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發(fā)酵工業(yè)中噬菌體的感染及防護科三五組第1頁/共13頁我國的傳統(tǒng)發(fā)酵產(chǎn)品醬油、醋、腐乳等享譽世界我國的釀酒已經(jīng)有4000多年的歷史我國的醬油距今已有3000年的歷史古老的發(fā)酵—天然發(fā)酵第2頁/共13頁微生物發(fā)酵技術(shù)的初創(chuàng)時期微生物學家已對微生物形態(tài)和生理進行觀察與研究。純培養(yǎng)技術(shù)的建立有的發(fā)酵過程開始時采用固體發(fā)酵形式進行生產(chǎn)。該時期生產(chǎn)的發(fā)酵產(chǎn)物都屬于微生物形成的初級代謝產(chǎn)物發(fā)酵產(chǎn)品以厭氧發(fā)酵居多,如酒精發(fā)酵、乳酸發(fā)酵。發(fā)酵生產(chǎn)與化學工程結(jié)合,促成了發(fā)酵生產(chǎn)的第一次飛躍第3頁/共13頁微生物發(fā)酵技術(shù)的全盛時期以微生物生命活動為研究中心、設(shè)計和指導工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)。幾個里程碑1.青霉素的誕生2.生物轉(zhuǎn)化的興起3.氨基酸的生產(chǎn)4.基因工程技術(shù)的誕生第4頁/共13頁線狀體無尾結(jié)構(gòu)的二十面體有尾結(jié)構(gòu)的二十面體噬菌體的種類第5頁/共13頁發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)菌的噬菌體可以從異常發(fā)酵液和工廠環(huán)境中分離出來,溶源性細菌也混雜在工廠周圍環(huán)境的細菌中。這樣,噬菌體極易污染發(fā)酵生產(chǎn),導致發(fā)酵異常,造成嚴重損失。(生產(chǎn)環(huán)境中有噬菌體)菌種本身帶噬菌體,特別是溶源性噬菌體,對這種菌種,一經(jīng)發(fā)現(xiàn),應(yīng)立即棄去。
噬菌體污染的原因第6頁/共13頁
噬菌體污染的特征發(fā)酵液光密度上升緩慢,甚至下降,肉眼可見發(fā)酵液逐漸變清,鏡檢時,有大量異常菌體出現(xiàn);發(fā)酵周期延長,耗糖速度緩慢或停止,發(fā)酵產(chǎn)物生成量少或不增加,發(fā)酵液中殘?zhí)歉?;產(chǎn)生大量泡末,發(fā)酵液呈粘稠狀;用敏感菌作平板檢查時,可以看到出現(xiàn)大量噬菌斑。第7頁/共13頁
噬菌體的檢查方法1.雙層瓊脂平板法
檢查有無透明的噬菌斑。
2.液體培養(yǎng)檢查法
將培養(yǎng)基和發(fā)酵菌種及待檢發(fā)酵液三者混合,培養(yǎng)后觀察培養(yǎng)液是否變清。3.斑點試驗法
培養(yǎng)后,觀察是否有噬菌斑。4.玻片快速法
經(jīng)短期培養(yǎng)后,在低倍鏡下觀察是否有噬菌斑。
第8頁/共13頁1
決不使用可疑菌種;2
清除周圍環(huán)境中存在的噬菌體。能滅菌的滅菌,能消毒的消毒,搞好清潔衛(wèi)生工作;3
選育抗噬菌體菌株4
輪換使用菌株。因為一個菌株用的時間一長,就有可能出現(xiàn)該菌種的噬菌體。5
注意通氣質(zhì)量。取風口應(yīng)設(shè)在30~40米的高空,空氣過濾器要保證質(zhì)量;噬菌體污染的防治措施第9頁/共13頁發(fā)酵液污染噬菌體后的搶救措施1.若在發(fā)酵前期污染了噬菌體(1)補加抗性種子,并根據(jù)發(fā)酵液中的營養(yǎng)多少,適當補加營養(yǎng)物質(zhì);(2)
補加約50%的已培養(yǎng)至對數(shù)期的正常的發(fā)酵液,再進行發(fā)酵;(3)
若噬菌體輕度污染,菌體仍能較正常地生長,并積累代謝產(chǎn)物,則可照常進行發(fā)酵,若污染嚴重,則用加熱法(70~80℃)滅活噬菌體,放罐后重消毒。第10頁/共13頁2.若在發(fā)酵中后期污染了噬菌體若情況比較嚴重,則應(yīng)提前放罐,盡快提取產(chǎn)物。發(fā)酵罐、管道、洗滌水及用具均應(yīng)徹底滅菌,防止噬菌體擴散而造成新的污染。并及時改用抗該噬菌體的生產(chǎn)菌株。
3.對某些產(chǎn)品可用藥物防治。選擇能特異性地抑制噬菌體而對生產(chǎn)菌株及其發(fā)酵產(chǎn)物的積累和提取均無影響,又符合衛(wèi)生要求、對人無毒的藥物。盡可能選活性高(用藥量少)、價
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