




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文檔簡(jiǎn)介
實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案《生物化學(xué)儀器分析與檢測(cè)技術(shù)》課程教學(xué)大綱一、課程基本信息課程代碼:02601課程名稱(chēng):生物化學(xué)儀器分析與檢測(cè)技術(shù)英文名稱(chēng):EquipmentAnalysisTechnologyBiochemistry課程類(lèi)別:
學(xué)時(shí)63時(shí),其中理論講24時(shí),實(shí)39時(shí),開(kāi)課學(xué)期第四學(xué)期。學(xué)分:3適用對(duì)象:生物技術(shù)類(lèi)專(zhuān)業(yè)考核方式:考試(平時(shí)成績(jī)占總成績(jī)的30%)先修課程:生物化學(xué),分子生物學(xué)二、課程簡(jiǎn)介本課程旨在系統(tǒng)學(xué)習(xí)生化相關(guān)技術(shù)與技能教學(xué)內(nèi)容涵蓋了農(nóng)業(yè)院校生物技術(shù)專(zhuān)業(yè)最廣泛應(yīng)用的分析與檢測(cè)技術(shù)手段光光度法心技術(shù)析技術(shù),氣液相色譜分析,電泳技術(shù)和PCR技術(shù)。該課程的講授部分主要以講解各種分析與檢測(cè)技術(shù)的基本原理及儀器的主要結(jié)構(gòu)部件及其工作原理為主要內(nèi)容的實(shí)驗(yàn)部分則主要使學(xué)生掌握各種技術(shù)的實(shí)際操作步驟及各步的注意事項(xiàng)。Thecourseemphasizesatsystematicbiochemistrytechniques.Thecontentbroadlycoversthemostoftheagriculturebiotechnology:spectrophotometer,centrifugal,chromatography,HPLC(HighPerformanceLiquidChromatography),electrophoresisandPCR(Polymerasereaction).theoreticalofcourseincludesbasictheoriesofdifferenttechniquesandthemaincomponentsofrelatedinstruments;Thepracticalofthecoursepayattentiontheapproachtheoperationalofdifferentexperiment.三、課程性質(zhì)與教學(xué)目的生物化學(xué)儀器分析與檢測(cè)技術(shù)是4制生物技術(shù)專(zhuān)業(yè)的專(zhuān)業(yè)基礎(chǔ)課是一門(mén)實(shí)驗(yàn)技術(shù)性較強(qiáng)的課程到基礎(chǔ)課程與專(zhuān)業(yè)課程的橋梁作用求學(xué)生掌握高速冷凍離心技術(shù)層層析技術(shù)相色譜法和高效液相色譜法應(yīng)用泳技術(shù)和PCR術(shù)的基本原理與相關(guān)操作技能。四、教學(xué)內(nèi)容及要求第一章緒論(一)目的與要求精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案儀器分析的意義在生命科學(xué)中的應(yīng)用,現(xiàn)代生化實(shí)驗(yàn)的意義、步驟、工程化技術(shù)及實(shí)驗(yàn)檢測(cè)技術(shù)。生化成份制備基本策略:材料的培養(yǎng)、選擇及預(yù)處理;細(xì)胞破碎及目的物的抽提;精制純化與保存。(二)教學(xué)內(nèi)容第一節(jié).主要內(nèi)容:儀器分析概述.基本概念和知識(shí)點(diǎn):現(xiàn)代儀器分析的任務(wù),作用和特點(diǎn);儀器分析方法和分類(lèi);現(xiàn)代儀器分析的發(fā)展現(xiàn)狀及在生命科學(xué)中的應(yīng)用。.能力要求:了解現(xiàn)代儀器分析的發(fā)展現(xiàn)狀及在生命科學(xué)中的應(yīng)用第二節(jié).