干化學(xué)技術(shù)及優(yōu)勢(shì)項(xiàng)目

強(qiáng) 生 干化學(xué)技術(shù)

及優(yōu)勢(shì)項(xiàng)目

介紹內(nèi)容：干化學(xué)技術(shù)優(yōu)勢(shì)項(xiàng)目Vitros950臨床實(shí)驗(yàn)室類產(chǎn)品（生化）：DT60,V350/250,V950,Fusion5.1DT60IIVitros350VitrosFusion5.1OrthoClinicalDiagnosticsMicroSlide－多涂層薄膜干片技術(shù)擴(kuò)散層擴(kuò)散層試劑層試劑層指示劑層指示劑層支持層支持層標(biāo)本MicroSlide多涂層薄膜干片技術(shù)：將所需試劑預(yù)固相在多層薄膜和郵票大小的透明支持基墊之上。當(dāng)血漿，血清，尿液或腦脊液與這些已含化學(xué)物質(zhì)的干式薄膜接觸時(shí)發(fā)生反應(yīng)并對(duì)反應(yīng)信號(hào)進(jìn)行測(cè)量。干片分類CM/RTPMIR干片(MicroSlide)鈉鉀氯地高辛苯巴比妥卡馬西平苯妥因C反應(yīng)蛋白膽固醇 甘油三酯總蛋白 白蛋白高密度酯蛋白脂肪酶尿蛋白

腦脊液蛋白谷丙轉(zhuǎn)氨酶谷氨酸轉(zhuǎn)移酶堿性磷酸酶 r谷氨酰轉(zhuǎn)酞酶乳酸脫氫酶 肌酸激酶肌酸激酶同工酶尿素氮肌酐 尿酸

乳酸 鐵、總鐵結(jié)合力磷 鋰淀粉酶膽堿脂酶總膽紅素結(jié)合/非結(jié)合膽紅素血氨乙醇水楊酸茶堿醋氨酚鎂二氧化碳比色/速率法干片免疫速率法干片電極法干片

指示劑層支持層擴(kuò)散層試劑層比色/速率法干片通過測(cè)定干片顏色變化來確定化合物濃度

指示劑層支持層

多孔結(jié)構(gòu)，允許標(biāo)本通過均勻分布標(biāo)本過濾大分子（蛋白質(zhì)，脂肪等）去除干擾物質(zhì)（溶血，黃疸等）提供反射測(cè)定的背景擴(kuò)散層試劑層擴(kuò)散層比色/速率法干片結(jié)構(gòu)試劑層

擴(kuò)散層試劑層指示劑層支持層

包含檢測(cè)反應(yīng)所需的酶，緩沖液，催化劑等多層試劑，控制反應(yīng)順序比色/速率法干片結(jié)構(gòu)葡萄糖干片指示劑層

擴(kuò)散層試劑層

指示劑層支持層試劑層產(chǎn)物與指示劑層中的染料結(jié)合時(shí)，形成有色復(fù)合物，其與分析物濃度成正比。比色/速率法干片結(jié)構(gòu)支持層

