體內(nèi)藥物分析考試

.z.**大學(xué)繼續(xù)教育學(xué)院《體內(nèi)藥物分析》習(xí)題集名詞解釋反相HPLC答：即流動相極性大于固定相極性的HPLC。ODS答：即十八烷基硅烷鍵合硅膠，為常用反相HPLC的固定相。熒光光譜答：以發(fā)射波長為橫坐標(biāo)，熒光強度為縱坐標(biāo)所作的圖。激發(fā)光譜答：以激發(fā)波長為橫坐標(biāo)，熒光強度為縱坐標(biāo)所作的圖。RSD答：相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，即精密度的一種表示方法。一相代謝答：指藥物在體內(nèi)發(fā)生的氧化反應(yīng)、還原反應(yīng)、水解反應(yīng)。二相代謝答：指藥物在體內(nèi)的結(jié)合反應(yīng)，包括：葡萄糖醛酸結(jié)合、硫酸酯化、甲基化、乙?；被峋Y合、谷胱甘肽綴合等。檢測限答：表示藥物的最低可測度，不必定量，通常以S/N=2~3倍時被測藥物的絕對量表示。定量限答：表示藥物可定量測定的最低量，須符合一定精密度和準(zhǔn)確度要求，常以標(biāo)準(zhǔn)曲線最低濃度點來確定，或以S/N=5～10確定。血清答：全血經(jīng)離心后的上清液。血漿答：全血加抗凝劑（肝素等），經(jīng)離心后的上清液。酶免疫分析答：酶免疫分析是在放射免疫分析基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種免疫分析方法，以酶代替同位素來標(biāo)記藥物，酶與底物、輔酶等反應(yīng)后引起吸收光譜變化而被檢測。手性藥物答：分子結(jié)構(gòu)中含有不對稱碳原子（即手性中心）的藥物稱為手性藥物。TDM答：治療藥物監(jiān)測，為英文"therapeuticdrugmonitoring”的縮寫。冷凍答：指－20℃人工抗原答：全稱為人工完全抗原，將藥物等小分子半抗原與蛋白質(zhì)、多肽等大分子物質(zhì)經(jīng)人工合成而得，具有免疫原性。生物轉(zhuǎn)化答：主要指體內(nèi)代謝反應(yīng)。提取回收率答：指藥物加入到生物樣本中經(jīng)前處理后測得的量與理論加入量的比值。CYP1A答：細(xì)胞色素P4501族A亞族第2個酶基因。毛細(xì)管電泳答：即高效毛細(xì)管電泳(HPCE),是以高壓電場為驅(qū)動力，以毛細(xì)管為分離通道，依據(jù)各組分之間的遷移速度和分配行為上的差異而實現(xiàn)分離的一類液相分離技術(shù)。填空氣相色譜法中常用的檢測器有氫焰離子化檢測器、氮磷檢測器、電子捕獲檢測器、MS等。分析方法認(rèn)證的主要指標(biāo)線性*圍、準(zhǔn)確度、精密度、專屬性、靈敏度、穩(wěn)定性等。在毛細(xì)管電泳中，驅(qū)動荷電物質(zhì)前進(jìn)的兩個重要作用力是電泳流和電滲流。手性HPLC法常用測定方法有手性試劑衍生化法、手性流動相添加劑法、手性固定相法。體內(nèi)藥物分析的特點干擾雜質(zhì)多，樣品量少濃度低，不能再度獲得完全相同的樣品，要有一定的儀器設(shè)備、工作量大等。6．精密度的表示方法有標(biāo)準(zhǔn)差（SD）、變異系數(shù)（CV）、相對標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）等。7.紫外光譜法消除干擾的方法有差示光譜法、導(dǎo)數(shù)光譜法、雙波長法等。8.液相色譜中常用檢測器有紫外檢測器（可變波長、二極管陣列）、熒光檢測器、電化學(xué)檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器、MS等。9.毛細(xì)管電泳分離模式有毛細(xì)管區(qū)帶電泳，膠束電動色譜，毛細(xì)管凝膠色譜，毛細(xì)管等電聚焦，毛細(xì)管等速電泳，移動界面毛細(xì)管電色譜。