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文檔簡介

臨床微生物標本的正確采集及運送4/2/2023第1頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三一、臨床微生物標本正確采集的重要意義二、各種類型標本的正確采集和送撿主要內(nèi)容2第2頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三標本質(zhì)量的好壞直接影響診斷結(jié)果的正誤,不當標本可導致假陰性、假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。因此正確采集和運送微生物標本,直接影響到微生物培養(yǎng)鑒定結(jié)果??煽康臋z驗結(jié)果可以指導臨床診斷治療,為臨床科學用藥和成功的感染控制提供依據(jù),是正確、合理使用抗菌藥物,延緩細菌耐藥,減少抗菌藥物濫用和監(jiān)測醫(yī)院感染的第一步,也是最重要的一步。為此應正確采集各種細菌學標本。臨床微生物標本正確采集和運送的重要意義第3頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三

血液標本的采集與運送第4頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三1、血液培養(yǎng)的送檢指征①發(fā)熱(≥38℃)或低溫(≤36℃)②寒戰(zhàn)③白細胞增多(>10×109/L,特別是有“核左移”)④粒細胞減少(<1×109/L)⑤血小板減少⑥皮膚、黏膜出血⑦昏迷⑧多器官衰竭⑨血壓降低⑩呼吸加快以及肝脾腫大;關(guān)節(jié)疼痛;C反應蛋白和降鈣素原升高等

患者出現(xiàn)以上一種或同時具備幾種臨床表現(xiàn)時可作為血培養(yǎng)的重要指征血液標本的采集與運送第5頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三2、血培養(yǎng)標本的采集時間盡可能在患者寒戰(zhàn)或開始發(fā)熱時采血在患者接受抗生素治療前采血如患者已經(jīng)使用抗生素進行治療,應在下一次用藥前采血血液標本的采集與運送第6頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三3、血培養(yǎng)標本的采集⑴皮膚消毒程序:嚴格執(zhí)行以下3步法:①75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上,②再用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用90s以上,從穿刺點向外畫圈消毒,至消毒區(qū)域直徑3cm以上;③最后用75%酒精脫碘。如對碘過敏的患者,可用75%酒精消毒60s,待酒精揮發(fā)干燥后采血。注意:不允許在消毒后按壓靜脈,除非戴有無菌手套血液標本的采集與運送第7頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三⑵血培養(yǎng)瓶消毒程序:用75%酒精擦拭血培養(yǎng)瓶橡皮塞,作用60s;用無菌紗布或無菌棉簽清除橡皮塞子表面殘余酒精,然后注入血液。注入血液后,應輕輕顛倒混勻防止血液凝固。血液標本的采集與運送第8頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三4、血培養(yǎng)采血量

由于每毫升血量中含菌量很小,血培養(yǎng)的陽性率直接與血樣本容量有關(guān),據(jù)報道每增加1ml血樣本可使血培養(yǎng)陽性率上升3%,所以采血量要足夠。通常采血量與培養(yǎng)基之比以1:5~1:10為宜,成人一次采血10~20ml平均注入兩個血培養(yǎng)(需氧、厭氧瓶)中,嬰幼兒采血量為全血量的1%(1~2ml),兒童采血量3~5ml。當發(fā)生菌血癥時,通常成人血液中含有的菌量小于1CFU/ml,而兒童血液中含有的菌量常超過100CFU/ml,所以嬰幼兒、兒童采血量少于5ml時,不會影響培養(yǎng)的陽性率。血液標本的采集與運送第9頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三5、血培養(yǎng)采集的次數(shù)⑴對懷疑菌血癥、真菌血癥的成人患者,推薦同時或短時間間隔(10分鐘內(nèi))從不同部位(如雙臂)采集2套血培養(yǎng)標本,做到“雙瓶雙側(cè)”。如有必要,可同時或短時間間隔內(nèi)從下肢靜脈采血接種第3套培養(yǎng)瓶。在采集血培養(yǎng)后的2-5天內(nèi),不需要重復采集血培養(yǎng)。當采血量不能滿足推薦的采血量時,應首先接種需氧瓶。⑵嬰幼兒患者,需要同時采集2次(不同部位)血培養(yǎng)標本。

血液標本的采集與運送第10頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三有研究表明,只做1套血培養(yǎng),病原菌的檢出率僅為65%;2套血培養(yǎng)為80%;3套血培養(yǎng)為96%。對于成年患者的血培養(yǎng),只采集單瓶是不允許的,因為單瓶的培養(yǎng)結(jié)果很難解釋是致病菌還是污染菌。血液標本的采集與運送第11頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三6、血培養(yǎng)標本的運送⑴

