植物細(xì)胞組織培養(yǎng)1緒論

第一節(jié)植物組織培養(yǎng)的一般概念2023/3/141當(dāng)前1頁，總共67頁。

一、植物細(xì)胞組織培養(yǎng)的概念（P1）★植物細(xì)胞組織培養(yǎng)（PlantCellandTissueCulture）：是指在離體（invitro）條件下利用人工培養(yǎng)基（medium）對植物器官、組織、細(xì)胞、原生質(zhì)體等進(jìn)行培養(yǎng)，使其長成完整的植株。通過無菌操作分離植物體的一部分（外植體explant），接種到培養(yǎng)基上，在人工控制的條件下（包括營養(yǎng)、激素、溫度、光照、濕度）進(jìn)行培養(yǎng)，使其產(chǎn)生完整植株的過程。2023/3/142當(dāng)前2頁，總共67頁。主要有:原生質(zhì)體（Protoplast）培養(yǎng)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)組織（愈傷組織Callus、莖尖分生組織）培養(yǎng)器官（胚，花藥，子房，根和莖）培養(yǎng)其中最常見的是愈傷組織培養(yǎng)。2023/3/143當(dāng)前3頁，總共67頁。（廣義）又叫離體培養(yǎng)：指從植物體分離出符合需要的組織、器官或細(xì)胞、原生質(zhì)體等，通過無菌操作，在人工控制條件下進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。

（狹義）組織培養(yǎng)：指用植物各部分組織，如形成層、薄壁組織、葉肉組織、胚乳等進(jìn)行培養(yǎng)獲得再生植株，也指在培養(yǎng)過程中從各器官上產(chǎn)生愈傷組織的培養(yǎng)，愈傷組織再經(jīng)過再分化形成再生植物。植物細(xì)胞組織培養(yǎng)范疇：2023/3/144當(dāng)前4頁，總共67頁。

原指植物在受傷之后于傷口表面形成的一團(tuán)薄壁細(xì)胞，在組培中則指在離體培養(yǎng)過程中形成的具有分生能力的一團(tuán)不規(guī)則細(xì)胞，多在植物體切面上產(chǎn)生。愈傷組織（callus）2023/3/145當(dāng)前5頁，總共67頁。外植體（explant）：在植物細(xì)胞組織培養(yǎng)中，由活體（invivo）植物體上取下來的，接種在培養(yǎng)基上無菌細(xì)胞、組織器官等用于離體培養(yǎng)的材料。胚軸花粉胚乳胚種子果實葉芽莖根組織原生質(zhì)體子葉分生組織成熟組織花器子房苞片胚珠花藥花?；ㄍ腥~柄幼苗2023/3/146當(dāng)前6頁，總共67頁。二、植物組織培養(yǎng)的分類固體培養(yǎng)液體培養(yǎng)1.培養(yǎng)基固體培養(yǎng)液體培養(yǎng)2023/3/147當(dāng)前7頁，總共67頁。二、植物組織培養(yǎng)的分類植株培養(yǎng)器官培養(yǎng)組織培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)原生質(zhì)體培養(yǎng)2、組織培養(yǎng)按培養(yǎng)對象可分為（外植體）2023/3/148當(dāng)前8頁，總共67頁。1.植株培養(yǎng)(plantculture)：對完整植株材料的培養(yǎng)。植株培養(yǎng)種子苗培養(yǎng)扦插苗培養(yǎng)2023/3/149當(dāng)前9頁，總共67頁。2.器官培養(yǎng)(organculture):即離體器官的培養(yǎng)。

器官培養(yǎng)

根系培養(yǎng)

莖段培養(yǎng)

花器培養(yǎng)

果實培養(yǎng)

種子培養(yǎng)

葉片培養(yǎng)

根據(jù)作用和需要的不同，可以包括分離莖尖、莖段、根尖、葉片、葉原基、子葉、花瓣、雄蕊、雌蕊、胚珠、胚、子房、果實等外植體的培養(yǎng)。2023/3/1410當(dāng)前10頁，總共67頁。3.組織或愈傷組織培養(yǎng)(tissue，callusculture)