10.常用生物樣品有血樣（血漿、血清、全血），尿樣，唾液等。11.常用去蛋白的方法有蛋白質(zhì)沉淀法（加蛋白質(zhì)沉淀劑，如：三氯乙酸，高氯酸，Zn2+，Cu2+，硫酸銨，氯化鈉，甲醇，乙腈，丙酮等）和組織酶消化法（加蛋白水解酶如：胃蛋白酶，胰蛋白酶，枯草菌溶素等）。12.抗血清的鑒定指標(biāo)有特異性，活度和滴度。13.反相HPLC法常用流動相有甲醇-水，乙腈-水，四氫呋喃-水等。14.生物樣品中藥物與代謝物的提取方法有液-液提取和液-固提取等。15.影響血藥濃度的因素有機體因素（生理因素、遺傳因素、病理因素）、藥物因素（劑型、手性藥物相互作用）、環(huán)境因素（藥酶誘導(dǎo)劑、抑制劑、大氣污染、飲食）等。16.影響液-液提取的因素有水相pH值、提取溶劑和離子強度等。17.在放射免疫分析中，結(jié)合物與游離標(biāo)記物的分離方法有沉淀法、吸附法、固相法、差速遷移法、雙抗體法。18.常用聯(lián)用技術(shù)有LC-MS，GC-MS，GC-GC，HPLC-HPLC，GC-HPLC，免疫分析-HPLC等。19.GC-MS中常用離子源包括電子轟擊、化學(xué)電離、負(fù)離子化學(xué)離子化等。20.體內(nèi)藥物分析方法包括光譜法（比色、紫外、熒光），色譜法（HPLC、GC、GC-MS、LC-MS），免疫分析法（放射免疫、酶免疫、熒光免疫）等。三、單選題高效液相中流動相極性大于固定相的稱為（A）.A.RP-HPLCB.HPTLCC.NP-HPLCD.LLPCE.HPCE尿中異煙肼及乙酰異煙肼的比色測定是利用（B）專屬反應(yīng)（K－氯胺T反應(yīng)）A異煙肼B乙酰異煙肼C異煙肼及乙酰異煙肼D異煙腙E異煙酸放射免疫法與熒光免疫法的區(qū)別在于（D）A抗體不同B親和力不同C標(biāo)準(zhǔn)抗原不同D標(biāo)記物不同E原理不同引起藥物氧化代謝的主要酶是（D）A氧化酶B硫酸酯酶C脫氫酶D細(xì)胞色素P450E葡醛酸轉(zhuǎn)移酶藥理作用強度與下列哪一項最相關(guān)（C）A血液濃度B攝入量C血液中游離藥物的濃度D與蛋白結(jié)合藥物的濃度E血藥總濃度6.一般鍵合相色譜的使用pH*圍為（E）A3～9B2～9C2～D3～8E2～87.表示生物樣品測定方法準(zhǔn)確度的是（E）A檢測限B定量限C精密度D線性*圍E回收率8.屬于藥物二相代謝酶的是（E）A氧化酶B酯酶C脫氫酶D細(xì)胞色素P450E葡醛酸轉(zhuǎn)移酶9.在色譜定量分析中，采用內(nèi)標(biāo)法的目的是（C）A提高靈敏度B改善分離度C改善精密度D增加穩(wěn)定性E增加選擇性10.高效液相中流動相極性小于固定相的稱為（C）.A.RP-HPLCB.HPTLCC.NP-HPLCD.LLPCE.HPCE11.表示生物介質(zhì)中藥物最低可測度的是（A）A檢測限B定量限C線性*圍D最低檢測濃度E可信限12.以發(fā)射波長對熒光強度所作的圖稱為（E）A激發(fā)光譜B照射光譜C紫外發(fā)射光譜D吸收光譜E熒光光譜（發(fā)射光譜）13.氣相色譜進(jìn)樣室溫度一般要求（D）A低于柱溫B低于沸點10CC不得低于250D高于被測物沸點E等于柱溫14.欲提取尿中*一堿性藥物，其pKa為7.8，要使99.9%的藥物能被有機溶劑提取，尿樣pH應(yīng)調(diào)節(jié)到（D）A.5.8B.9.8C15.蒸發(fā)光散射檢測器主要用于（C）的檢測A揮發(fā)性物質(zhì)B有紫外吸收的物質(zhì)C無紫外吸收的物質(zhì)D極性物質(zhì)E非極性物質(zhì)16.HPLC離子抑制色譜主要用于（B）的分析A弱酸性物質(zhì)B弱酸弱堿物質(zhì)C中性物質(zhì)D強極性物質(zhì)E非極性物質(zhì)17.