血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與基因治療探析,細(xì)胞生物學(xué)論文

血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與基因治療探析,細(xì)胞生物學(xué)論文摘要：隨著血管內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelialprogenitorcell,EPC)研究的深切進(jìn)入，EPC的分離、體外培養(yǎng)、鑒定及在血管相關(guān)性疾病(如缺血性疾病)和各種腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用及功能已成為新的研究熱門。EPC具有分化功能，增殖能力極強(qiáng)，體外擴(kuò)增培養(yǎng)速度快，主要存在于外周血、臍血、骨髓中，且容易獲取，是干細(xì)胞移植療法理想的種子細(xì)胞來源。當(dāng)前，EPC在治療心腦血管、肢體缺血性疾病等方面的研究特別活潑踴躍，并初步獲得了肯定的成果。本文主要就EPC在再生醫(yī)學(xué)中的細(xì)胞治療及基因治療上的應(yīng)用作一綜述。本文關(guān)鍵詞語：內(nèi)皮祖細(xì)胞;再生醫(yī)學(xué);細(xì)胞治療;基因治療;Abstract：Withthefurtherstudyofendothelialprogenitorcell(EPC),theisolation,invitrocultureandidentificationofEPCandtheirrolesinthepathogenesisandprogressofvasculardiseasessuchasischemicdiseasesaswellasvarioustumorshavebecomethenewfocusinthefieldofresearch.EPChaveadifferentialfunctionandstrongproliferationabilityandwerepropagatedrapidlyinvitro,whichmainlyexistinperipheralblood,umbilicalcordbloodandbornmarrowandisanidealsourceofcellseedforstemcelltransplantationtherapy.Atpresent,EPCwereresearchedactivelyinthefieldoftherapyofcardiovascularandcerebrovasculardiseasesandlimbischemicdiseases,inwhichthedefiniteachievementshavebeenobtained.ThispaperdescribestheapplicationofEPCincelltherapyandgenetherapyinregenerativemedicine.Keyword：Endothelialprogenitorcell(EPC);Regenerativemedicine;Celltherapy;Genetherapy;再生醫(yī)學(xué)是一個牽涉干細(xì)胞、組織工程、細(xì)胞與分子生物學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、生物化學(xué)等多個學(xué)科領(lǐng)域的新興學(xué)科，是通過研究機(jī)體的正常組織特征及功能、創(chuàng)傷修復(fù)及再生機(jī)制和干細(xì)胞分化機(jī)制，尋找有效的生物治療方式方法，促進(jìn)機(jī)體自我修復(fù)及再生，或構(gòu)建新的組織及器官，以改善或恢復(fù)損傷組織和器官功能的學(xué)科，主要包括干細(xì)胞、組織工程、細(xì)胞治療、器官移植等多個研究領(lǐng)域。近年來隨著細(xì)胞生物學(xué)尤其是干細(xì)胞生物學(xué)的飛速發(fā)展，細(xì)胞治療在基礎(chǔ)研究領(lǐng)域獲得了很大的進(jìn)展，部分基礎(chǔ)研究成果已開場在心血管系統(tǒng)疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、肌肉骨骼相關(guān)疾病、糖尿病等多種疾病的臨床試驗中得到應(yīng)用，并獲得了初步的研究成果，展示了廣闊的臨床應(yīng)用前景。