：是對植物體的各部分組織進(jìn)行培養(yǎng)，如莖尖分生組織、形成層、木質(zhì)部、韌皮部、表皮組織、胚乳組織和薄壁組織等等；或?qū)τ芍参锲鞴倥囵B(yǎng)產(chǎn)生的愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)，二者均通過再分化誘導(dǎo)形成植株.組織培養(yǎng)分生組織培養(yǎng)薄壁組織培養(yǎng)輸導(dǎo)組織培養(yǎng)2023/3/1411當(dāng)前11頁，總共67頁。4.細(xì)胞培養(yǎng)(cellculture)：是對由愈傷組織等進(jìn)行液體振蕩培養(yǎng)所得到的能保持較好分散性的離體單細(xì)胞或花粉單細(xì)胞或很小的細(xì)胞團(tuán)的培養(yǎng).細(xì)胞培養(yǎng)看護(hù)培養(yǎng)平板培養(yǎng)懸浮培養(yǎng)微室培養(yǎng)2023/3/1412當(dāng)前12頁，總共67頁。5.原生質(zhì)體培養(yǎng)(proplastculture)：是用酶及物理方法除去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體的培養(yǎng)。原生質(zhì)體培養(yǎng)非融合培養(yǎng)融合培養(yǎng)2023/3/1413當(dāng)前13頁，總共67頁。三、植物組織培養(yǎng)的生理依據(jù)細(xì)胞全能性(celltotipotency)：植物體的每一個細(xì)胞都攜帶有一套完整的基因組，并具有發(fā)育成為完整植株的潛在能力。植物細(xì)胞的再生性——是指在植物中很多是靠種子生長來產(chǎn)生完整的植株，但也有不少可通過根、莖、葉等器官再生而成為完整的植株的特性。

2023/3/1414當(dāng)前14頁，總共67頁。三、植物組織培養(yǎng)的生理依據(jù)植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對于植物細(xì)胞組織的分化和決定具有關(guān)鍵性作用。它包括：生長素類、細(xì)胞分裂素類、赤霉素、脫落酸、乙烯等生長素類主要用于愈傷組織的形成，體細(xì)胞胚的產(chǎn)生及試管苗的生根。常用的有2,4-D、NAA、IBA、IAA等。其作用強(qiáng)弱為2,4-D>NAA>IBA>IAA。細(xì)胞分裂素類則有促進(jìn)細(xì)胞的分裂與分化，延遲組織的衰老，促進(jìn)芽的產(chǎn)生等作用。常用的有Zip(異戊烯腺嘌呤)、KT、6-BA、ZT等作用強(qiáng)弱順序為。Zip>KT>6-BA>ZT。赤霉素則有促進(jìn)已分化的芽伸長生長，打破種子休眠的作用。常用的為GA3。2023/3/1415當(dāng)前15頁，總共67頁?！镏参锛?xì)胞全能性（Cellulartotipotency）：任何具有完整細(xì)胞核的植物細(xì)胞，都擁有形成一個完整植珠所必須的全部遺傳信息和發(fā)育成完整植株的能力。

（Haberlandt,1902）四、植物組織培養(yǎng)的原理2023/3/1416當(dāng)前16頁，總共67頁。細(xì)胞全能性證實？胡蘿卜根韌皮部細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體細(xì)胞胚完整小植株證實全能性1958年，Steward和Shantz誘導(dǎo)2023/3/1417當(dāng)前17頁，總共67頁。1.分化（differentiation）:

細(xì)胞在分裂過程中發(fā)生結(jié)構(gòu)和功能上的改變，從而在個體發(fā)育中形成各類組織和器官完成整個生活周期。2023/3/1418當(dāng)前18頁，總共67頁。2.脫分化(dedifferentiation):

在細(xì)胞組織培養(yǎng)中，一個成熟細(xì)胞或分化細(xì)胞轉(zhuǎn)變恢復(fù)分生能力成為分生狀態(tài)的過程，即形成愈傷組織的過程。3.再分化(redifferentiation):

