抗體-醫(yī)學(xué)知識專家講座

第六章抗體抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第1頁

抗體（antibody,Ab）:機體免疫細胞被抗原激活后，由分化成熟終末B細胞---漿細胞合成、分泌一類能與對應(yīng)抗原特異性結(jié)合含有免疫功效球蛋白。

免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）:

含有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體分子相同球蛋白。

免疫球蛋白存在形式：

膜型（membraneimmunoglobulin,mIg）---B細胞膜上抗原受體；

分泌型(secretedimmunoglobulin,sIg)

---分泌進入體液,介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答。抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第2頁第一節(jié)免疫球蛋白結(jié)構(gòu)

一.基本結(jié)構(gòu)(一)重鏈（heavychain，H）2條

輕鏈（lightchain，L）2條(二)可變區(qū)（variableregion,V區(qū)）恒定區(qū)（constantregion,C區(qū)）(三)超變區(qū)（

hyper-variableregion,HVR),又稱

互補決定區(qū)(complementarydeterminingregion,CDR）骨架區(qū)（frameworkregion,

FR）(四)鉸鏈區(qū)（hingeregion）抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第3頁抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第4頁抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第5頁抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第6頁二.功效區(qū)（domain）

輕鏈:VL，CL

重鏈:VH，CH1，CH2，CH3(IgG、IgA和IgD)多一個CH4（IgM和IgE）抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第7頁功效區(qū)主要功效：

VH和VL---抗原結(jié)合部位；CH1～3和CL---Ig遺傳標志所在；CH2(IgG)、CH3(IgM)---C1q結(jié)合部位；CH2～CH3(IgG)---結(jié)合并經(jīng)過胎盤；CH3(IgG)---FcγR結(jié)合部位；CH4(IgE)---FcεR結(jié)合部位?？贵w醫(yī)學(xué)知識專家講座第8頁

三.水解片段

木瓜蛋白酶（Papain）IgG

Fab段(fragmentofantigen-binding,抗原結(jié)合片段)

Fc段（fragmentcrystalizable,可結(jié)晶片段）

胃蛋白酶（Pepsin）IgGF(ab′)2pFc′

意義：說明Ig分子生物學(xué)作用；構(gòu)建基因工程抗體?？贵w醫(yī)學(xué)知識專家講座第9頁抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第10頁四.其它成份

1.連接鏈（joiningchain，J鏈)2.分泌片（secretorypiece,SP）

抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第11頁

第二節(jié)免疫球蛋白類型

雙重特征：抗體活性免疫原性（抗原物質(zhì)）抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第12頁

一.同種型（isotype）同一個屬每個個體都含有免疫球蛋白抗原特異性，其抗原決定簇主要存在于IgC區(qū)。

1.類和亞類（依據(jù)H鏈抗原性不一樣）五類：IgG---γ(gamma)IgA---α(alpha)IgM---μ(mu)IgD---δ(delta)IgE---ε(epsilon)抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第13頁抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第14頁亞類：IgG：IgG1,IgG2,IgG3,IgG4IgA：IgA1,IgA2IgM:IgM1,IgM22.型和亞型(依據(jù)輕鏈C區(qū)抗原特異性不一樣分型)：

κ(kappa)型、λ(lambda)型亞型(λ鏈)：OZ(+)(或λ1)：第190位(亮氨酸)OZ(-)(或λ2)：第190位(精氨酸)Kern(+)(或λ3)：第154位(甘氨酸)Kern(-)(或λ4)：第154位(絲氨酸)抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第15頁二.同種異型（allotype）同一個屬不一樣個體之間免疫球蛋白也含有差異性，主要反應(yīng)在分子CH和CL上一個或數(shù)個氨基酸差異(geneticmarkers---遺傳標志)。Gm因子：Gm1～30Am因子：A2m1，A2m2Km因子：Km1，Km2，Km3三.獨特型（idiotype）在同一個體內(nèi)，不一樣B細胞克隆所產(chǎn)生免疫球蛋白分子V區(qū)以及T、B細胞表面抗原受體V區(qū)所含有抗原特異性不一樣?？贵w醫(yī)學(xué)知識專家講座第16頁抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第17頁

第三節(jié)免疫球蛋白基因結(jié)構(gòu)及其表示

一.免疫球蛋白基因庫

H基因庫（重鏈基因連鎖群）：---第14號染色體κ基因庫（κ鏈基因連鎖群）：---第2號染色體λ基因庫（λ鏈基因連鎖群）：---第22號染色體抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第18頁

二.Ig基因結(jié)構(gòu)及其重排和表示κ鏈：Vκ(約100個)、Jκ(5個)、Cκ(1個)λ鏈：Vλ(約30個)、Jλ-Cλ(4個)

H鏈：V基因(約95個)D基因(27個)J基因(6個)C基因(9個)V區(qū)抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第19頁抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第20頁

三.Ig類別轉(zhuǎn)換（classswitching）

一個B細胞克隆在分化過程中V-D-J功效性基因片段保持不變，而發(fā)生C基因重排，使其表示抗體分子發(fā)生H鏈類改變，稱為類別轉(zhuǎn)換。

B細胞克隆IgM

IgGIFN-γ

IL-4IgE抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第21頁抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第22頁

