腫瘤的免疫診斷及治療

關(guān)于腫瘤的免疫診斷及治療第一頁，共三十五頁，2022年，8月28日腫瘤的免疫診斷：通過生化和免疫學(xué)技術(shù)檢測腫瘤抗原、抗腫瘤抗體或其他腫瘤標(biāo)記物。第二頁，共三十五頁，2022年，8月28日腫瘤的免疫診斷包括三個方面：①檢查腫瘤標(biāo)記物質(zhì)

②檢查特異性抗體③檢查細胞免疫狀態(tài)第三頁，共三十五頁，2022年，8月28日腫瘤標(biāo)志物的定義：腫瘤標(biāo)志物（tumormarker,TM）是指在腫瘤的發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細胞本身所產(chǎn)生的或者是由機體對腫瘤細胞反應(yīng)而產(chǎn)生的，反映腫瘤存在和生長的一類物質(zhì)。一般可以從血或尿中檢測。第四頁，共三十五頁，2022年，8月28日常見的標(biāo)記物質(zhì)有：肝癌的甲胎蛋白（AFP）結(jié)腸癌的癌胚抗原（CEA）胰腺癌的糖鏈抗原（CA199）前列腺癌的前列腺特異性抗原（PSA）第五頁，共三十五頁，2022年，8月28日甲胎蛋白（AFP）

是胎兒早期血清中主要的蛋白質(zhì)。分泌型胚胎抗原，主要由胎肝和卵黃囊產(chǎn)生的糖蛋白。當(dāng)肝細胞或生殖腺胚胎組織發(fā)生惡性病變時，AFP含量升高.

AFP的檢測:EIA和RIA；正常成人<20μg/L

成人血清AFP升高見于：?原發(fā)性肝癌（80-90%）可在癥狀出現(xiàn)前6-12個月作出診斷?非轉(zhuǎn)移性肝癌及肝外腫瘤，生殖腺胚胎癌、胃癌或胰腺癌?非腫瘤性疾??；先天性膽道閉鎖癥，急性肝炎，肝硬化等?孕婦血清AFP增高第六頁，共三十五頁，2022年，8月28日癌胚抗原（CEA）主要存在于胎兒消化道上皮組織、胰臟和肝臟。正常情況下CEA入胃腸道，而腫瘤細胞分泌的CEA則進入血液和淋巴液，故血中CEA含量會增高。

CEA的檢測：EIA、RIA參考值<5μg/L（97%健康人低于此值）血清CEA升高見于：?消化道惡性腫瘤：整個胃腸道惡性腫瘤均可增高。?非消化道惡性腫瘤：如卵巢癌、肺癌有不同程度升高。?檢測胸、腹水或胃液的CEA含量對鑒別診斷有意義。?

CEA與其它腫瘤標(biāo)志物結(jié)合測定可以提高對癌癥的檢出率。第七頁，共三十五頁，2022年，8月28日糖鏈抗原（CA199）（CA19-9）在消化道腺癌病人血清中的濃度可明顯升高，是胰腺癌和膽管癌的腫瘤標(biāo)志物。

[參考值]ELISA法0~3.7ku/L（1）胰腺癌(80%~95%)、肝癌、膽管癌、胃癌時CA19-9可明顯升高。（2）急性胰腺炎、膽汁淤積性膽管炎、膽石癥、急性肝炎、肝硬化等CA19-9有不同程度升高。（3）

CA19-9、CA50與CEA聯(lián)合檢測可提高陽性檢出率第八頁，共三十五頁，2022年，8月28日

前列腺特異性抗原(PSA)

血清PSA

分子形式：復(fù)合型PSA(t-PSA)參考值<4.0μg/LF/T比值＞0.25游離型PSA(f-PSA)參考值<1.0μg/L

（PSA）是一種僅由前列腺上皮細胞分泌的糖蛋白，當(dāng)正常腺管結(jié)構(gòu)遭到良性、惡性腫瘤或炎癥的破壞時，其血漿中PSA水平升高。正常人血清中PSA<4ug/L。第九頁，共三十五頁，2022年，8月28日血清PSA升高見于：