血管內(nèi)皮祖細(xì)胞〔endothelialprogenitorcell,EPC〕作為治療缺血性疾病的候選細(xì)胞，具有易于從外周血中獲得、有效的血管生成和血管生成效應(yīng)、血統(tǒng)的穩(wěn)定性和較低的致瘤性等特征，這些特征引起了很多關(guān)于其治療性新血管構(gòu)成的可能效用的研究。造血EPC由于其利于提取和分離，利于體外培養(yǎng)和擴(kuò)增，在這些應(yīng)用中具有一定的潛力。1、細(xì)胞治療1.1、EPC移植治療缺血性心臟病1.1.1、經(jīng)冠狀動脈移植2018年，SEN等[1]通過體外擴(kuò)張，對骨髓源性EPC的再生潛力進(jìn)行了調(diào)整，以治療心肌缺血。他們通過有效的基因改造來提高EPC的功能，在大鼠心肌梗死模型中，利用腺相關(guān)病毒〔adeno-associatedvirus,AAV〕擴(kuò)大和轉(zhuǎn)導(dǎo)周圍的血液EPC。通過左前降冠狀動脈阻塞而心肌梗死的成年大鼠，接受經(jīng)冠狀動脈移植的AAV-IGF-1轉(zhuǎn)導(dǎo)的自體EPC，結(jié)果顯示，表示出IGF-1的EPC導(dǎo)致心肌細(xì)胞凋亡減少，心肌細(xì)胞增殖增加，梗塞部位毛細(xì)血管數(shù)量增加。因而，經(jīng)冠狀動脈移植的表示出IGF-1的EPC在大鼠心臟梗塞中表現(xiàn)出良好的細(xì)胞保衛(wèi)作用。2021年，LEE等[2]提出一個假設(shè)，即對于不合適進(jìn)行冠狀動脈參與治療的嚴(yán)重彌漫性冠狀動脈疾病患者的缺血相關(guān)性左心室功能障礙，可通過來源于外周血的循環(huán)式自體CD34+細(xì)胞內(nèi)冠狀動脈輸血得到改善。他們進(jìn)行了一系列的臨床試驗，以測試兩種不同濃度的CD34+細(xì)胞在嚴(yán)重彌漫性冠狀動脈疾病中治療的有效性和安全性，并同時驗證了來源于外周血的循環(huán)式自體CD34+細(xì)胞內(nèi)冠狀動脈輸血的細(xì)胞療法對于不合適冠狀動脈參與治療且藥物療法反響差的嚴(yán)重彌漫性冠狀動脈疾病患者的心功能能否是安全有效的。在研究中，納入了38例患有嚴(yán)重彌散性冠狀動脈疾病的患者，并隨機(jī)分為2組，分別經(jīng)冠狀動脈注射濃度為1.0107和3.0107個的CD34+細(xì)胞，通過隨訪和調(diào)查后，結(jié)果顯示，經(jīng)冠狀動脈移植CD34+細(xì)胞后，兩組患者冠狀竇血液樣本中的EPC含量高于外周血液，左心室射血分?jǐn)?shù)增加，心絞痛和心力衰竭得到改善。因而，經(jīng)冠狀動脈移植的CD34+細(xì)胞療法對于不合適冠狀動脈參與治療且藥物療法反響差的嚴(yán)重彌漫性冠狀動脈疾病患者的心功能是安全有效的。1.1.2、經(jīng)心外膜心肌注射移植2020年，KAMATA等[3]通過實驗證實了伴隨EPC心外膜心肌注射誘導(dǎo)移植的心臟干細(xì)胞在治療慢性缺血性心肌病中，比用心臟干細(xì)胞單獨治療，能夠進(jìn)一步促進(jìn)新生血管的構(gòu)成和心肌纖維化的減少，講明伴隨EPC心外膜心肌注射的心臟干細(xì)胞對慢性缺血性心肌病的治療效果較單獨移植心臟干細(xì)胞更安全有效。QUAN等[4]通過一系列試驗研究了胸腺素4(T4〕對T4處理的EPC在梗塞心肌中經(jīng)心肌內(nèi)注射后對血管生成和心臟功能的影響。他們從成年雄性大鼠的骨髓中分離EPC，并在內(nèi)皮基礎(chǔ)培養(yǎng)基-2中孵育，然后分別用濃度0.05、0.1和0.2mol/L的T4處理細(xì)胞，同時用DMEM孵育的細(xì)胞作為對照，結(jié)果表示清楚，T4能夠加強(qiáng)EPC的活力，促進(jìn)細(xì)胞增殖和遷移以及細(xì)胞內(nèi)毛細(xì)血管樣構(gòu)造的構(gòu)成，還能增加細(xì)胞中p-Akt的表示出，經(jīng)T4處理的EPC可改善心肌功能，加強(qiáng)梗塞心肌的修復(fù)，促進(jìn)梗死心肌移植后的血管新生，因而，用T4預(yù)處理EPC可能是心肌梗死移植后缺血組織修復(fù)的新策略。但經(jīng)心外膜心肌內(nèi)注射EPC移植誘發(fā)室性心律失常的風(fēng)險尚需進(jìn)一步觀察。