基因工程菌苗

基因工程菌苗第1頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四

細菌一旦獲得耐藥性，存在與細菌染色體、質粒和轉座子中的耐藥基因就可通過轉化、轉導、接合和轉座等方式，將抗性基因傳播到其他敏感菌，使之成為抗藥菌株，給臨床傳染病的治療帶來困難。據(jù)WHO1996年報告，全球每年死亡約5190萬人，其中1/3約1730萬死于傳染病。第2頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四新病原體不斷出現(xiàn)與鑒定，新的疫苗研制也相繼開始。重要病原體全基因測序的開展和完成，及類似生物表型的不同菌屬間的同源序列和異源序列的發(fā)現(xiàn)，對抗感染研究來說，像進行了一場革命，不僅會促進病原體致病和發(fā)病機制的研究，也會開闊和調整菌苗研究的策略和思路。目前已完成500余種病毒的全基因測序。第3頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四完成的正在進行的將要進行的流感嗜血桿菌（Haemophilusinfluenzae）放線性放線菌（Actinobacillusactinomycetemcomitans）彎曲桿菌（Campylobacterjejuni）生殖道支原體（Mycoplasmagenitolium）枸巢曲霉桿菌（Aspergillusmidulans）流產(chǎn)布氏桿菌（Brucellaabortus）肺炎支原體（Mycoplasmapneumoniae）枯草桿菌（Bacillussubtilis）杜克雷嗜血桿菌（Haemophilusducreyi）幽門螺桿菌（Helicobacterpylori）沙眼衣原體（Chlamydiatrachomatio）鳥分枝桿菌（Mycobacteriumavium）伯氏疏螺旋體（Borreliaburgdorferi）糞腸球菌（Enterococcusfaecalis,E.faecium）多殺巴斯德菌（Pasteurellamultocida）人類重要病原菌全基因測序現(xiàn)狀

第4頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四E.coliK12軍團菌（Legionellapneumopbila）牙齦卟啉單胞菌（Porphyromonasgingvalis）肺炎球菌（Streptococcuspneumoniae）麻風分枝桿菌（Mycobacterunleprae）鼠傷寒沙門氏菌（SalmonellaserotypeTyphimurium）梅毒螺旋體（Treponemepallidun）淋病腦膜炎奈瑟氏球菌（Neisseriagonorrhoeae,N.meningitidis）布氏錐蟲（Trypanosomabrucei）

解脲原體（Ureoplasmaurealyticum）亞性瘧（plasmodiumfalciparum）痢疾桿菌（Shigella）綠膿桿菌（Pseudomonasaeruginosa）大型利什曼原蟲（Leishmaniamajor）金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）霍亂弧菌（Vibriocholerae）化膿鏈球菌（Streptococcuspyogenes）第5頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四第二節(jié)目前應用的菌苗及其存在問題

一、目前應用菌苗的類別

按菌苗所含的成份，菌苗可分為3類，即減毒活菌疫苗、滅活死菌疫苗、純化的多糖或蛋白成份疫苗。第6頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四1、減毒活菌疫苗如卡介苗（BCG），是巴斯德研究院A.Calmette和Guerin,C等（1921）將一株牛型強毒結核菌在甘油-膽汁-馬鈴薯培養(yǎng)基上傳230代后（13年），獲得的對動物不致病，但產(chǎn)生抗結核免疫反應的菌苗即BCG。對免疫嬰幼兒有保護效果。后來發(fā)現(xiàn)對成人的保護效果波動范圍很大，對其減毒機制始終不清。直至近年來完成結核分枝桿菌全基因測序后，與有毒牛型結核分枝桿菌全基因序列進行比較，方知BCG缺失了毒力相關基因?？傊瑢Π麅染壳斑€是用減毒的活菌苗。第7頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四2.滅活死菌疫苗通過加熱處理或福爾馬林、戊二醛、β-內酯等化學處理得到如霍亂死菌苗，百日咳死菌苗等。死菌苗的主要優(yōu)點是穩(wěn)定，缺點是需要多次免疫才能得到好的保護效果。滅活死菌苗須加佐劑以提高免疫效果。第8頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四3.亞單位或成分苗