擴(kuò)散層試劑層

指示劑層

支持層

提供反應(yīng)支持基墊允許光路自由通過比色/速率法干片結(jié)構(gòu)反射光的測(cè)定干擾物質(zhì)反光背景成色層生成純凈的反射光光源濾光片接收器接收器接收器透射與反射光線經(jīng)過干擾物質(zhì)光線不經(jīng)過干擾物質(zhì)受影響不受影響尿酸優(yōu)異的抗干擾能力MicroSlide多層涂膜技術(shù)可以針對(duì)不同檢測(cè)項(xiàng)目使用加以不同成份的薄膜以達(dá)到最佳的檢測(cè)結(jié)果某些干片中有清道夫?qū)樱ㄈ缒蛩幔喝コS他命C和鈣的干擾某些干片試劑層下有半透膜層（如尿素氮）：去除藥物干擾半透膜尿素氮－溶血－血脂－膽紅素等能有效排除標(biāo)本中對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成的影響優(yōu)異的抗干擾能力優(yōu)勢(shì)項(xiàng)目——膽紅素HPLC分離的膽紅素各組分巨細(xì)胞肝炎嬰兒血清a=游離膽紅素b=單葡萄糖醛酸酯結(jié)合膽紅素g=雙葡萄糖醛酸酯結(jié)合膽紅素d=和白蛋白共價(jià)結(jié)合膽紅素Figure1,OstreaEM,OngtengcoEA,ToliaVA,ApostolE.JPediatrGastroenterolNutr1988;7:511-516.△膽紅素在血液循環(huán)中結(jié)合膽紅素和白蛋白形成的。白蛋白緩慢地非酶作用置換了原葡萄糖醛酸酯。類似于糖化血紅蛋白。在長(zhǎng)期的高結(jié)合膽紅素血癥后，才能檢測(cè)出來。在血液循環(huán)中的清除緩慢。半衰期和白蛋白一樣，2～3周。因?yàn)槟懠t素不存在氫鍵的影響，所以膽紅素可以與重氮直接膽紅素反應(yīng)。傳統(tǒng)的膽紅素檢測(cè)方法偶氮方法(Ehrlich1883).由vandenBerghandMuller(1916)應(yīng)用于膽紅素檢測(cè)。直接膽紅素反應(yīng)快速。間接膽紅素反應(yīng)緩慢或不反應(yīng)（分子折疊，不溶性）。需要某些物質(zhì)的存在，才會(huì)打開游離膽紅素，使溶解在水，并和偶氮試劑反應(yīng)。直接膽紅素國(guó)內(nèi)長(zhǎng)期來，誤解了結(jié)合膽紅素參與反應(yīng)非?？?，整個(gè)反應(yīng)只要1分鐘，被稱為“1分鐘膽紅素”。結(jié)合膽紅素參與反應(yīng)的影響因素很多。例如：反應(yīng)時(shí)使用的重氮試劑的濃度、pH、反應(yīng)時(shí)間等。結(jié)合膽紅素的重氮反應(yīng)的初期確實(shí)很快，但是，要使所有結(jié)合膽紅素完全參與反應(yīng)，需要30分鐘以上。目前推薦10分鐘的方法。目前任何一個(gè)在自動(dòng)分析儀上的直接膽紅素測(cè)定都是不完全的（如：反應(yīng)時(shí)間太短）。少量游離膽紅素也參與直接反應(yīng)血清中的少量游離膽紅素也會(huì)參與直接反應(yīng)。因?yàn)檠逯杏心蛩?、尿酸等，早期的研究已?jīng)肯定，這些物質(zhì)的存在，具有促使游離膽紅素打開氫鍵、參與直接反應(yīng)的可能。按照膽紅素的代謝途徑，在健康人的血清中，只有由白蛋白攜帶的游離膽紅素；被肝臟處理過的結(jié)合膽紅素經(jīng)膽管進(jìn)入腸道，不會(huì)進(jìn)入血液。所以健康人的血清內(nèi)不應(yīng)該有結(jié)合膽紅素。傳統(tǒng)膽紅素檢測(cè)方法具有加速劑的偶氮反應(yīng)=總膽紅素。不加加速劑的偶氮反應(yīng)=“直接反應(yīng)膽紅素”(vandenBergh)或簡(jiǎn)稱為直接膽紅素。間接膽紅素為總膽紅素減去直接膽紅素。Vitros膽紅素檢測(cè)方法現(xiàn)今已廣泛應(yīng)用(2003年的CAP調(diào)查中在4964個(gè)實(shí)驗(yàn)室中，有1191個(gè)使用該法）?？偰懠t素干片還是傳統(tǒng)的偶氮方法。

