中藥中各類化學(xué)成分分離技術(shù)

第四章常規(guī)分離技術(shù)

第一頁(yè)，共76頁(yè)。用各種方法提取中藥所得的提取液是包含諸多成分的混合物，要想得到所需成份或單體化合物尚需經(jīng)過(guò)反復(fù)的分離精制和純化處理。但提取液一般體積較大，所含成分濃度較低，因此需對(duì)提取液進(jìn)行濃縮，提高濃度，以利于分離精制。第二頁(yè)，共76頁(yè)。

濃縮可通過(guò)蒸發(fā)或蒸餾來(lái)完成。常壓蒸餾減壓蒸餾具體的方法薄膜蒸發(fā)反滲透法超濾法第三頁(yè)，共76頁(yè)。濃縮與蒸餾皆是在沸騰狀態(tài)下，經(jīng)傳熱過(guò)程，將揮發(fā)性大小不同的物質(zhì)進(jìn)行分離的一種工藝操作。第四頁(yè)，共76頁(yè)。1、一般蒸發(fā)法：水提液，加熱蒸發(fā)水分。2、常壓蒸餾法：適用于溶劑沸點(diǎn)低、有效成分遇熱不易被破壞的提取液的濃縮。如氯仿、乙醚、石油醚等。操作時(shí)禁止用明火或電爐。濃縮方法與設(shè)備第五頁(yè)，共76頁(yè)。

3、減壓蒸餾法：利用溶劑的沸點(diǎn)與壓力的正比關(guān)系，即當(dāng)系統(tǒng)壓力降低，溶劑的沸點(diǎn)下降。適用于溶劑沸點(diǎn)高、有效成分遇熱易被壞的提取液的濃縮。一般當(dāng)溶劑沸點(diǎn)超過(guò)70°C，有條件的情況就因采用減壓蒸餾濃縮。見(jiàn)書(shū)圖4－1第六頁(yè)，共76頁(yè)。第七頁(yè)，共76頁(yè)。減壓蒸餾法操作時(shí)注意事項(xiàng)：（1）在真空泵與蒸發(fā)裝置間要有安全瓶以防倒吸。若為油泵，還需加干燥裝置和吸收瓶，以防揮發(fā)性成分與腐蝕性氣體侵入油泵。（2）蒸餾結(jié)束，要按順序拆卸。即：撤熱源、關(guān)壓力計(jì)活塞、開(kāi)安全瓶活塞、關(guān)真空泵（3）蒸餾有泡沫的成分，需要加裝防泡球第八頁(yè)，共76頁(yè)。第九頁(yè)，共76頁(yè)。第十頁(yè)，共76頁(yè)。第十一頁(yè)，共76頁(yè)。真空濃縮罐第十二頁(yè)，共76頁(yè)。常規(guī)分離技術(shù)

兩相溶劑萃取技術(shù)沉淀法結(jié)晶與重結(jié)晶法其他分離技術(shù)：鹽析法、透析法、分餾法第十三頁(yè)，共76頁(yè)。

第一節(jié)系統(tǒng)溶劑分離技術(shù)第十四頁(yè)，共76頁(yè)。一、原理：依據(jù)“相似相溶”的原理，按極性由小到大的順序依次提取分離總提液中各種溶解度有差異的成分

石油醚、己烷→揮發(fā)油、脂溶性色素、蠟乙醚、氯仿→生物堿、苷元

乙酸乙酯→黃酮苷

正丁醇→皂苷、蒽醌苷

甲醇、乙醇→苷、糖類、生物堿鹽第十五頁(yè)，共76頁(yè)。系統(tǒng)溶劑分離法的操作總提取物濃縮，拌入吸附劑苯石油醚乙醚氯仿乙酸乙酯正丁醇第十六頁(yè)，共76頁(yè)。常用的溶劑與用該溶劑提取出的中藥化學(xué)成分的對(duì)應(yīng)關(guān)系見(jiàn)表：選用的溶劑提取出的中藥成分石油醚、己烷揮發(fā)油、脂肪油、臘、脂溶性色素、甾醇類、某些苷元（強(qiáng)親脂性）乙醚、氯仿極性生物堿、樹(shù)脂、醛、酮、醇、酯、苷元、有機(jī)酸、某些苷類氯仿：乙醚由某些苷類，如強(qiáng)心苷乙酸乙酯小某些苷類，如黃酮苷正丁醇到某些苷類，如皂苷，黃酮苷丙酮、乙醇大極性很大的苷、糖類、氨基酸、某些生物堿鹽水蛋白質(zhì)、黏液質(zhì)、果膠、糖類、無(wú)機(jī)鹽（強(qiáng)親水性）第十七頁(yè)，共76頁(yè)。二、適用范圍

