第7-13章高效液相部分71hplc定義分類比較

1第七章高效液相色譜法第一節(jié)概述2液相色譜法的由來

俄國植物學(xué)家茨維特（M.C.Tswett），他一生從事植物色素提純與分離工作，于1906年創(chuàng)立了液固－色譜。3一、定義

液相色譜法以液體為流動相的色譜法,稱為液相色譜法（LiquidChromatography

,

LC）高效液相色譜法

在經(jīng)典液相色譜基礎(chǔ)上發(fā)展起來的實(shí)用、快速、高效及高靈敏度的分離分析方法。（HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC）

4二、分類-分離原理liquid-solidadsorptionchromatography，LSCliquid-liquidchromatography，LLCnormalphaseHPLC，NP-HPLCreversedphase，RP-HPLCbondedphasechromatography，BPCpairionchromatography，PICionsuppressionchromatography，ISCionexchangechromatography，IECionchromatography，IC5二、分類6第二節(jié)

HPLC的特點(diǎn)

和其它色譜法的比較與經(jīng)典液相色譜法比較與氣相色譜法比較7與氣相色譜比較20％80％在全部有機(jī)化合物中，僅有20％的樣品適用于氣相分析。高效液相色譜法可彌補(bǔ)氣相色譜法的不足之處，可對80％的有機(jī)化合物進(jìn)行分離分析。8HPLC與GC比較歸納9與經(jīng)典液相色譜比較

101、高分離效能-高效色譜柱經(jīng)典柱色譜填料顆粒粒徑一般大于100μm，顆粒較大，傳質(zhì)擴(kuò)散緩慢，手工裝柱不易裝均勻，渦流擴(kuò)散現(xiàn)象較嚴(yán)重，因此經(jīng)典液相色譜法柱效較低，分離能力差，只能勝任各組分分配系數(shù)相差較大的樣品（各組分性質(zhì)相差較大的樣品）的分離。HPLC填料粒徑一般為5-10μm，傳質(zhì)快，采用高壓勻漿技術(shù)裝柱，裝柱均勻性好，渦流擴(kuò)散小，因此HPLC柱效很高，比經(jīng)典柱色譜高數(shù)百～數(shù)千倍，25cm長的硅膠柱柱效可達(dá)2萬理論塔板，能勝任復(fù)雜物的分離，峰容量大。112、快速分離-高壓輸液泵經(jīng)典柱色譜中的柱子多為一次性使用，且體積大（0.1～2m長，0.5～5cm粗），分離速度慢（幾小時～幾周），每次均要重新裝柱，造成人力，物力及時間上的浪費(fèi)。一根HPLC柱能重復(fù)使用數(shù)百次，此外，由于配備了高壓輸液泵可實(shí)現(xiàn)快速分析。12柱色譜及薄層色譜（TLC）在進(jìn)行定量分析時影響因素較多，故準(zhǔn)確