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文檔簡介
第_章緒論遺傳學:研究動物遺傳與變異及其規(guī)律的一門學科。在遺傳學建立與發(fā)展領域起到重大作用的人物與代表作、年代達爾文《物種起源》1859孟德爾《植物雜交論文》1866摩爾根《基因論》1910Watson和crickDNA的雙螺旋結構1953第二章遺傳物質的基礎DNA作為遺傳物質的直接證據(jù)肺炎雙球菌的轉化實驗噬菌體的侵染實驗煙草花葉病毒的重建實驗(RNA為遺傳物質的證據(jù))作為遺傳物質的幾個條件精確復制,確保遺傳的世代遺傳儲備,傳遞信息的潛在能力時間,空間的穩(wěn)定性能夠變異DNA的一級結構:4種核苷酸的排列順序二級結構:雙螺旋直徑是2nm螺距3.4nm基因:是有功能的DNA片段,含有合成有功能的蛋白質多肽鏈或RNA所必需的全部核苷酸序列,是遺傳物質的結構和功能單位。外顯子:把斷裂基因中的編碼序列叫為外顯子內含子:把斷裂基因中的非編碼區(qū)叫為內含子啟動子:準確而有效的起始基因轉錄所特需的核苷酸序列C值矛盾:C值得大小與物種的結構組成和功能的復雜性沒有嚴格的對應關系的現(xiàn)象?;蚪M:一個物種單倍體染色體所攜帶的一整套基因。10.染色質由核酸和蛋白質組成(或者為DNARNA和蛋白質)染色質的分類與區(qū)別常染色質螺旋度低染色淺位于核中央有活性異染色質螺旋度高染色深位于核周邊無活性端粒:染色體末端的特化結構。功能:防止染色體末端被酶酶切;防止染色體末端與其他粘連;防止染色體在DNA復制時保持完整。染色體的幾個參數(shù):臂比著絲粒指數(shù)相對長度14著絲點位置:中著絲粒染色體;近著絲粒染色體;近中著絲粒染色體;端著絲粒染色體。15.同源染色體:在體細胞中成對存在的染色體中有一對來自父方一對來自母方,大小相同、結構形狀功能相似的一對染色體。16聯(lián)會:同源染色體彼此靠攏并精確配對的過程。染色體的核型分析:根據(jù)各個細胞中染色體的長度、大小、著絲粒位置,隨體有無等因素把他們排列起來研究的過程。
思乂:染色體異常引起的遺傳疾病動物育種,鑒定遠緣雜交研究物種間的親緣關系,物種進化機制追蹤鑒別外源染色體或染色體片段有絲分裂與減數(shù)分裂的區(qū)別有絲分裂發(fā)生在體細胞中染色體復制一次細胞分裂一次子母細胞具有同樣的質量與數(shù)量的染色體和遺傳物質減數(shù)分裂發(fā)生在性細胞中染色體復制一次細胞連續(xù)分裂兩次子細胞染色體減半遺傳物質減半第一次減數(shù)分裂前期的五期:細線期;偶線期;粗線期;雙線期;終變期第三章遺傳物質的基礎DNA的復制:以親代DNA為模板合成一個新的與親代相同的子代DNA的過程半保留復制:一個雙鏈DNA分子合成一個雙鏈子代DNA分子,一條是新和成的一條是原來的。岡崎片段:以5-3合成的不連續(xù)的片段DNA合成所要的幾種物質DNA聚合酶主要為酶三DNA連接酶連接岡崎片段拓撲異構酶消除正超螺旋解旋酶解開雙鏈單鏈結合蛋白防止單練水解引發(fā)酶引物合成環(huán)狀DNA復制的方式:8型;滾環(huán)形;D型原核與真核復制的區(qū)別原核真核DNA合成時期整個過程間期的S期起點數(shù)目一個多個引物長度10-16個10個岡崎片段長度長短前導鏈、后隨鏈的合成酶三聚合酶u。聚合酶a7.真核生物DNA復制依靠端粒與端粒酶。DNA復制與轉錄的異同?兩者均在酶的催化作用下,以DNA為模板,按堿基互補配對的原則,沿5-3方向合成與模板互補的新鏈卻口惑轉錄時只有一條鏈為模板;復制兩條鏈作為模板;轉錄起始不需要引物參與;復制需引物;?