5μg/天被認(rèn)為是在終生每日暴露情況下可以受到保護(hù)的量。

累積終生劑量為;1.5μg/天X25,550天=38.3mg日攝入量可以高于平均終生日暴露量，而其風(fēng)險水平仍與每日或非每日治療方案相持平單個雜質(zhì)可以接受的攝入量時間劑量關(guān)系表2是從上述概念得到的數(shù)據(jù)，其中寫出了臨床研發(fā)階段和上市階段終生暴露LTL下可接受攝入量數(shù)值。如果給藥是間歇性的，則可接受日攝入量應(yīng)根據(jù)給藥總天數(shù)計算。例如，2年期間每周服用一次的藥物（即104個服藥天數(shù)），其可接受攝入劑量為每劑20μg。該擬定的攝入水平一般大大低于計算值，在很短期治療時，安全性更大，詳見下圖：短于生命周期的可接受攝入量不同治療時長舉例LTL應(yīng)用于臨床階段和已上市藥物的情況--臨床階段采用LTL概念，誘變性雜質(zhì)的可接受攝入量在臨床研究中的治療期限最高為1個月、1-12個月及長于1年直到完成3期臨床試驗（表2）。保持早期臨床風(fēng)險水平為百萬分之一，后期臨床為十萬分之一。進(jìn)一步地，經(jīng)過調(diào)整的可接受攝入量可以應(yīng)用于14天的一期臨床試驗階段。只有1類和2類，以及3類中關(guān)注序列雜質(zhì)予以誘變性考慮。僅僅只是含有警示結(jié)構(gòu)（3類）不需要在一期臨床試驗期間進(jìn)行評估如果治療時長不超過6個月，被接受的日攝入量符合100萬分之一患癌風(fēng)險水平。LTL應(yīng)用于臨床階段和已上市藥物的情況已上市藥物已上市藥品的治療時長分類與可接受攝入量在上表中列出。它可以用來預(yù)計絕大部分患者的暴露時長。有些情況下，患者中一部分人群可能會延長治療時長，延長治療時長導(dǎo)致的風(fēng)險增加（如上例，增加比例為1.5/100000）可以忽略。在短期服用時，第1類，以及有特定閾值的也可以按上述的比例進(jìn)行調(diào)整（臨床階段和已上市），或限制不超過0.1%(ICH3A)，取低者例如，如果一個特定化合物的可接受服用量為終生暴露期15μg/天，在短于終生時長暴露時的限度（表2）可以增加至100μg（>1-10年治療進(jìn)長），200μg（>1-12月）或1200μg（<1個月）。但是，對于具有最大日服用劑量的藥物，例如，100mg，則<1個月時長的可接受日服用劑量應(yīng)受限于0.1%（500μg），而不是1200μg。LTL應(yīng)用于特定化合物的情況多個雜質(zhì)的可接受日總攝入量單獨應(yīng)用于各個雜質(zhì)。如果有兩個2類或3類雜質(zhì)，則限度是針對單個雜質(zhì)的。如果原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中有3個或更多3類或3類雜質(zhì)，臨床研發(fā)和已上市藥品中的總誘變性雜質(zhì)應(yīng)根據(jù)表3進(jìn)行限制。在原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，只有列出的2類和3類雜質(zhì)才會被包括在總限度計算中，而第1類的雜質(zhì)不應(yīng)計入第2類和第3類雜質(zhì)總限度。還有，原料藥中形成的降解產(chǎn)物要單獨控制，不能計入總限度。

多個雜質(zhì)的可接受日總攝入量舉例雜質(zhì)編號雜質(zhì)結(jié)構(gòu)雜質(zhì)來源限度IM2IM2殘留瑞戈非尼降解雜質(zhì)100ppmIM2-ZA05副產(chǎn)物（IM2與SM2反應(yīng)得到）100ppm氯乙烷-副產(chǎn)物0.1%瑞戈非尼基因毒性雜質(zhì)控制：IM2為降解雜質(zhì)，單獨控制；氯乙烷為1類，單獨控制相關(guān)概念介紹-M7Addendum中PDE介紹允許的日接觸量（PDE）：有一些機(jī)理說明對劑量的反應(yīng)并非線性，包括與非DNA靶標(biāo)產(chǎn)生作用的化合物，也包括與DNA有活性反應(yīng)的化合物，例如，在與DNA接觸前其毒性即被快速清除，或?qū)Ξa(chǎn)生的損傷進(jìn)行有效修復(fù)。針對該類化合物的合規(guī)方法可以是根據(jù)對無明顯反應(yīng)水平（NOEL）的鑒別，在可以獲得數(shù)據(jù)的情況下，使用不確定性因子（ICHQ3C（R5））計算允許日暴露量（PDE）。