1.1.3、經(jīng)心內(nèi)膜心肌注射移植2021年，PREMER等[5]提出了間質(zhì)干細(xì)胞〔mesenchymalstemcells,MSC〕能夠增加EPC的功能和恢復(fù)血流介導(dǎo)的血管舒張的假設(shè)。在研究中，特發(fā)性擴(kuò)張和缺血性心肌病患者被隨機(jī)分配接受自體或同種異體的MSC，比擬了MSC經(jīng)心內(nèi)膜注射前后3個月以及健康對照組的EPC-集落構(gòu)成單位及血管舒張功能和血管內(nèi)皮生長因子的循環(huán)水平，結(jié)果顯示，MSC能夠?qū)е鹿δ苄訣PC的增殖和血管反響性的改善，進(jìn)而使心力衰竭患者的內(nèi)皮功能恢復(fù)正常。1.1.4、外周血管內(nèi)注射移植EPC經(jīng)外周血管內(nèi)注射移植的優(yōu)點包括移植簡單、易行、不需要復(fù)雜設(shè)備和技術(shù)以及可通過血液循環(huán)定期、定時、持續(xù)向缺血病變部位進(jìn)行移植，進(jìn)而維持缺血組織有效的EPC濃度提高療效。研究表示清楚，集落細(xì)胞刺激因子[6]、血管內(nèi)皮生長因子[7]等細(xì)胞因子以及血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑[8]、促紅細(xì)胞生成素[9]、他汀類調(diào)脂藥[10]、銀杏葉提取物[11]等均具有發(fā)動EPC的功能，如HONOLD等[12]對慢性心衰患者注射集落細(xì)胞刺激因子后發(fā)現(xiàn)，集落細(xì)胞刺激因子不僅可使造血干細(xì)胞及EPC在外周血中的數(shù)量增加，還有促進(jìn)EPC的心肌再生及新生血管構(gòu)成的功能。1.2、EPC預(yù)防支架術(shù)后再狹窄在再生醫(yī)學(xué)中以EPC為中心的另一個主要研究課題是圍繞心血管應(yīng)用的捕獲支架，其將EPC從血液循環(huán)中隔離出來，以促進(jìn)裸露的腔外表的內(nèi)皮化。捕獲是由固定化抗體在支架外表產(chǎn)生的，通常是針對CD34。近年來的研究表示清楚[13]，抗體結(jié)合已經(jīng)被證明能夠鈍化外表，減少血小板黏附和凝血效應(yīng)以改善血液相容性檢測。在EPC捕獲支架上進(jìn)行的隨機(jī)臨床試驗表示清楚其是安全有效的，同時通過上市后的監(jiān)測，并無證據(jù)表示清楚使用后不良心臟事件的風(fēng)險增加[14]。與藥物洗脫支架〔drug-elutingstents,DES〕相比，EPC捕獲支架與晚期管腔丟失和靶血管衰竭有關(guān)，但晚期支架內(nèi)血栓構(gòu)成的發(fā)生率降低。OrbusNeich生產(chǎn)了新一代EPC捕獲支架COMBO，其將西羅莫司洗脫180d，進(jìn)而將DES的成效與生物工程支架的長期安全性結(jié)合起來[15]。當(dāng)前，為了知足快速內(nèi)皮化的需要，有研究者以為應(yīng)該專門針對晚期EPC甚至是循環(huán)EC，而涂有抗CD309或CD144抗體的外表與改善的內(nèi)皮化結(jié)果有關(guān)。2021年，CHEN等[16]進(jìn)一步修改了捕獲外表，以促進(jìn)捕獲細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，通過提出一種適體-siRNA嵌合體修飾的組織工程血管，使其能夠在糖尿病中保持通暢性，這種組織工程血管由CD133-腺苷激酶〔adenosinekinase,A.DK〕嵌合體和支架組成，最終的實驗結(jié)果顯示，CD133-ADK嵌合體能夠在體內(nèi)選擇性捕獲CD133陽性細(xì)胞，捕獲的細(xì)胞能夠內(nèi)化結(jié)合的嵌合體以實現(xiàn)RNA本身轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染后的SiRNA可抑制CD133陽性細(xì)胞凋亡，進(jìn)而導(dǎo)致了腺苷的上調(diào)，改善了EPC的功能。WOUDSTRA等[17]通過研究評價了組合支架使用1年的安全性和臨床結(jié)果，報告納入了2020年6月～2020年3月間，共1000例患者，應(yīng)用同時攜帶雷帕霉素生物可降解涂層和CD34+抗體涂層的新型生物組合支架，募集EPC以促進(jìn)血管重塑，進(jìn)而防止內(nèi)膜增生和再狹窄。