轉錄時DNA與RNA雜合雙鏈是不穩(wěn)定的;復制時,復制叉一直打開,不斷向兩側延伸;轉錄的底物是4種核糖核苷酸,配對關系是A-U,C-G;復制的底物是4種脫氧核糖核苷酸,配對關系是A-T,C-G;兩種酶系不同:轉錄為RNA聚合酶;復制為DNA聚合酶;復制時整條鏈進行,轉錄只發(fā)生在一部分區(qū)域真核生物轉錄生成的初級產(chǎn)物需要加工RNA聚合酶有核心酶與全酶組成:后者包括核心酶與亞基終止子分為強終止子與弱終止子11.mRNA加工的方式功能5端加帽有助于mRNA穿過核膜進入胞質;保護5端不被酶降解翻譯時供IF3和核糖體結合3端加尾增加mRNA的穩(wěn)定性有助于成熟的mRNA進入胞質增強翻譯效率mRNA的剪接翻譯:從DNA到mRNA的核苷酸到多肽鏈上的氨基酸最后合成蛋白質的過程遺傳密碼的特性?三聯(lián)子密碼無逗號不重疊通用性兼并性擺動簡并性:由一種以上密碼子編碼同一種氨基酸的現(xiàn)象蛋白質的生物合成:(1)起始(2)延伸:分為三個階段:進位,肽鍵合成,移位(3)終止TU-TS循環(huán):EF-TU-GTP---氨基酰tRNA三元復合物進入核糖體,GTP被水解為GDP,EF-TU-GDP無活性從核糖體解離下來,在另一延伸因子EF-TS的作用下形成EF-TU-TS復合物,釋放GDP,EF-TS被GTP取代形成EF-TU-GTP復合物,復合物再次被利用,協(xié)助下一個氨基酰進入A位。17.中心法則的內容17.中心法則的內容基因表達:基因轉錄及翻譯的過程。操縱子:由調節(jié)基因、操縱基因、和有關生物活性的結構基因組成,結構基因排列成簇,協(xié)同履行精巧的生命活動。負調控:當調節(jié)蛋白缺乏時基因表達,反之關閉的過程正調控:當調節(jié)蛋白存在時基因關閉,加入后基因表達開啟的過程第四章染色體畸變:在自然突變或人工誘變的條件下使染色體的某區(qū)段發(fā)生改變,從而改變基因的數(shù)目、位置與順序類型:缺失;重復;倒位;易位缺失的類型:中間缺失;末端缺失;缺失的表型與遺傳效應:a.致死或出現(xiàn)異常假顯性或擬顯性重復:染色體多了自己的一段,形成重復環(huán)。位置效應:一個基因隨著染色體畸變而改變它與鄰近基因的位置關系所引起的表型改變的現(xiàn)象劑量效應:因基因數(shù)目的不同,表現(xiàn)出的不同表型差異現(xiàn)象倒位類型:臂內倒位,臂間倒位;并且形成倒位圈。缺失環(huán)、重復環(huán)與倒位圈的區(qū)別缺失環(huán)發(fā)生在正常鏈上;重復環(huán)發(fā)生在異常鏈上;倒位圈是在區(qū)段合適的位置形成易位的類型:相互易位;單向易位。羅伯遜易位:兩條非同源的端著絲點發(fā)生著絲點融合,從而形成一條中或者近中著絲點染色體易位的遺傳與表型效應改變正常的連鎖群位置效應假連鎖現(xiàn)象:(1)交互分離配子可育(2)相鄰分離配子不可育染色體數(shù)目的變異:是指染色體數(shù)目發(fā)生發(fā)生不正常的改變。整倍體:含有一個或若干個染色體組的細胞或生物。整倍體變異:整套染色體組的增加或減少。整倍體變異(符號表示):單倍體n;二倍體2n;三倍體3n;四倍體4n;非整倍體:細胞中含有不完整的染色體組的生物。非整倍體變異(符號表示):單體(2n-1);雙單體(2n-1—1);缺體2n-2;三體2n+1;雙三體2n+1+1;四體2n+2;基因突變:基因水平上遺傳物質可檢測、能遺傳的改變,不包括遺傳重組(由理化因素引起的DNA分子的成分和結構的變化)。