PDE算法最初用于溶劑殘留的計算（ICHQ3C（R5））PDE的計算方法相關(guān)概念介紹-M7Addendum中PDE介紹M7Addendum中使用PDE計算的雜質(zhì)苯胺/羥胺：引起高鐵血紅蛋白血癥，在組織如脾臟含鐵血黃素沉積，和隨后的炎癥和腫瘤。過氧化氫：通過氧化損傷作用的化學(xué)物質(zhì)，由于存在大量的內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制，使有害的影響不會發(fā)生在低劑量時。舉例說明M7Addendum羥胺（RSM項目涉及）在M7的76頁中，羥胺存在相應(yīng)的TD50數(shù)據(jù)，但使用PDE計算如果采用AI計算，采用最敏感的TD50值：AI=TD50/100000X50kg=22ug/天M7Addendum給出的解釋為：舉例說明M7Addendum羥胺（RSM項目涉及）羥胺誘導(dǎo)腫瘤通過一種閾值模式（即，脾的含鐵血黃素沉著癥）。大鼠雄性在≥5ppm或0.2毫克/公斤/天觀察到血管肉瘤，雌性在80ppm或6.2毫克/公斤/天，觀察到腫瘤的增加（血管肉瘤和血管瘤）。因此，最低可見有害作用水平（LOAEL）在為期兩年的大鼠研究中為0.2毫克/公斤/天。采用PDE計算值為2ug/天，和AI計算法是不一樣的ICHQ3C附錄3PDE計算

F3：短期接觸急性毒性研究的可變系數(shù)。=1研究時間至少為動物壽命一半（鼠、兔1年，貓、

狗、猴7年）=1器官形成的整個過程的生殖研究。=2嚙齒動物6個月或者非嚙齒動物3.5年的研究=5嚙齒動物3個月或者非嚙齒動物2年的研究=10更短的研究時間F4：用于產(chǎn)生嚴(yán)重毒性情況的系數(shù)。=1與母體毒性有關(guān)的胎兒毒性。=5無母體毒性的胎兒毒性。=5受母體毒性影響的致畸反應(yīng)。=10無母體毒性影響的致畸反應(yīng)。F5：一個可變系數(shù)，可用在沒有建立不反應(yīng)的量（NOEL）時。ICHQ3C附錄3PDE計算ICHQ3C附錄3

ICHQ3C附錄3NOEL的確定：2、根據(jù)相應(yīng)的動物試驗資料確定NOEL（或LOEL）。動物試驗資料的獲得：各種數(shù)據(jù)庫、文獻(xiàn)，如：/ListPageC/L71.shtml/toxic/http://esis.jrc.ec.europa.eu/index.php?PGM=dat/?objectid=D16D6C59-F1F6-975E-7D23D1519B8CD7A5（美國國家毒理學(xué)綱要，溶劑類限度確定最權(quán)威，ICH例子中四氫呋喃引用此數(shù)據(jù)庫）可查的數(shù)據(jù)庫還有很多，希望多探索，交流。例.三苯基膦殘留限度的確定

三苯基膦：CDE共性問題解答，新藥，第十一個問題。例.三苯基膦殘留限度的確定三苯基膦：CAS號：603-35-0先查，未收載。繼續(xù)查找，在http://esis.jrc.ec.europa.eu/index.php?PGM=dat里面記載的試驗很多，要選取最嚴(yán)格的試驗：

比格犬吸入毒性試驗，接觸濃度濃度為0.0018、0.00945mg/L,每天6小時，每周5天，共試驗4周；結(jié)論：高濃度發(fā)現(xiàn)神經(jīng)功能缺損，兩個濃度均使中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生組織學(xué)變化；未發(fā)現(xiàn)其具有基因毒性三苯基膦殘留限度的確定

例.三苯基膦殘留限度的確定

ICHM7介紹及實例討論M7適用范圍介紹基因毒性雜質(zhì)評估及分類基因毒性雜質(zhì)控制策略基因毒性雜質(zhì)的控制策略ICHM7提到了4種控制策略，是一種遞進(jìn)關(guān)系，具體如下：第一種方法在原料藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中加入雜質(zhì)檢測并制訂質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，利于適當(dāng)?shù)膬x器分析方法。根據(jù)ICHQ6A，方法1控制方式可以適用定期檢測。如果原料藥中的誘變性雜質(zhì)在至少6個連續(xù)的中試批次或3個連續(xù)的生產(chǎn)批次中，測得結(jié)果均低于可接受限度的30%，則可以論述進(jìn)行定期檢測。如果不滿足該條件，則建議對原料藥進(jìn)行常規(guī)檢測。第一種控制策略舉例雜質(zhì)編號雜質(zhì)結(jié)構(gòu)雜質(zhì)來源IM2IM2殘留瑞戈非尼降解雜質(zhì)IM2-ZA05副產(chǎn)物（IM2與SM2反應(yīng)得到）瑞戈非尼基因毒性雜質(zhì)控制：IM2是瑞戈非尼的降解產(chǎn)物，擬將其訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。瑞戈非尼說明書上2個適應(yīng)癥的最長生存期7.3個月，瑞戈非尼最大日劑量160mg，計算得訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的單個潛在基因毒性雜質(zhì)限度為125ppm，根據(jù)成品及穩(wěn)定性樣品中IM2的實際檢出情況，擬定成品中IM2的控制限度為100ppm。第一種控制策略舉例