此法是早年研究天然藥物有效成分的一種最重要的方法，主要用于分離提純含有極性不同的各種化學(xué)成分的中藥提取液。目前仍是最常用的方法，三、優(yōu)缺點(diǎn)此法操作繁瑣，對(duì)化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，容易引起分解、異構(gòu)化的天然產(chǎn)物應(yīng)特別注意。在微量成分、結(jié)構(gòu)性質(zhì)相似成分的分離純化上受到很大限制。第十八頁(yè)，共76頁(yè)。

第二節(jié)兩相溶劑萃取法

第十九頁(yè)，共76頁(yè)。一、基本原理定義：簡(jiǎn)稱萃取法，往提取液中加入一種與其不溶的溶劑配成兩相溶劑系統(tǒng)，利用混合物中各種成分分配系數(shù)k的差異而達(dá)到分離方法。萃取時(shí)如果各成分在兩相溶劑中分配系數(shù)相差越大，則分離效率越高。第二十頁(yè)，共76頁(yè)。分配系數(shù)（K）當(dāng)物質(zhì)在兩相互不相溶的溶劑中（如水和丁醇，氯仿），于分液漏斗中充分振搖，放置后，即可分為兩層，此時(shí)，溶質(zhì)將分別溶于兩層溶劑中，并在一定溫度，壓力下為一常數(shù)，此時(shí)，溶質(zhì)在兩層溶劑中的濃度比值為一常數(shù)（K），用公式表示如下：第二十一頁(yè)，共76頁(yè)。K=CU/CL

CU：上層濃度，CL：下層濃度。若有兩種成份時(shí)（A，B），則A，B各有其分配系數(shù)KA，KB，則兩者差別越大，分離效果越好。如，KA＝10說(shuō)明振搖一次平衡后，A則有90％以上溶于上層溶液中。而KB＝0.l時(shí)，振搖一次平衡后，B則有90％以上溶于下層中，過(guò)樣A和B兩成份就有較大程度分離，連續(xù)分離萃取幾次，就可能達(dá)到A，B的全部分離。若有多種成份時(shí)，分離情況將更復(fù)雜。第二十二頁(yè)，共76頁(yè)。兩成份的分配系數(shù)差別越大，兩者就越容易分離。因此兩成份的分配系數(shù)比就可以反應(yīng)其分離的難易程度，過(guò)個(gè)比值稱為分離因子（β），用公式表示為：β＝KA/KB一般說(shuō)；β≥100一次萃取就可以實(shí)現(xiàn)基本分離，100＞β＞10則需萃取10—12次，β＜2需連續(xù)萃取100次以上，才能基本分離，β＝1時(shí)，則KA=KB兩者性質(zhì)相近，無(wú)法分離。第二十三頁(yè)，共76頁(yè)。兩相溶劑萃取法的操作簡(jiǎn)單萃取法逆流連續(xù)萃取法逆流分溶法液滴逆流分配法第二十四頁(yè)，共76頁(yè)。1.簡(jiǎn)單萃取法：儀器：分液漏斗操作：旋塞涂潤(rùn)滑劑→裝入溶劑和待萃取物（1/3）蓋塞子，倒轉(zhuǎn)分液漏斗，開(kāi)啟旋塞排氣后關(guān)緊→振搖，注意排氣（重復(fù)數(shù)次）→于鐵架臺(tái)靜置分層→分取萃取液注意事項(xiàng)：1.水提取液的密度：1.1～1.22.萃取次數(shù)：3～43.萃取溶劑用量：1/2～1/3（第一次）；1/4～1/64.避免產(chǎn)生乳化現(xiàn)象第二十五頁(yè)，共76頁(yè)。第二十六頁(yè)，共76頁(yè)。第二十七頁(yè)，共76頁(yè)。萃取劑的選擇有機(jī)溶劑作萃取劑。如從水提液中萃取親脂性性成分，一般選用苯、氯仿、或乙醚等有機(jī)溶劑；如從水提液中萃取中等極性成分，一般選用乙酸乙酯、丁醇等弱親脂性有機(jī)溶劑或在氯仿、乙醚中加入適量乙醇以增大其親水性。用pH梯度萃取法的萃取劑用pH梯度萃取法的萃取劑分離某有機(jī)溶劑中的黃酮類化合物，可依次選用pH由高到低的堿液如5%碳酸氫鈉、5%碳酸鈉、0.2%氫氧化鈉、4%氫氧化鈉的水溶液做萃取劑進(jìn)行萃取，使成鹽而達(dá)到分離目的

