半衰期測(cè)定-任衍開

磺胺嘧啶鈉藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)定新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院三全學(xué)院任衍開一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握磺胺類藥物血漿藥物濃度的測(cè)定方法2.掌握藥物半衰期的計(jì)算方法3.了解藥物血漿半衰期測(cè)定及計(jì)算的臨床意義二、實(shí)驗(yàn)原理1.多數(shù)藥物在體內(nèi)按一級(jí)動(dòng)力學(xué)規(guī)律消除,靜脈注射后，如以血漿藥物濃度的對(duì)數(shù)值為縱坐標(biāo)，時(shí)間為橫坐標(biāo)，其時(shí)量關(guān)系常呈直線。

2.藥物血漿半衰期（halflife，T1/2）為：Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1二、實(shí)驗(yàn)原理3.呈色原理：

磺胺類藥物在酸性溶液中，與亞硝酸鈉起重氮反應(yīng)，生成重氮鹽。此重氮鹽在堿性溶液中與酚類化合物起偶聯(lián)反應(yīng)，生成橙紅色的偶氮化合物。偶氮化合物的顯色深淺與磺胺的濃度有關(guān)。

三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物家兔（體重2.5Kg左右）四、實(shí)驗(yàn)器材和藥品1.器材：分光光度計(jì)、離心機(jī)、兔手術(shù)臺(tái)、手術(shù)器械、動(dòng)脈夾、動(dòng)脈插管、磅秤、注射器、移液管、離心管、試管等

分光光度計(jì)離心機(jī)四、實(shí)驗(yàn)器材和藥品2.藥品：20%磺胺嘧啶鈉溶液、1%肝素鈉溶液、

0.02%磺胺嘧啶鈉溶液（標(biāo)準(zhǔn)液）、7.5%三氯醋酸溶液、0.5%亞硝酸鈉溶液、0.5%麝香草酚溶液、20%NaOH溶液、20%烏拉坦溶液、蒸餾水五、實(shí)驗(yàn)步驟（一）動(dòng)物基本操作（二）測(cè)定液和標(biāo)準(zhǔn)液的配制（三）比色管的配制（四）比色與計(jì)算（一）動(dòng)物基本操作(血液標(biāo)本的采集）1.抓取家兔1只，稱重，用20％烏拉坦溶液5mL/kg行耳緣靜脈麻醉，然后固定于手術(shù)臺(tái)上。2.氣管插管手術(shù)區(qū)剪毛，沿正中線剪開頸部皮膚，鈍性分離皮下組織及肌肉，找出并游離氣管，穿線備用。確定甲狀軟骨的位置，在其下3——4環(huán)裝軟骨處切一倒“T”形切口，插管固定。(一)動(dòng)物基本操作(血液標(biāo)本的采集）3.游離頸總動(dòng)脈：分開肌肉層后，找出一側(cè)頸總動(dòng)脈并分離約2～3cm左右，在其下穿線兩根線備用。（一）動(dòng)物基本操作4.全身肝素化：耳緣靜脈注射肝素5ml。線1結(jié)扎遠(yuǎn)心端，待血管充盈后，動(dòng)脈夾夾閉近心端遠(yuǎn)心端剪一“V”形口，動(dòng)脈插管，線2結(jié)扎固定（二次固定）5.動(dòng)脈插管（肝素潤(rùn)洗）（一）動(dòng)物基本操作6.取血：打開動(dòng)脈夾取空白血樣2ml置于用肝素浸過的試管中待用；然后由耳緣靜脈注射20％磺胺嘧啶鈉溶液2ml/kg，于給藥后10min及40min各取血2ml，分別置于同上試管中待用（二）測(cè)定液和標(biāo)準(zhǔn)液的配制測(cè)定液的配制：用1ml注射器抽取上述血液各0.2ml，置于已盛有5.8ml

7.5％三氯醋酸溶液的玻璃試管中，充分搖勻，然后以1500r/min，離心5min待用。標(biāo)準(zhǔn)液的配制：取0.02％磺胺嘧啶鈉溶液0.2ml，加入已裝有5.8ml

7.5％三氯醋酸溶液試管中，搖勻待用。成分空白管（mL）標(biāo)準(zhǔn)管（mL）測(cè)定管（mL）給藥前給藥10min給藥40min測(cè)定液//1.51.51.5標(biāo)準(zhǔn)液/1.5///蒸餾水1.5////0.5％NaNO2

0.50.50.50.50.50.5％麝香草酚1.01.01.01.01.0（三）各比色管的配制蒸餾水0.02%NaSD②1組標(biāo)本各取0.2ml加入2組①2組各試管先加三氯乙酸5.8ml③2組測(cè)定液各取1.5ml清液加入3組④加0.5mlNaNO2⑤加1ml麝香草酚

標(biāo)本（1組）

測(cè)定液（2組）

比色液（3組）空白管標(biāo)準(zhǔn)管給藥前藥后10′藥后40′取13支試管分別用記號(hào)筆標(biāo)記（四）比色與計(jì)算用722型分光光度計(jì)進(jìn)行比色，選波長(zhǎng)520nm，以空白管調(diào)“0”點(diǎn)，讀出標(biāo)準(zhǔn)管及各測(cè)定管光密度，并記錄。

六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定管給藥前給藥后10min給藥后40min光密度值1.各比色管的光密度值六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.計(jì)算Ke及T1/2Ke=2.303(logC1-logC2)/t2-t1CNaSD=C標(biāo)/OD標(biāo)×（OD給藥后-OD給藥前）

七、注意事項(xiàng)1.麻醉時(shí)一定把握好速度。2.每次取血之前要先將殘血放掉。3.各盛血的試管及動(dòng)脈插管