類型:(1)自發(fā)與誘發(fā)突變(2)顯性與隱形突變(3)正向與回復突變基因突變的一般特性多向性可逆性重演與平行性突變的有利與有害性復等位基因:在群體不同個體中位于同一座位的多個基因基因型的種類N(n+1)/2等位基因:位于同源染色體上同一座位上控制一對相對性狀的基因。突變?yōu)楹魏Υ笥诶??因為在進化的過程中,它們的遺傳物質及基因調控下的代謝過程與環(huán)境都達到了相對平衡和高度的協(xié)調統(tǒng)一,一旦基因發(fā)生突變,往往便不可避免地造成整個代謝的過程破壞,從而變現(xiàn)為生活力降低,生育反常,極端的會造成當代致死。突變的分子機制:堿基替代:移碼突變轉換:在堿基替代中,一個嘌吟被另一嘌吟替代的現(xiàn)象顛換:在堿基替代中,一個堿基被一個嘧啶或者一個嘧啶被一個堿基取代的現(xiàn)象堿基替代的遺傳效應:(1)錯義突變(2)無義突變形成終止密碼子UAAUAGUGA(3)同義突變突變抑制的途徑:1.密碼子的兼并性基因內突變的抑制基因間突變的抑制DNA的修復方式:(復制的修復)1.DNA聚合酶的修復錯配修復系統(tǒng)尿嘧啶糖基酶修復系統(tǒng)(損傷的修復)1.sos修復系統(tǒng)2.二聚體糖基酶修復3.光修復4.暗修復5.重組修復重組的類型:同源重組;位點專一性重組;轉座重組;溶菌狀態(tài):入噬菌體在宿主細菌中獨立存在的狀態(tài)熔源狀態(tài):入噬菌體通過重組作用整合進入宿主細菌染色體的特異位點轉座子的特點:(1)其末端有20-30bp的反向重復序列;(2)轉座子編碼轉座酶轉座的遺傳效應:Q轉座引起插入效應Q引起插入位置產(chǎn)生新基因Q引起插入位置少數(shù)堿基對重復Q引起染色體畸變Q導致生物進化第五章性狀:生物表現(xiàn)出來的形態(tài)特征和生理特征得總稱相對性狀:同一單位性狀的相對差異基因型:生物個體的遺傳組成表現(xiàn)型:特定的基因型在一定環(huán)境條件下表現(xiàn)出的性狀基因座:基因處在染色體上的固定位置測交:Fj代雜合子與隱性純合體親本雜交,驗證F1的遺傳組成的方法孟德爾自由組合遺傳定律的意義?提示了位于非同源染色體上基因間的相互關系?不同對基因自由組合產(chǎn)生的基因重組是生物發(fā)生變異的一個重要來源,也是生物出現(xiàn)多樣性的一個重要原因?在雜交育種中,可以按照人們的意愿組合兩個親本的優(yōu)良性狀,培育新品種?預測測交后代中出現(xiàn)優(yōu)良性狀組合的大致比例實現(xiàn)自由組合的條件?二倍體完全顯性?控制不同性狀的基因位于不同的同源染色體上?不同對基因無互作,一種基因,一種效應?F1產(chǎn)生的配子比例相等,生活力相同,F(xiàn)2代個體成活率相同?實驗群體足夠大不完全顯性:介于親本之間的表型共顯性:雙親性狀同時在后代的同一個體表現(xiàn)出來的顯性致死基因可發(fā)生在不同的發(fā)育階段基因互作的類型及其比例?互補作用9:7?積加作用9:6:1?重疊作用15:1?上位作用顯性上位12:3:1隱性上位9:3:4連鎖遺傳:原來在親本中組合在一起的兩個性狀在F2中有連在一起的傾向交換率(重組率):重組型配字數(shù)占總數(shù)的百分比。