結(jié)果顯示，出現(xiàn)急性冠狀動脈綜合征的患者占49.9%，發(fā)生靶病變失敗率〔targetlesionfailure,TLF〕的患者占5.7%，發(fā)生心源性死亡的患者占1.7%，靶血管心肌梗死〔myocardialinfarction,MI〕和靶病變血運(yùn)重建〔targetlesionrevascularization,TLR〕發(fā)生率分別為0.7%和4.4%，支架內(nèi)血栓構(gòu)成的患者占0.5%。該研究表示清楚，在患者中應(yīng)用新型組合生物支架1年的臨床結(jié)果理想。用于捕獲和說明EPC的分化和功能中的主要信號傳導(dǎo)網(wǎng)絡(luò)的更清楚明晰的外表抗原定義，可能為EPC捕獲支架提供更合理的設(shè)計。然而，管腔外表的再生仍然是血管組織工程中的關(guān)鍵問題，大多數(shù)努力集中于在植入前用內(nèi)皮細(xì)胞預(yù)置腔外表。但研究表示清楚，這種體外內(nèi)皮化方式方法需大量時間和較高成本，因而是不切實際的。鑒于此，當(dāng)前很多研究活動均集中在采用、開發(fā)和改良血管移植的EPC捕獲技術(shù)上。1.3、EPC治療缺血性腦血管病MEAMAR等[18]通過試驗評估了循環(huán)EPC在短暫性腦缺血發(fā)作〔transientischemicattack,TIA〕患者中對將來腦血管〔cerebralvessels,CV〕事件的作用，在試驗中，納入了30名連續(xù)的TIA患者和30名健康志愿者。30名患者連續(xù)TIA24h后，使用流式細(xì)胞術(shù)測定循環(huán)EPC水平，同時也對30名健康志愿者EPC水平進(jìn)行了評估，在12個月的時間內(nèi)，所有患者由經(jīng)歷體驗豐富的神經(jīng)科醫(yī)師評估由CV疾病引起的復(fù)發(fā)性TIA、中風(fēng)或死亡。結(jié)果顯示，與對照組相比，TIA初次發(fā)作后患者組循環(huán)EPC增加，且在第1次TIA發(fā)作中，EPC升高的患者未發(fā)生將來CV事件的發(fā)生率增加。LI等[19]證實了轉(zhuǎn)染脂聯(lián)素基因的EPC聯(lián)合移植物移植至腦缺血大鼠模型中，可改善大鼠大腦中動脈閉塞后的功能恢復(fù)，同時也講明了基因修飾的細(xì)胞療法可能對治療缺血性中風(fēng)有效。MORANCHO等[20]報道，組織基質(zhì)金屬蛋白酶9能夠影響缺血后EPC誘導(dǎo)的血管生成，其在中風(fēng)后EPC誘導(dǎo)的血管重塑中起關(guān)鍵作用。GENG等[21]通過實驗討論了在糖尿病小鼠腦缺血后，EPC移植對血腦屏障完好性的影響。在實驗中，糖尿病小鼠經(jīng)歷90min短暫性大腦中動脈閉塞手術(shù)，并在再灌注后立即接受1106EPC移植，然后檢測腦梗塞體積、血腦屏障通透性、嚴(yán)密連接蛋白表示出和缺氧誘導(dǎo)因子-1〔hypoxia-induciblefactor-1，HIF-1〕mRNA水平。結(jié)果顯示，與對照組相比，短暫性腦缺血后EPC移植的糖尿病小鼠的神經(jīng)功能缺損減弱，腦梗塞體積減少，血腦屏障滲漏和嚴(yán)密連接蛋白降解減少，同時，EPC也上調(diào)了HIF-1表示出。表示清楚EPC可通過上調(diào)HIF-1信號傳導(dǎo)來保衛(wèi)糖尿病小鼠局灶性缺血后的血腦屏障完好性。PENA等[22]檢測了粒細(xì)胞集落刺激因子〔granulocytecolonystimulatingfactor,G-CSF〕在減少延遲組織纖溶酶原激活物〔tissueplasminogenactivator,tPA〕誘導(dǎo)的出血性轉(zhuǎn)化〔hemorrhagictransformation,HT〕，腦梗塞和血栓栓塞〔thromboembolism,TE〕中風(fēng)模型中的神經(jīng)功能缺損方面的成效，以及G-CSF的作用能否持續(xù)更長時間恢復(fù)期。在中風(fēng)誘導(dǎo)后6h，分別給大鼠靜脈注tPA(10mg/kg〕或G-CSF(300g/kg)+tPA，并以生理鹽水作為對照，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，G-CSF使延遲的tPA相關(guān)HT減少了47%，梗塞體積減少了33%，運(yùn)動和神經(jīng)功能缺損分別減少了15%和25%；同時，免疫組化結(jié)果顯示，缺血皮質(zhì)和紋狀體中EPC標(biāo)記物CD34+和VEGFR2分別富集1.5和1.8倍；另外，流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示，給予G-CSF的大鼠外周血中CD34+細(xì)胞的發(fā)動增加。