GB/T 38137-2019核酸適配體體外篩選技術(shù)導(dǎo)則

ICS07080

A20.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T38137—2019

核酸適配體體外篩選技術(shù)導(dǎo)則

Guidelinesforinvitroscreeningofnucleicacidaptamers

2019-10-18發(fā)布2019-10-18實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T38137—2019

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口

。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位河北省食品檢驗(yàn)研究院中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化研究院中國(guó)科技大學(xué)合肥工業(yè)大學(xué)河北

:、、、、

農(nóng)業(yè)大學(xué)西南大學(xué)江南大學(xué)河南大學(xué)浙江工商大學(xué)北京食品科學(xué)研究院河北醫(yī)科大學(xué)

、、、、、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人羅昭鋒周巍馬愛(ài)進(jìn)張巖瞿昊鄭磊王向紅陳佳王周平陳偉馬良

:、、、、、、、、、、、

田益玲張翠俠李永波李永艷康文藝王彥波傅凌琳孫勇呂品

、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T38137—2019

核酸適配體體外篩選技術(shù)導(dǎo)則

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了核酸適配體體外篩選的篩選流程篩選進(jìn)程監(jiān)測(cè)測(cè)序和序列分析候選適配體的鑒

、、、

定與優(yōu)化防污染措施

、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于金屬離子小分子大分子細(xì)胞及顆粒物組織以及混合目標(biāo)物等不同層次目標(biāo)物體

、、、、

系的核酸適配體篩選

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品分子生物學(xué)檢測(cè)

GB/T27403

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

。

31

.

核酸適配體nucleicacidaptamer

能夠與特定目標(biāo)物發(fā)生高親和性和特異性結(jié)合的寡核苷酸片段

。

注目標(biāo)物可以為金屬離子小分子大分子細(xì)胞組織以及混合靶標(biāo)等核酸適配體折疊成特定三維結(jié)構(gòu)通過(guò)

:、、、、。,

空間構(gòu)型互補(bǔ)與目標(biāo)物高親和性高特異性結(jié)合以短的單鏈核苷酸序列單鏈或?yàn)橹?/p>

,(DNARNA)。

32

.

體外篩選技術(shù)invitroscreeningtechnique

通過(guò)目標(biāo)物與大容量隨機(jī)寡核苷酸文庫(kù)作用將所形成的目標(biāo)物寡核苷酸復(fù)合物與游離寡核苷酸

,-

分離再利用體外擴(kuò)增技術(shù)對(duì)形成復(fù)合物的寡核苷酸進(jìn)行擴(kuò)增多次重復(fù)以上篩選步驟最終獲得

,PCR,

與目標(biāo)物有特異結(jié)合作用的核酸適配體的技術(shù)

。

4縮略語(yǔ)

下列縮略語(yǔ)適用于本文件

。

聚丙烯酰胺凝膠電泳

PAGE:(polyacrylamidegelelectrophoresis);

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

PCR:(polymerasechainreaction);

多聚腺苷酸

polyA:(polyadenylation);

指數(shù)富集的配體系統(tǒng)進(jìn)化

SELEX:(exponentiallyenrichedligandsystemevolution)。

5篩選流程

51篩選基本途徑

.

技術(shù)的基本途徑是將大容量的隨機(jī)寡核苷酸序列庫(kù)1315個(gè)隨