范圍是0-50%1%的交換率為一個遺傳單位連鎖群:位于同一染色體上的所有基因的集合基因定位:把染色體上的多種基因間的相互之間的排列順序確定下來又稱染色體作圖作圖的方法:兩點測交三點測交三點測交的計算步驟:找出親本性與雙交換性;確定中間位置基因計算雙單交換率干涉:染色體上某兩個基因座的單交換減少,鄰近基因座位單交換發(fā)生的可能性的現(xiàn)象并發(fā)系數(shù)=實際雙交換率除以理論雙交換率干涉率=1-并發(fā)系數(shù)性染色體的構型有哪些?XYXOZWZO性反轉:生物個體在發(fā)育過程中,由一個性別轉變成另一個性別的現(xiàn)象伴性遺傳:性染色體上的基因所控制的某些性狀總是伴隨著性別而遺傳的現(xiàn)象伴性遺傳的特點:。正反交結果不同Q性狀的分離比數(shù)在兩性比例不一致Q有交叉遺傳與個貸遺傳Q出現(xiàn)假顯性現(xiàn)象從性遺傳:性狀的表現(xiàn)受個體性別的影響,顛倒了性狀的顯隱性性狀,控制從性性狀的基因位于常染色體上限性性狀:只在一個性別表現(xiàn)的性狀。三種遺傳的區(qū)別:(1)伴性遺傳正反交結果不同;從性遺傳正交結果相同;限性遺傳無固定的遺傳模式;(2)伴性遺傳有交叉遺傳與隔代遺傳現(xiàn)象;從性遺傳基因一般位于常染色體上;限性遺傳有遺傳基礎無性狀表現(xiàn);(3)伴性遺傳出現(xiàn)假顯性現(xiàn)象;限性遺傳位于性染色體上基因控制的限性性狀只在雄性個體表達;第七章:數(shù)量遺傳學基礎?1.數(shù)量性狀(quantitativecharacter):表現(xiàn)連續(xù)變異的性狀稱為數(shù)量性狀,如產(chǎn)蛋量、產(chǎn)奶量。?數(shù)量性狀的特點:?變異的連續(xù)性?對環(huán)境的敏感性?分布正態(tài)性?多基因控制(無顯隱性、效應可加性、微效性)2.數(shù)量性狀和質量性狀的區(qū)別數(shù)量性狀多基因正態(tài)分布連續(xù)大群體質量性狀單基因二項分布分散小個體和群體3.數(shù)量性狀表型值的剖分?表型值P一個體表型值,G一基因型值,E一環(huán)境效應值,則:P=G+E。?群體均值在一個群體中,某一性狀的表型值應以群體均值來表示,即:P=G基因型值剖分G=A+D+IA—加性效應;D—顯性效應;I—上位效應通徑系數(shù):表示相關變量間因果關系的一個統(tǒng)計量決定系數(shù):表示一個變量對另一個變量的決定程度一自變量到依變量的通徑系數(shù)的平方稱為該自變量對依變量的決定系數(shù)。兩自變量間相關系數(shù)與它們各自到依變量的通徑系數(shù)乘積的2倍稱為該兩自變量共同對依變量的決定系數(shù)。決定系數(shù)的符號用d來表示,通徑系數(shù)的定理:(自己看書在178頁,五個定理)通徑鏈的追溯規(guī)則隊進退原則。一條通徑鏈必需要“先退后進”。B、換向原則。C、相關線原則。D、避免重復隨機交配下親屬間的通徑與相關?父子或母子,父女或母女r=1/2?祖孫關系與叔侄關系一樣七「174?半同胞關系r^=1/2X1/2=1/4?全同胞關系r「1/2重復力的概念重復力在統(tǒng)計學上的意義就是同一個體同一性狀不同次生產(chǎn)記錄的組內相關系數(shù),它是以個體間方差為組間方差,以個體內方差為組內方差的組內相關系數(shù)重復的用途:1.作為判斷遺傳力估計是否正確的參考。確定性狀需要度量的次數(shù)。重復力愈小,準確度隨度量次數(shù)增長愈快,接近最大準確度所需的度量次數(shù)也愈多。遺傳力:廣義:數(shù)量性狀基因型方差占表型方差的比例狹義:數(shù)量性狀基因型占育種值方差的比例遺傳力的應用:(一)預估選擇進展。子代群體均值與親代群體均值之差稱為遺傳進展或選擇反應,用AR表示:R=SH2(二)確定繁育方法。遺傳率高的性狀宜采用本品種選育,對遺傳率低的性狀則宜采用雜交育種。(三)確定選擇方法。h2高者,采用個體表型選擇效果好。h2低者采用家系或家系內選擇。(四)估計個體育種值°:h2=VA/Vp