這些結(jié)果證實，G-CSF能夠通過加強(qiáng)EPC發(fā)動來提高tPA治療時間窗口的有效性。CHEN等[23]研究證實，通過頸內(nèi)動脈輸注來自自體外周血的EPC，可減少大鼠的大腦梗塞區(qū)和急性缺血性卒中后神經(jīng)功能缺損大腦中動脈閉塞。近期，PENG等[24]對經(jīng)過14d冷馴化期后幼年和老年小鼠進(jìn)行永久性腦缺血，并進(jìn)行組織學(xué)分析和行為測試，分離小鼠EPC，測定其功能和數(shù)量，來研究EPC移植對腦缺血損傷的影響。結(jié)果顯示，腦缺血發(fā)作前的預(yù)防性冷馴化能增加EPC功能，促進(jìn)缺血性腦血管生成，保衛(wèi)免受腦缺血性損傷，并改善幼鼠的長期中風(fēng)結(jié)果；除此之外，與來自對照小鼠的EPC相比，來自冷暴露小鼠的移植EPC具有更強(qiáng)的減少腦缺血損傷和促進(jìn)局部血管發(fā)生的能力，同時，預(yù)防性冷馴化還可加強(qiáng)EPC功能，促進(jìn)局部血管生成，并預(yù)防老年小鼠的腦缺血性損傷。因而，缺血發(fā)作前的預(yù)防性冷馴化能夠部分地通過促進(jìn)EPC的修復(fù)功能改善小鼠的長期中風(fēng)結(jié)果，且頻繁冷暴露的室內(nèi)環(huán)境變化可能有利于中風(fēng)的高風(fēng)險人群。2、EPC與基因治療2.1、EPC轉(zhuǎn)染VEGFMENG等[25]用重組的腺病毒-VEGF-165(Ad-VEGF-165〕轉(zhuǎn)染EPC后將其移植至通過部分結(jié)扎下腔靜脈導(dǎo)致慢性靜脈血栓構(gòu)成的大鼠模型中，來討論干細(xì)胞移植與基因轉(zhuǎn)染對慢性靜脈血栓構(gòu)成的協(xié)同治療作用，結(jié)果顯示，移植轉(zhuǎn)染后的EPC組表示出的VEGFmRNA水平最高，再通毛細(xì)血管密度明顯升高，對慢性靜脈血栓的再通有加速作用。WANG等[26]利用VEGF-165轉(zhuǎn)染EPC觀察其對肢體缺血家兔新生血管構(gòu)成的影響，結(jié)果顯示，成功轉(zhuǎn)染VEGF-165的EPC，其增殖不受轉(zhuǎn)染影響，與EPC未轉(zhuǎn)染VEGH-165組相比，轉(zhuǎn)染組VEGF上清蛋白濃度水平及毛細(xì)血管密度明顯升高，對兔肢體缺血的被VEGH-165轉(zhuǎn)染的EPC移植反響明顯好于單獨EPC移植。2.2、EPC轉(zhuǎn)染eNOSCUI等[27]通過實驗證實了EPC中eNOS的過表示出加強(qiáng)了對新內(nèi)膜增生的抑制，并恢復(fù)了受損血管中內(nèi)皮依靠性血管舒張，移植過表示出eNOS的EPC可通過抑制新內(nèi)膜增生和恢復(fù)血管功能來修復(fù)受損血管。DANG等[28]利用脂質(zhì)體介導(dǎo)eNOS體外轉(zhuǎn)染小鼠骨髓來源的EPC，結(jié)果表示清楚，轉(zhuǎn)染48h后，EPC中eNOS表示出量明增加，NO含量明顯升高，ROS含量明顯降低，脂質(zhì)體介導(dǎo)eNOS基因能夠有效轉(zhuǎn)染小鼠EPC，并能在EPC中有效表示出。2.3、EPC轉(zhuǎn)染端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶ZHANG等[29]將端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)染的EPC移植至經(jīng)歷過6次全腎切除術(shù)的大鼠模型中，證實了轉(zhuǎn)染后的EPC能夠改善腎功能，減少管周微血管的損失，并抑制腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)展。2.4、EPC轉(zhuǎn)染其他基因SONG等[30]用肝細(xì)胞生長因子〔hepatocytegrowthfactor,HGF〕轉(zhuǎn)染EPC觀察HGF轉(zhuǎn)染對EPC增殖、遷移和血管生成的影響，以及轉(zhuǎn)染的EPC對高膽固醇血癥大鼠球囊誘導(dǎo)的動脈損傷后新內(nèi)膜構(gòu)成的影響。