中藥化學(xué)成分的一般研究方法

中藥化學(xué)成分的一般研究方法第1頁(yè)/共239頁(yè)2第一節(jié)、中藥成分及生物合成簡(jiǎn)介一、成分類型簡(jiǎn)介糖類苷類醌類苯丙素類黃酮類萜類和揮發(fā)油三萜類生物堿甾體類鞣質(zhì)類中藥化學(xué)成分第2頁(yè)/共239頁(yè)31.糖類(sugars)中藥中普遍存在，為多羥基醛或多羥基酮及其縮聚物，可分為單糖、低聚糖、多聚糖；第3頁(yè)/共239頁(yè)42.苷類(glycosides)糖或糖的衍生物與非糖通過(guò)糖的端基碳原子連接而成的化合物。第4頁(yè)/共239頁(yè)5苷類(glycosides)第5頁(yè)/共239頁(yè)63.醌類化合物(quinoids）一類分子中具有醌式結(jié)構(gòu)的化合物。分子中多有酚羥基，有一定的酸性。第6頁(yè)/共239頁(yè)7醌類化合物第7頁(yè)/共239頁(yè)84.苯丙素類（phenylpropanoids）是一類分子中以苯丙基為基本骨架的化合物。其中香豆素和木脂素為典型化合物。第8頁(yè)/共239頁(yè)9苯丙素類第9頁(yè)/共239頁(yè)105.黃酮類（flavonoids

）泛指兩個(gè)苯環(huán)通過(guò)三個(gè)C原子互相連接而成的一系列化合物。C6-C3-C6第10頁(yè)/共239頁(yè)11黃酮類C6-C3-C6C6-C3-C6第11頁(yè)/共239頁(yè)126.萜類和揮發(fā)油凡由甲戊二羥酸衍生、具有基本母核的分子式符合(C5H8)n通式的衍生物為萜類化合物(1)萜類（terpenoids）第12頁(yè)/共239頁(yè)13萜類第13頁(yè)/共239頁(yè)14揮發(fā)油又稱精油，是一類可隨水蒸氣蒸餾而蒸餾、與水不相混溶的油狀液體物質(zhì)。(2)揮發(fā)油（essentialoils）第14頁(yè)/共239頁(yè)157.三萜類（triterpenoids）是一類基本骨架由30個(gè)碳原子組成的萜類化合物。第15頁(yè)/共239頁(yè)16三萜類第16頁(yè)/共239頁(yè)178.甾體類（steroides）是一類具有環(huán)戊烷駢多氫菲的甾體母核的化合物。第17頁(yè)/共239頁(yè)18甾體類第18頁(yè)/共239頁(yè)199.生物堿（alkaloids）是一類存在于生物體類含氮的有機(jī)物，具有堿的性質(zhì)，能與酸成鹽。第19頁(yè)/共239頁(yè)20生物堿第20頁(yè)/共239頁(yè)2110.鞣質(zhì)（tannins）又稱單寧或鞣酸，是一類復(fù)雜的多元酚類化合物的總稱，可與蛋白質(zhì)結(jié)合形成致密、柔韌、不易腐敗又難于透水的化合物。第21頁(yè)/共239頁(yè)22鞣質(zhì)老鸛草素(geraniin)第22頁(yè)/共239頁(yè)2311.其它成分有機(jī)酸氨基酸和蛋白質(zhì)有機(jī)含硫化合物礦物質(zhì)第23頁(yè)/共239頁(yè)24biosynthesispathway二、主要的生物合成途徑中藥化學(xué)成分屬天然有機(jī)化合物類型眾多、結(jié)構(gòu)復(fù)雜、數(shù)目龐大結(jié)構(gòu)間存在著一定聯(lián)系第24頁(yè)/共239頁(yè)25有一定的規(guī)律可尋許多化合物在分子結(jié)構(gòu)中都含有某些基本組成單位。苯丙素類——具有C6-C3單位萜類——具有重復(fù)C5單位生物堿——具有氨基酸單位脂肪酸、酚類、醌及聚酮類——具有C2單位第25頁(yè)/共239頁(yè)26代謝產(chǎn)物的分類按生物合成途徑可分為一次代謝產(chǎn)物和二次代謝產(chǎn)物一次代謝產(chǎn)物——葉綠素、糖類、蛋白質(zhì)、脂類和核酸等二次代謝產(chǎn)物——生物堿、黃酮、萜類皂苷等。第26頁(yè)/共239頁(yè)27二次代謝產(chǎn)物二次代謝產(chǎn)物往往反應(yīng)了植物科、屬、種的特征，且大多數(shù)具有特殊顯著的生理活性。生物合成途徑是指二次代謝產(chǎn)物的生物合成途徑。第27頁(yè)/共239頁(yè)28研究生物合成的意義指導(dǎo)中藥化學(xué)成分結(jié)構(gòu)分類幫助推測(cè)中藥化學(xué)成分結(jié)構(gòu)對(duì)仿生合成和植物化學(xué)分類學(xué)提供理論指導(dǎo)。第28頁(yè)/共239頁(yè)29主要生物合成途徑（一）乙酸丙二酸途徑（二）甲戊二羥酸途徑（三）莽草酸途徑（四）氨基酸途徑（五）復(fù)合途徑第29頁(yè)/共239頁(yè)30（一）乙酸-丙二酸途徑

acetate-malonatepathway,(AA-MA)1.

脂肪酸2.

酚類3.

醌類第30頁(yè)/共239頁(yè)311.脂肪酸第31頁(yè)/共239頁(yè)322.酚類第32頁(yè)/共239頁(yè)333.醌類第33頁(yè)/共239頁(yè)34（二）甲戊二羥酸途徑

mevalonicacidpathway,(MVA)萜類、三萜類、甾體類的生物合成途徑第34頁(yè)/共239頁(yè)35甲戊二羥酸途徑第35頁(yè)/共239頁(yè)36甲戊二羥酸途徑第36頁(yè)/共239頁(yè)37（三）莽草酸途徑

skikimicacidpathway具有C6-C3（苯丙素類）及C6-C1基本結(jié)構(gòu)的化合物又叫桂皮酸途徑(cinnamicacidpathway)第37頁(yè)/共239頁(yè)38莽草酸途徑葡萄糖代謝莽草酸桂皮酸途徑苯丙氨酸或酪氨酸咖啡酸對(duì)羥基桂皮酸對(duì)羥基桂皮酸苷第38頁(yè)/共239頁(yè)39木脂素香豆素類倍半木脂素木質(zhì)素烯丙基丙稀基新木脂素鄰羥基桂皮酸苷苯丙烯類阿魏酸咖啡酸對(duì)羥基桂皮酸對(duì)羥基桂皮酸苷松柏醇傘形花內(nèi)酯第39頁(yè)/共239頁(yè)40（四）氨基酸途徑