第二十八頁(yè)，共76頁(yè)。適用范圍

適用于分配系數(shù)差異較大的成分的分離，一般萃取3~4次即可。若親水性成分不易轉(zhuǎn)入有機(jī)溶劑層，需增加萃取次數(shù)或更換萃取溶劑。第二十九頁(yè)，共76頁(yè)。乳化現(xiàn)象的處理：①長(zhǎng)時(shí)間放置②金屬絲攪動(dòng)③乳化層抽濾④乳化層加熱或冷凍⑤加新溶劑萃取⑥加電解質(zhì)⑦加醇數(shù)滴⑧離心第三十頁(yè)，共76頁(yè)。2.逆流連續(xù)萃取法

定義：是利用兩種互不相溶的溶劑相對(duì)密度不同，以相對(duì)密度小的溶劑相作為移動(dòng)相（或分散相），相對(duì)密度大的溶劑相作為固定相（連續(xù)相），使移動(dòng)相逆流連續(xù)穿過(guò)固定相，借以交換溶質(zhì)而達(dá)到分離的一種連續(xù)萃取技術(shù)。。

儀器裝置：儀器是由一根或數(shù)根萃取管組成（萃取管數(shù)目可根據(jù)分配效率的需要來(lái)決定），管內(nèi)用小瓷杯或小的不銹鋼絲圈填充，以增加液-液萃取時(shí)的接觸面積。

第三十一頁(yè)，共76頁(yè)。操作技術(shù)將相對(duì)密度小的溶劑相作為移動(dòng)相置高位儲(chǔ)存器中，而相對(duì)密度大者則作為固定相置萃取管內(nèi)。樣品用薄層層析、紙層析及顯色反應(yīng)或沉淀反應(yīng)進(jìn)行檢查。

優(yōu)缺點(diǎn)逆流連續(xù)萃取法操作簡(jiǎn)便，萃取較完全，適合各種密度的溶劑的萃取。此法克服了簡(jiǎn)單萃取法操作的麻煩，避免了乳化現(xiàn)象的發(fā)生。第三十二頁(yè)，共76頁(yè)。例子：氯仿從川楝樹(shù)皮的水浸液中萃取川楝素第三十三頁(yè)，共76頁(yè)。3.逆流分溶法（CCD）是一種多次連續(xù)的液液萃取分離過(guò)程。將混合物經(jīng)儀器操作，將兩相溶劑系統(tǒng)進(jìn)行反復(fù)多次的振搖、靜置、分離和轉(zhuǎn)移等萃取步驟，使分配系數(shù)不同的成分達(dá)到分離的一種新型分離方法。CCD又稱為逆流分配法、逆流分布法或反流分布法，如圖：第三十四頁(yè)，共76頁(yè)。

第一次溶劑如入萃取后，進(jìn)入第二號(hào)......第二號(hào)溶劑萃取一號(hào)后，濃度較低，再進(jìn)入第二號(hào)中.......提高濃度，最后達(dá)到分離。（強(qiáng)心苷提取）第三十五頁(yè)，共76頁(yè)。適用范圍