第四節(jié)抗體功效

一.V區(qū)功效-----識別并特異性結(jié)合抗原

抗體分子：單體（IgG,IgE)---2價二聚體(分泌型IgA)---4價五聚體(IgM)---10價（5價）實際意義:a.中和效應(yīng)---中和毒素和病毒b.與Ag結(jié)合---促吞噬細胞吞噬抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第23頁

二.C區(qū)功效

1.激活補體系統(tǒng)Ab(IgM、IgG)+AgC1q補體經(jīng)典路徑

IgG4、IgA和IgE凝聚物

補體旁路路徑

2.介導(dǎo)免疫細胞活性

(1).調(diào)理作用（opsonization）：IgG+抗原(顆粒性)FcγR（單核、巨噬細胞及中性粒細胞）促吞噬細胞吞噬；

(2).ADCC：IgG+抗原(靶細胞)FcγR（NK細胞）殺傷靶細胞；

(3).介導(dǎo)超敏反應(yīng)：Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型超敏反應(yīng)。抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第24頁抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第25頁抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第26頁抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第27頁

第五節(jié)各類免疫球蛋白特征和功效

一.IgG普通特征：單體分子；四個亞類；血清中含量最高(75%Ig)；半衰期最長(21～23天)；3～5歲達成人水平(8.0～17mg/ml)；可與SPA結(jié)合?？贵w醫(yī)學(xué)知識專家講座第28頁生物學(xué)活性：經(jīng)過胎盤（新生兒抗感染）；激活補體（裂解細胞）；

調(diào)理作用（促進吞噬）；介導(dǎo)ADCC（細胞毒作用）。實際意義：a.抗感染；b.本身抗體本身免疫病；c.介導(dǎo)變態(tài)反應(yīng)(II、III型)；d.封閉抗體腫瘤細胞逃逸；e.親合層析法---IgG純化；f.免疫學(xué)檢測。

抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第29頁二.IgM

1.五聚體，分子量最大(900kd)，又稱巨球蛋白；2.人類發(fā)育過程中最早合成Ig；3.體液免疫應(yīng)答最先產(chǎn)生Ig---感染早期免疫；4.占血清Ig含量5～10%；5.半衰期:5天---血清中特異性IgM水平增高提醒有近期感染；6.激活補體；7.IgM不能經(jīng)過胎盤臍帶血或新生兒血清中IgM水平升高表明胎兒有宮內(nèi)感染；8.B細胞膜IgM(mIgM)體液免疫應(yīng)答；9.本身抗體本身免疫病，如；類風(fēng)濕因子?？贵w醫(yī)學(xué)知識專家講座第30頁

三.IgA

1.兩種類型：血清型---IgA1(主要)，單體(主要)；分泌型---IgA2(主要)，二聚體(主要),粘膜局部漿細胞合成；分泌片由粘膜上皮細胞合成；2.半衰期:6天；3.占血清Ig含量5～15%；4.粘膜局部抗感染免疫；5.聚合IgA激活補體替換路徑。

抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第31頁

四.IgD

1.單體分子；2.存在形式：分泌性---血清中，功效不清；膜結(jié)合性---B細胞表面,（1）是B細胞成熟主要標志；（2）抗原受體；3.占血清Ig含量1%；4.半衰期:3天?？贵w醫(yī)學(xué)知識專家講座第32頁

五.IgE1.單體分子；

2.血清中含量最低(占Ig0.002%)；

3.半衰期:3天；4.呼吸道和胃腸道漿細胞產(chǎn)生；5.介導(dǎo)I型超敏反應(yīng)；6.過敏性疾病和一些寄生蟲感染患者血清中特異性IgE水平增高?？贵w醫(yī)學(xué)知識專家講座第33頁第六節(jié)單克隆抗體和基因工程抗體一.多克隆抗體（polyclonalantibody）：指由不一樣B細胞克隆產(chǎn)生針反抗原物質(zhì)中各種抗原決定簇各種抗體混合物。如:免疫血清（含各種特異性抗體）。實際意義：（1）預(yù)防、治療感染性疾病，如：破傷風(fēng)抗毒素血清抗破傷風(fēng)，胎盤球蛋白抗病毒感染等，副作用：超敏反應(yīng)（2）臨床診療，如：肥達氏反應(yīng)---傷寒、副傷寒，缺點：特異性差。

抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第34頁二.單克隆抗體（monoclonalantibody,McAb）

由單一克隆B細胞雜交瘤產(chǎn)生，只識別抗原分子某一特定抗原決定簇特異性抗體。特點：含有高度均一性。雜交瘤細胞：骨髓瘤細胞---無限增殖；免疫B細胞---合成、分泌特異性抗體。雜交瘤技術(shù)---HAT培養(yǎng)基：次黃嘌(H),氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)?？贵w醫(yī)學(xué)知識專家講座第35頁抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第36頁

實際意義：

（1）抗原純化和結(jié)構(gòu)分析；（2）細胞發(fā)生、分化及功效說明；（3）臨床疾病診療和治療，如：免疫分子檢測；免疫導(dǎo)向藥品治療惡性腫瘤---McAb抗癌藥品(毒素或放射核素偶聯(lián))。

抗體醫(yī)學(xué)知識專家講座第37頁三.基因工程抗體(geneticengineeringantibody)

在DNA水平對Ig基因進行切割、拼接或修飾，導(dǎo)入受體細胞表示抗體。

如：人-鼠嵌合抗體(chimericantibody)

改型抗體(resha