缺血性腦卒中與血小板活化關(guān)系的研究-1

缺血性腦卒中與血小板活化關(guān)系的研究缺血性腦卒中與血小板活化關(guān)系的研究【本文關(guān)鍵詞語】缺血性腦卒中;血小板活化;酶聯(lián)免疫吸附測定〔聲明：本站文章僅給需要的醫(yī)務(wù)工作者提供溝通學(xué)習(xí)參考。翰林醫(yī)學(xué)論文網(wǎng)免費提供。部分資源由工作人員網(wǎng)上搜索整理而成，假如您發(fā)現(xiàn)有哪部分資料損害了您的版權(quán)，請速與我們后臺工作人員聯(lián)絡(luò)，我們將即時刪除?？头q：88970242.后臺工作qq：928333977〕【內(nèi)容摘要】目的討論缺血性腦卒中患者血小板活化狀況。方法采取elisa法測定205例缺血性腦卒中患者及114例正常對照組血漿血小板活化因子(paf)、α顆粒膜糖蛋白140(gmp140)、β血小板球蛋白(βtg)和血小板第4因子(pf4)水平。結(jié)果缺血性腦卒中組血漿paf、gmp140、βtg和pf4水平均顯著高于對照組(p0.01)。腦梗死體積越大，腦梗死患者血漿paf、gmp140、βtg和pf4水平水平越高(p0.01)。結(jié)論缺血性腦卒中患者急性期血小板活化加強，且與腦梗死體積相關(guān)?！颈疚年P(guān)鍵詞語】缺血性腦卒中;血小板活化;酶聯(lián)免疫吸附測定investigationoftherelationbetweenplateletactivationandischemicstrokediseasezhoujianping1,shenyuxia1,yinkui1，wangchen1,qiuyuchen1,wangwanxiang2,dengjiangjin1(mentofgeriatrics,thefirstpeople'shospitalofyancheng,toryofthefirstpeople'shospitalofyancheng，jiangsu224001)【abstract】objectivetoobservetheplateletactivationinthepatientswithischemicstroke.methodstheplasmalevelsofplateletactivatingfactor(paf),plateletαgranulemembraneglycoprotein140(gmp140)，βthromboglobulin(βtg)andplateletfactor4(pf4)in205patientswithischemicstrokeand114normalsubjects,ascontrolgroup,weredetectedbysthelevelsofplasmapaf,gmp140,βtg,pf4inthepatientsweremarkedlyhigherthanthoseinthecontrols(p0.01).thelargertheinfarctionvolumewasinthepatientswithcerebralinfarction,thehigherthelevelsofplasmapaf,gmp140,βtgandpf4(p0.01).conclusiontheactivationfunctionofplateletintheacutephaseofpatientswithischemicstrokeareincreased,anditisassociatedwiththevolumeofcerebralinfarction.【keywords】ischemicstroke;plateletactivation;enzymelinkedimmunosorbentassay眾所周知，高血壓、糖尿病以及高脂血癥、血小板功能異常等為缺血性腦血管病的主要危險因素。血小板黏附聚集功能在血栓構(gòu)成、動脈粥樣硬化中起主要作用[1]，而此功能與多種聚集誘導(dǎo)劑水平相關(guān)，其中血小板活化因子(plateletactivatingfactor,paf)是迄今所發(fā)現(xiàn)最強的血小板聚集誘導(dǎo)劑，能加速血小板聚集和顆粒釋放，刺激內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞，增長血管通透性，在腦血管病的病理經(jīng)過中具有主要作用。