研究結(jié)果顯示，用HGF轉(zhuǎn)染的EPC可釋放出高水平的可溶性HGF蛋白，同時也加強(qiáng)了EPC的增殖、遷移和血管生成能力，轉(zhuǎn)染后的EPC在大鼠模型中能夠更有效地減少新內(nèi)膜構(gòu)成和增加再內(nèi)皮化。因而，HGF轉(zhuǎn)染EPC可能是預(yù)防血管損傷后新內(nèi)膜構(gòu)成的實用且有希望的療法。CAO等[31]用人缺氧誘導(dǎo)因子-1〔humanhypoxia-induciblefactor-1，hHIF-1〕轉(zhuǎn)染EPC，并將轉(zhuǎn)染后的EPC移植至成功構(gòu)建的患有肺動脈高壓〔pulmonaryhypertension,PAH〕的兔模型中，在其移植至兔2周后，應(yīng)用導(dǎo)管插入術(shù)來收集血液動力學(xué)數(shù)據(jù)，同時通過測量右心室肥大指數(shù)、內(nèi)側(cè)壁厚度和內(nèi)側(cè)壁區(qū)域來評估右心室肥大和肺血管重塑。蛋白印記法和免疫組化分析用于檢測肺小動脈中hHIF-1的表示出。結(jié)果顯示，在轉(zhuǎn)染EPC移植2周后，收縮期肺動脈壓和平均肺動脈壓均減弱；右心室肥大和肺血管重塑被逆轉(zhuǎn)；除此之外，hHIF-1在移植的轉(zhuǎn)染EPC中表示出增高，肺小動脈的數(shù)量增加。表示清楚用HIF-1轉(zhuǎn)染的EPC治療PAH可能是一種安全有效的方式方法。HU等[32]將基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(stromalcellderivedfactor-1,SDF-1〕和血管內(nèi)皮生長因子〔vascularendothelialgrowthfactor,VEGF〕轉(zhuǎn)染至EPC中，并將轉(zhuǎn)染后的EPC移植至腦梗死大鼠模型中，結(jié)果顯示，VEGF165和SDF-1的共表示出改善了腦梗死大鼠的神經(jīng)功能，減少了腦梗塞體積，增加了微血管密度，促進(jìn)了缺血半影中的血管生成，改善了腦血流量和灌注，因而，VEGF165和SDF-1基因聯(lián)合治療可能是改善腦梗死后血管重塑和恢復(fù)神經(jīng)功能的潛在策略。LI等[33]研究了趨化因子CXCL12轉(zhuǎn)染后的EPC在缺血性中風(fēng)小鼠模型中的作用，結(jié)果顯示，CXCL12-EPC治療在腦缺血后5周顯著減少了小鼠腦萎縮并改善其神經(jīng)行為功能，血管密度和髓鞘完好性增加，促進(jìn)神經(jīng)構(gòu)成，血管生成，CXCL12轉(zhuǎn)染的EPC在治療缺血性中風(fēng)方面具有宏大潛力。KE等[34]用表示出2AR的腺病毒血清轉(zhuǎn)染人EPC，結(jié)果表示清楚，轉(zhuǎn)染后的EPC過表示出2AR可加強(qiáng)體外EPC功能，并通過2AR/Akt/eNOS途徑加強(qiáng)體內(nèi)EPC的血管修復(fù)能力。3、瞻望綜上所述，當(dāng)前關(guān)于EPC在治療缺血性心臟病、預(yù)防支架術(shù)后再狹窄、治療缺血性腦血管病及肢體缺血性疾病等方面的研究均獲得了一定的進(jìn)展，給缺血性疾病患者的治療帶來了希望。相信隨著EPC在再生醫(yī)學(xué)研究中的不斷深切進(jìn)入，在不久的將來，EPC有希望成為治療缺血性疾病的又一利器。以下為參考文獻(xiàn)[1]SENS,MERCHANJ,DEANJ,etal.Autologoustransplantationofendothelialprogenitorcellsgeneticallymodifiedbyadeno-associatedviralvectordeliveringinsulin-likegrowthfactor-1geneaftermyocardialinfarction[J].HumGeneTher,2018,21(10):1327-1334.[2]LEEFY,CHENYL,SUNGPH,etal.Intracoronarytransfusionofcirculation-derivedCD34+cellsimprovesleftventricularfunctioninpatientswithend-stagediffusecoronaryarterydiseaseunsuitableforcoronaryintervention[J].CritCareMed,2021,43(10):2117-2132.