(五)制訂選擇指數(shù)。選種時往往需要同時選擇多個性狀,就需要制訂一個綜合選擇指數(shù),h2是選擇指數(shù)制訂過程中不可缺少的遺傳參數(shù)。遺傳相關(geneticcorrelation):指生物個體或性狀育種值之間的相關程度。遺傳相關的類型:親屬間的遺傳相關:指有親緣關系的兩個體同一性狀育種值之間的相關程度,用相關系數(shù)七表示。性狀間的遺傳相關:指同一個體兩個不同性狀育種值之間的相關程度,也用相關系數(shù)(ra(xy))表示.性狀間相關原因的剖分:r=hhrA+ee「h2+e2=1e=JT—h2遺傳相關的估計方法(一)親子協(xié)方差法18.性狀遺傳相關牛產(chǎn)奶量與乳脂率(%)-0.07~-0.67產(chǎn)奶量與非脂干物質(%)-0.02~-0.2產(chǎn)奶量與泌乳速度0.20~0.30產(chǎn)奶量與前乳房泌乳率(%)-0.20~0.90產(chǎn)奶量與提高0.30~0.70產(chǎn)奶量與胸圍0~0.40乳脂量與非脂干物質量0.30~0.70乳脂量與總蛋白質0.40~0.70綿羊污毛量與凈毛量0.65~0.76污毛量與毛從長度-0.02~0.17污毛量與體重-0.10~-0.03第九章動物基因組學基礎遺傳標記:指能夠用以區(qū)分生物個體或群體極其特定基因并能穩(wěn)定遺傳的物質標記。傳統(tǒng)遺傳標記(形態(tài)遺傳標記、細胞遺傳標記、生化遺傳標記和免疫遺傳標記)分子遺傳標記(RFLP、RAPD、AFLP、VNTR、SNP)。RFLP(restrictionfragmentlengthpolymorphism限制性片斷長度多態(tài))串聯(lián)重復序列標記(tandemrepeatedsequence,TRS)或可變串聯(lián)重復序列(variablemumbertrandemrepeatedsequence,VNTR)RAPD(randomamplifiedpolymorphismDNA隨機擴增多態(tài)DNA)AFLP(amlifiedfragmentlengthpolymorphism擴增片段長度多態(tài))SNP(singlenucleoidepolymorphisms,單核苷酸多態(tài))分子遺傳標記在動物育種中的應用?個體及親緣關系的鑒定?種質資源的遺傳評估、檢測、保護和利用?基因定位與遺傳圖譜的構建:如豬的蘭尼定受體基因(RYR1),酸肉基因(PRKAG3),影響產(chǎn)仔數(shù)的ESR和FSH基因,綿羊高繁殖率FecB位點等.?標記輔助選擇動物的標記輔助選擇應用1豬的應激基因檢測;2豬的ESR基因與多仔性狀;3雞的羽速、鵪鶉羽色自別雌雄4矮小基因與矮小雞5肌肉生長抑制素Myostatin基因與肉牛生產(chǎn)基因圖譜描述了基因位點在染色體上的線性排列及它們之間的相對距離。廣義:包括物理圖譜、遺傳圖譜、表達圖譜和轉錄圖譜。狹義:物理圖譜和遺傳圖譜遺傳圖譜:又稱連鎖圖譜(linkagemap),它是以具有遺傳多態(tài)性(在一個遺傳位點上具有一個以上的等位基因,在群體中的出現(xiàn)頻率皆高于1%)的遺傳標記為“路標”,以遺傳學距離(在減數(shù)分裂事件中兩個位點之間進行交換、重組的百分率,1%的重組率稱為1cM)為圖距的基因組圖。物理圖譜:物理圖譜是指有關構成基因組的全部基因的排列和間距的信息,它是通過原位雜交和體細胞雜交對構成基因組的DNA分子進行測定而繪制的。