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文檔簡(jiǎn)介

放射自顯影術(shù)(ARG)

一、發(fā)展史

1867年Niepledestvicter發(fā)展鈾鹽能使膠片感光,但引出錯(cuò)誤的結(jié)論1896年H.Becqueral證實(shí)上述是輻射引起。1898年Bq.和居里夫婦發(fā)現(xiàn)210po,226Ra1924年Lacassagae首次研究鈾在生物體內(nèi)分布1939—1945各種記錄粒子徑跡的專用乳膠1946年Belanger和lebland—更好的液體乳膠,ARG分辨力大為提高。1950年P(guān)elc揭膜乳膠1956年 超微結(jié)構(gòu)及電鏡ARGARG的特點(diǎn):定位準(zhǔn)確敏感度高

可定量測(cè)量,還可做形態(tài)定量分析

不需復(fù)雜設(shè)備,應(yīng)用廣泛。

ARG的一般過(guò)程:引入示蹤劑→制備標(biāo)本→制備ARG→曝光→照像處理→標(biāo)本染色→分析各類材料的性質(zhì)和應(yīng)用1、乳膠及制品a、液體核乳膠:粘稠、10℃以下呈膠凍狀,40℃溫溶,極限50℃,出廠本底3個(gè)銀粒/1000μm應(yīng)用:核4——所有帶電粒子核2——a粒子 HW3—4——電鏡ARGb、干板:宏觀及光鏡ARGc、揭膜乳膠:光鏡定量ARGd、國(guó)外產(chǎn)品:美Eastman—KodakNTE英Kodak英IlfordL-4比利時(shí)GevaertNuc-307銀粒0.07-0.4Exp-6M按敏感度分為:0型:a粒子2型:3H,125I5型:用于低電離作用的β粒子徑跡ARG2、電影正片or幻燈片:

粒徑1μm,單面涂乳膠,厚15μm,外加保護(hù)層,除3H以外的各種核素宏觀ARG3、X光片:粒徑2.5μm,敏感性強(qiáng),但分辨力低,宏觀ARG,低能核素不適應(yīng)。4、氚片:進(jìn)口LKB產(chǎn)品,國(guó)產(chǎn)也有了,粒徑1μm,暗室安全光相當(dāng)耐受,宏觀3HARG5、彩色乳膠片干板:彩顯ARG1、潛影形成:2、潛影消退:3、顯影及顯影劑:最常用的顯影劑:D-196和D-191)米吐爾(硫酸甲基對(duì)氨基苯酸)主份,強(qiáng)還原劑 2)亞硫酸鈉:保護(hù)劑,能中和還原劑的氧化物,延長(zhǎng)顯影效力,還可溶解部分銀粒,減少其相互結(jié)合而導(dǎo)致粒變粗3)海德爾(以苯二酚):強(qiáng)還原劑,但與米吐爾不同。但與米吐爾不同。它還原力低,影像出現(xiàn)緩慢,可使影像密度增加

4)碳酸鈉:促進(jìn)劑,增加顯影5)溴化鉀:抑制劑,抑制未感光的銀鹽,防止溴折出而增加灰霧,從而增加顯象的反差,使力象更清晰

影響顯影的因素: (1)顯影時(shí)間 (2)顯影溫度 (3)顯影液的攪動(dòng) (4)顯影液的效力4、定影:海波(硫代硫酸鈉)溶去未形成潛影的銀晶體亞硫酸鈉:保護(hù)劑,能與酸形成亞硫酸氫根離子,從而抑制海波被酸分解。醋酸:停顯劑:終止顯影液繼續(xù)使用。鉀礬:堅(jiān)膜劑,防止乳膠在定影和水洗過(guò)程中因膨脹而造成脫落,防止操作中的擦傷or劃痕。5、水洗及干燥:洗去雜質(zhì)等,防止析出硫磺,它與空氣中水份氧化為硫酸,影象變黃。 干燥:人工電吹風(fēng),or自然干燥,防空氣灰法沾染。