血培養(yǎng)采集后應立即送到微生物室(常規(guī)運送時間少于2h)⑵如果不能立即送到微生物室,需室溫保存或置于35℃-37℃孵箱中,切勿冷藏(因為有些苛養(yǎng)菌遇冷很容易死亡)。血液標本的采集與運送第12頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三

痰液標本的采集與運送第13頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三1、痰標本的采集時間及頻率⑴在抗生素應用前采集;⑵最好在清晨采集;多數(shù)患者在清晨痰較多,且含菌量也多,即使對痰量少的患者,也以清晨最為容易;⑶對于細菌性肺炎,痰標本送檢每天1次,連續(xù)2-3天;不建議24h內(nèi)多次采集,除非痰液外觀形狀出現(xiàn)改變;⑷懷疑分枝桿菌感染者,應連續(xù)收集3天清晨痰液送檢。⑸采集痰標本前應先進行口腔清潔。因為本身人體口腔內(nèi)含有很多微生物,致使痰液咳出時易受到污染。痰標本的采集與運送第14頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三2、痰標本的采集方法⑴自然咳痰法:留取前刷牙,用清水漱口3次(或硼酸漱口),以除去口腔內(nèi)大部分雜菌,之后用力咳出呼吸道深部的痰液吐至無菌的廣口瓶內(nèi),蓋好蓋子?;颊咛狄狠^深不易咳出時,可在咳痰前捶背、協(xié)助排痰。采集痰量不能少于1ml。痰標本的采集與運送第15頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三⑵下呼吸道肺泡灌洗,支氣管刷洗,氣管抽吸:將抽吸物或灌洗液直接放入痰杯內(nèi),刷出物放入1ml無菌生理鹽水的痰杯中。⑶誘導咳痰:刷完牙齦和舌頭后讓患者用水漱口,借助霧化器使患者吸入約25ml3-5%的無菌鹽水誘導咳痰。痰標本的采集與運送第16頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三3、痰標本的運送標本采集后需盡快(<2h)送至微生物室,不及時運送可導致肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌由于不適應外界環(huán)境和自溶現(xiàn)象而死亡。如不能及時送達,應將標本置于4℃冰箱保存,以免雜菌生長,但不超過24h。痰標本的采集與運送第17頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三

鼻咽拭子標本采集及運送第18頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三鼻咽拭子標本采集采集標本時患者先用清水漱口,由檢查者將舌向外拉,使腭垂盡可能向外牽引,用無菌鼻咽拭子由口腔進入,越過舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)采集鼻咽紅腫處,取材后小心退出,立即放入無菌試管內(nèi),避免觸及舌、口腔黏膜和唾液,以防污染。鼻咽拭子標本采集第19頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三

化膿和創(chuàng)傷標本的采集與運送第20頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三采集方法⑴未破裂膿腫:在采集標本前,對患者病灶局部的皮膚或黏膜表面,用2.5%—3%碘酊消毒、75%酒精脫碘,用無菌注射器將膿腫內(nèi)容物吸出,然后切開膿腫、引流,采集的膿液(>1ml),并取部分膿腫壁置于厭氧運送裝置或接種于厭氧培養(yǎng)基中立刻送檢。注意不主張用拭子采集標本?;摵蛣?chuàng)傷標本的采集與運送第21頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三⑵開放性病灶和膿腫:首先用無菌生理鹽水清洗病灶表面的污染雜菌,用無菌棉拭子先蘸少許生理鹽水,以保持標本的濕度,然后采取膿液及病灶深部的分泌物(最好從膿腫底部或膿腫壁取樣)后置于無菌的容器中送檢。最好采集2個拭子,其中一個用于細菌培養(yǎng),另一個用于涂片革蘭染色?;摵蛣?chuàng)傷標本的采集與運送第22頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三⑶膿皰或水皰:用酒精消毒使之干燥,對于患兒用23號針頭挑破膿皰,拭子采集膿皰液和基底部標本。化膿和創(chuàng)傷標本的采集與運送第23頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三膿腫標本采集及運送過程中的注意事項⑴應盡可能在使用抗生素前采集標本,若患者在采集標本前已用抗生素,應在檢驗申請單上注明應用的抗生素,并在下次用抗生素前采集;⑵在采集標本時,應注意無菌操作,以防帶入與感染無關(guān)的皮膚定植菌;⑶采集標本時應注意標本的性狀、色澤及氣味,為分離鑒定致病菌提供依據(jù);⑷標本采集后應在室溫2h內(nèi)送檢,若不能及時送檢,可保存在4℃冰箱中,但不應超過24h。化膿和創(chuàng)傷標本的采集與運送第24頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三