植物的成熟細(xì)胞經(jīng)歷了脫分化后，即形成愈傷組織能再形成完整的植株，這一過程叫做脫分化。2023/3/1419當(dāng)前19頁，總共67頁。初代培養(yǎng)繼代培養(yǎng)生根培養(yǎng)馴化移栽4.植物組織培養(yǎng)一般過程2023/3/1420當(dāng)前20頁，總共67頁。5.初代培養(yǎng)：

芽、莖段、葉片、花、器官等外植體在離體培養(yǎng)條件下誘導(dǎo)愈傷組織、側(cè)芽或不定芽、胚狀體過程2023/3/1421當(dāng)前21頁，總共67頁。6.繼代培養(yǎng)：

更換新鮮培養(yǎng)基來繁殖同種類型的材料（愈傷組織、芽）。2023/3/1422當(dāng)前22頁，總共67頁。7.生根培養(yǎng)：將芽苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)成為完整植株的過程。2023/3/1423當(dāng)前23頁，總共67頁。8.馴化移栽：組培苗經(jīng)人工煉苗后移栽到馴化苗床上使之適應(yīng)露地或保護(hù)地條件的過程。2023/3/1424當(dāng)前24頁，總共67頁。

緒論

組織培養(yǎng)技術(shù)的蓬勃發(fā)展只是近50年的事，但它的整個歷史可以追溯至19世紀(jì)末和上世紀(jì)初。

第二節(jié)植物細(xì)胞組織培養(yǎng)發(fā)展簡史2023/3/1425當(dāng)前25頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史

植物組織培養(yǎng)與細(xì)胞培養(yǎng)開始于19世紀(jì)后半葉，當(dāng)時植物細(xì)胞全能性的概念還沒有完全確定，但基于對自然狀態(tài)下某些植物可以通過無性繁殖產(chǎn)生后代的觀察，人們便產(chǎn)生了這樣一種想法即能否將植物體的一部分在適當(dāng)?shù)臈l件下培養(yǎng)成一個完整的植物體，為此許多植物科學(xué)工作者開始了培養(yǎng)植物組織的嘗試。2023/3/1426當(dāng)前26頁，總共67頁。

第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史

19世紀(jì)30年代，德國植物學(xué)家施萊登，1804—1881)和德國動物學(xué)家施旺(T.Schwann,1810—1882)創(chuàng)立了細(xì)胞學(xué)說：①細(xì)胞是有機(jī)體，一切動植物都是由單細(xì)胞發(fā)育而來，即生物是由細(xì)胞和細(xì)胞的產(chǎn)物所組成；

②所有細(xì)胞在結(jié)構(gòu)和組成上基本相似；

③新細(xì)胞是由已存在的細(xì)胞分裂而來；

④生物的疾病是因為其細(xì)胞機(jī)能失常。

根據(jù)這一學(xué)說，如果給細(xì)胞提供和生物體內(nèi)一樣的條件，每個細(xì)胞都應(yīng)該能夠獨立生活。

對組織培養(yǎng)技術(shù)的誕生起到了極大的推動作用。2023/3/1427當(dāng)前27頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史可劃分為三個階段：一、探索階段二、奠基階段三、迅速發(fā)展階段2023/3/1428當(dāng)前28頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史一、探索階段（上世紀(jì)初至上世紀(jì)30年代中）

1902年德國著名的植物生理學(xué)家和植物學(xué)家哈伯蘭特（Haberlandt）在Schleiden和Schwann的細(xì)胞學(xué)說的推動下，提出了高等植物細(xì)胞全能性理論。它是植物組織培養(yǎng)的理論依據(jù)，對植物組織培養(yǎng)的發(fā)展起了先導(dǎo)作用。

植物細(xì)胞全能性的理論：即植物的體細(xì)胞，在適當(dāng)?shù)臈l件下，具有不斷分裂和繁殖，發(fā)育成完整植株的潛在能力。2023/3/1429當(dāng)前29頁，總共67頁。1904年，Hanning培養(yǎng)蘿卜和辣根菜的胚成功；