樣品來源檢測數(shù)據(jù)中試樣品20141102中試樣品20141103中試樣品20141104原研片劑BXGN9G2IM2(%)0.000380.000330.000790.0092API-ZA05(%)0.0000890.000170.0000910.005中試樣品檢測情況：后期可以結(jié)合報產(chǎn)情況，在日后GMP生產(chǎn)進(jìn)行定期檢測第二種方法在原料、起始物料或中間體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中包括對雜質(zhì)的檢測，或作為中控檢測，同時制訂可接受標(biāo)準(zhǔn)，或采用適當(dāng)?shù)姆治龇椒?，將雜質(zhì)控制在可接受限度以下?；蚨拘噪s質(zhì)的控制策略實例：奧貝膽酸奧貝膽酸起始物料制備工藝中使用到乙醛，我們在起始物料中制定了可接受標(biāo)準(zhǔn)第二種方法實例通過查詢，獲得乙醛TD50=153mg/kg/day,為第1類基因毒性雜質(zhì)計算每日可接受限量AI=153ug/天奧貝膽酸日最大服用劑量25mg/天濃度=（153ug/天）/（25mg/天）=0.00612=0.612%按照ICHM7的要求，>0.1%的，取限度0.1%基因毒性雜質(zhì)的控制策略第三種方法在原料、起始物料或中間體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中包括對雜質(zhì)的檢測，或作為中控檢測，同時制訂一個高于原料藥中可接受限度的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，采用適當(dāng)?shù)姆治龇椒?，配合?jīng)過證明毒性認(rèn)識，在后續(xù)工藝中被清除的知識，并對后續(xù)工藝進(jìn)行控制，保證原料藥中的該雜質(zhì)殘留水平低于可接受限度，不需要在后續(xù)工藝中再行檢測。當(dāng)實驗室級試驗（鼓勵采用加樣試驗）數(shù)據(jù)，必要時可以采用中試生產(chǎn)或商業(yè)批次數(shù)據(jù)加以支持，顯示原料藥中雜質(zhì)水平低于可接受限度的30%時，可以采用該方法。第三種方法實例ICHM7案例1：第3種控制策略舉例差2步到原料藥時，生成了中間體X，雜質(zhì)A在中間體X中常規(guī)檢出。雜質(zhì)A是一個穩(wěn)定的化合物，會被帶入原料藥。在實驗室中，將雜質(zhì)A以不同濃度加入中間體X，發(fā)現(xiàn)即使在1%水平時，也能降到根據(jù)TTC制訂的限度的30%以下。由于中間體X的形成離原料藥只有2步，雜質(zhì)A在中間體X中的水平相對較高，因此另外又通過檢測不同中試規(guī)模批次中，原料藥里的雜質(zhì)A水平確認(rèn)了工藝清除水平，獲得的結(jié)果為根據(jù)TTC制訂的限度的30%以下。因此，對中間體X中雜質(zhì)A控制在1.0%水平是可以接受的，不需要在原料藥標(biāo)準(zhǔn)中對該雜質(zhì)進(jìn)行檢測。ICHM7案例2：第3種控制策略舉例—根據(jù)加樣研究采用標(biāo)準(zhǔn)分析方法所獲得的預(yù)期清除數(shù)據(jù)一個5步合成工藝中，起始物料Y在第3步引入，采用標(biāo)準(zhǔn)分析方法在起始物料Y中檢出雜質(zhì)B通常低于0.1%。為了確定0.1%的標(biāo)準(zhǔn)是否可接受，在實驗室里進(jìn)行了清除研究。將雜質(zhì)B以不同濃度（最高10%）加入起始物料Y中，通過最后3步工藝步驟，得到清除系數(shù)>500倍。該清除系數(shù)應(yīng)用于起始物料Y含雜質(zhì)B為0.1%時，雜質(zhì)B在原料藥中的期望水平低于2ppm。由于該值低于根據(jù)TTC限度計算的原料藥中該雜質(zhì)允許水平50ppm，因此認(rèn)為起始物料Y中雜質(zhì)B為0.1%的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是可接受的，不需要再提交中試生產(chǎn)數(shù)據(jù)或商業(yè)放大批數(shù)據(jù)。第三種方法實例第四種方法對工藝參數(shù)和殘留雜質(zhì)水平（包括致命性和清除知識）影響有了解，確信原料藥中的雜質(zhì)一定會低于可接受限度；建議該雜質(zhì)不需要進(jìn)行分析測試（例如，不需要將雜質(zhì)列在任何質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中）。在很多情況下，只需要根據(jù)科學(xué)原理對該控制方法進(jìn)行論述就可以了?？茖W(xué)風(fēng)險評估要素可以用來論證第4種方法。第4種方法特別適用于不穩(wěn)定的雜質(zhì)（例如，二氯亞砜），以及那些在合成路線早期引入，但已被有效清除的雜質(zhì)。基因