4、EC、IT:在電子俘獲和內(nèi)轉(zhuǎn)換的衰變中產(chǎn)生的γ、X線不被乳膠記錄,但俄歇電子和內(nèi)轉(zhuǎn)換電子與β粒子的性質(zhì)相同,可使乳膠感光。純?chǔ)滤プ兊暮怂兀?H、14C、45Ca、35S、32Pβr——:131IEC——:125IIT——:99mTc徑跡ARG:乳膠厚度超過(guò)射線粒子的射程,記錄到的是粒子的全部徑跡,物理學(xué)研究范疇。銀粒密度ARG:薄的乳膠層,只要求留下徑跡超始部分的銀粒。 ARG常用核素,能量及射程P270表14—6(參考書夏宗勤主編實(shí)驗(yàn)核醫(yī)學(xué)與核藥學(xué))五、ARG的分辨力、效率、本底及示蹤1、分辨力:定義,區(qū)別示蹤物在組織中準(zhǔn)確位置的能力。區(qū)分兩個(gè)鄰近結(jié)構(gòu)(放射源) 表示方法:半距離HD半半徑HR

它是反映影象散射情況的常用指標(biāo)。 應(yīng)注意:HD、HR指反映顆粒的散射情況,并不說(shuō)明ARG所能分辨的最小距離或源的大小。 HD、HR越小,分辨力越高3H光鏡ARGHD在0.3——0.4μm電鏡ARGHD在80——180nm影響分辨力的因素:a、銀粒的大小b、乳膠厚度c、標(biāo)本與乳膠間距d、射線能量e、曝光時(shí)間f、顯影時(shí)間g、標(biāo)本厚度h、本底3、本底:沒有放射性時(shí)的銀顆粒 本底增高的因素:a、紅燈過(guò)亮b、外環(huán)境輻射c、顯影時(shí)間過(guò)長(zhǎng)d、乳膠受到壓力或張力的作用e、標(biāo)本中有還原物f、乳膠保存過(guò)久4、示蹤劑用量與曝光時(shí)間一般原則:輻射強(qiáng)時(shí),曝光時(shí)間可縮短,而射線弱時(shí),曝光時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng)。影響因素:a、核素的性質(zhì)b、核素引入的途徑c、示蹤劑劑型d、核素在體內(nèi)的分布和蓄積狀況e、標(biāo)本制備時(shí)間長(zhǎng)時(shí),核素易丟失f、感光材料的靈敏度目前最常用的是:實(shí)驗(yàn)確定曝光法。六、ARG的各種方法1、宏觀ARG:

接觸法:適于磨片,動(dòng)物整體切片植物片2、光鏡ARG: 用于非擴(kuò)散性示蹤劑(石蠟切片)浸膜法:從乳膠中提出來(lái) 裱貼法:在溫水中撈起標(biāo)本和干板揭膜乳膠法:在溫水中撈起標(biāo)本和揭膜用于擴(kuò)散性示蹤劑(冰凍切片):融表法:冷沾取切片 絞鏈接觸法:復(fù)雜ARG圖像閱讀分析圖像中銀粒沉著處,反映標(biāo)本中核素的存在部位,也表示標(biāo)記物定位。一、宏觀ARG:可直接看or放大鏡,黑度表示放素所在部位,越黑說(shuō)明放射性越強(qiáng),含某物標(biāo)記物越多,如要精確定位,必須與原標(biāo)本重合在一起觀察。二、微觀ARG:a、銀粒與組織結(jié)構(gòu)的關(guān)系用微調(diào)來(lái)確定。b、銀粒與其它顆粒的區(qū)別,用改變焦點(diǎn)來(lái)觀察它們的大小,顏色和外形。c、區(qū)別標(biāo)本內(nèi)與標(biāo)本外乳膠中的銀粒d、定量以銀粒計(jì)數(shù)表示。

定量分析法:預(yù)先制作一套已知活度梯度的放射源標(biāo)準(zhǔn)系列片,與待測(cè)標(biāo)本在同一張乳膠上曝,顯,定。 圖像用黑度計(jì)or光密度計(jì)讀數(shù),以標(biāo)準(zhǔn)梯度活度為縱坐標(biāo),光密度值為橫坐標(biāo),繪一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可定量。還有如下定量法:視測(cè)顆粒計(jì)數(shù):顆粒數(shù)/cm 顯微光度計(jì)測(cè)定:電視掃描裝置(三)亞微觀ARG: 電鏡ARG,它圖象中銀粒呈扭曲的絲團(tuán)狀,故易辨認(rèn)。

八、熒光增敏微觀ARG 適于顯影不太清楚or放射性較弱的組織AGR。 特點(diǎn):在乳膠中加入了閃爍劑。九、雙標(biāo)記ARG 當(dāng)需要研究機(jī)體同時(shí)攝入的多種放素?fù)饺爰?xì)胞的區(qū)別時(shí),必須用雙標(biāo)記。

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