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第二章遺傳的細胞學(xué)基礎(chǔ)

●細胞的結(jié)構(gòu)●原核生物的染色體一般結(jié)構(gòu)、超微結(jié)構(gòu)與數(shù)目和染色質(zhì)●真核生物的染色體一般結(jié)構(gòu)、超微結(jié)構(gòu)與數(shù)目(核小體、端粒、著絲粒、端粒)●原核生物的染色體的復(fù)制●有絲分裂時的染色體●減數(shù)分裂時的染色體第一節(jié)細胞的結(jié)構(gòu)1〕每種生物都是由1個或多個細胞組成的2〕細胞是生命的最小單位3〕生命的延續(xù)是以單個細胞的生長和分裂為基礎(chǔ)的1生命的細胞理論4〕可獨自生存或具此潛力5〕可進行高度有序的代謝6〕可感受并對環(huán)境的變化作出反應(yīng)7〕具有繁殖的潛力2細胞的結(jié)構(gòu)(StructureofCells)原核(Prokaryotic)細胞真核(Eukaryotic)細胞

2.1真核細胞(EukaryoticCells)具有細胞核和其他細胞器(Haveanucleusandotherorganelles)真核生物(Eukaryoticorganisms)植物(Plants)動物(Animals)原生生物(Protistans)真菌(Fungi)高爾基體溶酶體核糖體細胞核核仁染色體葉綠體基粒漿膜核膜內(nèi)質(zhì)網(wǎng)線粒體內(nèi)吞小泡濾泡動物細胞(AnimalCells)質(zhì)膜Plasmamembrane細胞核Nucleus核糖體Ribosomes內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Endoplasmicreticulum高爾基體Golgibody小泡Vesicles線粒體Mitochondria溶酶體Lysosome細胞骨架Cytoskeleton動物細胞示意圖中心粒復(fù)合體嵴線粒體結(jié)構(gòu)示意圖微管中心粒細胞核細胞骨架示意圖細胞支架的功能:●與DNA復(fù)制有關(guān),是DNA復(fù)制的支架●與基因表達有關(guān),基因只有結(jié)合于核骨架上才能進行轉(zhuǎn)錄●與染色體的構(gòu)建和核的重建有關(guān)●與細胞分裂、分化、癌變有關(guān)●病毒在宿主細胞內(nèi)的DNA復(fù)制、RNA的轉(zhuǎn)錄等均依賴于核骨架?!癜┗虻谋磉_是在核骨架上進行的。細胞核(Nucleus)核孔復(fù)合體核孔:將細胞核內(nèi)外膜融合形成的小孔。(nuclearpores)

核孔在核膜上的密度很大,一個典型的哺乳動物細胞核膜上有3000-4000個核孔。

核仁:光鏡下能見的結(jié)構(gòu),球形,數(shù)目不等,位置不定。由致密纖維包圍的纖維中心

是rDNA存在的地方,這類DNA編碼的基因是rRNA,它轉(zhuǎn)錄下來的rRNA構(gòu)成了核仁纖維區(qū)的主要成分,這部分DNA稱為核仁組織者(nucleolarorganizer)。由致密的細纖維構(gòu)成的致密纖維組分由核糖核蛋白構(gòu)成的顆粒成分

人類的rDNA分布在10條染色體上,分別是13、14、15、21、22。核仁組織區(qū)定位在核仁染色體次縊痕部位,它們共同構(gòu)成的區(qū)域稱為核仁組織區(qū)。它包含有從5對核仁染色體上核仁組織區(qū)來的DNA袢環(huán),這些袢環(huán)上含有核糖體核糖核酸(rRNA)的基因。

