食品儀器分析-高效液相色譜參考答案

高效液相色譜習(xí)題一、填空題1.高效液相色譜分析是將流動相用高壓泵輸送，使壓力高達(dá)5MPa以上，并采用新型的化學(xué)鍵合固定相，是分離效率很高的液相色譜法。2.高效液相色譜法的特點是分離性能高、分析速度快、檢測器靈敏度高、應(yīng)用范圍廣。3.高效液相色譜法和氣相色譜法的共同之處是分離功能、分析功能、在線分析。4.高效液相色譜分析根據(jù)分離機理不同可分為四種類型，即液固色譜、液液色譜、鍵合相色譜、凝膠色譜。5.高效液相色譜中的液一液分配色譜采用的新型固定相叫化學(xué)鍵合相，它是利用化學(xué)方法將固定液官能團(tuán)鍵合在載體表面上的。6.通常把固定相極性大于流動相極性的一類色譜稱為正相色譜。反之稱為反相色譜。7.高效液相色譜儀通常由儲液器、輸液泵、梯度淋洗器、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、色譜工作站七部分組成。8.高效液相色譜儀中使用最廣泛的檢測器為紫外檢測器，另外還有折光檢測器、熒光檢測器等等。9.高效液相色譜主要用于分析沸點高的、分子量大的、受熱易分解的以及具有生理活性物質(zhì)的分析。二、判斷題?、?、′、′、?、?、′、?、′、?、′、?、?、′、?、′、′、?、′、?、?、′、′、′、′、′、′、′、?、′1．液一液色譜流動相與被分離物質(zhì)相互作用，流動相極性的微小變化，都會使組分的保留值出現(xiàn)較大的改變。（?）2．利用離子交換劑作固定相的色譜法稱為離子交換色譜法。（√）3．紫外吸收檢測器是離子交換色譜法通用型檢測器。（×）4．檢測器性能好壞將對組分分離產(chǎn)生直接影響。（×）5．高效液相色譜適用于大分子，熱不穩(wěn)定及生物試樣的分析。（?）6．高效液相色譜中通常采用調(diào)節(jié)分離溫度和流動相流速來改善分離效果。（×）7．鍵合固定相具有機械性能穩(wěn)定，可使用小粒度固定相和高柱壓來實現(xiàn)快速分離。（√）8．在液相色譜中為避免固定相的流失，流動相與固定相的極性差別越大越好。（×）9．正相分配色譜的流動相極性大于固定相極性。（×）10．反相分配色譜適于非極性化合物的分離。（√）11．高效液相色譜法采用梯度洗脫，是為了改變被測組分的保留值，提高分離度（×）12．液相色譜柱一般采用不銹鋼柱、玻璃填充柱。（×）13．液相色譜固定相通常為粒度5～10μm。（×）14．示差折光檢測器是屬于通用型檢測器，適于梯度淋洗色譜。（×）15．離子交換色譜主要選用有機物作流動相。（×）16．體積排阻色譜所用的溶劑應(yīng)與凝膠相似，主要是防止溶劑吸附。（×）17．在液一液色譜中，為改善分離效果，可采用梯度洗脫。（√）18．化學(xué)鍵合固定相具有良好的熱穩(wěn)定性，不易吸水，不易流失，可用梯度洗脫。（×）19．液相色譜的流動相又稱為淋洗液，改變淋洗液的組成、極性可顯著改變組分分離效果。（√）20．液相色譜指的是流動相是液體，固定相也是液體的色譜。（×）21．高效液相色譜柱柱效高，能用液相色譜分析的樣品不用氣相色譜法分析。（×）22．在液相色譜中，流動相的流速變化對柱效影響不大。（×）×24．某人用凝膠色譜分離易高聚物樣品，分離情況很差，他改變流動相的組成后，分離情況大為改進(jìn)，這種說法對嗎？（×）25．在離子交換色譜中使用的固定相也屬于一種鍵合固定相。（√）三、選擇題1．在液相色譜法中，按分離原理分類，液固色譜法屬于（D）。A、分配色譜法B、排阻色譜法C、離子交換色譜法D、吸附色譜2.在高效液相色譜流程中，試樣混合物在（C）中被分離。A、國標(biāo)規(guī)定的一級、二級去離子水B、國標(biāo)規(guī)定的三級水C、不含有機物的蒸餾水D、無鉛（無重金屬）水14.