aminoacidpathway鳥(niǎo)氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸都是合成生物堿的重要前體。大多數(shù)生物堿由此途徑合成。第40頁(yè)/共239頁(yè)41氨基酸途徑第41頁(yè)/共239頁(yè)42氨基酸途徑第42頁(yè)/共239頁(yè)43（五）復(fù)合途徑

complexpathway如查耳酮、二氫黃酮類化合物由莽草酸途徑和乙酸丙二酸途徑合成。分子中各個(gè)部位由不同的生物合成途徑產(chǎn)生。第43頁(yè)/共239頁(yè)44復(fù)合途徑第44頁(yè)/共239頁(yè)45第二節(jié)、提取分離方法一、提取方法溶劑提取法水蒸汽蒸餾法超臨界流體萃取法其它方法提取方法煎煮法浸漬法滲漉法回流提取法連續(xù)回流提取法第45頁(yè)/共239頁(yè)46（一）溶劑提取法應(yīng)用最普遍的提取方法根據(jù)被提取成分的溶解性能，選用合適的溶劑和方法來(lái)提取。第46頁(yè)/共239頁(yè)47提取原理示意圖溶劑細(xì)胞有效成分第47頁(yè)/共239頁(yè)48按極性分類可分為三類1、溶劑分類②親水性：如甲醇、乙醇、丙酮③親脂性：石油醚、飽和烷烴①水第48頁(yè)/共239頁(yè)49常見(jiàn)溶劑極性順序石油醚<

四氯化碳<

苯<

氯仿<

乙醚<

乙酸乙酯<

正丁醇<

丙酮<

乙醇<甲醇<

水第49頁(yè)/共239頁(yè)502.溶劑的選擇有效成分溶解性大，無(wú)效成分溶解性小，與植物成分不起化學(xué)反應(yīng)；安全無(wú)毒沸點(diǎn)低，易回收，成本低；理想溶劑：第50頁(yè)/共239頁(yè)51①能團(tuán)極性：

RCOOH>

Ar-OH>H2O>R-OH

>

R-NH2

>

RCONH2

>RCHO

>

RCOOR’

>

R-OR’

>R-X>R-H②

官能團(tuán)相同，極性官能團(tuán)數(shù)目多，極性大。③

ε介電常數(shù)越大，極性越強(qiáng)?；衔飿O性強(qiáng)弱比較第51頁(yè)/共239頁(yè)523.提取方法①

浸漬法：藥材+溶劑浸泡提取物a.

冷提法：②滲漉法：藥材粉碎后，加入滲漉桶中第52頁(yè)/共239頁(yè)53滲漉法裝置示意圖第53頁(yè)/共239頁(yè)54提取方法③煎煮法：水加熱煮沸提取b.

熱提法④

回流提取法：有機(jī)溶劑提?、葸B續(xù)回流提取法第54頁(yè)/共239頁(yè)55連續(xù)回流提取法1.冷凝管2.溶劑蒸氣上升管3.虹吸管4.裝有藥粉的濾紙袋5.溶劑6.水浴索氏提取器第55頁(yè)/共239頁(yè)56（二）水蒸氣蒸餾法用于提取能隨水蒸汽蒸餾、對(duì)熱穩(wěn)定、難溶于水的成分。揮發(fā)油多用此法第56頁(yè)/共239頁(yè)57揮發(fā)油提取裝置圖示第57頁(yè)/共239頁(yè)58揮發(fā)油提取裝置圖第58頁(yè)/共239頁(yè)59（三）超臨界流體萃取法