核仁的功能核仁是細胞核中rRNA合成的中心核仁是rRNA加工成熟的區(qū)域

人的rRNA轉(zhuǎn)錄初的前體物質(zhì)是45SrRNA,要經(jīng)過剪接,形成28SrRNA、18SrRNA和5.8SrRNA。此外,在核仁組織區(qū)之外還有編碼5S的rDNA序列。核仁是核糖體大小亞基裝配的工廠在核仁的顆粒區(qū),是核糖體前體物質(zhì)組裝的地方,即合成好RNA與胞質(zhì)中合成的蛋白質(zhì)在此組裝成顆粒。植物細胞(PlantCells)細胞壁Cellwall中央液泡Centralvacuole葉綠體Chloroplast質(zhì)膜Plasmamembrane細胞核Nucleus核糖體Ribosomes內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Endoplasmicreticulum高爾基體Golgibody小泡Vesicles線粒體Mitochondria溶酶體Lysosome細胞骨架Cytoskeleton原核細胞與真核細胞的區(qū)別

原核細胞

真核細胞核膜染色體數(shù)目核小體結(jié)構(gòu)核仁遺傳交換內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高爾基體溶酶體線粒體葉綠體核糖體大小無有1

≥1無有

無有質(zhì)粒介導(dǎo),單向配子融合無有無有無有無有無植物中有70s80s細胞壁有植物有真核細胞和原核細胞比較圖須注意的是:成熟的哺乳動物血紅細胞沒有細胞核;禽類的血紅細胞卻含有細胞核。第二節(jié)

原核生物的染色體一般結(jié)構(gòu)、超微結(jié)構(gòu)與數(shù)目、染色體復(fù)制

真核生物:高等動植物、原生動物、真菌以及一些藻類。原核生物:細菌、病毒以及藍藻。噬菌體(感染細菌的病毒)和病毒既不是原核生物,也不是真核生物,只是一種超分子的亞細胞生命形式,必須在寄主體內(nèi)進行繁殖,噬菌體適應(yīng)了原核生物的遺傳戰(zhàn)略,動物的病毒和植物病毒使用真核生物的遺傳法則。原核生物染色體:原核生物的遺傳物質(zhì)只以裸露的核酸分子存在,雖與少量蛋白質(zhì)結(jié)合,但不形成染色體結(jié)構(gòu),但習(xí)慣上也被稱為染色體,為環(huán)狀。1原核生物的染色體一般結(jié)構(gòu)大腸桿菌大腸桿菌原核生物的染色體DNA包括2部分:環(huán)狀基因組DNA

(雙鏈環(huán)狀----大腸桿菌)。DNA集中在細胞質(zhì)中的低電子密度區(qū),稱核區(qū)或核質(zhì)體(nuclearbody),DNA高度緊密地卷曲和纏繞。

環(huán)狀質(zhì)粒DNA(Plasmid):是染色體外能夠進行自主復(fù)制的遺傳單位或遺傳因子,為裸露的閉合環(huán)狀DNA分子(簡稱cccDNA)。細菌質(zhì)粒的相對分子質(zhì)量一般較小,約為細菌染色體的0.5%~3%。所含遺傳信息量為2~200個基因,能進行自我復(fù)制,有時能整合到核DNA中去?;蚪MDNA質(zhì)粒DNA質(zhì)粒DNA根據(jù)拷貝數(shù)的多少可以分為松弛型質(zhì)粒和嚴謹型質(zhì)粒。嚴謹型質(zhì)粒的拷貝在1---10之間,松弛型質(zhì)粒的拷貝數(shù)在10-100之間,甚至更多。質(zhì)粒的不相容性:同一種宿主細胞中不能同時含有2種不同的質(zhì)粒DNA,其中一種必然會隨著宿主細胞的傳代而發(fā)生丟失現(xiàn)象。2原核生物的染色體超微結(jié)構(gòu)(以大腸桿菌為例)類核(nucleoid)

DNA并非散布在整個細胞中,而是集中在一小區(qū)域,形成類核(包括DNA、RNA和蛋白質(zhì)),呈腳手架結(jié)構(gòu)。該支架(scafford)由100個DNA環(huán)組成,每個環(huán)長40Kb,13微米,為負超螺旋結(jié)構(gòu),兩端點被蛋白質(zhì)固定。類

結(jié)