①從細菌培養(yǎng)液中提取、用化學方法脫毒的類毒素苗，如破傷風類毒素（TT）、白喉類毒素（DT），免疫后誘導機體產(chǎn)生的抗血清能特異中和TT破傷風類毒素或DT白喉類毒素，其保護效果可達95%以上。由于毒素純化方法的改進，產(chǎn)品的副作用很??；

第9頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四②莢膜細菌純化的多糖菌苗，可誘導產(chǎn)生的抗體能保護機體抵抗入侵莢膜菌的感染。如嗜血性流感桿菌b(Hib)、傷寒桿菌Vi多糖等多糖苗，能誘導機體產(chǎn)生T細胞非依賴的抗體反應，其特點是誘導產(chǎn)生短期的IgM抗體，缺乏免疫記憶，對不到18個月幼兒的多糖苗免疫原性差，而沒有保護效果。因此多糖類的菌苗急需改進。第10頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四③目前，將多糖與載體蛋白共價連接，通過載體蛋白提供適當?shù)腡細胞表位，由T細胞協(xié)助B細胞產(chǎn)生多糖特異性抗體，使T細胞非依賴性抗原轉變?yōu)門細胞依賴抗原，這類菌苗稱為多糖-蛋白結合苗。如嗜血流感桿菌b(Hib)的結合苗已在幾個國家獲得證書，證明對不到18個月的兒童有很高的免疫原性，能誘導免疫記憶，免疫球蛋白的類型轉換及抗體親和力成熟，明顯減少Hib菌的入侵感染與發(fā)病。第11頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四目前可用于人群的菌苗

菌苗類型預防的疾病國內國外1卡介苗（BCG）活菌苗結核病i.di.d2布氏病菌苗（104M）活菌苗布氏菌病d.s—3鼠疫菌苗（EV）活菌苗鼠疫d.s—4炭疽菌苗（A16R,CTN-1,V770-NP-1）活芽胞苗炭疽d.s—

炭疽菌苗滅活菌苗炭疽s.c第12頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四菌苗類型預防的疾病國內國外5百日咳菌苗類毒素滅活菌苗百日咳炭疽i.m—

—

i.m6腦膜炎球菌苗（A、C群）多糖成分腦膜炎i.ms.c7腦膜炎球菌苗（A/C/Y/W-35群）多糖成分腦膜炎—

s.c8流腦A群多糖-破傷風蛋白結合菌苗多糖-蛋白結合苗流行性腦脊髓膜炎i.m—

9傷寒菌苗（Ty21a）傷寒菌苗（Ty21a）傷寒Vi多糖苗活菌苗滅活全菌苗多糖成分傷寒傷寒傷寒—

—

i.mp.os.ci.m10精制破傷風菌苗類毒素破傷風i.mi.m11精制白喉菌苗類毒素白喉i.m—

第13頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四菌苗類型預防的疾病國內國外12白-百-破三聯(lián)苗（DTP）類毒素白喉，百日咳i.m滅活全苗破傷風—

i.m13白-破-百三聯(lián)（DTaP）類毒素白喉，百日咳i.m白-破-百三聯(lián)苗滅活全苗破傷風—

i.m14白-破二聯(lián)苗（DT或Td）類毒素白喉，破傷風

i.mi.m15鉤端螺旋體菌苗外膜成苗鉤端螺旋體病s.c—

16霍亂弧菌（O139）滅活全菌苗霍亂s.cS,c/i.d17CVD103HgR基因工程活苗霍亂—

p.o18肺炎球菌（23型）多糖成分肺炎—

p.o第14頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四菌苗類型預防的疾病國內國外19嗜血流感桿菌B型（Hib）類毒素腦膜炎—i.m20