高效液相色譜儀與普通紫外-可見分光光度計完全不同的部件是（A）。A、流通池B、光源C、分光系統(tǒng)D、檢測系統(tǒng)15.高效液相色譜儀中高壓輸液系統(tǒng)不包括（E）。A、貯液器B、高壓輸液泵C、過濾器D、梯度洗脫裝置E、進(jìn)樣器16.在液相色譜中，為了獲得較高柱效能，常用的色譜柱是（B）。A、毛細(xì)管柱B、直形柱C、U形柱D、螺旋形柱17.在色譜法中，任何組分的分配系數(shù)都比1小的是（D）。A、離子交換色譜B、氣固色譜C、氣液色譜D、空間排阻色譜18.反相液液色譜適合于分離（D）。A、低沸點液體B、高分子化合物C、極性化合物D、非極性化合物四、簡答題（略）1．從分離原理、儀器構(gòu)造及應(yīng)用范圍上簡要比較氣相色譜及液相色譜的異同點。答：共同點：高效、高速、高選擇性，兼具分析和分離功能，均可在線分析。不同點：（1）流動相不同（2）固定相不同，GC粒度粗（100—250um），HPLC采用化學(xué)鍵合固定相，粒度?。?-10um）（3）應(yīng)用范圍不同（4）結(jié)構(gòu)不同，HPLC有高壓輸液泵，GC的檢測器更多。各有所長，互為補充。2．在液相色譜中,提高柱效的途徑有哪些?其中最有效的途徑是什么?答：液相色譜中提高柱效的途徑主要有：（1）提高柱內(nèi)填料裝填的均勻性；（2）改進(jìn)固定相：（3）粒度;選擇薄殼形擔(dān)體;選用低粘度的流動相;（4）適當(dāng)提高柱溫其中，減小粒度是最有效的途徑。.3．液相色譜有幾種類型?它們的保留機理是什么？在這些類型的應(yīng)用中，最適宜分離的物質(zhì)是什么？答：液相色譜有以下幾種類型：液-液分配色譜；液-固吸附色譜；化學(xué)鍵合色譜；離子交換色譜；離子對色譜；空間排阻色譜等。液－液分配色譜的保留機理是通過組分在固定相和流動相間的多次分配進(jìn)行分離的?？梢苑蛛x各種無機、有機化合物。液-固吸附色譜是通過組分在兩相間的多次吸附與解吸平衡實現(xiàn)分離的。最適宜分離的物質(zhì)為中等相對分子質(zhì)量的油溶性試樣，凡是能夠用薄層色譜分離的物質(zhì)均可用此法分離?；瘜W(xué)鍵合色譜中由于鍵合基團(tuán)不能全部覆蓋具有吸附能力的載體，所以同時遵循吸附和分配的機理，最適宜分離的物質(zhì)為與液-液色譜相同。離子交換色譜是通過組分與固定相間親合力差別而實現(xiàn)分離的。各種離子及在溶液中能夠離解的物質(zhì)均可實現(xiàn)分離，包括無機化合物、有機物及生物分子，如氨基酸、核酸及蛋白質(zhì)等?？臻g排阻色譜是利用凝膠固定相的孔徑與被分離組分分子間的相對大小關(guān)系，而分離、分析的方法。最適宜分離的物質(zhì)是：蛋白質(zhì)等生物分子的分離、高聚物等大分子分離（分子量大于2000）。4．在液-液分配色譜中，為什么可分為正相色譜及反相色譜？答：采用正相及反相色譜的分類法，是為了選擇與固定相性能匹配的流動相，以降低固定液在流動相中的溶解度從而避免固定液的流失。當(dāng)然，分離的對象也隨之發(fā)生改變。5．何謂化學(xué)鍵合固定相？它有什么突出的優(yōu)點？答：利用化學(xué)反應(yīng)將固定液的官能團(tuán)鍵合在載體表面形成的固定相稱為化學(xué)鍵合固定相。優(yōu)點：固定相表面沒有液坑,比一般液體固定相傳質(zhì)快的多；無固定相流失，增加了色譜柱的穩(wěn)定性及壽命；可以鍵合不同的官能團(tuán)，能靈活地改變選擇性，可應(yīng)用與多種色譜類型及樣品的分析；有利于梯度洗提，也有利于配用靈敏的檢測器和餾分的收集。6．何謂梯度洗脫？它與氣相色譜中的程序升溫有何異同之處？答：在一個分析周期內(nèi)，按一定程序不斷改變流動相的組成或濃度配比，稱為梯度洗