構(gòu)大腸桿菌和染色體(大腸桿菌經(jīng)過裂解以后染色體釋放出來)DNA

DNA結(jié)合蛋白(該部分還包含RNA)E.coli

2.4×109Da,42000Kb(1300微米),閉合環(huán)狀,約編碼2000個基因。每200bp就有一個負超螺旋(=0.05),即基因組中含5%的負超螺旋。超螺旋以兩種狀態(tài)存在:(1)自由狀態(tài)的超螺旋,可在環(huán)內(nèi)傳遞張力。(2)超螺旋受到束縛,不能傳遞張力。原核生物染色體的數(shù)目:原核生物染色體特點:◆染色體簡單;◆遺傳信息含量少;◆多數(shù)為雙螺旋結(jié)構(gòu),少數(shù)單鏈形式存在;◆核酸多數(shù)為環(huán)狀,少數(shù)為線狀。3原核生物的染色體的復(fù)制

21341單一染色體附著在細胞膜間體上2染色體復(fù)制,兩個子染色體分別附著在間體上,兩間體將的細胞膜延伸3每一子染色體(daughterchromosomes)進入子細胞(daughtercells)4形成2個子細菌細胞,各有一染色體附著在細胞膜間體上3.1細菌的細胞分裂注:間體是由于細胞質(zhì)膜內(nèi)陷而成的在無絲分裂過程中不形成染色體,分裂速度快,消耗能量較少,在分裂過程中可繼續(xù)執(zhí)行細胞的功能,因而具有適應(yīng)意義。無絲分裂多出現(xiàn)在動、植物生長旺盛的組織器官中。如動物的上皮組織、疏松結(jié)締組織、肝細胞;植物的薄壁組織、表皮、生長點和胚乳等。3.2原核的復(fù)制起點和方向

E.coli

:定點、雙向等速復(fù)制。

T7:在近一端的17%處開始,向兩端延伸??莶輻U菌:有固定的起始點,雙向不對稱復(fù)制。質(zhì)粒R6K:早期為單向復(fù)制,復(fù)制了約1/5基因組進行時雙向復(fù)制。質(zhì)粒ColE1:有固定起始點,但卻為單向復(fù)制。原核生物特殊的復(fù)制類型3.3復(fù)制起始區(qū)的結(jié)構(gòu)特點富含A-T,這可能和雙鏈易于解開起始,與復(fù)制有關(guān);含有多個回文結(jié)構(gòu)(9-14個GATC),

8個GATC較保守,GATC中的“A”已甲基化;具有4個反向重復(fù)順序,作為蛋白結(jié)合位點;此順序的右側(cè)毗鄰區(qū)域有兩個啟動子,其可能的作用是:①轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生引物;②產(chǎn)生復(fù)制必要的蛋白;③產(chǎn)生調(diào)節(jié)功能的RNA;④起轉(zhuǎn)錄激活作用。3.4原核生物復(fù)制的酶系統(tǒng)DNA合成酶

DNA聚合酶的共同特點是:(1)需要提供合成模板;(2)不能起始新的DNA鏈,必須要有引物提供3'-OH;(3)合成的方向都是5‘→3’;(4)除聚合DNA外還有其它功能。E.coli中的3種DNA多聚酶

DNApolⅠDNApolⅡDNApolⅢ結(jié)構(gòu)分子量

109KD90KD900KD構(gòu)成

單體單體異多聚體分子數(shù)/細胞

400?10-20酶活性5→3`聚合酶

+++3`→5`外切酶

+++5`→3`外切酶

+--(可切單鏈)突變體突變位點polApolBpolC(dnaE),dnaN,dnaZX,dnaQ,dnaT突變表型修復(fù)有缺陷能修復(fù)阻止復(fù)制3.4.2單鏈結(jié)合蛋白(Single-strandDNABindingprotein,SSB)又稱為雙螺旋去穩(wěn)定蛋白(helixdestabilizingprotein)由177個aa組成在E.coli

中以四聚存在分子量為74KDa在原核中SSB與DNA結(jié)合表現(xiàn)出協(xié)同效應(yīng)。(1)SSB之間的相互作用;(2)第一個SSB和DNA的結(jié)合改變了DNA的結(jié)構(gòu)。3.4.3解旋酶(helica

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