Supercriticalfluidextraction-SFE是一種集提取和分離一體，又基本上不用有機(jī)溶劑的新技術(shù)。超臨界流體：是處于臨界溫度和臨界壓力以上，介于氣體和液體之間的流體第59頁(yè)/共239頁(yè)60PhasediagramofCO2第60頁(yè)/共239頁(yè)61超臨界流體的性質(zhì)密度與液體相似、粘度與氣體相近，擴(kuò)散系數(shù)比液體大100倍。物質(zhì)的溶解與溶劑的密度、擴(kuò)散系數(shù)成正比，與粘度成反比。第61頁(yè)/共239頁(yè)62CO2supercriticalfluidextractionprocess第62頁(yè)/共239頁(yè)63SFE的優(yōu)缺點(diǎn)接近室溫下提取，防止氧化熱解幾乎不用到有機(jī)溶劑，無(wú)有機(jī)溶劑殘留，對(duì)環(huán)境無(wú)公害效率高，節(jié)約能耗工藝技術(shù)要求高,投資比較大第63頁(yè)/共239頁(yè)64（四）其它方法升華法：氣態(tài)→固態(tài)樟木中樟腦的提取。超聲提取法第64頁(yè)/共239頁(yè)65超聲提取法其基本原理是利用超聲波的空化作用，破壞植物藥材的細(xì)胞，使溶劑易于滲入細(xì)胞內(nèi)同時(shí)超聲波的許多次級(jí)作用，如機(jī)械運(yùn)動(dòng)、乳化、擴(kuò)散、擊碎、化學(xué)效應(yīng)等也能加速細(xì)胞內(nèi)有效成分的擴(kuò)散、釋放和溶解，促進(jìn)提取的快速進(jìn)行。第65頁(yè)/共239頁(yè)66超聲提取法的特點(diǎn)具有以下優(yōu)點(diǎn)適用于各種溶劑提取速度快方法簡(jiǎn)單產(chǎn)率高無(wú)需加熱超聲提取對(duì)一些遇熱不穩(wěn)定成分的提取尤為適宜。第66頁(yè)/共239頁(yè)67第一節(jié)、中藥成分及生物合成簡(jiǎn)介第二節(jié)、提取分離方法第三節(jié)、化學(xué)結(jié)構(gòu)研究方法中藥化學(xué)成分的一般研究方法第67頁(yè)/共239頁(yè)68第二節(jié)、提取分離方法二、分離精制方法溶劑法沉淀法分餾法膜分離法分離方法升華法結(jié)晶法色譜法第68頁(yè)/共239頁(yè)69（一）溶劑法1、酸堿溶劑法對(duì)于難溶于水的有機(jī)堿類成分，與酸成鹽后，可溶于水。如生物堿。利用混合物中各組分酸堿性的不同進(jìn)行分離。第69頁(yè)/共239頁(yè)70酸堿溶劑法對(duì)于具有羧基或酚羥基的酸性成分，難溶于酸水，與堿成鹽后，可溶于水。對(duì)于具內(nèi)酯或內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)的成分，可被皂化而溶于水。第70頁(yè)/共239頁(yè)71酸堿溶劑法操作圖示生物堿有機(jī)層酸水層酸+→生物堿鹽第71頁(yè)/共239頁(yè)722.溶劑分配法利用各組分在兩相中分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離的方法。兩相往往是互相飽和的水相與有機(jī)相第72頁(yè)/共239頁(yè)73溶劑分配法混合物在兩相中的分配系數(shù)越大，則分離效果越高。分配系數(shù)：K=C上/C下分離因子：β=KA/KB（KA>KB），表示分離難易第73頁(yè)/共239頁(yè)74溶劑分配法常用的兩相有極性大的成分：正丁醇—水極性中等成分：乙酸乙酯—水極性小等成分：氯仿—水第74頁(yè)/共239頁(yè)75（二）沉淀法有些化學(xué)成分能與某些試劑生成沉淀，或加入某些試劑后可降低某些成分在溶液中的溶解度而自溶液中析出。這種沉淀反應(yīng)必須是可逆的第75頁(yè)/共239頁(yè)761.專屬試劑沉淀法雷氏銨鹽能與季銨堿生成沉淀某些試劑能選擇性地沉淀某類成分，稱專屬性沉淀法。膽甾醇能與甾體皂苷沉淀明膠能與鞣質(zhì)生成沉淀，可用于分離和出去鞣質(zhì)。第76頁(yè)/共239頁(yè)772.分級(jí)沉淀法在混合組分的溶液中加入與該溶液能互溶的溶劑，改變混合組分溶液中某些成分的溶解度，使其從溶液中析出。改變加入溶劑的極性或數(shù)量而使沉淀逐步析出稱為分級(jí)沉淀。第77頁(yè)/共239頁(yè)78分級(jí)沉淀法含有糖類或蛋白質(zhì)的水溶液中，分次加入乙醇，使含醇量逐步增高，可逐級(jí)沉淀出分子量段由大到小的蛋白質(zhì)、多糖、多肽等等。含有皂苷的乙醇溶液中分次加入乙醚或乙醚－丙酮，可使有極性差異的皂苷分級(jí)沉淀出來(lái)。第78頁(yè)/共239頁(yè)793.鹽析法在混合物水溶液中加入易溶于水的無(wú)機(jī)鹽至一定濃度或飽和狀態(tài)，使某些成分在水中的溶解度降低而析出來(lái)，或用有機(jī)溶劑萃取出來(lái)。最常用的是氯化鈉第79頁(yè)/共239頁(yè)80鹽析法例如從黃連中分離小檗堿又如麻黃堿、苦參堿等水溶性較大，分離時(shí)也常采用鹽析的方法。鹽析是分離蛋白質(zhì)時(shí)常采用的方法之一。第80頁(yè)/共239頁(yè)81（三）分餾法利用混合物中各成分沸點(diǎn)的不同而進(jìn)行分離的方法。適用于液體混合物的分離?？煞譃槌赫麴s、減壓蒸餾、分子蒸餾等。第81頁(yè)/共239頁(yè)82簡(jiǎn)單分餾裝置1.溫度計(jì)2.分餾柱3.燒瓶第82頁(yè)/共239頁(yè)83（四）膜分離法利用人工合成的高分子膜，以外加壓力或化學(xué)位差為推動(dòng)力，對(duì)混合物溶液中各成分進(jìn)行分離、分級(jí)、提純或富集。反滲透、超濾、微濾、電滲析為四大已開(kāi)發(fā)應(yīng)用的膜分離技術(shù)。第83頁(yè)/共239頁(yè)84膜分離法反滲透、超濾、微濾相當(dāng)于過(guò)濾技術(shù)。溶劑、小分子能透過(guò)膜，而大分子被截留。第84頁(yè)/共239頁(yè)85（五）升華法固體物質(zhì)加熱直接變成氣體，遇冷又凝結(jié)為固體的現(xiàn)象為升華。如樟木中的樟腦，是世界上最早應(yīng)用升華法制取的有效成分。茶葉中的咖啡堿加熱到178℃就能升華而不被分解。第85頁(yè)/共239頁(yè)86升華法升華法雖簡(jiǎn)單易行但藥材炭化后，往往產(chǎn)生揮發(fā)性的焦油狀物，粘附在升華物上，不易精制除去并且升華不完全，產(chǎn)率低，有時(shí)還伴有分解現(xiàn)象，因此較少采用。第86頁(yè)/共239頁(yè)87（六）結(jié)晶法化合物由非晶形成有晶形的過(guò)程稱為結(jié)晶。