（1）前列腺癌患者可見血清PSA濃度升高。以血清t-PSA>4μg/L判斷陽性，則陽性率可達50%-80%。t-PSA血清濃度和陽性率隨著病程的進展而增高，因此，PSA可作為監(jiān)測前列腺癌病情變化和療效的重要指標(biāo)。（2）前列腺肥大、前列腺炎，也可見t-PSA和f-PSA水平輕度升高，必須結(jié)合其它檢查進行鑒別。（3）單獨使用t-PSA和f-PSA升高來診斷前列腺癌時很難排除前列腺增生癥，特別是當(dāng)t-PSA在5μg/L-10μg/L時。此時應(yīng)用t-PSA和f-PSA來判斷。t-PSA/f-PSA<10%提示前列腺癌，t-PSA和f-PSA比值>25%時提示前列腺增生癥。其特異性達90%,正確率>80%。第十頁，共三十五頁，2022年，8月28日

酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）

（EnzymelinkedlmmunosorbentAassay）【原理】把抗原抗體的免疫反應(yīng)和酶（主要有辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等）的高效催化作用有機地結(jié)合起來，并仍保持其免疫和酶的活性。結(jié)合在抗原抗體復(fù)合物上的酶在遇到相應(yīng)的底物時，可以催化底物水解、氧化或還原，從而產(chǎn)生有色的物質(zhì)。顏色反應(yīng)的深淺與抗體或抗原的量成正比。

【方法】主要有間接法和雙抗體夾心法第十一頁，共三十五頁，2022年，8月28日放射免疫指導(dǎo)外科（RIGS）radioimmunoguidedsurgery腫瘤外科手術(shù)有些難以確定腫瘤的浸潤的深度，具體邊緣及隱藏的部分。RIGS恰好能解決上述難題。該方法是將放射性核素如131I與特異性抗腫瘤單抗結(jié)合后，從靜脈或腔內(nèi)注入體內(nèi)可將放射性核素導(dǎo)向腫瘤的所在部位，顯示清晰的腫瘤影像，此種放射免疫顯像法是一種有較好應(yīng)用前景的腫瘤診斷技術(shù)。第十二頁，共三十五頁，2022年，8月28日

腫瘤的免疫學(xué)治療第十三頁，共三十五頁，2022年，8月28日腫瘤的免疫學(xué)治療1．

主動免疫治療

給機體輸入具有抗原性的瘤苗，刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗腫瘤免疫以達到治療腫瘤、預(yù)防腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的目的。2

被動免疫治療

給機體輸入外源性的免疫效應(yīng)物質(zhì)，使其在宿主體內(nèi)發(fā)揮抗腫瘤作用。3．

細胞因子治療4

腫瘤的基因治療

第十四頁，共三十五頁，2022年，8月28日一主動免疫治療腫瘤的特異性主動免疫治療(ASI)是指利用腫瘤細胞或腫瘤抗原物質(zhì)誘導(dǎo)機體的特異性細胞免疫和體液免疫，增強機體的抗瘤能力，阻止腫瘤的生長擴散和復(fù)發(fā)以治療腫瘤的方法。第十五頁，共三十五頁，2022年，8月28日（一）