DTP-嗜血流感桿菌B型結合苗滅活的全菌苗白喉，百日咳，—i.m（DTP-Hib）細菌多糖-蛋白結合菌苗破傷風，腦膜炎—i.m21

福氏2a與宋內雙價痢疾菌苗（FSM2117）基因工程活苗痢疾p.o—F2a與宋內雙價痢疾菌苗（FS）基因工程活苗痢疾p.o

—22萊姆病菌苗（OspA）重組OspA萊姆病s.c注：i.d皮內，s.c皮下，d.s劃痕，i.m肌注，p.o口服

第15頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四（二）研制菌苗的新方法（Newmethodofproducebacteriavaccine）1、研制菌苗的新方法（newmethods）對細菌感染發(fā)病機制認識的深入及涉及許多病原體毒力決定簇如黏附素、侵襲素、莢膜多糖、脂多糖、毒素等編碼基因及其產(chǎn)物的結構與功能的分析與鑒定，是不斷設計和研制新型疫苗的重要基礎。針對不同的病原體致病特點和毒力決定簇的特點，發(fā)展和產(chǎn)生了不同的菌苗研制方法，得到不同類型的菌苗?，F(xiàn)將目前研制菌苗的新方法及可能的后選菌苗列于表5-4。第16頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四表6-4目前研制菌苗的新方法及可能的候選菌苗1

純化亞單位成份嗜血流感桿菌（莢膜多糖）（H.influenze）奈氏腦膜炎球菌（莢膜多糖）(N.meningitidia)百日咳菌血凝素（Hemagglutinin）2

合成肽

淋球菌（黏附菌毛）（N.gonorihoeae,Adhernce-pili）肺炎鏈球菌（Streptococcus）3核酸疫苗結核分枝桿菌（M.tuberculosis）產(chǎn)單核細胞李斯特菌（L.monocytogenes）沙眼衣原體（Chlamydiatrachomatio）伯氏疏螺旋體（Borreliaburgdorferi）第17頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四4構建突變株（化學、輻射、點突變或轉座子插入等）傷寒菌苗Ty21a(S.typhi,Ty21a)霍亂菌苗（V.Cholerae）CVD103HgRETEC苗5與CT-B，LT，TT，DT等化學結合

傷寒Vi抗原痢疾菌苗,嗜血流感桿菌苗6構建重組細菌載體

重組病毒載體HbsAg腸沙門氏菌載體宋內氏痢疾菌LPS痢疾菌載體痢疾多價菌苗耶爾森氏菌載體

BCG載體幽門螺桿菌溶酶素腺病毒載體霍亂菌載體第18頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四2.目前菌苗存在的問題（1）盡管疫苗免疫取得了巨大的成功，但小于5歲的嬰幼兒每年死于傳染病的數(shù)目仍然很高。如瘧疾幾種腹瀉病等均無有效疫苗，雖然卡介苗（BCG）使用幾十年了，甚至納入WHO的計劃免疫，但其效果波動很大0%-80%。因此急需安全有效的結核菌苗問世。第19頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四（2）與病毒相比,基因工程菌苗及細菌核酸苗報導明顯為少。至今國際上還沒有成功滿意的重組細菌苗提供人群使用。關于細菌毒素的分子及其編碼基因與調控機制都比較清楚，因此，有關毒素的基因工程菌苗的構建或載體構建等均無問題。但細菌外膜上的其它結構如黏附分子，侵襲蛋白，鞭毛及脂多糖等分子結構十分復雜，編碼基因多呈叢分布，如LPS的表達涉及近30個基因的級聯(lián)反應，操作起來尚有困難。因此還有毒力相關或保護相關基因的分離、克隆和表達等基因工程菌苗研制的前期工作要做。第20頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四理想菌苗的條件P192安全，無毒性遺傳性狀穩(wěn)定，無致癌性，無致畸變或致流產(chǎn)性。結構簡單清楚，可生物降解，有生物相容性，與組織抗原無免疫學交叉反應。對各年齡組人群均有長時間的免疫保護作用。多價，有更大的覆蓋面，最好一次性免疫。能口服，能有效誘導黏膜免疫。為大量人群應用，疫苗必須廉價。易于生產(chǎn)，儲存及服務，不需冷藏。第21頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四第三節(jié)重要細菌基因工程苗的研究進展P193