結(jié)晶法是純化物質(zhì)最后階段常采用的方法，其目的是進(jìn)一步分離純化。第87頁(yè)/共239頁(yè)88結(jié)晶法結(jié)晶法的關(guān)鍵是選擇適宜的溶劑。對(duì)結(jié)晶溶劑的要求:①對(duì)待結(jié)晶的成分溶解度隨溫度不同有顯著差異。②與被結(jié)晶的成分不應(yīng)產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)。③沸點(diǎn)適中。第88頁(yè)/共239頁(yè)89結(jié)晶法甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸、吡啶等。常用的結(jié)晶溶劑單一溶劑不能達(dá)到結(jié)晶時(shí)，可用兩種或兩種以上溶劑組成的混合溶劑進(jìn)行結(jié)晶。第89頁(yè)/共239頁(yè)90（七）色譜法色譜法是中藥化學(xué)成分分離中最常用的方法。最大的優(yōu)點(diǎn)在于，通過(guò)選用不同分離原理、不同操作方式、不同色譜材料或?qū)⒏鞣N色譜組合應(yīng)用，達(dá)到對(duì)化學(xué)成分的分離和精制。第90頁(yè)/共239頁(yè)91色譜Flash動(dòng)畫(huà)第91頁(yè)/共239頁(yè)92柱色譜視頻第92頁(yè)/共239頁(yè)93色譜法分類吸附色譜分配色譜凝膠色譜離子交換色譜根據(jù)分離原理可分為：第93頁(yè)/共239頁(yè)94色譜法分類薄層色譜法(thinlayerchromatography,TLC)柱色譜法(columnchromatography)紙色譜法(paperchromatography，PC)高效液相色譜法(HPLC)氣相色譜法(GC)根據(jù)分離方法可分為：第94頁(yè)/共239頁(yè)951.吸附色譜法吸附色譜是利用吸附劑對(duì)被分離化合物分子的吸附能力的差異，而實(shí)現(xiàn)分離的一類色譜。常用的吸附劑有硅膠、氧化鋁、活性炭、聚酰胺等。第95頁(yè)/共239頁(yè)96吸附力的分類物理吸附：無(wú)選擇性，吸附與解吸可逆，如硅膠、氧化鋁、活性炭吸附。化學(xué)吸附：有選擇性，吸附牢固。半化學(xué)吸附：介于上述二者之間，如聚酰胺。第96頁(yè)/共239頁(yè)97吸附力的特點(diǎn)吸附劑活性吸附力三要素溶質(zhì)極性溶劑極性物理吸附：相似者易于吸附第97頁(yè)/共239頁(yè)98吸附劑的特點(diǎn)硅膠、氧化鋁為極性吸附劑溶質(zhì)極性大，吸附力強(qiáng)溶劑極性大，洗脫力強(qiáng)活性炭為非極性吸附劑，與此相反第98頁(yè)/共239頁(yè)99硅膠吸附色譜應(yīng)用最為廣泛的吸附色譜，大多數(shù)成分都可用它來(lái)分離。硅膠是極性吸附劑，適合分離極性相對(duì)較小的成分，用有機(jī)溶劑系統(tǒng)洗脫。第99頁(yè)/共239頁(yè)100硅膠的結(jié)構(gòu)第100頁(yè)/共239頁(yè)101硅膠的結(jié)構(gòu)第101頁(yè)/共239頁(yè)102硅膠吸附色譜實(shí)際應(yīng)用中有柱色譜和薄層色譜兩種。第102頁(yè)/共239頁(yè)103TLC第103頁(yè)/共239頁(yè)104氧化鋁吸附色譜應(yīng)用范圍有一定的限制，主要用于堿性或中性親脂性成分的分離。如可用于生物堿、甾體、萜類成分的分離。尤其不適合含有酚羥基化合物的分離。第104頁(yè)/共239頁(yè)105聚酰胺吸附色譜利用氫鍵締合分離，屬于半化學(xué)吸附。固定相流動(dòng)相第105頁(yè)/共239頁(yè)1062.凝膠過(guò)濾色譜原理主要是分子篩作用，根據(jù)凝膠的孔徑和被分離化合物的分子大小而達(dá)到分離目的。凝膠是具有多孔隙網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的固體物質(zhì)，當(dāng)混合物溶液通過(guò)凝膠柱時(shí)，比凝膠孔隙小的分子可以自由進(jìn)入凝膠內(nèi)部。第106頁(yè)/共239頁(yè)107凝膠過(guò)濾色譜第107頁(yè)/共239頁(yè)108凝膠過(guò)濾色譜商品凝膠的種類很多，常用的是葡聚糖凝膠，羥丙基葡聚糖凝膠葡聚糖凝膠(sephadexG)是由葡聚糖（右旋糖酐）和甘油基通過(guò)醚橋相交聯(lián)而成的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，親水性，只適合在水中使用。第108頁(yè)/共239頁(yè)109SephadexG凝膠顆粒網(wǎng)孔的大小取決于所用交聯(lián)劑的數(shù)量和反應(yīng)條件。加入的交聯(lián)劑越多，網(wǎng)孔越緊密，孔徑越小，吸水膨脹也越小。SephadexG-75，含義此干凝膠吸水量為7.5mL/g。第109頁(yè)/共239頁(yè)110SephadexLH-20既有親水性又有親脂性既可在水性溶劑系統(tǒng)中使用，又可在親脂有機(jī)溶劑系統(tǒng)中使用。羥丙基葡聚糖凝膠，是在sephadexG-25的羥基上引入羥丙基而成醚狀結(jié)合態(tài)。第110頁(yè)/共239頁(yè)111PartialstructureofSephadexLH-20Thegelisbasedonhydroxypropylateddextranwhichhasbeencrosslinkedtoyieldapolysaccharidenetwork.第111頁(yè)/共239頁(yè)112SephadexLH-20與sephadexG相比引入羥丙基后分子中羥基的總數(shù)不變，但碳原子所占的比例相對(duì)增加，因此使用范圍擴(kuò)大。含水系統(tǒng)：甲醇－水有機(jī)系統(tǒng)：氯仿－甲醇第112頁(yè)/共239頁(yè)113SephadexLH-20使用小結(jié)使用含水溶劑系統(tǒng)時(shí)主要為分子篩作用。具有雙重色譜性能，主要原理為分子篩作用。使用有機(jī)溶劑系統(tǒng)洗時(shí)，還有吸附作用，極性相對(duì)較小的化合物先被洗脫下來(lái)。第113頁(yè)/共239頁(yè)1143.離子交換色譜(ionexchangechromatography)離子交換色譜主要是基于混合物中各成分解離度差異進(jìn)行分離。有離子交換樹(shù)脂、離子交換纖維素和離子交換凝膠三種。