體內(nèi)藥物分析方法學(xué)研究要求考察穩(wěn)定性，以下內(nèi)容中哪一項不屬于穩(wěn)定性試驗內(nèi)容(E)A長期貯存穩(wěn)定性B短期室溫穩(wěn)定性C冷凍-解凍穩(wěn)定性D貯備液穩(wěn)定性E流動相穩(wěn)定性18.測定藥物的血漿蛋白結(jié)合率時應(yīng)注意什么問題（A）A測定治療量時的結(jié)合率B采用超濾法測定C體內(nèi)外測定相結(jié)合D測定高中低濃度的結(jié)合率E采用平衡透析法19.表示樣品中含有其他共存物質(zhì)時該法能定量測定被測物的能力的是（D）A方法的精密度B方法的準(zhǔn)確性C方法的相關(guān)性D方法的選擇性E方法的線性*圍20.方法的專屬性也稱選擇性，在體內(nèi)藥物分析中主要考察（E）A相關(guān)物質(zhì)B內(nèi)標(biāo)物C共存雜質(zhì)D降解物E內(nèi)源性物質(zhì)四、多選題RIA中分離結(jié)合與游離標(biāo)記物的方法有（ACDE）A雙抗體法BLC/MS法C吸附法D固相法E沉淀法體內(nèi)藥物分析的任務(wù)包括（ABCD）.A分析方法的研究B血藥濃度監(jiān)測C藥動學(xué)研究D體內(nèi)內(nèi)源性物質(zhì)測定E新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究紫外分光光度法中消除干擾的方法有（ABE）A差示分光光度法B導(dǎo)數(shù)光譜法C二極管陣列法D化學(xué)發(fā)光法E雙波長法氣-質(zhì)聯(lián)用儀中接口的作用是（BC）A連接作用B使壓力匹配C組分濃縮D檢測器作用E電離作用5.藥物二相代謝物——綴合物（結(jié)合物）的水解方法有（ACD）A酸水解B堿水解C溶劑解D酶水解E離子對法6.質(zhì)譜儀的基本部件有（BCE）A接口B離子源C質(zhì)量分析器D色譜柱E檢測器7.體內(nèi)藥物分析方法的專屬性主要考察（BDE）A輔料B共服藥C有關(guān)物質(zhì)D內(nèi)源性雜質(zhì)E代謝物8.測定血漿蛋白結(jié)合率的常用方法（AB）A、平衡透析法B、超濾法C、酶法D、衍生化法E、反相色譜法9.設(shè)計生物樣品預(yù)處理方法時，應(yīng)考慮(ABCDE)A藥物的理化性質(zhì)B藥物的濃度*圍C測定目的D生物樣本類型E擬采取的測定方法10.氣相色譜中常用流動相為（CDE）A甲醇-水B乙腈-水C氦氣D氮氣E氫氣11.抗血清的鑒定指標(biāo)（BCD）A吸光強度B特異性C活度D滴度E放射性強度12.免疫分析中基本試劑包括（ADE）A特異性抗體B分離試劑C免疫原D標(biāo)準(zhǔn)抗原E標(biāo)記抗原13.在HPLC法中常用來調(diào)節(jié)流動相pH的酸堿是（ABDE）A枸櫞酸B稀醋酸C稀硫酸D三乙胺E磷酸鹽14.利用吸光度差值（A）來消除干擾的方法是（AC）A差示分光光度法B導(dǎo)數(shù)光譜法C雙波長法D化學(xué)發(fā)光法E二極管陣列法15.質(zhì)譜儀常用離子源（ADE）A電子轟擊B熱導(dǎo)C電子捕獲D場致離子化E化學(xué)電離16.藥物在體內(nèi)的一相代謝包括（AC）A氧化反應(yīng)B甲基化反應(yīng)C水解反應(yīng)D綴合反應(yīng)E與大分子結(jié)合反應(yīng)17.影響液-液提取的因素有(ABC)A水相pHB提取溶劑C離子強度D流速E裝樣量18.影響液-固提取的主要因素有(CDE)A水相pHB提取溶劑C固定相D洗脫液流速E樣品裝載量19.在反相HPLC中，增加流動相中甲醇含量（BCE）A被測物保留時間延長B被測物保留時間變短C被測物容量因子k值變小D流動相極性增加E洗脫能力增加20.離子對反相色譜中，烷基磺酸鹽主要用作（AE）藥物的反離子。A有機強堿B有機強酸C羧酸D有機弱酸E季銨鹽五、問答題生物樣本分析前為什么要除去蛋白質(zhì)？常用去蛋白質(zhì)的方法有哪些？