CCD法具有很強(qiáng)的分離混合物各組分的能力中等極性、分離因子較小及不穩(wěn)定的物質(zhì)高分子化合物如多肽、蛋白質(zhì)等（色譜法不能分離的）。不適合分離微量成分、試樣極性過(guò)大或過(guò)小、或分配系數(shù)受溫度或濃度影響過(guò)大及易于產(chǎn)生乳化現(xiàn)象的溶劑系統(tǒng)。第三十六頁(yè)，共76頁(yè)。優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：高效率，操作條件溫和、試樣易回收等優(yōu)點(diǎn)。對(duì)于非常相似性質(zhì)的混合物分離效果好。缺點(diǎn)：操作繁瑣，溶劑消耗大，萃取管易因機(jī)械振蕩而損壞，微量成分易損失，反復(fù)多次振動(dòng)溶劑系統(tǒng)易產(chǎn)生乳化現(xiàn)象。第三十七頁(yè)，共76頁(yè)。4.液滴逆流分配法

液滴逆流分配法（dropletcountercurrentchromatography,DCCC）又稱液滴逆流色譜法，是在逆流分溶法的基礎(chǔ)上改進(jìn)的兩相溶劑萃取法。其原理類似于逆流分溶法，利用混合物中各成分在兩液相間的分配系數(shù)的差異，讓移動(dòng)相以液滴的形式通過(guò)固定相的液柱，實(shí)現(xiàn)逆流分配，從而達(dá)到分離純化的目的。第三十八頁(yè)，共76頁(yè)。儀器裝置該裝置有3個(gè)部分組成。輸液部分。包括微型泵、移動(dòng)相溶劑儲(chǔ)槽和試樣液注射器。萃取部分。由300～500根內(nèi)徑約2mm、長(zhǎng)度為20～40cm的萃取管連接而成。收集檢出部分。包括檢出器及分步自動(dòng)收集儀。第三十九頁(yè)，共76頁(yè)。第四十頁(yè)，共76頁(yè)。適用范圍

目前DCCC法廣泛用于皂苷、生物堿、酸性成分、蛋白質(zhì)、糖類等天然產(chǎn)物的分離和精制，特別是用于皂苷類的分離，并取得良好效果。優(yōu)缺點(diǎn)

使用溶劑較少，可定量回收試樣，因不需振蕩，故不會(huì)產(chǎn)生乳化，分離效果較CCD法好（移動(dòng)相形成液滴，與萃取管固定相接觸摩擦）。可用氮?dú)怛?qū)動(dòng)避免物質(zhì)氧化例子：柴胡皂甙、原小檗堿型季銨堿的分離第四十一頁(yè)，共76頁(yè)。（1）簡(jiǎn)單萃取法適用于分配系數(shù)差異較大成分分離。（2）逆流連續(xù)萃取適用于各種密度的溶劑萃取。避免乳化。（3）CCD法適用于分離中等極性、分離因子較小及不穩(wěn)定的物質(zhì)。操作繁瑣，溶劑消耗大，易乳化。（4）DCCC法適用于分離純化多種天然藥物化學(xué)成分。溶劑使用少，可定量回收。（5）因選擇β值大的溶劑系統(tǒng)；亦可根據(jù)β選擇適當(dāng)萃取方法。小結(jié)第四十二頁(yè)，共76頁(yè)。

第三節(jié)沉淀法

第四十三頁(yè)，共76頁(yè)。沉淀法：是在天然藥物的提取液中加入某些試劑，與其中成分發(fā)生沉淀反應(yīng)生成沉淀或降低其溶解性而從溶液中析出，從而獲得有效成分或去除雜質(zhì)的方法。條件：采用沉淀法分離化合物，若生成沉淀的是有效成分，則要求沉淀反應(yīng)必須是可逆的；若沉淀物為雜質(zhì)，則沉淀反應(yīng)可以是不可逆的。第四十四頁(yè)，共76頁(yè)。沉淀法操作步驟：