1912年，Haberlandt的學(xué)生科特（Kotte）和美國的羅布林（Robins）在根尖培養(yǎng)中獲得了組織培養(yǎng)的成功。Kotte采用了無機(jī)鹽、葡萄糖、蛋白胨、天冬酰胺，及添加各種氨基酸的培養(yǎng)基。Robins用含無機(jī)鹽、葡萄糖或果糖的瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)了長度為的豌豆、玉米和棉花的莖尖，形成了一些缺綠的莖和根。

Laibach（1925,1929）亞麻種間雜種胚培養(yǎng)成功，證明胚培養(yǎng)在植物遠(yuǎn)緣雜交上可利用；

第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史2023/3/1430當(dāng)前30頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史二、奠基階段（30年代中至50年代末）

1934年美國的懷特（White）由番茄根建立了第一個活躍生長的無性繁殖系，并反復(fù)轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基中繼代培養(yǎng)，使根的離體培養(yǎng)實驗獲得了真正的成功，并在以后28年間培養(yǎng)了1600代。之后，White又以小麥根尖為材料，研究了光、溫度、通氣、pH值、培養(yǎng)基組成等各種培養(yǎng)條件對生長的影響，并于1937年建立了第一個組織培養(yǎng)的綜合培養(yǎng)基，其成分均為已知化合物，包括3種B族維生素，即吡哆醇、硫胺素和煙酸，該培養(yǎng)基后來被定名為White培養(yǎng)基。

2023/3/1431當(dāng)前31頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史與此同時，高特里特（Gautheret）(1934)在研究山毛柳和黑楊等形成層的組織培養(yǎng)實驗中，提出了B族維生素和生長素對組織培養(yǎng)的重要意義，并于1939年連續(xù)培養(yǎng)胡蘿卜根形成層獲得首次成功。同年，White由煙草種間雜種的瘤組織，諾比考特（Nobecourt）由胡蘿卜均建立了與上述類似的連續(xù)生長的組織培養(yǎng)物。2023/3/1432當(dāng)前32頁，總共67頁。因此，Gautheret，White和Nobecourt一起被譽(yù)為組織培養(yǎng)學(xué)科的奠基人。我們現(xiàn)在所用的培養(yǎng)方法和培養(yǎng)基，基本上都是由這三位科學(xué)家建立的。他們?nèi)说呢暙I(xiàn)在于：一是認(rèn)識了B族維生素對植物生長的重要意義；二是發(fā)現(xiàn)了生長素是一種天然的生長調(diào)節(jié)物質(zhì)。后來，White于1943年發(fā)表了《植物組織培養(yǎng)手冊》專著，使植物組織培養(yǎng)開始成為一門新興的學(xué)科。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史2023/3/1433當(dāng)前33頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史

40年代斯庫克（Skoog）和崔澂在煙草莖切段和髓培養(yǎng)以及器官形成的研究中發(fā)現(xiàn)，腺嘌呤或腺苷可以解除培養(yǎng)基中生長素(IAA)對芽形成的抑制作用，而能誘導(dǎo)形成芽，從而明確了腺嘌呤與生長素的比例是控制芽和根形成的主要條件之一。即細(xì)胞分裂素與生長素比例高時，產(chǎn)生芽；這一比例低時，則形成根；相等則不分化，形成愈傷組織。

——器官分化的植物激素控制理論2023/3/1434當(dāng)前34頁，總共67頁。第二節(jié)

植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史

50年代開始以后，組織培養(yǎng)研究日趨繁榮，10年當(dāng)中引人注目的進(jìn)展主要有7項：

1952年，莫雷爾（Morel）和馬?。∕artin）通過莖尖分生組織的離體培養(yǎng)，從已受病毒侵染的大麗花中首次獲得無病毒植株；2023/3/1435當(dāng)前35頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史

