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文檔簡介
試驗一 胞間連絲的觀看一、試驗目的:觀看植物細胞間的胞間連絲,進一步細胞間的物質運輸與信號傳遞起橋梁作用。二、試驗用具:1、器材:顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子等三、試驗內(nèi)容:1、紅辣椒表皮細胞臨時裝片制作:觀看胞間連絲,剪取一小塊紅辣椒,用小刀留神刮除果肉,留下一層極薄的表皮,置于載玻片上,滴一滴清水,蓋蓋片,吸水后即可。2、玉米籽粒糊粉層臨時裝片制作:玉米籽粒用鑷子剝?nèi)ケ砥ず?,露出糊粉層,制把切好的薄片置于載玻片上,加一滴清水后蓋片,即可觀看。3、柿子胚乳細胞永久裝片的觀看。四、留意事項:光線不要太亮五、作業(yè):1、完成試驗報告,并繪胞間連絲圖。2、胞間連絲屬于哪種細胞連接,有何生物學功能?試驗二植物細胞原生質流淌的觀看一、試驗目的在活細胞中,原生質流淌是細胞活力強弱的重要指標。通常認為,原生質流淌是原生質中微絲肌動蛋白與肌球蛋白相互滑溫度、滲透壓、機械損傷等的影響。通過試驗響因素。二、試驗用品:1、材料:黑藻2、器材:顯微鏡、載玻片、蓋玻片等三、試驗內(nèi)容:1、黑藻葉片細胞質流淌的觀看取黑藻葉片制作臨時裝片并觀看,留意流速,并記錄。2、用溫水浸泡,再觀看其流淌速度有無改變,并記錄。3、用照明燈照耀一段時間后再觀看其流淌速度有無轉變,并記錄。四、作業(yè):1、如何理解細胞原生質流淌的原理?2、細胞質環(huán)流有何特點?3、圖示細胞質環(huán)流。一、試驗原理:活體染色是指對生活有機體的細胞或B可專一性地對線粒體進展超活染色,這是由于線粒體內(nèi)的細胞色素氧化酶系的作用,使染料始終保持氧化狀態(tài)〔即有色狀態(tài)〕呈現(xiàn)藍懸浮綠色,而線粒體四周的細胞質中,這些染料被復原為無色的色基。二、試驗器材:詹納斯綠B三、試驗內(nèi)容:〔一〕線粒體超活染色1、取清潔載玻片放在37℃恒溫水浴鍋的金2B染色液。2、用牙簽取口腔上皮細胞放置于染色液的15分鐘〔留意:染色液不能枯燥〕蓋片,吸出多余的染色液即可觀看,線粒體為藍綠色顆?;蚨贪魻畹臉嬙臁!捕秤谰醚b片的觀看1、線粒體 2、中心體四、作業(yè):試驗報告、并繪線粒體形態(tài)圖試驗四 葉綠體的分別與觀看一、試驗原理:組織勻漿后懸浮在等滲介質中進展差速離心,是分別細胞器的常用方法。一個顆粒在離心場中的沉降速率取決于顆粒的大小,外形和密度,也同離心力以及懸浮介質的粘度有關。在肯定的離心場中,同一時間內(nèi),密度不同,大小不同、沉降速度不同,細胞組分。二、材料與用具:離心機、組織勻漿器、天平、紗布、菠菜等三、試驗內(nèi)容:1、選取穎嫩菠菜葉,洗凈擦干后去除葉30g150ml0.35mol/LNaCl溶液中裝入研缽搗碎;2、將勻漿用紗布過濾于燒杯中;34ml1000r/min2分鐘,棄沉淀;4、將上清液在3000r/min下離心5分鐘,棄上清,沉淀即是葉綠體;50.35mol/L氯化鈉溶液懸浮。6、取葉綠體懸液制臨時裝片觀看。四、作業(yè):完成試驗報告,并繪圖。試驗五 細胞膜的通透性一、試驗目的:1、觀看細胞膜的通透性及各類物質進入細胞的速度。2、了解細胞膜通透性的一般規(guī)律。二、試驗原理:放在低滲溶液中,水分子會大量滲到細胞內(nèi),使細胞脹破,血紅細胞釋放到介質中,的透性不同,有的溶質可以滲入,有的溶質滲透壓,所以促進水分進入細胞,隨著水分的不斷進入紅細胞最終裂開,即引起溶血。不同。因此,發(fā)生溶血現(xiàn)象所需時間長短可作為測量物質進入紅細胞速度的一種指標。三、試驗用品:剪刀,試管等四、試驗材料:兔血五、試驗步驟:1、制備兔紅細胞懸液取兔靜脈血20ml〔加抗凝劑3.8%檸檬酸鈉,以1份兔血加10份0.17mol/L鈉溶液配制兔紅細胞懸液。2、低滲溶血的觀看13mL蒸餾水,再參加0.5ml紅細胞懸液,觀看溶液顏色的變化,100%紅細胞溶血。3、兔紅細胞的滲透性取試管1支,參加0.17mol/l氯化鈉3mL,再參加0.5ml象?