繪制物理圖譜的目的是把有關基因的遺傳信息及其在每條染色體上的相對位置線性而系統(tǒng)地排列出來°1cM大致相當于1X106~3X106bp的DNA.雜合度(H):表示該群體中雜合子個體比例多態(tài)信息含量(PIC):值給出在平衡群體及隨機交配的情況下,根據(jù)后代遺傳標記,判斷出來自父親遺傳標記的交配類型占所有交配類型的比例。摩爾根圖距函數(shù)X=9(9為重組率)Haldane圖距函數(shù)(當基因位點間有多重交換時)Kosambi圖距函數(shù)(邊際干擾)Karlin圖距函數(shù)(兩位點間有N次交換)似然的概念:指特定觀測表型出現(xiàn)的可能性。假定有A和a一對等位基因,A對a為顯性,人群中有3種基因型AA、Aa和aa,2種表型A_和aa(如白化),一對夫婦基因型為Aa,則其后代表型正常的概率為3/4,白化的概率為1/4。如果這對夫婦有3個孩子,前兩個孩子表型正常,第三個孩子為白化,出現(xiàn)這種表型的總概率(即似然率)為3/4)(3/4)(1/4)=9/64物理圖譜:用細胞核遺傳分子學原位雜交的方法和體細胞雜交與基因標記的方法來構建的圖譜。選擇定位:是通過特定的培養(yǎng)基選擇雜種細胞來進行定位的方法。易位定位和缺失定位的原理基本相同,當雜種細胞丟失了易位染色體和缺失染色體后,分析雜種細胞能夠表達的基因及不能表達的情況來判斷該基因可能位于的染色體。第六章群體遺傳學基礎群體:一個亞種,一個變種,一個品種或一個其他同種生物類群的所有成員的總和。孟德爾群體:具有共同的基因庫,并由有性交配個體所組成的繁殖群體基因庫:一個孟德爾群體所包含的所有個體擁有的基因的總數(shù)遺傳平衡定律的要點:1)在隨機交配的大群體中,沒有其他因素的影響基因頻率世代不變2)任何一個大群體中,無論基因頻率如何,只要經(jīng)過一代交配,一對常染色體基因型不變3)在平衡群體中,基因頻率與基因型頻率關系有:D=P2H=2PqR=q2遺傳平衡群體成立的條件1)必須為大群體2)隨機交配3)無遷移現(xiàn)象4)無突變5)無選擇包括人工和自然選擇應用:育種上通過選擇改變基因頻率和基因型頻率。從根本上打破舊平衡建立新平衡,以達到提高畜群品質的目的;家畜保種上克服突變、遷移及遺傳漂變的影響,保持現(xiàn)有品種或品系的基因始終處于平衡狀態(tài)影響遺傳平衡定律的因素1)突變2)選擇淘汰率:某一基因型個體在下一代淘汰的個體數(shù)占后代總數(shù)的比率適應度:在選擇中某一基因型個體在下一代平均保留后代的比率3)遺傳漂變:由于樣本機誤造成基因頻率的隨機波動,可發(fā)生于任何群體中。4)遷移同質交配:表型相似或相同的個體間的交配異質交配:不同表型個體間的交配第十章非孟德爾遺傳非孟德爾遺傳包括:母體效應,劑量補償效應,基因組印跡,核外遺傳母體效應:子體的遺傳物質來自母方,但其表型不受本身基因型作用,與母體基因型相同,表型不同母體效應的特點:自己的基因型推遲一代表達;子一代表型受母體基因型的影響,表型不與母體相同,不按自己的基因型發(fā)育,而按母本的基因型。巴氏小體:將XX個體中失活的那條染色體命名為巴氏小體劑量補償效應:在哺乳動物中,只有一條X染色體具有活性,雌雄動物之間雖然X染色體的數(shù)量不同,但X染色體上基因產(chǎn)物的劑量是平衡的萊昂假說的要點巴氏小體是一個失活的X染色體,失活的過程稱為萊昂化X染色體的失活是隨機的在哺乳動物中,雌雄個體細胞中的兩個X染色體中有一個在受精后失活在失活后,失活的染色體在細胞分裂過程中,一直失活在生殖細胞形成后,失活的染色體復活X染色體失活的三步:起始;擴散;維持基因組印跡:源自雙親的兩個等位基因,在遺傳后代時一方不表達或很少表達,依靠單親的性狀傳遞某種遺傳性狀的現(xiàn)象8.