現(xiàn)有傳統(tǒng)菌苗對重要細菌感染性疾病存在的問題：①現(xiàn)有菌苗保護效果不好；②副反應大；③難以培養(yǎng)的細菌；④可誘發(fā)癌變，有嚴重后遺癥；⑤新出現(xiàn)的病原體或新變異病原菌。第22頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四一、霍亂菌苗P193霍亂是由革蘭氏陰性霍亂弧菌引起的烈性腸道傳染病。臨床表現(xiàn)輕重不一，輕者僅有輕度腹瀉；重者劇烈吐瀉大量米泔水樣排泄物，并引起嚴重脫水、肌肉痙攣，酸鹼失衡、周圍循環(huán)衰竭及急性腎功能衰竭。第23頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四一.分類：O1群霍亂弧菌：古典生物型和埃爾托生物型。不典型O1群霍亂弧菌非O1群霍亂弧菌：O139第24頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四根據(jù)菌體抗原成份可分三種血清型根據(jù)弧菌O抗原不同，分成多個血清群。第Ⅰ群有A、B、C三種主要抗原成分，A抗原為特異性抗原，與其他兩個抗原成分相結合而成為:稻葉型（原型，含AC）小川型(異型，含AB)彥島型(中間型，含ABC)。第25頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四第26頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四第27頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四第28頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四據(jù)菌體抗原霍亂弧菌可分為200個以上的血清型目前流行的霍亂為O1和O139兩種血清型。目前使用的霍亂疫苗是滅活全菌體或全菌與其毒素的結合物，對成人有效，但不能誘發(fā)兒童免疫反應。第29頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四1.BS/WC滅活菌苗由提取的或重組的霍亂毒素B亞單位（BS）及殺死的全菌細胞（WC）組成。2.CVD103-HgR減毒活菌苗在美國獲準，為一次劑量的霍亂活菌苗。它是由霍亂經(jīng)典型569B菌株構建而成的CVD103減毒株（CTA-B+）。并在其染色體溶血素基因nlyA位點插入汞抗性基因作為篩選標記。3.以沙門氏菌為載體表達霍亂弧菌O抗原的傷寒/霍亂菌苗。4.O139減毒菌苗候選株CVD112及Bengal-15

霍亂菌苗有四類：第30頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四另外，發(fā)現(xiàn)霍亂毒素（CT）是很強的黏膜免疫原，能有效刺激黏膜sIgA及血清IgG反應，及黏膜免疫記憶反應，對CT及CTB的免疫佐劑活性進行了大量的研究，對多種蛋白、多糖及病毒、細菌等的免疫佐劑效果得到肯定的認識。第31頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四第32頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四第33頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四第34頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四CT/CT-B佐劑應用的抗原

抗原（佐劑）途徑參考文獻蛋白質

破傷風類毒素（CT）p.o（Jacksonetal,1993）鏈球菌M蛋白（CT-B）i.m（BessenandTischetti,1988）鏈球菌

（CT-B）

S.Mutans抗原I/II（CT/CT-B）p.o（Czerkinskyetal,1989;WuandRusell,1993）S.Mutans蛋白質抗原（CT-B）

流感病毒溶血素（CT/CT-B）i.m(Takahashietal.,1990)呼吸道合胞病毒FG糖蛋白（CT/CT-B）p.o,i.m（Tomasietal,1994）S.mutansGtf.1：：phoA融合蛋白i.m（Walsh,1993）第35頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四多糖p.o(Tomasietal,1994)沙門氏菌多糖（CT-B）p.o（Orretal.,1994）P．a(chǎn)eruginosa多糖（CT）p.o（AbrahamandPobinson,1991）病毒

完整流感病毒（CT）p.o(ChenandStrober1990)仙臺病毒（CT）p.o,i.m（Nedrudetal.1987）Neasles病毒（CT-B）i.n(Mulleretal,1995)呼吸道合胞病毒（RSV）i.n(Reumanetal,1991)細菌/原生動物