細胞疫苗

1

基因修飾的腫瘤細胞

細胞因子的基因或MHCI分子的基因等轉(zhuǎn)移入腫瘤細胞，降低致瘤性，增強免疫原性。

2基因修飾的樹突狀細胞（DC）

第十六頁，共三十五頁，2022年，8月28日（二）分子疫苗腫瘤抗原疫苗

包括TAA/TSA疫苗、MHC抗原多肽復(fù)合疫苗、HSP-肽復(fù)合體疫苗，以及人工合成腫瘤肽疫苗等。熱休克蛋白(HSP)是在生物進化中高度保守、廣泛分布的蛋白質(zhì)，具有“分子伴侶”(moleculechaperone)作用，參與多種胞內(nèi)蛋白的折疊、裝配及轉(zhuǎn)運。從腫瘤組織中提取的HSP-肽復(fù)合體含有多種腫瘤相關(guān)肽，可誘導(dǎo)多個腫瘤特異性CTL克隆，發(fā)揮特異性殺傷作用，而且不受MHCⅠ類抗原限制，因此，HSP-肽復(fù)合體疫苗展示一定的應(yīng)用前景。與腫瘤發(fā)生有關(guān)的病毒疫苗病毒疫苗不僅可以預(yù)防病毒性疾病，更重要的可以預(yù)防或治療人類許多與病毒感染密切相關(guān)的腫瘤，如乙型肝炎病毒疫苗。目前，以病毒為載體與其他腫瘤抗原或多肽組成的重組病毒疫苗(如重組痘苗病毒)正在研制和I期臨床試驗之中?？躬毺匦涂贵w疫苗抗獨特型抗體作為抗原的內(nèi)影像，可模擬抗原的結(jié)構(gòu)并代替腫瘤抗原成為疫苗，誘發(fā)機體產(chǎn)生特異性抗腫瘤免疫應(yīng)答。制備簡便，只需以腫瘤特異性單克隆抗體作為免疫原，制備抗體并篩選具有內(nèi)影像作用的抗獨特型抗體，不需要分離或鑒別腫瘤抗原。抗獨特性疫苗的優(yōu)點在于不含抗原或抗原片段，制備起來經(jīng)濟，可大量人工合成?？躬毺匦钥贵w的分子量小，其免疫原性往往不完全，故需與免疫載體結(jié)合。采用抗獨特性抗體疫苗已治療了淋巴瘤、黑色素瘤、結(jié)腸癌、皮膚T淋巴細胞瘤、卵巢癌等，其臨床療效有待觀察。一組臨床試驗用抗獨特型抗體疫苗治療了40例惡性淋巴瘤，15％獲完全緩解、50％獲部分緩解，緩解期為6個月左右?？躬毺匦涂贵w疫苗治療的主要障礙是腫瘤內(nèi)存在獨特型陰性的細胞，因而可逃脫免疫反應(yīng)的攻擊。第十七頁，共三十五頁，2022年，8月28日（三）核酸疫苗

DNA疫苗是指人工克隆一段編碼腫瘤特異性抗原的DNA，并通過質(zhì)粒等方式注入機體，使其在體內(nèi)細胞中有效表達蛋白而成為腫瘤特異性抗原。這種抗原模仿了病毒蛋白等內(nèi)源性抗原的遞呈方式，解除了免疫耐受，誘導(dǎo)機體產(chǎn)生特異性抗腫瘤免疫應(yīng)答。DNA疫苗雖有許多問題有待研究，但顯示了誘人的前景。第十八頁，共三十五頁，2022年，8月28日二被動免疫治療1

免疫導(dǎo)向治療2過繼免疫療法第十九頁，共三十五頁，2022年，8月28日免疫導(dǎo)向療法將具有細胞毒作用的殺傷因子與單克隆抗體偶聯(lián)制成“生物導(dǎo)彈”，利用單抗能特異性結(jié)合腫瘤抗原的特性將殺傷因子“導(dǎo)向”腫瘤病灶，殺傷腫瘤細胞第二十頁，共三十五頁，2022年，8月28日常用的殺傷因子：放射性核素(131I)抗腫瘤藥物氨甲蝶呤臨床用于急性白血病，尤其是急性淋巴細胞性白血病，絨毛膜上皮癌及惡性葡萄胎等效果較好。對頭頸部腫瘤、乳腺癌、肺癌及盆腔腫瘤均有一定療效。

阿霉素主要適用于急性白血病，對急性淋巴細胞白血病及粒細胞白血病均有效，一般作為第二線藥物，即在首選藥物耐藥時可考慮應(yīng)用此藥。惡性淋巴瘤，可作為交替使用的首先藥物。乳腺癌、肉瘤、肺癌、膀胱癌等其他各種癌癥都有一定療效，多與其他抗癌藥聯(lián)合使用。

毒素蓖麻毒素由A、B兩條鏈組成。A鏈比B鏈稍短，兩鏈之間以一個二硫鍵相連接。當(dāng)毒素進入體內(nèi)，A、B鏈分開。A鏈通過滲透經(jīng)細胞膜進入細胞漿，主要使真核細胞的核糖體抑制失活，從而抑制蛋白質(zhì)的合成。B鏈與細胞表面結(jié)合，通過內(nèi)陷作用轉(zhuǎn)入細胞內(nèi)，它能促使A鏈進入胞漿。主要通過抑制蛋白質(zhì)合成來殺傷癌細胞