酸堿沉淀法試劑沉淀法鉛鹽沉淀法第四十五頁(yè)，共76頁(yè)。一、酸堿沉淀法原理此法是利用某些成分在酸（或堿）中生成沉淀的性質(zhì)達(dá)到分離的目的。這種沉淀反應(yīng)是可逆的，可使有效成分和雜質(zhì)分離。適用范圍此法適用于分離提純酸性、堿性或兩性有機(jī)化合物，如黃酮、蒽醌類酚酸性成分、一些生物堿、蛋白質(zhì)等。第四十六頁(yè)，共76頁(yè)。二、試劑沉淀法原理此法利用一些成分能與某些試劑產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)或利用某些成分在不同溶劑中溶解度的差異，通過(guò)加入特定試劑或溶劑，使生成沉淀，與其他成分分離。使用范圍與試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)而分離加入試劑后改變混合液的極性、減小某些成分的溶解度而沉淀分離第四十七頁(yè)，共76頁(yè)。與試劑發(fā)生沉淀反應(yīng)而分離生物堿沉淀試劑雷氏銨鹽和水溶性季氨堿膽甾醇與甾體皂苷加入試劑后改變混合液的極性、減小某些成分的溶解度而沉淀分離水提醇沉法醇提水沉法醇提醚沉法或醇提丙酮沉淀法：分離皂苷第四十八頁(yè)，共76頁(yè)。試劑沉淀法水提醇沉的操作要點(diǎn)如下：藥液濃縮時(shí)最好采用減壓、低溫，濃縮前后視情況調(diào)pH值，以保留更多的有效成分。以分次方式或梯度遞增方式加入乙醇，逐步提高乙醇濃度，當(dāng)藥液中乙醇濃度達(dá)75%以上時(shí)，可是蛋白質(zhì)、淀粉、黏液質(zhì)、油脂、樹(shù)脂、樹(shù)膠等雜質(zhì)沉淀而出去。加乙醇后，將容器口蓋嚴(yán)，防乙醇揮發(fā)。自然降至室溫，在移至冷庫(kù)中靜置12~24h。

第四十九頁(yè)，共76頁(yè)。試劑沉淀法醇提水沉法的操作要點(diǎn)：先用乙醇提取，樹(shù)脂、油脂、色素等雜質(zhì)可溶于乙醇而被提取出來(lái)。醇提取液回收乙醇。加水?dāng)嚢?，靜置冷藏一定時(shí)間。待完全沉淀后濾過(guò)去除。第五十頁(yè)，共76頁(yè)。三、鉛鹽沉淀法原理此法是利用中性醋酸鉛和堿式醋酸鉛在水和稀醇溶液中能與許多天然藥物化學(xué)成分生成難溶性的鉛鹽或鉛絡(luò)合物沉淀的性質(zhì)，使有效成分和雜質(zhì)分離。此法既可使雜質(zhì)生成鉛鹽沉淀除去，又可以使有效成分生成鉛鹽沉淀。第五十一頁(yè)，共76頁(yè)。鉛鹽沉淀法適用范圍中性醋酸鹽(Pb(Ac)2)可用于沉淀天然藥物成分中的有機(jī)酸、蛋白質(zhì)、氨基酸、黏液質(zhì)、鞣質(zhì)、樹(shù)脂、酸性皂苷、部分黃酮苷、蒽醌苷、香豆素苷和某些色素等具有羧基、鄰二酚羥基的酸性或酚性物質(zhì)。堿式醋酸鉛(Pb(OH)Ac)沉淀范圍更廣，除上述物質(zhì)外，還能沉淀某些大分子中性成分如中性皂苷、糖類，某些異黃酮及其苷，某些堿性較弱的生物堿等。第五十二頁(yè)，共76頁(yè)。操作過(guò)程：

第一步：醋酸鉛沉淀的形成中藥的水或醇提液加入醋酸鉛溶液（不再產(chǎn)生沉淀為止），濾出沉淀，再于濾液中加堿式醋酸鉛飽和溶液至不再發(fā)生沉淀為止。得到：醋酸鉛沉淀物、堿式醋酸鉛沉淀物、母液。