幽門螺桿菌（CT）p.o(CzinnandNedrud,1991)弓形體（CT）p.o（Bourguinetal.,1991）阿米巴原蟲多肽-CT-B融合蛋白p.o(Zhangetal,1995b)第36頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四二、痢疾菌苗痢疾是我國常見和多發(fā)傳染病，其發(fā)病率始終居24種法定傳染病的前二位。主要病原體為痢疾桿菌，其致病特點是定居侵入結腸黏膜上皮細胞，且能迅速溶解吞噬泡膜進入胞漿.臨床表現(xiàn)為發(fā)燒，膿血便，腹瀉，里急后重，甚至引起神經(jīng)癥狀和血尿綜合癥。第37頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四痢疾菌共有4群：A志賀氏痢疾菌（Shigelladysenteriae），B福氏痢疾菌（S.flexneri），C鮑氏痢疾菌（S.bordii）和D宋內氏痢疾菌（S.sonnei）。在我國及其他發(fā)展中國家主要流行型是福氏痢疾和宋內氏痢疾。按其菌膜表面LPS-O抗原分為44個血清型。第38頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四1.死菌苗五、六十年代大量動物及人體實驗證明滅活的痢疾全菌非口服途徑，雖可誘導機體產(chǎn)生高的血清抗體，但沒有保護效果；用提取的宋氏痢疾菌的核糖體，皮下免疫途徑，在豚鼠和猴中證實可提供特異保護，證明LPS-O多糖是保護性抗原；Robbins(1992)將痢疾菌LPS與不同蛋白載體（TT，DT）交聯(lián)進行非口服途徑免疫能誘導豚鼠產(chǎn)生高的血清抗體反應，豚鼠眼模型證明有一定保護作用。宋內氏LPS-O-蛋白（TT，DT）有保護作用，Robbins（1996）將多糖-蛋白結合苗用于越南士兵，報告宋氏多糖-蛋白結合苗保護效果達70%。第39頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四2.活菌苗采取了多種方法進行痢疾菌野生毒株的減毒研究。Meitert等（1984）在膽鹽平皿連續(xù)傳代32次獲得S.f2a減毒株IstratiT32；80年代初中國近一萬人現(xiàn)場觀察，證實T32菌苗安全，有保護活性，效果與免疫次數(shù)和劑量有關。

第40頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四80年代中國國內以T32為受體株開始致力于構建雙價痢疾菌苗株的研究。牟兆欽等，1989年將一編碼宋內氏菌LPS-O抗原的大質粒轉移至T32菌中獲得福氏2a宋內氏雙價痢疾菌苗株FS-18，F(xiàn)SM2117；宋樹珍等構建了FS痢疾雙價菌苗株，其中FSM2117識別福氏2a和識別宋內氏痢疾苗LPS-O抗原；林紀勝(1999)構建了S.flexenri2a和S.dysenteriaI雙價痢疾菌株，有雙價免疫原性，現(xiàn)FSM2117與FS兩株痢疾雙價菌苗均已獲國家新生物制品證書和試生產(chǎn)文號。

３.基因工程雙價活菌苗第41頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四90年代國內外開展了痢疾侵襲活菌苗的研究。主要針對痢疾菌毒力相關基因的插入失活或缺失的方法，構建減毒突變株，目的是保存其入侵能力，限制其無限繁殖能力。對其免疫原性和保護效果進行了大量實驗室研究。國外工作主要集中在福氏2a，福氏5型或Y型。構建出福氏2a-宋內氏雙價侵襲的菌苗株，目的是降低目前非侵襲雙價苗的免疫劑量，提高免疫原性。

痢疾桿菌III型分泌系統(tǒng)將不同侵襲蛋白分泌和導入宿主細胞的調節(jié)分子與效應分子的鑒定，可能會找到構建痢疾基因工程菌苗新的靶分子和靶基因。第42頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四三、產(chǎn)毒性大腸桿菌苗腸毒素大腸桿菌（ETEC）是嬰幼兒和旅游者腹瀉的主要病原菌。全球年病例為2.1億次，死亡病例達38萬，多為5歲以下的兒童。其致病特征是分泌ST和LT毒素及菌膜表面存在致病相關的菌毛抗原CFAs。正在采用減毒痢疾菌為載體進行LT或菌毛抗原的表達，進行多價菌苗研制的前期工作，或用重組的卡介苗為載體進行LT-B的表達研究。國內早年構建表達K88、K99及LT的幼畜工程菌苗已投入生產(chǎn)。（封套抗原Ｋ、脂多糖毒素ＬＴ）第43頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四四、腸出血性大腸桿菌苗（EHEC苗）大腸桿菌O157：H7是腸出血性大腸桿菌的主要病原菌，首次鑒定于1982年。1996年日本大規(guī)模爆發(fā)EHECO157出血性腸炎以來，引起國際上的極大關注。致病特點通過特殊的黏附分子（intimin）黏附靶器官，產(chǎn)生類志賀毒素和腸溶血素（hly）等，出血性腹瀉，溶血性尿毒綜合癥，血栓形成性血小板減少性紫癜。