白喉毒素綠膿桿菌外毒素其中放射性核素應(yīng)用方便、標(biāo)記簡便，易顯像及定位定量檢測，并能破壞鄰近未被單抗結(jié)合的腫瘤細胞，因此應(yīng)用最多。第二十一頁，共三十五頁，2022年，8月28日二被動免疫治療

將自身或異體抗腫瘤效應(yīng)細胞或其前體細胞在體外進行誘導(dǎo)、激活和擴增，然后轉(zhuǎn)輸給腫瘤患者，提高患者抗腫瘤免疫力，以達到治療和預(yù)防復(fù)發(fā)的目的常見的免疫效應(yīng)細胞有LAK、TIL、CD3AK、CTL2.過繼免疫療法第二十二頁，共三十五頁，2022年，8月28日LAK（lymphokineactivatedkiller）用高濃度IL-2激活來自患者自體或正常供者的外周血單個核細胞，能夠殺傷NK不敏感腫瘤細胞TIL（tumorinfiltratinglymphocytes）從切除的瘤組織或癌性胸腹水中分離淋巴細胞，體外經(jīng)IL-2誘導(dǎo)激活擴增。TIL已應(yīng)用于臨床，主要治療皮膚、腎、肺、頭頸部、肝、卵巢部位的原發(fā)或繼發(fā)腫瘤。CD3AK（CD3antibodyactivatedkiller）抗CD3單抗輔以小劑量IL-2激活外周血單個核細胞。CD3AK細胞在體內(nèi)、外均有較強的抗瘤活性，目前已有報道在臨床應(yīng)用CD3AK細胞治療腎癌、黑色素瘤并取得一定的療效。但是由于腫瘤病人一般狀況較差，故從腫瘤病人身上大量抽取外周血誘導(dǎo)CD3AK細胞用于治療較為困難，采用健康成人外周血誘導(dǎo)CD3AK細胞經(jīng)體外激活擴增后輸給腫瘤病人則是較為可行的治療方法。CTL用特異性多肽抗原體外誘導(dǎo)CTL克隆第二十三頁，共三十五頁，2022年，8月28日三細胞因子療法將某些細胞因子注射體內(nèi)后，可調(diào)節(jié)、增強一種或多種免疫細胞的活性，發(fā)揮更強的抗腫瘤免疫功能目前臨床常用的細胞因子有IL-2、TNF-α、IFN-γ、CSF等第二十四頁，共三十五頁，2022年，8月28日增加MHC-I分子的表達緩解毛細胞白血病,對癌癥有弱的效應(yīng)IFN-α,IFN-βIFN-β增加MHC-I分子的表達,激活Tc和NK細胞緩解卵巢癌IL-2使T細胞活化和增殖,激活NK細胞緩解腎細胞癌和黑色素瘤TNF-α激活巨噬細胞和淋巴細胞減少惡性腹水細胞因子用于免疫治療第二十五頁，共三十五頁，2022年，8月28日四基因療法克隆某些可用于腫瘤治療的目的基因，體外轉(zhuǎn)染受體細胞，然后回輸體內(nèi)直接將目的基因體內(nèi)注射，使目的基因在體內(nèi)有效表達增強體內(nèi)抗腫瘤作用或改善腫瘤微環(huán)境以增強抗腫瘤免疫力第二十六頁，共三十五頁，2022年，8月28日目前常用的抗腫瘤目的基因細胞因子基因IL-2～12、IFN-γ、TNF-α、CSF等基因腫瘤抗原基因MAGE、CEA等基因MHC基因協(xié)同刺激分子基因CD54、LFA-3等基因腫瘤自殺基因TK、CD基因等抑癌基因RB基因、p53基因等第二十七頁，共三十五頁，2022年，8月28日非特異性免疫治療

是指應(yīng)用一些免疫調(diào)節(jié)劑通過非特異性地增強機體的免疫功能，激活機體的抗腫瘤免疫應(yīng)答，以達到治療腫瘤的目的。晚期腫瘤病人大多伴有免疫功能紊亂，在手術(shù)切除腫瘤后