第114頁(yè)/共239頁(yè)115離子交換樹(shù)脂結(jié)構(gòu)第115頁(yè)/共239頁(yè)116離子交換樹(shù)脂離子交換樹(shù)脂對(duì)交換化合物的能力強(qiáng)弱，主要取決于化合物解離度大小，帶電荷多少等因素?；衔锝怆x度大易交換在樹(shù)脂上，相對(duì)難洗脫，因此解離度小的化合物先被洗脫下來(lái)。第116頁(yè)/共239頁(yè)117離子交換色譜flash動(dòng)畫(huà)第117頁(yè)/共239頁(yè)118離子交換纖維素和凝膠是在纖維素或葡聚糖等大分子的羥基上，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)引入能釋放離子的基團(tuán)所形成。二乙氨基纖維素(DEAE-cellulose)羧甲基纖維素(CM-cellulose)二乙氨基葡聚糖凝膠(DEAE-sephadex)羧甲基纖維素(CM-sephadex)第118頁(yè)/共239頁(yè)119離子交換纖維素和凝膠它們既有離子交換性質(zhì)，又有分子篩作用，對(duì)水溶性成分的分離十分有效，主要用于分離純化如蛋白質(zhì)、多糖、生物堿和其它水溶性成分。第119頁(yè)/共239頁(yè)1204.大孔樹(shù)脂色譜大孔樹(shù)脂是一類沒(méi)有可解離基團(tuán)，具有多孔結(jié)構(gòu)，不溶于水的固體高分子物質(zhì)。通過(guò)吸附（范德華力及氫鍵）與分子篩（多孔結(jié)構(gòu)）作用macro-reticularresine第120頁(yè)/共239頁(yè)121大孔樹(shù)脂色譜大孔樹(shù)脂的色譜行為具有反相的性質(zhì)。被分離物質(zhì)的極性越大，其Rf值越大，反之Rf值越小。對(duì)洗脫劑而言，極性大的溶劑洗脫能力弱，而極性小的溶劑洗脫能力強(qiáng)。第121頁(yè)/共239頁(yè)122大孔樹(shù)脂色譜根據(jù)骨架材料是否帶功能基團(tuán)，大孔吸附樹(shù)脂可分為非極性、中等極性與極性三類。第122頁(yè)/共239頁(yè)123大孔樹(shù)脂色譜大孔樹(shù)脂常應(yīng)用于中藥有效成分富集，具有選擇性好、機(jī)械強(qiáng)度高、再生處理方便、吸附速度快。一般水煎法收率30%，水醇法15%，大孔樹(shù)脂法收率5%。第123頁(yè)/共239頁(yè)124常用的大孔樹(shù)脂Amberlite系列（美國(guó)）；Diaion系列（日本）；GDX系列（天津試劑二廠）；AB-8、X-5（南開(kāi)大學(xué)化工廠）；第124頁(yè)/共239頁(yè)125大孔樹(shù)脂分離操作過(guò)程人參提取液通過(guò)樹(shù)脂柱水洗樹(shù)脂70%乙醇洗脫乙醇洗脫液人參總皂苷粗品第125頁(yè)/共239頁(yè)1265.分配色譜利用被分離成分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離。按照固定相與流動(dòng)相的極性差別，分配色譜有正相與反相分配色譜法之分。第126頁(yè)/共239頁(yè)127正相分配色譜固定相>流動(dòng)相極性常用的固定相有氰基與氨基鍵合相洗脫劑用親脂性有機(jī)溶劑系統(tǒng)。第127頁(yè)/共239頁(yè)128反相分配色譜固定相<流動(dòng)相極性常用的固定相有：C8鍵合相十八烷基硅膠(ODS,octadecanesilica)流動(dòng)相常用甲醇-水，乙腈-水。反相色譜是應(yīng)用最廣的色譜法。第128頁(yè)/共239頁(yè)129反相硅膠化學(xué)結(jié)構(gòu)第129頁(yè)/共239頁(yè)130反相分配色譜的特點(diǎn)反相色譜是應(yīng)用最廣的色譜法鍵合相表面官能團(tuán)不會(huì)流失流動(dòng)相的極性可在很大范圍內(nèi)調(diào)整可重復(fù)使用多次，重現(xiàn)性好第130頁(yè)/共239頁(yè)131分配色譜的分類（1）紙色譜法（2）分配薄層色譜法（3）分配柱色譜法按操作方法可分為：第131頁(yè)/共239頁(yè)132紙色譜法紙色譜法屬分配色譜，具有雙重色譜性能使用親脂性有機(jī)溶劑洗脫時(shí)為正相分配色譜使用含水溶劑系統(tǒng)洗脫時(shí)為反相分配色譜第132頁(yè)/共239頁(yè)133將兩相溶劑中的一相涂覆在硅膠等多孔載體上，作為固定相，填充于色譜柱中，用流動(dòng)相洗柱。液-液分配柱色譜：第133頁(yè)/共239頁(yè)1346.其它色譜分離方法DCCC(液滴逆流色譜)和HSCCC(高速逆流色譜法)可使流動(dòng)相呈液滴形式在固定相間交換，分離效果好。多用于分離皂苷、蛋白質(zhì)、糖類等。第134頁(yè)/共239頁(yè)135DCCC裝置圖示DropletCounterCurrentChromatography第135頁(yè)/共239頁(yè)1367.色譜技術(shù)進(jìn)展（1）制備薄層技術(shù)（2）加壓液相柱色譜技術(shù)第136頁(yè)/共239頁(yè)137（2）加壓液相柱色譜技術(shù)多用反相色譜柱所用載體是顆粒直徑小、機(jī)械強(qiáng)度高、比表面積大的球形硅膠，其上鍵有不同極性的有機(jī)化合物以適應(yīng)不同類型的分離工作。第137頁(yè)/共239頁(yè)138加壓液相柱色譜技術(shù)根據(jù)液相色譜所用壓力大小的不同，可分為:①高效液相色譜(HPLC,>20個(gè)大氣壓)②中壓液相色譜(MPLC,5~20個(gè)大氣壓)③低壓液相色譜(LPLC,<5個(gè)大氣壓)第138頁(yè)/共239頁(yè)139①高效液相色譜（HPLC）highperformanceliquidchromatography是在經(jīng)典的液相色譜基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種快速分離分析新技術(shù)。采用了高效填充劑，利用加壓手段加快流動(dòng)相流速的一種高效能液相色譜法。第139頁(yè)/共239頁(yè)140高效液相色譜（HPLC）按分離原理可分為：吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜凝膠色譜等其中液－液分配色譜應(yīng)用最廣泛。根據(jù)固定相與流動(dòng)相極性的差別，亦分為:正相分配色譜反相分配色譜第140頁(yè)/共239頁(yè)141HPLCSystemforAnalysis第141頁(yè)/共239頁(yè)142HPLCSystemforPurification第142頁(yè)/共239頁(yè)1431.7μmBEHUPLC?顆粒1.8μmHSSUPLC顆粒

