《人載脂蛋白AⅠ羊多抗血清制備技術規(guī)程》

ICS65.020.20B41

DB32江 蘇 省 地 方 標 準DB32/TXXXX-2022人Technicalregulationsforproductionofsheepanti-humanapolipoproteinAⅠpolyclonalantiserum江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB32/TXXXX-2022DB32/TXXXX-2022II前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農業(yè)科學研究所提出。本文件由江蘇省畜牧業(yè)標準化技術委員會歸口。江蘇省農科院。本文件主要起草人：徐志偉、姚明霞、徐一然、溫小林、鄧碧華、于建寧、李云、胡強、張兆麗、譚圣偉、盛媛媛。PAGEPAGE1人載脂蛋白A羊多抗血清制備技術規(guī)程范圍本文件運用于人載脂蛋白AⅠ羊多抗血清制備中羊品種選擇和飼養(yǎng)要求、免疫佐劑選用、抗原乳化、抗原接種、抗體效價評估、抗血清制備的步驟和方法。規(guī)范性引用文件本文件無規(guī)范性引用文件。術語和定義下列術語和定義適用于本文件。AⅠApolipoproteinAⅠ用于運輸血液中脂類的高密度主要載脂蛋白,A1是載脂蛋白A族中最多的一種組分，約占HDL顆粒的65%，主要在肝臟、部分在小腸合成。羊的選擇和飼養(yǎng)要求選用體重30kg—40kg生長發(fā)育良好、10月齡左右的健康羊。采用群養(yǎng)放牧，適當補飼方式，每天早晚觀察羊的健康狀況?？乖笕搜逋ㄟ^優(yōu)化PEG沉淀、離子交換吸附的方法，純度達96%。免疫佐劑選用首次免疫佐劑采用弗氏完全佐劑，從第二次免疫開始，采用弗氏不完全佐劑?？乖榛捎酶咚偌羟蟹ㄈ榛乖Ｈ榛萜餍璺胖迷诮禍貖A套中，將佐劑按需要量置于乳化容器中，用吸管以60滴/min的速度緩慢加入載脂蛋白AⅠ抗原溶液，用漩渦混合器以1.5萬rmp/min混合均勻，抗原溶液全部加完后，再持續(xù)混合15min?？乖臃N免疫劑量和部位1mg1mg/ml,1。表1 免疫劑量和部位次數(shù)間隔天數(shù)（d）免疫接種部位第1次0腹股溝、肘部、耳后、額下、背側和足窩第2次15腹股溝、肘部、耳后、額下、背側和腹股溝淋巴結點第3~9次9腹股溝、肘部、耳后、額下和背側抗體效價評估在第716，可以判定為合格，可以采血?？寡逯苽洳裳?50mL1/5。血清制備37℃1h4500rmp/min15min乳白色或微黃色，去掉沉淀物雜質。外觀質量血清應呈黃色或微紅色血清狀液體，允許少量的絮狀物或沉淀。血清保存血清用滅菌