印跡的特點1)正反交結果不一致2)印跡即為抑制,母本印跡父本表達;父本印跡母本表達3)印跡可發(fā)生在一個基因上,一條染色體區(qū)段上,整條染色體上甚至全部來源的單條染色體印跡的階段:建立階段;維持階段;重建階段核外遺傳的特點:子代獲得母體基因,表現(xiàn)與母體相同的性狀核外遺傳:研究的是細胞核染色體以外的遺傳物質的結構,功能及遺傳信息傳遞的知識體系核外基因遺傳的特征:a.無組織特異性B.為多拷貝基因組結構一般為共價,閉合,環(huán)狀分子,分子量小呈現(xiàn)嚴格的母系遺傳特征第十一章基因工程是指在分子水平上采取工程建設方式,按照預先設計的藍圖,借助于實驗室技術將某種生物的基因或基因組轉移到另一種生物中去,使后者獲得新遺傳性狀的一門技術。基因操作中的工具酶:手術刀一限制性核酸內切酶、核酸外切酶縫紉機一連接酶;復印機一DNA聚合酶、逆轉錄酶基因工程的內容:目的基因的獲得;目的基因與載體的連接成重組DNA分子;重組DNA分子導入受體細胞;篩選重組克隆;基因表達與產(chǎn)物分離限制性核酸內切酶簡稱限制性內切酶,是一類能識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列并具有專一切割位點的脫氧核糖核酸水解酶。5.限制性內切酶分類類別反應必須因子專一性活性I型S-腺苷基蛋氨酸,ATP,Mg2+識別部位和切點不同,無特定切割位點內切甲基化II型Mg2+特定識別、特定切割、切點在識別序列內部只有限制酶活性III型ATP,Mg2+特定識別,切割隨機,切點在識別序列一側一定距離(3,端7-26bp)內切甲基化6.II型限制性內切酶的特性1)II型限制酶的識別特異性回文識別序列II型限制酶的識別序列大多是具有雙重對稱結構,或稱回文序列(PalindromicSequence)2)識別特定的核苷酸序列,其長度一般為4-8個核苷酸。3)具有特定的酶切位點和酶切末端。切割方式有兩種:平頭末端;粘性末端7載體:.將外源DNA或基因攜帶入宿主細胞(hostcell)的工具稱為載體。基因工程載體的分類:(1)質粒載體(2)噬菌體載體(3)病毒載體(4)人工構建合載體理想質粒載體的基本要求:1)能夠在宿主細胞中大量復制。(2)具有一種或多種限制酶的單一切割位點,并在此位點插入外源DNA片段。(3)分子量盡量小。(4)應包含一個可供選擇的標記基因,這個基因中間可插入一段外源DNA而失活,導致表型改變。(5)還應包含一個標記基因(性狀),以區(qū)別轉化細胞和未轉化細胞。一般質粒的性質:質粒的復制;質粒的拷貝;質粒的不相容性;質粒的宿主范圍;轉移性;遺傳標記;兩個質粒在同一宿主中不能共存的現(xiàn)象稱質粒的不相容性,它是指在第二個質粒導入后,在不涉及DNA限制系統(tǒng)時出現(xiàn)的現(xiàn)象。質粒的類型:松馳型質粒:分子量較小,不具傳遞能力,復制不需要質粒編碼的功能蛋白,完全依賴于宿主提供的半衰期較長的酶(如DNA聚合酶I、IIL依賴于DNA和RNA聚合酶等)來進行。嚴緊型質粒:復制要求同時表達一個由質粒編碼的蛋白質。多半是一些具有自身傳遞能力的質粒,分子量較大,其DNA復制與宿主染色體復制相偶聯(lián)。獲得目的基因的方法:PCR法;分離;化學合成PCR與大腸桿菌復制不同之處類別大腸桿菌復制PCR引物RNA單鏈DNA聚
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