與傳統(tǒng)的HPLC相比，UPLC的速度、靈敏度及分離度分別是HPLC的9倍、3倍及1.7倍。

1mL/min流速時(shí)的耐壓可達(dá)15000psi

超高效液相色譜（UltraPerformanceLiquidChromatography，UPLC）

第143頁(yè)/共239頁(yè)144第144頁(yè)/共239頁(yè)145BEH顆粒

1.7μm乙烯架橋雜化顆粒(EthyleneBridgedHybrid，簡(jiǎn)稱BEH)HSS顆粒1.8μm高強(qiáng)度二氧化硅(HSS)顆粒。WatersUPLC顆粒第145頁(yè)/共239頁(yè)146HPLCWatersAgilentDIONEXShimadzu第146頁(yè)/共239頁(yè)147HPLCColumn第147頁(yè)/共239頁(yè)148HPLCColumn-兩大類第148頁(yè)/共239頁(yè)149HPLC的優(yōu)點(diǎn)高效液相色譜法分離速度快、效率高、試樣分析重現(xiàn)性好，而且試樣不需氣化，只需制成溶液，即可在室溫下進(jìn)樣分析。此法應(yīng)用范圍極廣，對(duì)揮發(fā)性差或遇熱不穩(wěn)定的成分及某些高分子化合物的分離極為有利。第149頁(yè)/共239頁(yè)150第一節(jié)、中藥成分及生物合成簡(jiǎn)介第二節(jié)、提取分離方法第三節(jié)、化學(xué)結(jié)構(gòu)研究方法中藥化學(xué)成分的一般研究方法第150頁(yè)/共239頁(yè)151第三節(jié)、化學(xué)結(jié)構(gòu)研究方法闡明機(jī)理第151頁(yè)/共239頁(yè)152化學(xué)結(jié)構(gòu)研究程序化合物純度化合物類別化合物結(jié)構(gòu)第152頁(yè)/共239頁(yè)1531.物理常數(shù)：mp，[α]D2.TLC（PC）：三種展開(kāi)系統(tǒng)均為單一斑點(diǎn)。3.HPLC，GC一、純度鑒定第153頁(yè)/共239頁(yè)1541.物理常數(shù)測(cè)定化合物物理常數(shù)的測(cè)定包括熔點(diǎn)、沸點(diǎn)、比旋度、折光率和比重測(cè)定等。熔點(diǎn)：?jiǎn)我患兓衔锝Y(jié)晶的溶距常小于2oC。第154頁(yè)/共239頁(yè)155物理常數(shù)測(cè)定沸點(diǎn)：液體純物質(zhì)應(yīng)有恒定的沸點(diǎn)，沸程不超過(guò)5oC。折光濾＆比重：液體純物質(zhì)應(yīng)有恒定的折光濾＆比重。比旋度：比旋度反應(yīng)化合物結(jié)構(gòu)有無(wú)手性結(jié)構(gòu)，與立體結(jié)構(gòu)有關(guān)。第155頁(yè)/共239頁(yè)1562.TLC（PC）僅采用一種溶劑系統(tǒng)或色譜條件，得到的結(jié)論常會(huì)出現(xiàn)偏差。通常三種溶劑系統(tǒng)或色譜條件下，均得到單一斑點(diǎn)可初步說(shuō)明為單一化合物。第156頁(yè)/共239頁(yè)1573.HPLC，GC判斷純度時(shí)，靈敏度、準(zhǔn)確度高于TLC(PC)，但也應(yīng)采用多種色譜條件進(jìn)行測(cè)試。第157頁(yè)/共239頁(yè)1581、文獻(xiàn)調(diào)研：同種、同屬及相近屬植物的成分2、鑒別反應(yīng)：確定官能團(tuán)、骨架3、色譜行為：酸堿性、溶解性等二、化合物類型的確定第158頁(yè)/共239頁(yè)1591、文獻(xiàn)調(diào)研同科同屬的植物常含有相同或相似的化合物。通過(guò)對(duì)文獻(xiàn)中同科同屬植物化學(xué)成分進(jìn)行調(diào)研，就可以推測(cè)研究對(duì)象中含有成分的可能類別。第159頁(yè)/共239頁(yè)160鑒別反應(yīng)主要是利用的化合物的理化性質(zhì)。一些類型的中藥化學(xué)成分具有特征性的鑒別反應(yīng)。2、鑒別反應(yīng)對(duì)化合物進(jìn)行鑒別反應(yīng)，就能夠推測(cè)化合物的骨架類型。第160頁(yè)/共239頁(yè)161蒽醌類成分：堿液顯色反應(yīng)檢識(shí)骨架類型黃酮類成分：鹽酸鎂粉反應(yīng)、四氫硼鈉反應(yīng)生物堿類成分：碘化鉍鉀反應(yīng)、碘化汞鉀反應(yīng)第161頁(yè)/共239頁(yè)162某些基團(tuán)也具有一些特征性的鑒別反應(yīng)。鑒別反應(yīng)對(duì)化合物進(jìn)行鑒別反應(yīng)，還能夠推測(cè)化合物結(jié)構(gòu)中可能含有的基團(tuán)。第162頁(yè)/共239頁(yè)163酚羥基：三氯化鐵反應(yīng)檢識(shí)官能團(tuán)亞甲二氧基：Labat反應(yīng)不飽和內(nèi)酯環(huán)：異羥肟酸鐵反應(yīng)苯環(huán)酚羥基對(duì)位有無(wú)取代基：Gibb’s反應(yīng)第163頁(yè)/共239頁(yè)164試驗(yàn)時(shí)平行對(duì)照未知樣品、空白、典型樣品三者平行對(duì)照注意綜合多種試驗(yàn)作出判斷一種檢識(shí)反應(yīng)易誤判，最好兩種以上試驗(yàn)第164頁(yè)/共239頁(yè)165化合物提取、分離、精制過(guò)程中獲得的化合物的色譜行為也有助于判斷化合物的類別。3、色譜行為通過(guò)色譜行為的觀察可獲知化合物的溶解性、酸堿性、極性、顯色反應(yīng)方面的信息。第165頁(yè)/共239頁(yè)166例如有個(gè)化合物進(jìn)行硅膠TLC分析時(shí)發(fā)現(xiàn)它易溶于乙醚，用氯仿－丙酮（8:1）展開(kāi)時(shí)Rf=0.6，UV365nm下，檢識(shí)顯藍(lán)色斑點(diǎn)。該化合物屬于哪一類天然產(chǎn)物？第166頁(yè)/共239頁(yè)167(一)

波譜方法

UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、MS(二)

化學(xué)溝通化學(xué)降解、衍生物制備、人工合成(三)

立體結(jié)構(gòu)

CD、ORD、2D-NMR、X-射線衍射三、化合物結(jié)構(gòu)的確定第167頁(yè)/共239頁(yè)168（一）波譜方法目前，波譜分析已成為確定中藥有效成分化學(xué)結(jié)構(gòu)的主要手段具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)、試樣用量少以及快速、簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)準(zhǔn)確性也大大提高波譜的應(yīng)用已成為廣大藥學(xué)工作者必須掌握的一門技術(shù)第168頁(yè)/共239頁(yè)169波譜方法的內(nèi)在聯(lián)系△E