[3]KAMATAS,MIYAGAVAS,FUKUSHIMAS,etal.Improvementofcardiacstemcellsheettherapyforchronicischemicinjurybyaddingendothelialprogenitorcelltransplantation:analysisoflayer-specificregionalcardiacfunction[J].CellTransplant,2020,23(10):1305-1319.[4]QUANZ,WANGQL,ZHOUP,etal.Thymosin4promotesthesurvivalandangiogenesisoftransplantedendothelialprogenitorcellsintheinfarctedmyocardium[J].IntJMolMed,2021,39(6):1347-1356.[5]PREMERC,BLUMA,BELLIOMA,etal.Allogeneicmesenchymalstemcellsrestoreendothelialfunctioninheartfailurebystimulatingendothelialprogenitorcells[J].Ebiomedicine,2021,2(5):467-475.[6]FUWL,XIANGZ,HUANGFG,etal.Combinationofgranulocytecolony-stimulatingfactorandCXCR4antagonistAMD-3100foreffectiveharvestofendothelialprogenitorcellsfromperipheralbloodandinvitroformationofprimitiveendothelialnetworks[J].CellandTissueBanking,2021,17(1):161-169.[7]GUERRAG,PERROTTAF,TESTAG.Circulatingendothelialprogenitorcellsbiologyandregenerativemedicineinpulmonaryvasculardiseases[J].CurrPharmBiotechnol,2021,19(9):700-707.[8]MONIKAGJ,EDYTAP,MACHALINSKIBOGUSLAWM,etal.Effectsofangiotensin-convertingenzymeinhibitiononcirculatingendothelialprogenitorcellsinpatientswithacuteischemicstroke[J].StemCellsInt,2021,2021(4):1-10.[9]GREENWALDAC,LICHTT,KUMARS,etal.VEGFexpandserythropoiesisviahypoxia-independentinductionoferythropoietininnoncanonicalperivascularstromalcells[J].JExpMed,2022,216(1):215-230.[10]SANDHUK,MAMASM,BUTLERR.Endothelialprogenitorcells:Exploringthepleiotropiceffectsofstatins[J].WorldJCardiol,2021,9(1):1-13.[11]CHENJZ,WANGXX,ZHUJH,etal.EffectsofGinkgoBilobaextractonnumberandactivityofendothelialprogenitorcellsfromperipheralblood[J].JCardiovascularPharmacol,2004,43(3):347-352.[12]HONOLDJ,LEHMANNR,HEESCHENC,etal.Effectsofgranulocytecolonystimulatingfactoronfunctionalactivitiesofendothelialprogenitorcellsinpatientswithchronicischemicheartdisease[J].ArteriosclerThrombVascBiol,2006,26(10):2238-2243.