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XXXX醫(yī)院凝血酶原時間(PT)測定凝固法操作規(guī)程一、檢驗目的二、工作原理三、方法學溯源四、試劑準備五、標本采集及處理六、室內(nèi)質(zhì)控七、參考范圍八、危急值處理九、報告審核制度十、臨床意義一、檢驗目的:血漿凝血酶原時間(PT)。二、工作原理:被測血漿加入帶不銹鋼球的檢測杯內(nèi)溫育后,加入激活試劑血漿開始凝固,被測血漿粘度不斷增加,不銹鋼球在檢測杯底沿彎曲的軌道運動逐漸減慢,并且振幅減小,此振幅的變化由數(shù)學算法通過計算得到凝固時間。三、方法學溯源:凝血酶原時間(PT)測定是Quick于1935年創(chuàng)立的。在受檢血漿中加入過量的組織凝血活酶(人腦、兔腦、胎盤及肺組織等制品的浸出液)和鈣離子,使凝血酶原變?yōu)槟福笳呤估w維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白。觀察血漿凝固所需要的時間即凝血酶原時間。其凝固時間取決于凝血因子II、VII、V、X、I的水平。該試驗是反映外源凝血系統(tǒng)最常用的篩選試驗。線性范圍:10-1%四、試劑準備:成分:兔腦來源凝血活酶、含鈣溶液貯存:冷藏2-8C按照試劑瓶標簽上標明的量,用試劑2復溶半小時,使用前預溫到室溫(20-25C)。五、標本采集及處理:1、采血步驟登記:登記的內(nèi)容包括病人的姓名、病歷號、采血時間、登記編號、送檢部門等。識別病人:問清病人并識別病人是至關(guān)重要的。了解近期用藥情況和特殊生理狀況,并記錄。例如阿斯匹林、潘生丁等藥物能抑制血小板聚集;服避孕藥會使血小板粘附、聚集功能、纖維蛋白原及多種凝血因子活性明顯增高;當劇烈運動或輸注腎上腺素時VV因子活性會快速上升。應注明。病人的體位:坐位采血;臥位采血;采血時病人的中不準含食物、香糖或表等,以防意外。選擇適當?shù)撵o脈,最宜采血的肘窩靜脈,也可在腕,手,踝靜脈采血。2、注意事項:(1)病人宜處于休息狀態(tài),并且在早餐前采血(乳糜血影響檢測結(jié)果)。(2)針頭不應小于21GAVGE。國際推薦用21G1.5或20G1.5號針頭,確保針頭與空針聯(lián)接牢固,以免產(chǎn)生泡。如果采血時產(chǎn)生泡沫,可能導致纖維蛋白原和伽因子變性。抽血時要“一針見血”,如抽血過慢或不太順利,將會影響檢測結(jié)果。取樣完畢,立即與抗凝劑充分混合,混合抗凝標本時需輕微的但徹底的混勻,因為纖維蛋白在劇烈振蕩混勻時可能變性,一般輕輕的翻轉(zhuǎn)5至10次,要避免用力振搖,以免標本溶血影響結(jié)果。采血的注射器應是硅化玻璃或塑料注射器,并要求收集管刻度精確,所有試管應與參比管一一比較,棄去所有不符合要求的試管。不可在輸液側(cè)手臂采血,更不宜在輸液針頭內(nèi)抽血。采血前也不要拍打靜脈。3、抗凝劑的選擇:血液與抗凝劑的比例為9:1,并且應根據(jù)HCT調(diào)整抗凝劑比率;為了保證比例準確,推薦使用真空采血管含抗凝劑濃度為109MMOL/L的枸椽酸鈉。4、標本的送檢:標本采取前先將標本編號貼在采血管上,采血后應進行核對。標本應帶蓋存放;存貯時間為2-8CV4小時;-20^<2周;-80^<6個月;因此取血后應及時送至實驗室,以免檢測結(jié)果受影響。5、標本處理(1)檢驗人員收到標本后應首先逐個檢查其是否符合檢驗要求。如果不符合檢驗要求的標本需通知臨床重新采血。包括抽血量不標準(過多或過少)、目測發(fā)現(xiàn)采血管中存在小血絲或小血塊,如果排除病人體內(nèi)自身溶血的情況,人為造成的溶血標本以及重度乳糜血的標本等。核對化驗單申請檢驗項目,編號登記。標本應在采集后離心,離心力15G,15分鐘,4小時內(nèi)檢測。六、室內(nèi)質(zhì)控:1、質(zhì)控檢測完成后,到主菜單,進入質(zhì)控畫面查看質(zhì)控結(jié)果。2、質(zhì)控結(jié)果判定:采用L-J質(zhì)控圖在土2SD內(nèi):合格。2SD—3SD:找原因。>±3SD:失控,實驗報告不能發(fā)出并啟動室內(nèi)質(zhì)控失控程序(操作參照失控處理程序)。要求室內(nèi)質(zhì)控的RCV:PT<5%,INR<7%,APTT<5%,F(xiàn)bg<7%七、參考范圍:凝血酶原時間PT-SEC:
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