高、超速離心技術(shù)及離心過程中應(yīng)注意

高、超速離心技術(shù)及離心過程中應(yīng)留意的事項在生物科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中離心機(jī)主要用于分別細(xì)胞和細(xì)菌；純化和收集病毒、RNADNA質(zhì)粒和蛋白質(zhì)等生物大分子。—.離心機(jī)的組成離心機(jī)主要有驅(qū)動電機(jī)、制冷系統(tǒng)、真空系統(tǒng)〔超離有〕、顯示系統(tǒng)、.離心轉(zhuǎn)頭的選用在離心中最常使用的轉(zhuǎn)頭是角度頭和水平頭。角度頭常用于差速離心來分別s〔沉降系數(shù)〕值相差較大〔1：10〕的樣品。水平頭常用于密度梯度或等密度離心。另有一種垂直轉(zhuǎn)頭使用較少，此轉(zhuǎn)頭主要用于等密度離心，以縮短離心時間。三.離心管的選用玻璃離心管不能在高速或者超速離心機(jī)上使用。PP〔polypropyiene，聚丙烯〕半透亮?；瘜W(xué)及溫度性能穩(wěn)定，但低4C以下離心。PA〔polyallomer〕半透亮?；瘜W(xué)性質(zhì)最穩(wěn)定，但高溫易變軟。CAB^celluloseacetobutyrate，醋酸丁酯纖維素〕LH為015C下使用，HT20-40C下使用。透亮?？捎糜谳^稀的酸、堿、鹽。但當(dāng)pH=8以上，有機(jī)溶劑，重鹽如CsCI時僅有限條件下可用。適用于酒精及蔗糖梯度。PC〔polycarbonate，聚碳酸酯〕：透亮度好，硬度大，能耐高溫消毒。但不耐強(qiáng)酸強(qiáng)堿及某些有機(jī)溶劑如酒精、油、 主要用于5萬rpm以上離心。PCR〔polyclear，超透亮〕PCPC更硬PE〔polyethylene，聚乙烯〕不透亮。對丙酮、醋酸、鹽酸等穩(wěn)定。高溫易變軟，必需裝滿。PS〔polystyrol，聚苯乙烯〕透亮堅硬。對大多數(shù)水溶液穩(wěn)定，但不能沾很多有機(jī)物，一次性使用。多用于低速離心。PF〔polyflor，聚氟〕-100C140C下使用，半透亮。不銹鋼能抗熱，抗化學(xué)腐蝕，能高壓消毒，但較重，也較貴。適合于蔗糖、甘油等密度梯度離心。透亮，利于收集。四.留意事項1—5萬〔轉(zhuǎn)/分〕1克,轉(zhuǎn)頭5厘米，則F=mxRCF查表得：1萬〔轉(zhuǎn)/分〕—RCF=6000 —代入公式-F*1x6000=6〔公斤〕5萬〔轉(zhuǎn)/分〕RCF=150000代入公式—F=1X150000=150〔公斤〕此時引起兩邊不平衡可達(dá)6-150〔公斤〕 ，這對離心機(jī)的損傷是很大的，至少將縮短離心機(jī)的使用壽命。如離心管蓋子密封性差液體就不能加滿〔針對高速離心且使用角度頭〕，以防外溢。p失去平衡外溢后果一?污染轉(zhuǎn)頭和離心腔—影響感應(yīng)器正常工作超速離心時，液體肯定要加滿離心管，因超離時需抽真空，只有加滿才能避開離心管變形。使用角度頭時別忘蓋轉(zhuǎn)頭蓋，如未蓋，離心腔內(nèi)會產(chǎn)生很大的渦流阻力和摩擦升溫，這等于給離心機(jī)的電機(jī)和制冷機(jī)增加了額外負(fù)擔(dān)， 影響離心機(jī)的使用壽命。參數(shù)參數(shù)公式常數(shù)單位名稱VcoV=oro=2N/60厘米/秒弧度/秒線速度角速度r厘米半徑N轉(zhuǎn)/分轉(zhuǎn)速RCFRCFRCF=o2r/g=CXMrg相對離心場CC=1.118X105-gg=980厘米/秒2厘米/秒2重力加速度FFF=RCFXm克m克離心力質(zhì)量PP1=1.FiF2FPFi=mprO勺6克浮力F2=3刃d?(dr/dt)F=RCFXm克摩擦力克離心力克/2液體密度NN=((350.4/st)Xlog(rmax/rmin))0.5轉(zhuǎn)/分轉(zhuǎn)速COO=((2.303/St)Xlog(r05弧度/分角速度ma/ minr))6克/厘米2樣品顆粒密度d厘米顆粒直徑?介質(zhì)粘度dr