GMP質量體系四環(huán)素片中間產品檢驗操作規(guī)程

目的：為檢驗四環(huán)素片中間產品規(guī)定一個標準的程序，以便獲得準確的實驗數據。范圍：適用于四環(huán)素片中間產品的檢驗。職責：檢驗員，檢驗室主任對本規(guī)程實施負責。規(guī)程：1性狀：本品為黃色片。2鑒別：2.1試劑與儀器2.1.1四環(huán)素對照品2.1.2乙醇2.1.3硫酸2.1.4三氯化鐵試液2.1.5量杯2.1.6燒杯2.1.7漏斗2.2.8水浴鍋2.1.9電子天平2.2頂目與步驟2.2.1取本品的細粉適量(約相當于鹽酸四環(huán)素25mg)，加熱乙醇25ml，浸漬20分鐘后，濾過，濾液置水浴上蒸干，取殘渣約0.5mg，加硫酸2ml，即顯深紫色，再加三氯化鐵試液化1滴，溶液變?yōu)榧t棕色為符合規(guī)定。3檢查3.1試劑與儀器3.1.1電子天平(萬分之一克)3.1.2FAB-2片劑脆碎儀3.1.3BJ2A片劑崩解儀3.2項目與步驟3.2.1重量差異：照片劑重量差異測定法（SOP-QC-334-00）檢查，±7.5%重量差異限度為符合規(guī)定。3.2.2崩解時限：取本品6片，按崩解時限檢查法（SOP-QC-330-00）檢查，各片應在15分鐘內全部崩解，如有1片崩解不完全，應另取6片按同樣方法復試，均應為符合規(guī)定。3.2.3脆碎度：取本品約20片，用吹風機吹去脫落的粉末，精密稱重，按脆碎度檢查法（SOP-QC-333-00）檢驗，減失重量不得過1%，且不得檢出斷裂、龜裂及粉碎的片；如減失重超過1%時，可復檢2次，3次的平均減失重量不得過1%，并不得檢出斷裂、龜裂及粉碎的片為符合規(guī)定。4含量測定：4.1試劑與儀器4.1.1四環(huán)素標準品4.1.2磷酸鹽緩沖液（pH6.0）4.1.3四環(huán)素標準品抗生素檢定培養(yǎng)基Ⅱ(6.5-6.6)4.1.4藤黃微球菌4.1.5容量瓶(50ml,100ml)4.1.6滅菌刻度吸管、滴管4.1.7雙碟4.1.8陶瓦蓋 4.1.9鋼管放置器4.1.10電熱隔水培養(yǎng)箱 4.1.11稱量瓶4.1.12CHB-1抗生素效價測量儀 4.1.13電子天平(萬分之一克) 4.1.14超凈工作臺 4.1.15酒精燈4.1.16三角燒瓶(50ml,150ml) 4.1.17量筒(100ml)4.1.18鑷子，按種棒檢驗步驟：取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于鹽酸四環(huán)素0.25g），加0.1N鹽酸液（按標示量計算每10mg加酸液2ml），振搖，使四環(huán)素溶解后，再加滅菌水稱釋至每1ml中約含1000單位的懸浮液，靜置，精密量取上層液適量，照四環(huán)素微生物檢定法（SOP-QC-339-00）操作。4.2.1培養(yǎng)基的制備:稱取抗生素檢定培養(yǎng)基Ⅱ（Ph6.5-6.6）28.5g，加1000ml水，加熱溶解，分裝121℃高壓滅菌30分鐘。4.2.2磷酸鹽緩沖液(pH6.0)制備：稱取磷酸氫二鉀2g，5磷酸二氫鉀8g，加水使成1000ml，濾過，經121℃蒸氣滅菌30分鐘，備用。4.2.3藤黃微球菌(28001)的營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，接種于盛有營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,在26-27℃培養(yǎng)24小時，臨用時，用培養(yǎng)基Ⅲ將菌苔洗下，合并菌液至滅菌大試管中，備用。4.2.4標準品溶液的制備:4.2.4.1將標準品從冰箱取出，使與室溫平衡，準確稱取四環(huán)素對照品約58.0mg，置50ml容量瓶中，加N/10鹽酸液5.8ml溶液后，加滅菌水至刻度。精密吸取10ml，置25ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液（pH6.0）稀釋至刻度，備用。4.2.4.2高劑量標準品的制備:精密吸取4.2.4.1制備的標準溶液5ml，置50ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液（pH6.0）稀釋至刻度，備用。4.2.4.3低劑量標準品的制備:精密吸取4.2.4.1制備的標準溶液5ml，置100ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液（pH6.0）稀釋至刻度，備用。4.2.5樣品溶液的制備：4.2.5.1取樣20片,精密稱定，研細，精密稱取重約0.66g置250ml容量瓶中，加N/10鹽酸液100ml溶液后，加滅菌水至刻度，搖勻。精密吸取上清液10ml，置25ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液（pH6.0）稀釋至刻度，備用。4.2.5.2高劑量樣品溶液的制備:精密吸取4.2.5.1制備的樣品溶液5ml，置50ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液（pH6.0）稀釋至刻度，備用。4.2.5.3低劑量樣品溶液的制備:精密吸取4.2.5.1制備的樣品溶液5ml，置100ml容量瓶中，用磷酸鹽緩沖液（pH6.0）稀釋至刻度，備用。4.2.6雙碟的制備:按抗生素微生物檢定法(SOP-QC-339-00)操作；4.2.7小鋼管的放置：按抗生素微生物檢定法(SOP-QC-339-00)操作；4.2.8滴管、培養(yǎng)基與測量：按抗生素微生物檢定法(SOP-QC-339-00)操作；5記錄與計算用電腦測試，計算、統計分析的打印紙貼附記錄后。本品含四環(huán)素按鹽酸四環(huán)素（C22H24O8N2·HCl）計算,應為標示量的90.0%-110.0%PT=P×按下列計算四環(huán)素的最終效價PT：為樣品的真實效價；P：為樣品(相當于標示量或估計效價)的百分數；對照品：ds=