BuBc干片(游離膽紅素Bu、結(jié)合膽紅素Bc）為非傳統(tǒng)方法。BuBc干片由EastmanKodak在1980s早期開發(fā)。使用染媒劑，不是試劑。染媒劑是什么？染媒劑可以區(qū)分結(jié)合膽紅素和游離膽紅素的最大反射差。在技術(shù)上的一個(gè)機(jī)遇。BuBc干片技術(shù)原理實(shí)線為Bu,虛線為Bc.反射最大峰:Bu460,Bc420nm.在400(二者反射強(qiáng)度相同)和460nm(最大反射差)閱讀。FromWuT-W,DappenGM,SpaydRWetal,ClinicalChemistry1984;30.8:1304-9.HPLCPEAKHPLC峰ALPHAα峰BETAβ峰GAMMAγ峰DELTAδ峰BilirubinSpecies膽紅素類別Unconjugated未結(jié)合型膽紅素SinglyConjugated單一結(jié)合型膽紅素DoublyConjugated雙重結(jié)合型膽紅素Conjugatedtoalbumin白蛋白結(jié)合型膽紅素TraditionalMethods傳統(tǒng)測(cè)定方法TotalBilirubin(T-BIL)總膽紅素(T-BIL)Indirect#（I-BIL）(Total－Direct)間接膽紅素(I-BIL)（T-BIL－D-BIL）*灰色區(qū)域DirectBilirubin（D-BIL）直接膽紅素(D-BIL)VITROSMethodsVITROS測(cè)定方法TotalBilirubin(TBIL)總膽紅素（TBIL）Unconjugated(Bu)未結(jié)合膽紅素（Bu）Conjugated(Bc)結(jié)合膽紅素（Bc）Delta(DELB)#(TBIL－[Bu＋Bc])Delta膽紅素(DELB)（TBIL－[Bu＋Bc]）BuDirectBilirubin(D-BIL)#(TBIL－Bu)直接膽紅素（D-BIL）(TBIL－Bu)NeonateBilirubin(NBIL)#(Bu＋Bc)

新生兒膽紅素(NBIL)(Bu＋Bc)DELB膽紅素的臨床應(yīng)用黃疸的鑒別診斷黃疸是指高膽紅素血癥引起皮膚、鞏膜和粘膜等組織黃染的現(xiàn)象。按原因分為溶血性黃疸；細(xì)胞性黃疸；膽汁淤積性黃疸；先天性非溶血性黃疸；多因性黃疸。按黃疸發(fā)生的部位肝前性黃疸(溶血性和非溶血性)；肝性黃疸(肝細(xì)胞性和肝膽小管性即肝內(nèi)膽淤性)；肝后性(肝外梗阻性)。成功的肝膽梗阻再通后Kubasiketal.AmJClinPath1985:84;518050100123456789Days%總膽百分比BuBcBdeltaDirectTreatment膽紅素組分的臨床應(yīng)用△膽紅素（Bδ）高結(jié)合膽紅素血癥，尤其是阻塞性黃疸時(shí)，Bc的快速下降（Bc的半衰期僅幾個(gè)小時(shí)）是阻塞完全消退的最敏感指標(biāo)。不能用檢測(cè)總膽紅素來評(píng)價(jià)高結(jié)合膽紅素血癥，因?yàn)樵跈z測(cè)的總膽紅素中包含了半衰期為2-3周的Bδ。理想的是，使用只檢測(cè)Bc的方法，臨床可較好地評(píng)價(jià)高結(jié)合膽紅素血癥。

真實(shí)的結(jié)合膽紅素優(yōu)于直接膽紅素膽道阻塞解除后，結(jié)合膽紅素下降迅速。直接（和總）膽紅素仍然保持高水平達(dá)數(shù)周。（D膽紅素的存在）容易產(chǎn)生誤解，認(rèn)為阻塞沒有解決。優(yōu)勢(shì)項(xiàng)目——電解質(zhì)電極法干片

離子選擇電極技術(shù)直接法測(cè)定兩電極間電勢(shì)不同鉀，鈉，氯鹽橋S2S1S3S4aIar離子載體膜M+ClAgCl

Ag離子載體膜M+ClAgClAgaIarVV干片常規(guī)已知濃度液體(參比液)待測(cè)液體(標(biāo)本)離子選擇電極(ISE)鹽橋ar直接法vs.間接法ISE游離離子已結(jié)合形式復(fù)合形式濕化學(xué)間接法所測(cè)量的離子直接法所測(cè)量物質(zhì)水相(血清)非水相(血脂,蛋白質(zhì))直接法測(cè)量間接法測(cè)試到的體積（93％水相）

直接法直接測(cè)量具有臨床意義的活性離子。

間接法不能糾正由蛋白質(zhì)，血脂增高引起的檢測(cè)結(jié)果偏離間接法ISE電解質(zhì)排斥效應(yīng)標(biāo)本10微升，非水相5％，水相9.5微升稀釋100倍，加入稀釋液990微升，水相999.5微升實(shí)際稀釋倍數(shù)＝999.5／9.5＝105.211如果標(biāo)本中含K3.50mmol/L;Na14