第44頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四當前研制的菌苗O157多糖綠膿桿菌外毒素蛋白的結合苗（O157LPS-rEPA），已進行I期臨床觀察，認為安全，有免疫原性。重組的Stx的減毒活菌苗，重組Stx亞單位苗及鈷照射的全菌死菌苗正在進行動物實驗觀察。第45頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四五、傷寒桿菌P195傷寒桿菌能入侵腸黏膜上皮細胞，在吞噬細胞酸性吞噬泡內存活，經(jīng)淋巴系統(tǒng)進入血流引起菌血癥，近而侵犯肝，脾，腎等多種臟器與器官，并大量繁殖而再次引起嚴重菌血癥，臨床表現(xiàn)為高熱，胃腸炎，敗血癥等。世界傷寒桿菌感染病例約300萬，死亡人數(shù)50萬。滅活死菌苗已有70余年的歷史，由于副反應較大的問題促進了活苗的研制。第46頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四①口服Ty21a減毒活菌苗是Germamier經(jīng)NTG誘導后，篩選得到傷寒VigalE減毒株。它缺乏UDP-4-半乳糖異構酶而不能正常合成胞壁脂多糖，在體內外有半乳糖供給情況下可正常合成細胞壁。②注射用傷寒Vi多糖苗表面抗原Vi是位于菌膜LPS外的莢膜多糖抗原，由Ｎ-乙酰-氨基糖醛酸高度聚合而成，可阻止外膜與補體的結合，對菌的入侵也有一定作用。目前正進行Vi多糖與蛋白交聯(lián)的結合苗的研制。第47頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四六、結核菌苗P196據(jù)WHO估計，全球每年增加結核病人達800萬，年死亡病例為300萬。全球有1/3的人（即17億）曾感染過結核，其中90%-95%的人感染初期并無癥狀，此時雖然機體的免疫反應控制了初始的感染，但并未完全排除病原體。第48頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四最近的研究進展證明T細胞不僅只分泌TH1類的細胞因子激活感染的宿主細胞殺傷病原體，而且通過CTL溶解感染靶細胞和胞內病原體，CD8+T細胞在直接殺傷胞內結核桿菌有其特殊作用。結核桿菌是專性需氧胞內致病菌，由于血清各種檢測方法交叉反應嚴重，至今不甚清楚它的抗原決定簇的定位及數(shù)目，其毒力機制不清。第49頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四卡介苗（BCG）是預防結核病的唯一活菌苗，經(jīng)大量資料的統(tǒng)計指出BCG的效果波動很大（0%-80%）。以及在艾滋病人和HIV攜帶者接種BCG后發(fā)生全身性感染，促使人們研制新一代結核菌苗。顯然核酸免疫是結核菌苗的重要研究方向。

第50頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四卡介苗（ＢＣＧ）由于其廣泛應用的安全性和免疫佐劑作用，因而以ＢＣＧ為載體的重組疫苗研究日益被科學家們重視。

卡介苗可長期在體內存活，其增殖可達幾個月，生長緩慢可誘發(fā)強的，持續(xù)的免疫應答，具有佐劑活性，可誘發(fā)TH1型免疫反應。第51頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四七、嗜血流感桿菌苗（Hib）P197

嗜血流感桿菌（Hib）為G-有莢膜短小桿菌，其莢膜多糖有特異型免疫原性，其中b型毒力最強，主要引起化膿性感染如急性肺炎、腦膜炎、敗血癥等，常在流感、麻疹、百日咳、肺結核等之后合并感染。第52頁，共60頁，2023年，2月20日，星期四

Hib莢膜多糖（磷酸聚核糖基核糖醇）（PRP）是Hib多糖菌苗的有效成分，將PRP與載體蛋白如白喉（DT）、破傷風類毒素（TT）腦膜炎球菌外膜蛋白（OMP）等共價交聯(lián)成Hib莢膜多糖-蛋白結合苗。證明Hib-蛋白結合苗對嬰幼兒使用安全，有免疫原