1953-1954年繆爾（Muir）把單細(xì)胞放在一張鋪在愈傷組織上面的濾紙上培養(yǎng)，使細(xì)胞發(fā)生了分裂，即實施了看護(hù)接種技術(shù)，使單細(xì)胞培養(yǎng)獲得初步成功。

1955年米勒（Miller）等人發(fā)現(xiàn)了激動素（kinetin）。不久即知道激動素可以代替腺嘌呤促進(jìn)發(fā)芽，并且效果可增加3萬倍。2023/3/1436當(dāng)前36頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史1957年，Skoog和Miller提出植物激素控制器官形成的概念；上述控制器官分化的激素模式變?yōu)榧铀嘏c生長素的比例關(guān)系。這方面的成功發(fā)現(xiàn)，有力地推動了植物組織培養(yǎng)的發(fā)展。2023/3/1437當(dāng)前37頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史1958年，美國植物學(xué)家斯圖爾德（Steward）等人，用胡蘿卜根韌皮部的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，得到了完整植株，并且這一植株能夠開花結(jié)實，首次證實了Haberlandt在五十多年前關(guān)于細(xì)胞全能性的預(yù)言；1958年，Wickson和Thimann指出，應(yīng)用外源細(xì)胞分裂素CTK可促成在頂芽存在的情況下打破腋芽的休眠——后來，Murashige利用這一方法發(fā)展了快繁技術(shù)，廣泛的應(yīng)用于植物的快速繁殖。2023/3/1438當(dāng)前38頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史綜上所述，在這一發(fā)展階段中，通過對培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基成分的廣泛研究，特別是對B族維生素、生長素和細(xì)胞分裂素在組織培養(yǎng)中作用的研究，已經(jīng)實現(xiàn)了對離體細(xì)胞生長和分化的控制，從而初步確立了組織培養(yǎng)的技術(shù)體系，為以后的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。2023/3/1439當(dāng)前39頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史

三、迅速發(fā)展階段1960年，科金（Cocking）——開創(chuàng)植物原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交研究工作。（用真菌纖維素酶從番茄幼根分離得到活性原生質(zhì)體）；同年，Kanta——植物試管受精首次成功。1960年，Morel——提出了一個莖尖離體無性繁殖蘭花的方法——迅速建立起蘭花工業(yè)；名貴蘭花春日飄香2023/3/1440當(dāng)前40頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史1962年，Murashige和Skoog發(fā)表了促進(jìn)煙草組織快速生長的培養(yǎng)基組成——MS培養(yǎng)基；1964年印度固哈（Guha）和馬海舒瓦瑞（Maheshwari）成功地在毛葉曼陀羅花藥培養(yǎng)中，由花粉誘導(dǎo)得到單倍體植株，從而促進(jìn)了花藥和花粉培養(yǎng)的研究；以后相繼在煙草、水稻、小麥、玉米、番茄、辣椒、草莓、蘋果等多種植物培養(yǎng)中獲得成功，其數(shù)目達(dá)到160多種，其中煙草、水稻和小麥等的花藥育種培養(yǎng)在中國取得了引入注目的成就。2023/3/1441當(dāng)前41頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史

1971年，Takebe等在煙草上首次由原生質(zhì)體獲得了再生植株，這不僅在理論上證明了無壁的原生質(zhì)體同樣具有全能性，而且在實踐上為外源基因的導(dǎo)入提供了理想的受體材料。80年代中期以來，對禾谷類作物的原生質(zhì)體培養(yǎng)也相繼告捷，在這方面中國學(xué)者做出了重要貢獻(xiàn)。

1973年Carlson等通過兩個煙草物種之間原生質(zhì)體融合，獲得了第一個體細(xì)胞雜種，Cocking等倡導(dǎo)的原生質(zhì)體培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交，研究得到了迅速發(fā)展，已經(jīng)能使矮牽牛和煙草屬的雜種細(xì)胞增殖分化生成雜種植株。2023/3/1442當(dāng)前42頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史