答：除蛋白質(zhì)的意義：使結(jié)合型藥物釋放出來，以測定總濃度。得到較"干凈”的提取液，減少乳化。消除對測定的干擾。常用去蛋白質(zhì)方法：蛋白質(zhì)沉淀法——生成不溶性鹽或鹽析和脫水作用。包括：加酸類、重金屬鹽、中性鹽和能與水混溶的有機溶劑等，如：三氯乙酸、高氯酸、Cu2+、硫酸銨、甲醇、乙腈等。組織酶消化法——蛋白水解酶，如胰蛋白酶、胃蛋白酶等。影響血藥濃度的因素有哪些？答：包括機體因素：生理（年齡、性別、妊娠）、病理、遺傳；藥物因素：劑型因素、手性藥物對映體相互作用；環(huán)境因素：化學(xué)物質(zhì)、合并用藥；人體晝夜節(jié)律、營養(yǎng)和精神狀態(tài)。簡述體內(nèi)藥物分析方法建立的一般步驟。答：首先進(jìn)行文獻(xiàn)查閱，設(shè)計方案，然后通過實驗加以驗證。一般實驗步驟如下：以純品進(jìn)行測定——選擇最佳測定條件（線性，靈敏度、pH、檢測波長等）?？瞻讟悠窚y定——按設(shè)定的方法進(jìn)行前處理和測定，考察空白值的大小和干擾程度。以水代替空白樣品，添加標(biāo)準(zhǔn)品后測定，以獲得提取回收率的大致情況，從而對前處理中各步操作條件進(jìn)行選擇。空白樣品中添加標(biāo)準(zhǔn)后測定——求樣品回收率，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線等。體內(nèi)實樣測定——根據(jù)實樣測定結(jié)果來判斷設(shè)定的方法是否合理、可行。以上步驟需要反復(fù)試驗以獲得最佳實驗條件。說明RP-HPLC法的常用固定相、流動相、適用*圍，及流動相中甲醇等有機溶劑濃度變化對被測組分保留時間的影響。答：常用固定相——ODS（C18）柱；流動相——甲醇-水、乙腈-水、四氫呋喃-水；適用*圍——非極性至中等極性的各類分子型化合物；流動相中甲醇等有機溶劑濃度增大，被測組分保留時間縮短。藥物進(jìn)入體內(nèi)后一般需經(jīng)歷哪些物理、化學(xué)變化？這些變化與藥理作用的關(guān)系？答：物理變化——系指藥物與生物大分子如血漿蛋白的結(jié)合反應(yīng)?；瘜W(xué)變化——系指藥物的代謝反應(yīng)，包括一相代謝（氧化、還原、水解反應(yīng)）和二相代謝反應(yīng)（各種結(jié)合反應(yīng)）由于藥物的作用強度與血液中游離藥物的濃度密切相關(guān)，同時藥物經(jīng)代謝后活性發(fā)生了變化，故藥物的物理、化學(xué)變化與藥理作用密切有關(guān)。為什么要進(jìn)行體內(nèi)藥物分析？體內(nèi)藥物分析的主要任務(wù)是什么？答：為開展臨床藥學(xué)和臨床藥理學(xué)研究服務(wù)，以指導(dǎo)臨床安全、合理、有效用藥和正確評價新藥。體內(nèi)藥分的主要任務(wù)：分析方法學(xué)的研究、治療藥物監(jiān)測、藥代動力學(xué)研究、人群代謝分型研究、體內(nèi)內(nèi)源性物質(zhì)的測定及其它方面（藥物濫用、吸毒、興奮劑檢測、法醫(yī)毒物分析等）的應(yīng)用。藥物在體內(nèi)的代謝包括哪些反應(yīng)？答：一相代謝（氧化反應(yīng)、還原反應(yīng)、水解反應(yīng)）和二相代謝（葡萄糖醛酸結(jié)合、硫酸酯化、甲基化、乙?；被峋Y合、谷胱甘肽綴合等反應(yīng)）。為什么要研究手性藥物？常用手性HPLC法有哪些？答：因手性藥物兩對映體在體內(nèi)的生物活性有差異，包括藥效學(xué)差異（競爭拮抗等）和藥動學(xué)差異（吸收、分布、代謝、排泄）。為正確評價兩對映體的作用和進(jìn)行對映體藥物的質(zhì)量控制，所以要研究手性藥物。常用手性HPLC法有：手性衍生化法、手性流動相添加劑法、手性固定相法。9.免疫分析的基本原理與基本條件是什么？