尿液標本的采集與運送第25頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三1、尿液培養(yǎng)的送檢指征⑴有典型的尿路感染癥狀:如尿急、尿頻、尿痛⑵肉眼膿尿或血尿⑶尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細胞或亞硝酸鹽陽性⑷不明原因的發(fā)熱,無其它局部癥狀⑸留置導尿管的患者出現(xiàn)發(fā)熱⑹膀胱排空功能受損⑺尿道口有膿性分泌物⑻泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前尿液標本的采集與運送第26頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三2、尿標本采集方法:盡量取早晨第一次尿液⑴清潔中段尿采集法①女性:采集前先用肥皂水或0.1%高錳酸鉀溶液沖洗外陰部及尿道口,用滅菌紗布擦拭,用手指將陰唇分開排尿,留取中段尿送檢②男性:用肥皂水翻轉(zhuǎn)包皮沖洗,用0.1%新潔爾滅消毒尿道口,用滅菌紗布擦拭,取中段尿送檢尿液標本的采集與運送第27頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三⑵導尿法①直接導尿:將會陰局部清洗后,用導尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱,獲取膀胱尿液。但有可能將下尿道細菌引入膀胱,導致繼發(fā)感染,一般不提倡用。②留置導尿:通過專門的采樣端口采集,不能把導尿管與尿袋拔開后收集尿液。采樣端口用酒精消毒;必要時可先夾住導尿管但不能超過30分鐘;將注射器針頭插入采樣端口,抽吸出尿液。注意:不能從集尿袋的下端管口留取標本,集尿袋內(nèi)的尿液也不能用于培養(yǎng)。尿液標本的采集與運送第28頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三⑶膀胱穿刺采集法采用恥骨上膀胱穿刺取尿。這種方法是評估膀胱內(nèi)細菌感染的“金標準”方法。因有一定的痛苦,患者難以接受。尿液標本的采集與運送第29頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三3、尿液標本運送收集中段尿5—10ml,及時送檢室溫保存下不得超過2h,否則應置于4℃冷藏保存時間不得超過8h。尿液標本的采集與運送第30頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三女性生殖道標本采集第31頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三⑴陰道及宮頸分泌物采集⑵宮腔內(nèi)標本采集羊膜腔感染時可經(jīng)腹壁羊膜穿刺抽取羊水或經(jīng)子宮頸插管抽取羊水進行細菌培養(yǎng)。但經(jīng)子宮頸插管抽取羊水進行細菌培養(yǎng)易受陰道或子宮頸部位細菌污染,臨床應用價值有限。懷疑有急性宮腔內(nèi)感染時,原則上不采取宮腔分泌物,以免引起感染播散;必要時用滅菌導管抽取,導管外套一層保護膜,經(jīng)子宮頸插入宮腔后再刺穿保護膜抽取分泌物。女性生殖道標本采集第32頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三

穿刺液標本的采集及運送第33頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三1、標本采集由臨床醫(yī)生采集(無菌操作穿刺抽取標本或外科手術(shù)采集標本)膽汁采集分三種方法:⑴十二指腸引流法(以B膽汁—來自膽囊,做細菌培養(yǎng)意義較大)。⑵膽囊穿刺法⑶手術(shù)采取法。取標本約2ml裝入無菌密封容器送檢。其它穿刺液的采集:由臨床醫(yī)生采集標本5—10ml注入無菌密封容器內(nèi)送檢(為防止凝固,可先加入滅菌肝素),也可將標本直接加入血培養(yǎng)瓶中送檢。心包液、關(guān)節(jié)液、鞘膜積液采樣量為1—5ml。穿刺液標本的采集及運送第34頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三2、標本運送采集后應正確蓋好,防止泄露或容器外部留有殘留物。標本應在15min內(nèi)送檢。若不能及時送檢室溫保存不超過24h。穿刺液標本的采集及運送第35頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三糞便標本的采集與運送第36頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三1、采集指征:當腹瀉患者出現(xiàn)以下任何一種情況時建議采集糞便標本,進行細菌培養(yǎng):糞便涂片鏡檢白細胞>5/HP體溫>38.5℃重癥腹瀉血便或便中有膿液未經(jīng)抗菌藥物治療的持續(xù)性腹瀉病人來自腸道傳染疫區(qū)的患者糞便標本的采集與運送第37頁,共40頁,2023年,2月20日,星期三2、糞便標本的采集方法自然排便采集標本時,取有膿液、粘液、組織碎片部分的糞便1-3克(花生米大小)液體糞便取絮狀物,一般取1-3ml送檢。直腸拭子采集糞便標本:適用于排便困難患者或嬰幼兒;先用肥皂水清洗肛門周圍,用無菌鹽水潤濕棉拭子后插入肛門,成人約4-5cm,兒童約2-3cm,與直腸黏

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