（1）微繁技術(shù)廣泛應(yīng)用

（2）花藥培養(yǎng)取得顯著成績（3）原生質(zhì)體培養(yǎng)取得重大突破概括起來，這一階段的成就體現(xiàn)在：（4）基礎(chǔ)研究2023/3/1443當(dāng)前43頁，總共67頁。第二節(jié)植物組織培養(yǎng)發(fā)展簡史

在整個植物組織培養(yǎng)發(fā)展的歷史中，我國學(xué)者做出多方面的貢獻(xiàn)，除了前述的崔徵的研究成效以外，還有1993年李繼侗和沈同研究銀杏的胚培養(yǎng)，將銀杏胚乳的提取物加入培養(yǎng)基，獲得成功；1993年李繼侗等關(guān)于玉米等植物離體根尖培養(yǎng)的研究工作，以及羅士韋關(guān)于幼胚和莖尖培養(yǎng)，李正理關(guān)于離體胚的研究培養(yǎng)、王伏雄等關(guān)于幼胚的研究培養(yǎng)工作。2023/3/1444當(dāng)前44頁，總共67頁。

緒論第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用

植物組織培養(yǎng)成為生物科學(xué)的一個廣闊領(lǐng)域，除了在基礎(chǔ)理論的研究上占有重要地位以外，還在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中也得到越來越廣泛的應(yīng)用。2023/3/1445當(dāng)前45頁，總共67頁。第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用

一、農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用1.

快速繁殖種苗(rapidpropagation)

用組織培養(yǎng)的方法進(jìn)行快速繁殖是生產(chǎn)上最有潛力的應(yīng)用，包括花卉觀賞植物、蔬菜、果樹、大田作物及其他經(jīng)濟(jì)作物?？旆奔夹g(shù)不受季節(jié)等條件的限制，生長周期短，而且能使不能或很難繁殖的植物進(jìn)行增殖。2023/3/1446當(dāng)前46頁，總共67頁。

母株（完整）→外植體（母株的一小部分，種子亦可）→接種到培養(yǎng)基上→長芽（繼代增殖）→長根（試管外生根亦可）→練苗，馴化→完整植株★微（快）繁步驟（micropropagation）2023/3/1447當(dāng)前47頁，總共67頁。第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用快速繁殖可用下列手段進(jìn)行：1.通過莖尖、莖段、鱗莖盤等產(chǎn)生大量腋芽；2.通過根、葉等器官直接誘導(dǎo)產(chǎn)生不定芽；3.通過愈傷組織培養(yǎng)誘導(dǎo)產(chǎn)生不定芽。2023/3/1448當(dāng)前48頁，總共67頁。試管快速繁殖應(yīng)用在下列生產(chǎn)或研究中：(1)繁殖雜交育種中得到的少量雜交種，以及保存自交系、不育系等。(2)繁殖脫毒培養(yǎng)得到的少量無病毒苗。(3)繁殖生產(chǎn)上急需的或種源較少的種苗。由于組織培養(yǎng)周期短，增殖率高及能全年生產(chǎn)等特點，加上培養(yǎng)材料和試管苗的小型化，這就可使有限的空間培養(yǎng)出大量的植物，在短期內(nèi)培養(yǎng)出大量的幼苗。第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用2023/3/1449當(dāng)前49頁，總共67頁。

2.無病毒苗(virusfree)的培養(yǎng)植物在生長過程中幾乎都要遭受到病毒病不同程度的危害，有的種類甚至同時受到數(shù)種病毒病的危害，尤其是很多園藝植物靠無性方法來增殖，若蒙受病毒病，代代相傳，越染越重，甚至?xí)斐蓸O嚴(yán)重的后果。

第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用2023/3/1450當(dāng)前50頁，總共67頁。第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用自從Morell952年發(fā)現(xiàn)采用微莖尖培養(yǎng)方法可得到無病毒苗后，微莖尖培養(yǎng)就成為解決病毒病危害的重要途徑之一。若再與熱處理相結(jié)合，則可提高脫毒培養(yǎng)的效果。對于木本植物，莖尖培養(yǎng)得到的植株難以發(fā)根生長，則可采用莖尖微體嫁接的方法來培育無病毒苗。2023/3/1451當(dāng)前51頁，總共67頁。第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用