答：基本原理：即抗原-抗體結(jié)合反應(yīng)。在反應(yīng)體系中，當(dāng)抗體（Ab）量一定時，抗原（Ag）與標(biāo)記抗原（Ag*）就與抗體發(fā)生競爭性結(jié)合反應(yīng)，生成的[Ag*-Ab]與[Ag]的量呈負(fù)相關(guān)，這種特異的競爭性抑制的數(shù)量關(guān)系是免疫分析的定量基礎(chǔ)?；緱l件是：特異性抗體、標(biāo)記抗原、未標(biāo)記抗原（即標(biāo)準(zhǔn)品）。10.什么是體內(nèi)藥物分析？與常規(guī)藥物分析相比，體內(nèi)藥物分析有哪些特點？答：體內(nèi)藥物分析旨在通過各種分析手段，了解藥物在體內(nèi)的數(shù)量與質(zhì)量變化。獲得藥物代謝動力學(xué)的各種參數(shù)和信息，從藥品生產(chǎn)、臨床醫(yī)療、實驗研究等方面對所研究藥物作出估計和評價。與常規(guī)藥物分析相比，體內(nèi)藥物分析具有干擾雜質(zhì)多、樣品量少且濃度變化大，不能再度獲得完全相同的樣品、有時要求較快提供結(jié)果、要有一定的儀器設(shè)備、工作量大等特點。11.什么叫檢測限？什么叫定量限？兩者的區(qū)別是什么？答：檢測限（LOD）——表示藥物的最低可測度，不必定量，通常以信噪比（S/N）=2~3時被測藥物的絕對量表示；定量限——即定量下限（LLOQ），表示藥物可定量測定的最低量，須符合一定精密度和準(zhǔn)確度要求，常以標(biāo)準(zhǔn)曲線最低濃度點來確定，或以S/N=5～10確定。兩者的區(qū)別主要在于是否有定量要求：LOD沒有定量要求，而LLOQ則有定量要求。12.為什么一些藥物欲獲得相近血藥濃度，個體之間劑量相差可達(dá)數(shù)十倍？答：因為藥物進(jìn)入體內(nèi)到產(chǎn)生一定血藥濃度，要經(jīng)過一系列的過程，而在這一過程中會受到多種因素影響：包括機體因素中的生理因素（性別、年齡、妊娠），病理因素（胃、肝、腎疾病影響藥物的吸收、代謝和排泄），遺傳因素（快代謝、慢代謝）；藥物因素中的劑型因素（影響藥物溶解速度的藥物粒子大小、晶型，輔料，工藝），手性藥物對映體相互作用（藥效學(xué)、藥動學(xué)相互作用）；環(huán)境因素中的化學(xué)物質(zhì)和合并用藥（藥酶誘導(dǎo)劑、抑制劑、藥物相互作用），大氣污染，飲食；以及人體晝夜節(jié)律、營養(yǎng)狀態(tài)、精神狀態(tài)等。13.常用生物樣本有哪些？如何采集、儲存？答：常用生物樣本有：血樣（血漿、血清和全血）、尿樣、唾液。采集與儲存：血漿——全血加抗凝劑，離心，取上清液；血清——全血離心，取上清液。采血后必須盡快離心分離出血漿或血清，置－20℃以下冷凍保存。尿樣——收集服藥后一定時間內(nèi)尿樣，記錄體積，混合均勻后取一定量,測定尿中藥物濃度，計算一定時間內(nèi)尿中藥物的累積量。唾液——漱口15分鐘后收集口內(nèi)自然流出或經(jīng)舌在口內(nèi)攪動后流出的混合唾液，離心后取上清液。樣本采集后不能及時測定，可置4℃冷藏，若放置時間較長，則需-20℃～-80℃冷凍保存。14.體內(nèi)藥物分析方法有哪些？各有何優(yōu)缺點？答：體內(nèi)藥物分析方法可分為三大類：光譜法——包括比色法、紫外法和熒光法。方法優(yōu)點是操作簡便、快速，所需設(shè)備簡單。其缺點是不具備分離功能，選擇性較差，對前處理要求高；比色法和紫外法靈敏度較低。免疫法——包括放射免疫、酶免疫、熒光免疫等。方法優(yōu)點是靈敏、專屬，操作簡便、快速，對樣品預(yù)處理要求不高。其缺點是精密度較差，需要試劑盒和專屬儀器。色譜分析法——包括HPLC,GC,LC/MS,GC/MS等。方法優(yōu)點是具有分離分析功能，是評價其它方法的參比方法。15.簡述紫外差示光譜法消除干擾的原理。答：被測物在兩種不同的溶液系統(tǒng)中具有大的紫外