＝hvv

＝c/λ電磁波區(qū)域分子變化能量(千焦/摩)頻率(Hz)波長(zhǎng)(cm)紫外電子躍遷42010152×10-5－4×10-5可見(jiàn)電子躍遷2105×10144×10-5－8×10-5紅外分子振動(dòng)211013－1014104－10-2微波分子轉(zhuǎn)動(dòng)12×10-33×10101無(wú)線電波在外磁場(chǎng)中核自旋取向4.7×10-71065×105光譜中所用的電磁波區(qū)域第169頁(yè)/共239頁(yè)1701、UVspectrumultravoiletspectroscopy第170頁(yè)/共239頁(yè)171UVspectrum各種電子躍遷所需能量示意圖第171頁(yè)/共239頁(yè)172UVspectrum一般來(lái)說(shuō)，UV光譜主要用于判斷結(jié)構(gòu)中的共軛體系和估計(jì)共軛系統(tǒng)中取代基的位置、種類和數(shù)目等。UV是測(cè)定含有共軛雙鍵、α，β-不飽和羰基（醛、酮、酸、酯）結(jié)構(gòu)的化合物及芳香化合物結(jié)構(gòu)的一種重要手段。第172頁(yè)/共239頁(yè)173UVspectrum在某些場(chǎng)合下，還對(duì)測(cè)定化合物的精細(xì)結(jié)構(gòu)具有一定意義。如黃酮類化合物，測(cè)定其UV光譜時(shí)，加入某種診斷試劑后，可因分子中取代基的類型、數(shù)目及排列方式不同而發(fā)生光譜形狀的改變。第173頁(yè)/共239頁(yè)174UVspecturmofrutin第174頁(yè)/共239頁(yè)175UV-visiblespectrometer第175頁(yè)/共239頁(yè)1762、IRspectruminfraredabsorptionspectrum,IR有機(jī)化合物用不同波長(zhǎng)的紅外線照射，分子吸收紅外線后引起化學(xué)鍵的振動(dòng)或轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)躍遷而形成的光譜，稱為紅外吸收光譜。第176頁(yè)/共239頁(yè)177IRspectrometer第177頁(yè)/共239頁(yè)178IRspectrum測(cè)定范圍在波數(shù)4000~500cm-1。特征基團(tuán)區(qū)4000~1600cm-1

。指紋區(qū)1000~500cm-1

。第178頁(yè)/共239頁(yè)179IRspectrum1）3300~3000弱吸收烯氫、芳?xì)洹=N

強(qiáng)吸收O-H、N-H2）3000~2700飽和C-H3）2400~2100不飽和三鍵4）1900~1650C=O及其衍生物5）1680~1500C=C及芳香核骨架振動(dòng)、C=N等6）1500~1300飽和C-H面內(nèi)彎曲振動(dòng)7）1000~650不飽和C-H面外彎曲振動(dòng)第179頁(yè)/共239頁(yè)180羥基羰基苯環(huán)IR光譜顯示有羥基(3452cm-1)、羰基(1734cm-1)和苯環(huán)(1614,1517,1458cm-1)第180頁(yè)/共239頁(yè)181IRspectrum未知化合物：主要用于功能基團(tuán)的確認(rèn)，芳環(huán)取代類型的確認(rèn)。已知化合物:和已知對(duì)照品做一張共紅外圖譜，如果兩者的紅外光譜完全一致可推測(cè)是同一物質(zhì)。第181頁(yè)/共239頁(yè)1823、MassSpectrometry第182頁(yè)/共239頁(yè)183質(zhì)譜能夠提供的信息⑴相對(duì)分子質(zhì)量低分辨質(zhì)譜就可以確定相對(duì)分子質(zhì)量高分辨質(zhì)譜可精確到0.0001；⑵分子式(樣品的元素組成)用同位素豐度比法（低分辨法）或高分辨質(zhì)譜儀測(cè)得的準(zhǔn)確相對(duì)分子質(zhì)量,均可以確定分子式；第183頁(yè)/共239頁(yè)184⑸人機(jī)問(wèn)答，給出可能的化合物質(zhì)譜能夠提供的信息⑶鑒定某些官能團(tuán)如甲基(m/z15)、羰基(m/z28)、甲氧基(m/z31)、乙酰基(m/z43)……⑷分子結(jié)構(gòu)信息由分子結(jié)構(gòu)與裂解方式的經(jīng)驗(yàn)規(guī)律,根據(jù)碎片離子的m/z及相對(duì)豐度RA提供分子結(jié)構(gòu)信息；第184頁(yè)/共239頁(yè)185MassSpectrometryMassSpectrometryisananalyticalspectroscopictoolprimarilyconcernedwiththeseparationofmolecular(andatomic)speciesaccordingtotheirmassMassSpectrometryhasanumberofusesforexamplegeologistsuseittodaterocks,pharmaceuticalcompaniesmakeuseofmassspectrometrytodeterminethestructureofnovelcompounds.Todaytechniquessuchasthefollowingarecommonlyused:GC/MS,GC/MS/MS,LC/MS,FAB,ElectrosprayMS,MALDITOFMS,FTMS,ICPMS第185頁(yè)/共239頁(yè)186DevelopmentHistoryofMS第186頁(yè)/共239頁(yè)187Ionsources電子轟擊源（Electro-Impactsource,EI）化學(xué)電離源（ChemicalIonization,CI）場(chǎng)致電離源（FieldIonization,FI）場(chǎng)解吸電離源（FieldDesorption,FD）快原子轟擊（Fastatombombardment,FAB）基質(zhì)輔助激光解析電離（matrix-assistedlaserdesorption-ionization,MALDI）第187頁(yè)/共239頁(yè)188Ionsources液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)機(jī)的接口粒子束(ParticleBeam,PB)

熱束(ThermoBeam)大氣壓電離源(AtmosphericPressure)電噴霧電離(ElectroSparyIonization,ESI)大氣壓化學(xué)電離(AtmosphericPressureChemicalIonization,APCI)第188頁(yè)/共239頁(yè)189分子離子碎片離子基峰同位素離子亞穩(wěn)離子重排離子EI質(zhì)譜中的離子包括第189頁(yè)/共239頁(yè)190HREIMSm/z502.1854[M]+(calcdforC26H30O10,502.1839)

第190頁(yè)/共239頁(yè)191HRESIMS(positiveionmode)m/z

469.1454[M+Na]+

(calcdforC23H26O9Na,469.1475)

第191頁(yè)/共239頁(yè)1924、NMRspectroscopyNMR現(xiàn)象的產(chǎn)生第192頁(yè)/共239頁(yè)193NMR現(xiàn)象的產(chǎn)生第193頁(yè)/共239頁(yè)194NMR現(xiàn)象的產(chǎn)生第194頁(yè)/共239頁(yè)195NMR現(xiàn)象的產(chǎn)生第195頁(yè)/共239頁(yè)196從核磁共振的發(fā)現(xiàn)到如今，共有13位科學(xué)家因?qū)舜殴舱褡龀鲋匾暙I(xiàn)而獲得諾貝爾獎(jiǎng)：1944年I.Rabi1952年F.Block1952年E.M.Purcell1955年W.E.Lamb1955年P(guān).Kusch1964年C.H.Townes1966年A.Kastler1977年J.H.VanVleck1981年N.Bloembergen1983年H.Taube1989年N.F.Ramsey1991年R.R.Ernst。2002年KurtWuthrich第196頁(yè)/共239頁(yè)197核磁波譜儀原理示意圖第197頁(yè)/共239頁(yè)198核磁波譜儀第198頁(yè)/共239頁(yè)199Chemicalshift第199頁(yè)/共239頁(yè)200AppliedMagneticFiledHo分子內(nèi)部：電負(fù)性、各向異性效應(yīng)、H鍵、范德華力等。做譜溶劑：DMSO-d6;CDCl3;MeOD;pyridine-d5;acetone-d6影響δ的因素第200頁(yè)/共239頁(yè)201苯環(huán)的電子環(huán)流圖示第201頁(yè)/共239頁(yè)202各向異性效應(yīng)第202頁(yè)/共239頁(yè)203（1）1H-NMR1H-NMR譜化學(xué)位移范圍