主要內(nèi)容:現(xiàn)代生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)概述.基本概念和知識(shí)點(diǎn):對(duì)物質(zhì)的分離,提取,精制,檢測(cè),研究對(duì)象:微生物,動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)液,酶等。.能力要求:掌握生化實(shí)驗(yàn)的大致步驟。第三節(jié)主要內(nèi)容:生化成分制備基本策略基本概念和知識(shí)點(diǎn):有效成分,雜質(zhì),溶脹和自溶,微膜過(guò)濾,材料的培養(yǎng)和選擇需遵循的原則,細(xì)胞破碎及目的物質(zhì)抽提,目的物的初級(jí)分離,目的物的精制與純度鑒定。3能力要求:重點(diǎn)掌握生化分析的基本概念與細(xì)胞破碎的方法。(三)課后練習(xí):1.解:細(xì)胞破碎方法,微膜過(guò)濾及其作用。2.簡(jiǎn)述:提中幾種主要試劑的作用。(四)教學(xué)方法與手段畫(huà)圖講授或多媒體講授。第二章離心技術(shù)(一)目的與要求掌握離心技術(shù)原理與應(yīng)用,離心機(jī)的結(jié)構(gòu)及性能,常用超離心技術(shù),離心機(jī)的操作與安全事項(xiàng)。(二)教學(xué)內(nèi)容第一節(jié)精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案主要內(nèi)容:離心技術(shù)原理及應(yīng)用基本概念和知識(shí)點(diǎn)心力,RCF=1.12X10-5n2r沉降系數(shù),能力要求:掌握離心力與轉(zhuǎn)速之間的相互換算。第二節(jié)主要內(nèi)容:離心機(jī)的結(jié)構(gòu)及主要部件性能;離心機(jī)的種類(lèi)?;靖拍詈椭R(shí)點(diǎn):離心機(jī)的五個(gè)系統(tǒng)。能力要求:識(shí)別離心機(jī)的主要結(jié)構(gòu),了解各類(lèi)離心管的應(yīng)用范圍。第三節(jié)1.主要內(nèi)容離心技術(shù)機(jī)安全操作步驟機(jī)及轉(zhuǎn)頭的保養(yǎng)。2.基本概念和知識(shí)點(diǎn):沉淀離心,差速沉淀離心,密度梯度離心。3.能力要求:安全使用一般高速冷凍離心機(jī)。(三)實(shí)踐環(huán)節(jié)與課后練習(xí)質(zhì)粒DNA小量制備。.離心機(jī)適用范圍如何?.使用離心機(jī)時(shí)應(yīng)該注意哪些?3.差速離心與密度剃梯度離心方法有什么不同?離心結(jié)束時(shí)亞細(xì)胞組分在介質(zhì)中各呈什么樣的分布?因而收集組分的方法有什么分別?(四)教學(xué)方法與手段畫(huà)圖講授或多媒體講授。第三章
層析技術(shù)(一)目的與要求掌握紙層析,離子交換層析,離子交換纖維素層析,凝膠層析,親和層析的基本原理與技術(shù)。(二)教學(xué)內(nèi)容第一節(jié)主要內(nèi)容:概述,層析的分類(lèi),分配層析法分離目的物質(zhì)原理?;靖拍詈椭R(shí)點(diǎn):層析法,色譜法,吸附劑裝柱,加樣,洗脫,固定相與流動(dòng)相,分配系數(shù),分配層析機(jī)理(塔板理論能力要求:掌握基本概念和分配層析機(jī)理。第二節(jié)主要內(nèi)容:紙層析,離子交換層析,離子交換纖維素層析。基本概念和知識(shí)點(diǎn)值,多元溶劑系統(tǒng)溶劑的原則,紙層析及裝置,飽和與展層,離子交換樹(shù)脂,離子交換平衡與選擇性,離子交換柱精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案層析基本原理,吸附與解吸,梯度洗脫。3.能力要求:了解各類(lèi)層析的基本操作步驟。第三節(jié)主要內(nèi)容:凝膠層析;親和層析。基本概念和知識(shí)點(diǎn):凝膠層析機(jī)理,親和層析的特性,配基,載體,手臂。能力要求:了解各類(lèi)層析的基本操作步驟。(三)實(shí)踐環(huán)節(jié)與課后練習(xí)可溶性糖的硅膠G層層析。子篩層析、離子交換層析樣品在流經(jīng)柱子的時(shí)候都受到哪些力的作用?.分子篩層析、離子交換層析對(duì)柱料前處理、上樣和洗脫的要求有何不同?.如果兩種組分分離不開(kāi),試解釋其可能的原因?.