分析緣由。取試管9支,編號后分別參加其他9種等滲溶液各3ml,再逐一參加0.5ml紅細胞懸液,分別登記時間,輕輕搖動,觀看溶某種溶液的溶血時間等于自參加紅細胞懸液到溶液變成紅色透亮所需的時間。4、溶血結果推斷:不溶血:液體分兩層,上層淺黃色,下層紅色不透亮,鏡檢紅細胞完好。,鏡檢紅細胞有局部裂開。完全溶血:液體變紅而透亮,鏡檢紅細胞全部呈碎片。六、作業(yè):1、統(tǒng)計不同等滲溶液的溶血狀況。2、爭論溶血試驗在爭論中應用的可能性。試驗六 相差顯微鏡觀看口腔上皮細胞帶相板的物鏡,合軸調(diào)中望遠鏡及濾色片,這些特別裝置能使活細胞或未經(jīng)染色的標生相位差,然后利用光的衍射和干射原理,把相位差變成振幅〔明暗差〕之差,使人的肉眼能夠辯認出來。二、試驗用具:相差顯微鏡、一般顯微鏡、解剖器具三、試驗內(nèi)容:理濾光片、調(diào)中望遠鏡2、口腔上皮細胞臨時裝片的制備與一般光鏡下的觀看。3四、留意事項:制備樣品時,防止產(chǎn)生氣泡五、作業(yè):調(diào)好口腔上皮細胞的相差像后,比照一般明視野的像和相差像,畫圖說成像特點。試驗七細胞熒光染色觀看與熒光顯微鏡的使用一、試驗目的:1、初步了解熒光顯微鏡的根本組件、位置和根本原理。2、學習細胞熒光染色的根本方法。二、試驗用具:12、用具:熒光顯微鏡、鑷子、蓋玻片等三、試驗內(nèi)容:1P8熒光:物質中電子吸取光的能量由低能轉變?yōu)楦吣軤顟B(tài),再回到低能狀態(tài)時釋放出的光。熒光顯微鏡組件:光源、激發(fā)濾片、雙色反射鏡、阻斷濾片、物鏡、目鏡等。熒光顯微鏡的成像原理,2蛙血——涂片——晾干——甲醇固定,10分鐘——1%分鐘——水洗——枯燥3撕取內(nèi)表皮——鋪展于玻片上——晾干——1%分鐘——水洗——枯燥4撕取綠色植物葉表皮細胞制作臨時裝片,即可觀看。四、留意事項:1、熒光顯微鏡要在光線盡量暗的環(huán)境下觀看。2五、作業(yè):簡述熒光顯微鏡的主要部件和根本光路。試驗八細胞融合一、試驗目的:1PEG誘導細胞融合的根本原理。2、通過試驗,初步把握細胞融合的技術。二、試驗原理:兩個或兩個以上的細胞合成為一個雙核雜交。常用的誘導方法有病毒誘導融合、化融合,進而細胞質溝通,形成一個大的雙核或多核融合細胞。三、試驗材料與用具:P89四、試驗步驟:1、在公雞翼下靜脈抽取2mL雞血,參加盛有8mL的Alsever液中,使血液與Alsever1:4,混勻。21ml4ml0.85%生理鹽水,充分混勻,800r/min離心3min,棄上清,重復上述條件離心兩次。最終棄上GKN4ml離心,1000r/min,5min。3、棄上清,加GKN液制成10%細胞懸液。41ml于離心管中,放入37℃水浴中預熱,同時將50%PEG液20min。5、200.5ml50%PEG溶液逐1mL細胞懸液中,邊加邊搖勻,然后放入37℃水浴中保溫20min。620GKN8mL,靜止于水浴中20min。7、800r/min離心3min,棄上清,加GKN1次。8、棄上清,參加GKN液少許,混勻,取少量制臨時裝片觀看細胞融合狀況。五、作業(yè):1、繪制細胞融合圖像。2、分析試驗中遇到的問題及其解決方法。試驗九 植物凝集素對紅細胞的凝集作用一、試驗目的:1、學習植物凝集素的提取方法;2、觀看紅細胞的凝集現(xiàn)象。二、試驗原理:細胞外被是指細胞質膜外外表的一層黏多糖物質,它在細胞間的聯(lián)系和識別、細胞發(fā)揮重要作用。向膜的外表,它們是細胞識別、細胞免疫及一類含糖的,并能與糖專一結合的蛋白質,集素使細胞凝集是由于它與細胞外表的糖分子連接,在細胞間形成“橋”的結果。凝集素與糖分子結合有肯定的專一性和結合價,并與細胞膜上受體的分布有關。三、試驗用具:離心機、天平、顯微鏡、試管、注射器等四、試驗材料:土豆塊莖或蕓豆粒,家兔1只五、試驗步驟120g,加100mlPBS2出的粗提取液過濾,即為土豆凝集素提取液。2
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