組織培養(yǎng)無病毒苗的方法已在很多作物的常規(guī)生產(chǎn)上得到應(yīng)用。如馬鈴薯，甘薯，草莓，蘋果，香石竹，菊花等。而且已有不少地區(qū)建立了無病毒苗的生產(chǎn)中心，這對于無病毒苗的培養(yǎng)、鑒定、繁殖、保存、利用和研究，形成了一個規(guī)范的系統(tǒng)程序，從而達(dá)到了保持園藝植物的優(yōu)良種性和經(jīng)濟(jì)性狀的目的。2023/3/1452當(dāng)前52頁，總共67頁。3.

在育種上的應(yīng)用(breeding)

植物組織培養(yǎng)技術(shù)為育種提供了許多手段和方法，使育種工作在新的條件下更有效的進(jìn)行。

第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用1.倍性育種，縮短育種年限，雜種優(yōu)勢明顯。2.克服遠(yuǎn)緣雜交的不親合性和不孕性（胚培養(yǎng)）3.保存種質(zhì)2023/3/1453當(dāng)前53頁，總共67頁。第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用例如：用花藥培養(yǎng)單倍體植株；用原生質(zhì)體進(jìn)行個體細(xì)胞雜交和基因轉(zhuǎn)移；用子房、胚和胚珠完成胚的試管發(fā)育和試管受精，以及種質(zhì)資源的保存等等。2023/3/1454當(dāng)前54頁，總共67頁。4.工廠化育苗(industrializingpropagation)

近年來，組織培養(yǎng)育苗工廠化生產(chǎn)已作為一種新興技術(shù)和生產(chǎn)手段，在園藝植物的生產(chǎn)領(lǐng)域蓬勃發(fā)展。第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用2023/3/1455當(dāng)前55頁，總共67頁。第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用

（1）工廠化育苗含義：是指以植物組織培養(yǎng)為基礎(chǔ)，將外植體接種在人工配制的培養(yǎng)基上，通過控制環(huán)境條件，使細(xì)胞脫分化、再分化成新的組織、器官，進(jìn)而培育出與母株一樣的批量幼苗的方法。例如：非洲紫羅蘭組織培養(yǎng)育苗的工廠化生產(chǎn)。（2）特點：繁殖快，整齊、一致，無病蟲害，周期短，周年生產(chǎn)，性狀穩(wěn)定。2023/3/1456當(dāng)前56頁，總共67頁。2023/3/1457當(dāng)前57頁，總共67頁。第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用（3）作用：有利于繁殖系數(shù)低、雜合材料的快速繁殖有利于有性繁殖優(yōu)良性狀易分離材料的繁殖有利于保持從雜合的遺傳群體中篩選出的表現(xiàn)型優(yōu)異植株的優(yōu)良遺傳性。組織培養(yǎng)育苗的無毒化生產(chǎn)，還可減少病害傳播?？梢詼p少氣候條件對幼苗繁殖的影響，緩和淡、旺季的供需矛盾。2023/3/1458當(dāng)前58頁，總共67頁。第三節(jié)植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用（4）現(xiàn)狀：世界上一些先進(jìn)國家園藝植物組織培養(yǎng)技術(shù)的迅速發(fā)展從60年代就已經(jīng)開始，并隨著生長、分化規(guī)律性探索的逐步深化，到了70年代僅花卉業(yè)就已在蘭花、百合、非洲菊、大巖桐、菊花、香石竹、矮牽牛等二十幾種花卉幼苗生產(chǎn)上建立起大規(guī)模試管苗商品化生產(chǎn)。

到1984年世界花卉幼苗產(chǎn)業(yè)的生產(chǎn)總值已達(dá)20億美元，其中美國花卉幼苗市場總值為6億多美元，日本三友種苗公司有60％