上樣之前如果不進(jìn)行平衡,會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生什么影響?(四)教學(xué)方法與手段畫(huà)圖講授或多媒體講授。第四章氣液相色譜分析技術(shù)(一)目的與要求掌握氣相色譜層析的原理步驟及注意事項(xiàng);掌握高效液相層析的原理,步驟及注意事項(xiàng)。(二)教學(xué)內(nèi)容主要內(nèi)容:定義,常用術(shù)語(yǔ),氣相色譜儀的構(gòu)造,操作要點(diǎn)和條件的選擇,定性和定量分析方法?;靖拍詈椭R(shí)點(diǎn):固分析法,液分析法,載氣,擔(dān)體,固定液,死時(shí)間、保留時(shí)間、校正保留時(shí)間,死體積、保留體積、校正保留體積,滯留因子峰(,峰寬度W)與半峰寬度2,標(biāo)準(zhǔn)偏差δ)分離度正因子,加入法,保留常數(shù)法,歸一化法,外標(biāo)法,內(nèi)標(biāo)法,校正曲線(xiàn)定量。能力要求:掌握氣相與液相色譜分析的主要操作步驟。(三)實(shí)踐環(huán)節(jié)與課后練習(xí)內(nèi)標(biāo)法測(cè)定樣品液中丁醇的含量;精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案1.
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法測(cè)定藥片中VC的含量。色譜分析的基本原理是什么?.何謂流動(dòng)相,固定相?.任何樣品都能用液相色譜法分析嗎?(四)教學(xué)方法與手段畫(huà)圖講授或多媒體講授。第五章電泳技術(shù)(一)目的與要求掌握電泳的基本原理和影響因素烯酰胺凝膠電泳泳;熟悉電泳相關(guān)技術(shù)(凝膠干燥,掃描,成像,印跡技術(shù))纖維膜,毛細(xì)管電泳;了解電泳技術(shù)的拓展和創(chuàng)新(免疫、雙向,脈中,單細(xì)胞電泳等(二)教學(xué)內(nèi)容第一節(jié)主要內(nèi)容:電泳定義,電泳原理,影響電泳速度的因素?;靖拍詈椭R(shí)點(diǎn):等電點(diǎn),v=EQ/6πrη。第二節(jié)主要內(nèi)容:電泳分類(lèi),聚丙烯酰胺凝膠電泳,其他幾種常用電泳?;靖拍詈椭R(shí)點(diǎn)電泳式電泳式電泳,等電聚焦電泳(IEForEF度梯度電泳,瓊脂糖凝膠電泳,醋酸纖維素薄膜電泳,毛細(xì)管電泳。能力要求:掌握聚丙烯酰胺和瓊脂糖凝膠電泳的基本操作步驟。第三節(jié)主要內(nèi)容:電泳技術(shù)的拓展和創(chuàng)新?;靖拍詈椭R(shí)點(diǎn)疫電泳向電泳細(xì)胞電泳沖凝膠電泳,印跡轉(zhuǎn)移電泳,溫度梯度凝膠電泳,逆向色譜電泳,介體電泳。能力要求:了解各類(lèi)電泳的基本原理。(三)實(shí)踐環(huán)節(jié)與課后練習(xí)精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案質(zhì)粒DNA瓊脂糖凝膠電泳和特異性產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳。1電泳結(jié)果不好可能有哪些方面的原因?.電泳時(shí)的電壓根據(jù)什么作出選擇的?.在不連續(xù)體系SDS,當(dāng)分離膠加完后,需在其上加一層水,為什么?4電極緩沖液中甘氨酸的作用?.在不連續(xù)體系SDS中,分離膠與濃縮膠中均含有TEMED和述其作用?.樣品液為何在加樣前需在沸水中加熱幾分鐘.試述EB顯色的原理?.說(shuō)明不同電壓對(duì)電泳結(jié)果的影響是什么(四)教學(xué)方法與手段畫(huà)圖講授或多媒體講授。第六章PCR技術(shù)(一)目的與要求掌握PCR理,PCR術(shù)種類(lèi),PCR術(shù)在現(xiàn)代生物化學(xué)與生命科學(xué)上的應(yīng)用技術(shù)體系的成分與最適條件,試劑的配制與操作步驟及注意事項(xiàng)。(二)教學(xué)內(nèi)容第一節(jié)主要內(nèi)容:PCR增原理?;靖拍詈椭R(shí)點(diǎn)板DNA聚合酶。第二節(jié)主要內(nèi)容:標(biāo)準(zhǔn)PCR增方案。