0~20

ppm1H-NMR譜提供的結(jié)構(gòu)信息參數(shù)：化學(xué)位移（δ）耦合常數(shù)（J）質(zhì)子數(shù)第203頁(yè)/共239頁(yè)204第204頁(yè)/共239頁(yè)2051H-NMRspectrumA2B2系統(tǒng)δ6.96δ3.80δ

2.142.052.01甲氧基甲基端基質(zhì)子J=7.2Hzδ4.38J=8.8Hzδ7.44第205頁(yè)/共239頁(yè)2061H-NMR小結(jié)1.

質(zhì)子的類型：說(shuō)明化合物具有哪些種類的含氫官能團(tuán)。2.

氫分布：說(shuō)明各種類型氫的數(shù)目。3.

核間關(guān)系：氫核間的偶合關(guān)系與氫核所處的化學(xué)環(huán)境提供化合物結(jié)構(gòu)信息有：核間關(guān)系：可提供化合物的連結(jié)方式、位置、距離；結(jié)構(gòu)異構(gòu)與立體異構(gòu)(幾何異構(gòu)、光學(xué)異構(gòu)、構(gòu)象)等)。

第206頁(yè)/共239頁(yè)207（2）13C-NMR13C-NMR譜化學(xué)位移范圍：0~250ppm13C-NMR譜提供的結(jié)構(gòu)信息：碳核的化學(xué)位移異核耦合常數(shù)（JCH）馳豫時(shí)間（T1）其中利用最高的是化學(xué)位移（δ

C）。第207頁(yè)/共239頁(yè)20813C-NMR的特點(diǎn)①靈敏度低，分辨力高②

譜圖容易解析③可直接觀測(cè)不帶氫的官能團(tuán)④常規(guī)13C譜不提供積分曲線等定量數(shù)據(jù)第208頁(yè)/共239頁(yè)209常見(jiàn)的13C-NMR的類別全氫去偶譜(COM)DEPT譜第209頁(yè)/共239頁(yè)210全氫去偶(Proton

complete

decoupling,COM)

寬帶去偶(Broad

band

decoupling,BBD)所有的13C

信號(hào)在圖譜上均作為單峰出現(xiàn)，故無(wú)法確定其上連接的1H數(shù)，對(duì)判斷13C信號(hào)的化學(xué)位移十分方便。全氫去偶譜(COM)第210頁(yè)/共239頁(yè)211DEPT法系通過(guò)改變照射1H核的脈沖寬度(θ)或設(shè)定不同的弛豫時(shí)間(delay

time),使不同類型的13C信號(hào)在譜圖上呈單峰并分別呈現(xiàn)正向峰或倒置峰特點(diǎn)靈敏度高,信號(hào)之間很少重疊,目前已成為13C-NMR譜的一種常規(guī)測(cè)定方法。Distortionless

enhancement

by

polarization

transferDEPT譜第211頁(yè)/共239頁(yè)21213C-NMR第212頁(yè)/共239頁(yè)21326個(gè)碳原子171.0127.9102.255.2114.2第213頁(yè)/共239頁(yè)21413C-NMR小結(jié)1.

碳的類型2.

碳分布3.

核間關(guān)系主要提供化合物結(jié)構(gòu)信息有：碳譜的各條譜線一般都有它的惟一性，能夠迅速、正確地否定所擬定的錯(cuò)誤結(jié)構(gòu)式。碳譜對(duì)立體異構(gòu)體比較靈敏，能給出細(xì)微結(jié)構(gòu)信息。主要提供化合物的碳“骨架”信息。第214頁(yè)/共239頁(yè)2151H-NMR和13C-NMR對(duì)比氫譜不能測(cè)定不含氫的官能團(tuán)，如羰基、氰基等；對(duì)于含碳較多的有機(jī)物，如甾體化合物、萜類化合物等，常因烷氫的化學(xué)環(huán)境類似，而無(wú)法區(qū)別，是氫譜的弱點(diǎn)。碳譜彌補(bǔ)了氫譜的不足，碳譜不但可給出各種含碳官能團(tuán)的信息，且光譜簡(jiǎn)單易辨認(rèn)，對(duì)于含碳較多的有機(jī)物，有很高的分辨率。當(dāng)有機(jī)物的分子量小于500時(shí)，幾乎可分辨每一個(gè)碳核，能給出豐富的碳骨架信息。第215頁(yè)/共239頁(yè)2161H-NMR和13C-NMR對(duì)比普通碳譜(COM譜)的峰高，常不與碳數(shù)成比例是其缺點(diǎn)而氫譜峰面積的積分高度與氫數(shù)成比例二者可互為補(bǔ)充。第216頁(yè)/共239頁(yè)217（3）2D-NMR二維化學(xué)位移相關(guān)譜（相關(guān)譜，correlationspectroscopy,COSY）是2D-COSY譜中最重要、最常用的測(cè)試技術(shù)。2D-COSY譜分為同核相關(guān)和異核相關(guān)譜兩種。第217頁(yè)/共239頁(yè)218常用的2D-NMRspectroscopy（1）1H-1HCOSYspectrum（2）

NOESY(ROESY)spectrum（3）

HMQC(HSQC)spectrum（4）HMBCspectrum第218頁(yè)/共239頁(yè)219（1）1H-1HCOSYspectrum反映同一偶合體系中質(zhì)子的耦合關(guān)系可以確定質(zhì)子化學(xué)位移以及質(zhì)子之間的耦合關(guān)系和連接關(guān)系。第219頁(yè)/共239頁(yè)2201H-1HCOSYspectrum第220頁(yè)/共239頁(yè)221（2）NOESY(ROESY)spectrumNOE是在核磁共振中選擇地照射一種質(zhì)子使其飽和，則與該質(zhì)子在立體空間