血小板有多種細胞器，最主要是各種顆粒成分如α顆粒，它是血小板中可分泌蛋白質(zhì)的重要儲存部位，含有β血小板球蛋白(βthromboglobulin,βtg)、血小板第4因子(plateletfactor4,pf4)等，其外表存有α顆粒膜糖蛋白140(plateletαgranulemembraneglycoprotein140,gmp140)。血小板活化時顆粒內(nèi)容物和特異膜蛋白釋放入血漿或出如今血小板膜外表，成為辨別活化血小板的特異分子標(biāo)記物。本研究觀察血漿paf、gmp140、βtg和pf4水平在缺血性腦卒中發(fā)病急性期變化及其與腦梗死體積間的關(guān)系，討論其在缺血性腦卒中發(fā)生、發(fā)展病理經(jīng)過中的作用。資料和方法1.一般資料2004年10月至2007年6月在我院住院的急性缺血性腦卒中患者，共205例，男性126例，女性79例，年齡60.52±7.35歲。經(jīng)ct或mri影像學(xué)證明有腦梗死，診斷符合1995年全國第四次腦血管病學(xué)術(shù)會議通過的“動脈粥樣硬化性血栓性腦梗塞〞診斷標(biāo)準(zhǔn)，除外近1個月內(nèi)有嚴(yán)重感染史、手術(shù)外傷史患者，除外近個1月內(nèi)使用抗凝劑、溶栓劑患者，除外有腦出血、血液病、結(jié)締組織病患者。205例中有高血壓病史者143例，占69.8%，糖尿病史者57例，占27.8%，吸煙者73例，占35.6%。按梗死體積(cm3)=π/6(長×寬×ct/mri掃描陽性層面數(shù))分組:大體積梗死組(10cm3)28例，中體積梗死組(4～10cm3)138例，小體積梗死組(4cm3)39例。對照組114例為無心腦血管病、血液病的健康體檢者，年齡和性別與腦卒中組匹配(p0.05)。2.方法(1)標(biāo)本收集急性缺血性腦卒中患者在入院次日凌晨8am收集5mledta抗凝靜脈血，對照組體檢者在凌晨8am收集5mledta抗凝靜脈血。血漿分離后置-20℃保存。(2)檢測方法和指標(biāo)慣例測定兩組血糖、血脂等生化指標(biāo);以elisa法測定血漿paf、gmp140、βtg和pf4水平，試劑盒由美國rapidbio公司和上海太陽生物試劑公司提供。嚴(yán)格按試劑盒說明操作，酶標(biāo)儀為奧地利tecan公司sltspectraⅲ型。3.統(tǒng)計學(xué)處理采取spss10.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-±s)表示，兩組間的比較采取t檢驗，三組間的比較采取方差分析，兩兩比較采取q檢驗(newmankeuls法),以p0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果1.兩組血生化指標(biāo)的比較腦卒中組的空腹血糖、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白顯著高于對照組，高密度脂蛋白顯著低于對照組(p0.05或0.01)。見表1。2.兩組血小板活化標(biāo)記物水平的比較腦卒中組患者的血漿paf、gmp140、βtg和pf4水平均顯著高于對照組(p0.01)。見表2。表1兩組血生化指標(biāo)的比較表2兩組血小板活化標(biāo)記物水平的比較3.不同體積腦梗死患者的血小板活化標(biāo)記物水平的比較腦卒中組不同梗死體積患者血漿paf、gmp140、βtg和pf4水平均有顯著性差別(p0.01)，而且隨著腦梗死體積增大，血漿paf、gmp140、βtg和pf4水平越高(p0.01)。見表3。表3不同體積腦梗死患者的血小板活化標(biāo)記物水平的比注：q檢驗(newmankeuls法)，與小體積梗死組比較※p0.01;與中體積梗死組比較，▲p0.01討論缺血性腦卒中與血小板功能異常親密相關(guān)。血小板的重要生理功能是參與止血和血栓構(gòu)成，并在動脈硬化、腫瘤轉(zhuǎn)移和炎癥反應(yīng)等多種病理經(jīng)過中起積極作用，這些生理病理經(jīng)過與血小板活化后黏附、聚集和釋放等功能改變親密相關(guān)。paf是多種細胞內(nèi)磷脂代謝產(chǎn)品，具有強烈的血小板活化和炎癥介導(dǎo)作用，是迄今所發(fā)現(xiàn)最強的血小板聚集誘導(dǎo)劑。