基本概念和知識(shí)點(diǎn):標(biāo)準(zhǔn)的反應(yīng)體系,設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則,溫度程序,對(duì)PCR應(yīng)中主要組分的分析。能力要求:了解PCR主要操作步驟。第三節(jié)主要內(nèi)容:與PCR關(guān)的技術(shù)及PCR術(shù)的應(yīng)用?;靖拍詈椭R(shí)點(diǎn):反-PCR術(shù)(即隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA技;mRNA差示技(RNA-differentialdisplaytechnique,mRNA-DD-PCR差減法雜交;免疫PCR精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案(Immuno-PCRPCR3.能力要求:了解各類(lèi)PCR術(shù)的原理。(三)實(shí)踐環(huán)節(jié)與課后練習(xí)質(zhì)粒DNA特異性片段增。PCR的理是什么?PCR擴(kuò)有哪些實(shí)驗(yàn)步驟?PCR儀用過(guò)程中有哪些注意事項(xiàng)?.PCR行的的基本條件是什么?.PCR一循環(huán)有哪幾個(gè)步驟組成?.影響PCR增的因素有哪些?.優(yōu)化那些條件可以最大限度的減少非特異性擴(kuò)增?非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)擴(kuò)增時(shí)我們應(yīng)該優(yōu)化那些條件?(四)教學(xué)方法與手段畫(huà)圖講授或多媒體講授。第七章
光譜分析法(一)目的與要求光譜分析法導(dǎo)論,原子吸收光譜,掌握紫外可見(jiàn)吸收光譜分析技術(shù)。本課程內(nèi)容回顧、總結(jié)、復(fù)習(xí)。(二)教學(xué)內(nèi)容第一節(jié)主要內(nèi)容:紫外可見(jiàn)分光光度法?;靖拍詈椭R(shí)點(diǎn)原理基本特性對(duì)光的選擇性吸收,吸收定律。第二節(jié)1.主要內(nèi)容:紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),分光光度計(jì)的操作步驟,注意事項(xiàng)。2.基本概念和知識(shí)點(diǎn):儀器的基本組成部件,紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)的類(lèi)型與型號(hào)。3.能力要求:掌握分光光度計(jì)的基本操作步驟。第三節(jié)復(fù)習(xí)本課程每一章節(jié)主要內(nèi)容。(三)實(shí)踐環(huán)節(jié)與課后練習(xí)精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案回顧生化實(shí)驗(yàn)中的多次分光光度分析過(guò)程。為何測(cè)定紫外值時(shí)不能用玻璃比色杯?分光光度計(jì)的使用(開(kāi)機(jī),調(diào)O,調(diào)100的步驟?3.干燥劑多長(zhǎng)時(shí)間換一次?(四)教學(xué)方法與手段畫(huà)圖講授或多媒體講授。五、各教學(xué)環(huán)節(jié)學(xué)時(shí)分配教學(xué)環(huán)節(jié)講
習(xí)
討
小其他教教學(xué)時(shí)數(shù)
題
論
實(shí)驗(yàn)學(xué)環(huán)節(jié)課
課
課
計(jì)課程內(nèi)容第一章第二章第三章第四章第五章第六章第七章合計(jì)
六、推薦教材和教學(xué)參考資源教材:精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案現(xiàn)代生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),蔣立科,楊婉身主編,中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社2003.主要參考書(shū)目:[1]馮萬(wàn)祥,趙伯龍.化技術(shù),湖南工業(yè)出版社,1989[2]郭堯君.蛋白質(zhì)電泳技術(shù),科學(xué)出版社,1999
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