標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 28065-2011 地中海實(shí)蠅生物芯片檢測(cè)方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，該標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了使用生物芯片技術(shù)對(duì)地中海實(shí)蠅進(jìn)行快速準(zhǔn)確鑒定的方法。地中海實(shí)蠅是一種重要的果蔬害蟲，其存在對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)構(gòu)成嚴(yán)重威脅。此標(biāo)準(zhǔn)旨在通過提供一種高效、靈敏的檢測(cè)手段來加強(qiáng)對(duì)該害蟲的監(jiān)控與管理。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容，首先介紹了適用范圍，明確了本標(biāo)準(zhǔn)適用于進(jìn)出口水果及蔬菜等植物產(chǎn)品中地中海實(shí)蠅成蟲或幼蟲DNA的提取以及后續(xù)基于生物芯片平臺(tái)上的特異性探針雜交反應(yīng)來進(jìn)行物種識(shí)別。接著，標(biāo)準(zhǔn)描述了所需的主要儀器設(shè)備和試劑材料，包括但不限于生物芯片掃描儀、核酸提取試劑盒、標(biāo)記酶、熒光素等，并對(duì)這些物品的質(zhì)量要求做出了明確規(guī)定。

在樣品處理部分，標(biāo)準(zhǔn)給出了從待測(cè)樣本（如果實(shí)內(nèi)部發(fā)現(xiàn)的疑似害蟲）到最終可用于生物芯片分析的DNA溶液制備的具體步驟，涵蓋了組織研磨、裂解細(xì)胞釋放遺傳物質(zhì)、純化去除雜質(zhì)等多個(gè)環(huán)節(jié)的操作指南。此外，還強(qiáng)調(diào)了實(shí)驗(yàn)過程中需要注意的安全防護(hù)措施和個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣。

關(guān)于生物芯片的應(yīng)用，則詳細(xì)說明了如何將已知的地中海實(shí)蠅基因序列設(shè)計(jì)為特異性探針固定于芯片表面；如何利用PCR擴(kuò)增目標(biāo)片段并對(duì)其進(jìn)行熒光標(biāo)記；以及如何通過雜交反應(yīng)使標(biāo)記后的DNA與芯片上的探針結(jié)合形成可被儀器讀取的信號(hào)模式。最后，通過對(duì)獲得的數(shù)據(jù)圖像進(jìn)行分析比對(duì)，可以確定是否存在地中海實(shí)蠅。

整個(gè)流程不僅需要嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范，而且要求技術(shù)人員具備一定的分子生物學(xué)知識(shí)和技術(shù)水平。正確實(shí)施該標(biāo)準(zhǔn)有助于提高地中海實(shí)蠅監(jiān)測(cè)工作的效率和準(zhǔn)確性，對(duì)于防止此類有害生物入侵具有重要意義。


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....

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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2011-12-30 頒布
  • 2012-06-01 實(shí)施
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文檔簡(jiǎn)介

ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T28065—2011

地中海實(shí)蠅生物芯片檢測(cè)方法

BiochidetectionofCeratitiscapitataWiedemann

p()

2011-12-30發(fā)布2012-06-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

中華人民共和國(guó)

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

地中海實(shí)蠅生物芯片檢測(cè)方法

GB/T28065—2011

*

中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社出版發(fā)行

北京市朝陽(yáng)區(qū)和平里西街甲號(hào)

()

北京市西城區(qū)三里河北街2號(hào)100013

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務(wù)熱線

/p>

年月第一版

20124

*

書號(hào)

:155066·1-44583

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T28065—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中華人民共和國(guó)深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局中華人民共和國(guó)北京出入境檢驗(yàn)檢疫局

:、,

本元正陽(yáng)基因有限公司深圳市檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院

、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人余道堅(jiān)李建光任魯風(fēng)徐浪周琦章桂明陳枝楠汪萬(wàn)春康林仲建忠

:、、、、、、、、、、

向才玉

。

Ⅰ

GB/T28065—2011

地中海實(shí)蠅生物芯片檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)確定了地中海實(shí)蠅Ceratitiscapitata雙翅目實(shí)蠅科

(Wiedemann)(DipteraTephritidae)

的生物芯片制備檢測(cè)和結(jié)果判定方法

、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于相關(guān)貿(mào)易和有害生物監(jiān)測(cè)中地中海實(shí)蠅卵幼蟲蛹的鑒定和成蟲的鑒定或復(fù)核

、、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

地中海實(shí)蠅檢疫鑒定方法法

SN/T2039PCR

3縮略語(yǔ)

界定的縮略語(yǔ)適用于本文件

SN/T2039。

4方法原理

選擇實(shí)蠅科昆蟲線粒體基因核苷酸片段為分子標(biāo)記探針將探針按預(yù)先設(shè)置的排列固

DNACOI,

定于特定的固相支持載體如醛基化基片的表面形成微點(diǎn)陣?yán)梅聪蚬滔嚯s交技術(shù)用標(biāo)記脫

(:),,Cy3

氧胞苷三磷酸熒光標(biāo)記的樣品分子與微點(diǎn)陣上的探針雜交實(shí)現(xiàn)多個(gè)分子之間的雜交反

(Cy3-dCTP),

應(yīng)并通過芯片掃描信號(hào)的判讀來檢測(cè)樣品中特定基因片段的存在最后確定是否為地中海實(shí)蠅

,,。

5儀器和用具

擴(kuò)增儀芯片點(diǎn)樣儀芯片掃描儀離心機(jī)水浴鍋渦旋器冰箱電子天平烘箱磁力攪

PCR、、、、、、、、、

拌器

。

醛基化基片多孔板芯片蓋片芯片分隔圍欄芯片粘貼工具濕盒雜交盒計(jì)時(shí)器磁柱芯片架

、、、、、、、、、、

燒杯離心管量筒移液器等

2L、15mL、、。

6試劑

61昆蟲基因組提取試劑盒

.DNA。

62快速純化回收試劑盒

.DNA/。

63去離子水

.。

64

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