paf促使血小板釋放βtg、pf4、5ht等生物活性物質(zhì)及微量paf;并促進鈣離子內(nèi)流;其對血小板的活化作用不依靠于花生四烯酸和adp途徑，用環(huán)氧化酶抑制劑阿司匹林和消炎痛可抑制paf引起的txa2生成和釋放，但并不影響paf誘導(dǎo)的血小板聚集和血小板內(nèi)鈣離子濃度增高，這可能是阿司匹林等抗血小板聚集劑對部分缺血性腦卒中患者預(yù)防作用有限的機制之一;paf還能通過降低部分腦血流量、增長血腦屏障通透性、激活中性粒細胞、介導(dǎo)血管收縮等導(dǎo)致腦缺血后神經(jīng)元損害[2];同時還具有直接毒性作用。與靜止的血小板相比，活化血小板α顆粒常發(fā)生顯著變化。正常情況下，gmp140在血小板外表不表達，但在血小板活化時，隨著活化血小板“脫顆粒〞發(fā)生異位而很快轉(zhuǎn)移到細胞膜上與血小板質(zhì)膜融合，它具有黏附分子的活性，能介導(dǎo)中性粒細胞與內(nèi)皮細胞、中性粒細胞與血小板等細胞間反應(yīng)，引起血栓構(gòu)成[3]。βtg和pf4是存在于α顆粒內(nèi)的特有蛋白質(zhì)，血小板活化時被釋放至血小板外，是反映血小板活化的特異指標(biāo)，腦缺血患者血小板易被激活并發(fā)生脫顆粒，進而使血漿βtg水平明顯增高，由于血漿βtg水平不易受抗凝藥(如肝素)等因素的影響，因此能可靠反映血小板活性。pf4隨著血小板的激活而釋放入血，對中性粒細胞有強烈的化學(xué)趨化作用，與血管內(nèi)皮細胞外表硫酸乙酰肝素結(jié)合后能減慢凝血酶的滅活經(jīng)過，因而，pf4被以為是血液高凝狀況的最敏感指標(biāo)之一。所以本研選擇paf、gmp140、βtg和pf4這幾種指標(biāo)作為評定血小板活化標(biāo)記物，綜合評價患者血小板活化功能狀態(tài)，結(jié)果顯示，急性缺血性腦卒中患者血漿paf、gmp140、βtg和pf4水平均顯著增高(p0.01)，表示清楚缺血性腦卒中患者急性期存在血小板明顯活化，也提示血小板聚集加強并非單一途徑促發(fā)，可誘導(dǎo)血小板聚集的各種活性物質(zhì)均參與此經(jīng)過，由此提示臨床中采取單途徑抑制血小板活化對控制血小板聚集作用能力不足，如產(chǎn)生阿司匹林抵抗現(xiàn)象可能[4]。血小板活化狀況也與缺血性腦卒中患者病變的嚴(yán)重水平和疾病進展?fàn)顟B(tài)相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)腦梗死面積大的患者中血小板活化狀況顯著高于梗死面積較小者(p0.01)，說明前者存在著較嚴(yán)重的血栓構(gòu)成經(jīng)過，病變越嚴(yán)重血小板活化越明顯，可作為評價卒中嚴(yán)重水平和臨床轉(zhuǎn)歸的指標(biāo)，與adunsky等[2]、陸鋒等[5]報道一致。一般以為，動脈粥樣硬化性血栓性腦梗死的發(fā)生發(fā)展，經(jīng)常與動脈粥樣硬化斑塊破裂血小板活化血栓構(gòu)成有關(guān)，血小板因素在進行期的動脈血栓中有側(cè)重要作用。在血栓發(fā)生經(jīng)過中，內(nèi)皮細胞損傷后，合成釋放的血小板活化抑制因子前列環(huán)素與一氧化氮減少，血小板易于活化[6]。paf、gmp140、βtg和pf4作為血小板活化的標(biāo)記，在血栓構(gòu)成經(jīng)過中發(fā)揮主要作用。故檢測腦梗死患者的血漿paf、gmp140、βtg和pf4，對早期應(yīng)用干涉治療和防止病情進展具有主要臨床意義，同時有助于判定使用抗血小板治療的有效性和停藥根據(jù)，可以應(yīng)用于群的普查和高危人群的篩查。【以下為參考文獻】[1]marquardtl,rufa,mansmannu,etofplateletactivationmarkersafterischemicstroke[j].stroke,2002,33(11):2570-2574.[2]adunskya,hershkowitzm,atare,ettvolume,neurologicalseverityandfpabindingtoplateletsofpatifntswithacutecerebralischemicstrokr[j].neurolres,1999,21(7):645-648.[3]賈麗景，李彬，哈志遠.p選擇素在腦缺血損傷中的作用[j].腦與神經(jīng)疾病雜志，2004，12(4):313-314.[4]張穎冬.阿司匹林防治缺血性腦血管病中的阿司匹林抵抗[j].臨床神經(jīng)病學(xué)雜志,2005,18(3):161-163.[5]陸鋒，張梅，郭力.缺血性腦血管疾病患者血小板膜糖蛋白變化及臨床意義[j].中國實用雜志，2006，26(11):817-81