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臨床輸血檢驗技術(shù)HLA抗體檢測技術(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)熟悉淋細(xì)胞毒交叉配合試驗的原理、方法及質(zhì)量控制。HLA血清學(xué)分型試驗的原理及質(zhì)量控制。淋巴細(xì)胞毒交叉配合試驗+補(bǔ)體臺盼藍(lán)染液抗原與抗體結(jié)合當(dāng)特異性抗體與待檢淋巴細(xì)胞表面HLA分子結(jié)合后，激活補(bǔ)體，使細(xì)胞膜通透性增加或細(xì)胞死亡，加入染料后在顯微鏡下可見結(jié)合補(bǔ)體的細(xì)胞被活性染料著色。分離淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞毒交叉配合試驗供者淋巴細(xì)胞+受者血清37℃孵育30分鐘兔補(bǔ)體2%臺盼藍(lán)死細(xì)胞體積大，著黑色，無折光性；活細(xì)胞大小正常，未著色，折光性強(qiáng)，較透亮；抗體測定-試管法37℃孵育60分鐘淋巴細(xì)胞毒交叉配合試驗質(zhì)量控制HLA抗原抗體最好選用單克隆抗血清抗體效價適宜存在劑量效應(yīng)淋巴細(xì)胞要求活性和純度高濃度為2～4×106/mL病理狀態(tài)下HLA可能會表達(dá)異常孵育溫度和時間嚴(yán)格掌握孵育時間最適溫度為20-25℃其他補(bǔ)體染液應(yīng)進(jìn)行預(yù)試驗；用甲醛固定設(shè)置陽性和陰性對照淋巴細(xì)胞毒交叉配合試驗淋巴細(xì)胞毒交叉配合試驗<10%或為陰性才能施行腎移植。如果受體以前曾經(jīng)接受過輸血、有過妊娠或接受過同種異體移植，很可能在其血清內(nèi)已產(chǎn)生抗淋巴細(xì)胞抗體，對人類白細(xì)胞抗原（HLA）敏感。此時，淋巴細(xì)胞毒交叉配合試驗可為陽性，器官移植術(shù)后將可能發(fā)生超急性排斥反
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