[13]DENGJ,YUANS,LIX,etal.Heparin/DNAaptamercoassembledmultifunctionalcatecholaminecoatingforEPCcaptureandimprovedhemocompatibilityofvasculardevices[J].MaterSciEngCMaterBiolAppl,2021,79(5):305-314.[14]MIGLIONICM,PATTIG,DAMBROSIOA,DISCIASCIOG.Percutaneouscoronaryinterventionutilizinganewendothelialprogenitorcellsantibody-coatedstent:aprospectivesingle-centerregistryinhighriskpatients[J].CatheterCardiovascInterv,2008,71(5):600-604.[15]BARSOTTIM,DISTEFANOR,SPONTONIP,etal.Roleofendothelialprogenitorcellmobilizationafterpercutaneousangioplastyprocedure[J].CurrPharmDesign,2018,15(10):1107-1122.[16]CHENW,ZENGW,SUNJ,etal.Constructionofanaptamer-SiRNAchimera-modifiedtissue-engineeredbloodvesselforcell-type-specificcaptureanddelivery[J].AcsNano,2021,9(6):6069-6076.[17]WOUDSTRAP,KALKMANDN,DENHP,etal.1-YearResultsoftheREMEDEEregistry:clinicaloutcomesafterdeploymentoftheabluminalsirolimus-coatedbioengineered(Combo)stentinamulticenter,prospectiveall-comersregistry[J].JACCCardiovascInterv,2021,9(11):1127-1134.[18]MEAMARR,NIKYARH,DEHGHANIL,etal.Theroleofendothelialprogenitorcellsintransientischemicattackpatientsforfuturecerebrovascularevents[J].JResMedSci,2021,21(1):47.[19]LIY,FENGH,YUQ,etal.Constitutiveexpressionofadiponectininendothelialprogenitorcellsprotectsaratmodelofcerebralischemia[J].NeuralPlasticity,2021,2021(10):1-8.[20]MORANCHOA,MAF,BARCELOV,etal.ImpairedvascularremodelingafterendothelialprogenitorcelltransplantationinMMP9-deficientmicesufferingcorticalcerebralischemia[J].JCerebralBloodFlowMetab,2021,35(10):1547-1551.[21]GENGJ,WANGL,QUM,etal.Endothelialprogenitorcellstransplantationattenuatedblood-brainbarrierdamageafterischemiaindiabeticmiceviaHIF-1[J].StemCellResTher,2021,8(1):163.[22]PENAID,YANGS,SHENG,etal.Extensionoftissueplasminogenactivatortreatmentwindowbygranulocyte-colonystimulatingfactorinathromboembolicratmodelofstroke[J].IntJMolSci,2021,19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