標準解讀

《GB/T 40255-2021 對蝦肝胰腺細小病毒病診斷規(guī)程 PCR檢測法》是一項國家標準,專門針對對蝦肝胰腺細小病毒(HPV)的診斷提供了一套基于PCR技術的方法。該標準適用于對蝦養(yǎng)殖過程中疑似感染HPV病例的確診以及相關研究。

在本標準中,首先明確了實驗所需材料與試劑,包括但不限于DNA提取試劑盒、特異性引物、Taq酶等,并且強調了這些試劑的質量要求,以保證后續(xù)操作能夠順利進行并得到準確的結果。對于樣品采集方面,則詳細描述了從活體或冷凍保存狀態(tài)下的對蝦中獲取組織樣本的具體步驟,推薦使用肝胰腺作為主要檢測部位,因為這是病毒最易累積的地方之一。

接著,標準給出了詳細的DNA提取流程,采用商業(yè)化試劑盒結合特定的操作指南來完成這一過程。之后是PCR反應體系建立部分,這里不僅列出了各種成分如模板DNA、上下游引物、dNTPs等的具體用量,還規(guī)定了擴增條件,比如預變性溫度時間、循環(huán)次數(shù)及每個循環(huán)中的退火延伸參數(shù)等。通過優(yōu)化這些參數(shù)設置,可以大大提高目標片段的擴增效率和特異性。

此外,《GB/T 40255-2021》還特別提到了結果分析方法,即如何根據(jù)電泳圖譜判斷是否存在陽性信號,以及如何處理可能出現(xiàn)的假陰性或假陽性情況。同時,為了確保整個檢測過程的有效性和可靠性,標準還設置了內部對照實驗,用以監(jiān)控每批次實驗的一致性和準確性。

最后,在質量控制章節(jié)里,標準提出了關于實驗室環(huán)境、人員培訓、儀器校準等方面的要求,這些都是保障檢測結果真實可靠不可或缺的因素。通過遵循這套標準化的操作流程,科研人員和水產養(yǎng)殖從業(yè)者能夠更加高效準確地識別出受HPV感染的對蝦個體,從而采取相應措施減少疾病傳播風險。


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  • 現(xiàn)行
  • 正在執(zhí)行有效
  • 2021-05-21 頒布
  • 2021-12-01 實施
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GB/T 40255-2021對蝦肝胰腺細小病毒病診斷規(guī)程PCR檢測法_第1頁
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文檔簡介

ICS6502030

CCSB.41.

中華人民共和國國家標準

GB/T40255—2021

對蝦肝胰腺細小病毒病診斷規(guī)程

PCR檢測法

Codeofdiagnosisforinfectionwithhepatopancreaticparvovirusof

penaeidshrimp—PCRmethod

2021-05-21發(fā)布2021-12-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標準化管理委員會

GB/T40255—2021

前言

本文件按照標準化工作導則第部分標準化文件的結構和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任

。。

本文件由中華人民共和國農業(yè)農村部提出

。

本文件由全國水產標準化技術委員會歸口

(SAC/TC156)。

本文件起草單位中國水產科學研究院黃海水產研究所全國水產技術推廣總站

:、。

本文件主要起草人楊冰萬曉媛黃倢余衛(wèi)忠史成銀張鋒宋曉玲李清張慶利許華李晨

:、、、、、、、、、、、

劉莉

。

GB/T40255—2021

對蝦肝胰腺細小病毒病診斷規(guī)程

PCR檢測法

1范圍

本文件規(guī)定了對蝦肝胰腺細小病毒病診斷規(guī)程中普遍適用的核酸檢測技術的要求針對肝胰腺細

,

小病毒給出了檢測法所需試劑或材料儀器設備樣品試

(Hepatopancreaticparvovirus,HPV),PCR、、、

驗步驟和結果判定

。

本文件適用于對蝦各生活期樣品中帶毒情況的定性檢測以進行對蝦肝胰腺細小病毒病的

HPV,

流行病學調查診斷檢疫和監(jiān)測

、、。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對應的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

白斑綜合征診斷規(guī)程第部分組織病理學診斷法

GB/T28630.4—2012(WSD)4:

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義

。

4縮略語

下列縮略語適用于本文件

堿基對

bp:(basepair)

脫氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

脫氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)

溴化乙錠

EB:(ethidiumbromide)

乙二胺四乙酸

EDTA:(ethylenediaminetetraaceticacid)

鹽酸

HCl:(hydrogenchloride)

肝胰腺細小病毒

HPV:(hepatopancreaticparvovirus)

氫氧化鈉

NaOH:(sodiumhydroxide)

聚合酶鏈式反應

PCR:(polymerasechainreaction)

十二烷基硫酸

SDS:(sodiumdodecylsulfate)

Ta水生棲熱菌thermusauaticus

q:(q)

鹽酸和緩沖液

TE:TrisED

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