第五十三頁(yè)，共76頁(yè)。第二步：脫鉛處理

a.硫化氫法將鉛鹽沉淀懸浮于水或稀醇中，通入硫化氫氣體，使其分解并使鉛轉(zhuǎn)為不溶性的硫化鉛沉淀（脫鉛），中藥成分留在母液中，硫化氫法脫鉛徹底，但脫鉛液需通入空氣或二氧化碳以驅(qū)凈剩余的硫化氫。b.中性硫酸鹽法常加入硫酸鈉等中性硫酸鹽，因生成的硫酸鉛在水中有一定的溶解度，故脫鉛不徹底。

c.陽(yáng)離子交換樹(shù)脂脫鉛快而徹底，但溶液中某些陽(yáng)離子也可能被交換到樹(shù)脂上，且脫鉛后的樹(shù)脂再生困難。第五十四頁(yè)，共76頁(yè)。1.請(qǐng)畫(huà)出從中藥中提取有效成分的回流裝置圖，以及得到提取溶劑后濃縮成體積較小的溶液的裝置圖。2.何謂超聲提取法？闡述超聲提取法的原理，應(yīng)用范圍？3.闡述超臨界流體優(yōu)缺點(diǎn)？說(shuō)明超臨界流體由氣態(tài)變?yōu)橐簯B(tài)的條件？4.畫(huà)出索氏提取器提取中藥藥效成分的裝置圖？并在圖中指明裝置中各儀器部位的名稱。說(shuō)明此法的應(yīng)用范圍。第五十五頁(yè)，共76頁(yè)。5.簡(jiǎn)述從中藥中提取有效成分的方法。6.常用溶劑的親水性或親脂性的強(qiáng)弱順序如何？那些與水混溶？那些與水不相混溶？7.何謂“相似相溶原理”？溶劑提取法中溶劑的選擇主要從那幾方面考慮？第五十六頁(yè)，共76頁(yè)。第四節(jié)結(jié)晶與重結(jié)晶法

第五十七頁(yè)，共76頁(yè)。一、基本原理利用溶劑對(duì)有效成分與雜質(zhì)在冷、熱情況下溶解度的差異而分離。第五十八頁(yè)，共76頁(yè)。結(jié)晶與重結(jié)晶法：利用混合物各成分不同溫度下溶解度的差別，使所需成分以結(jié)晶狀態(tài)析出，達(dá)到分離精制目的的分離方法。結(jié)晶：不是結(jié)晶狀態(tài)的固體物質(zhì)處理成結(jié)晶狀態(tài)的操作稱為～。重結(jié)晶：用適當(dāng)溶劑處理粗結(jié)晶，使不純的結(jié)晶進(jìn)一步精制成較純的結(jié)晶的過(guò)程稱為～。第五十九頁(yè)，共76頁(yè)。結(jié)晶的關(guān)鍵：合適的溶劑理想溶劑具備的條件：（1）與被結(jié)晶成分不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。（2）要對(duì)被結(jié)晶成分熱時(shí)溶解度大、冷時(shí)溶解度小。（3）對(duì)雜質(zhì)或冷熱時(shí)都溶解，或冷熱時(shí)都不溶解。（4）沸點(diǎn)不宜太低或太高。二、結(jié)晶溶劑的選擇第六十頁(yè)，共76頁(yè)。常用溶劑：水、冰乙酸、甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙酯等?；旌先軇翰荒芤环N選擇合適溶劑時(shí)，通常選用兩種或兩種以上溶劑組成混合溶劑。如：乙醇－水、丙酮－水、吡啶－水等

重結(jié)晶選用的溶劑相應(yīng)有所不同第六十一頁(yè)，共76頁(yè)。三、結(jié)晶分離技術(shù)（一）操作過(guò)程1.結(jié)晶溶液的制備：制成近飽和溶液2.趁熱過(guò)濾，除去不溶性雜質(zhì)3.濾液放冷，析出結(jié)晶4.抽濾，從母液中分離結(jié)晶5.重結(jié)晶6.結(jié)晶的干燥第六十二頁(yè)，共76頁(yè)。2.操作注意1.選擇合適溶劑（溶解度、沸點(diǎn)）2.結(jié)晶條件：溶液濃度、粘度、溫度、時(shí)間濃度過(guò)大，雜質(zhì)濃度和溶液粘度也相應(yīng)增大，會(huì)阻礙結(jié)晶的析出。降溫的速度要慢，使結(jié)晶慢慢形成，速度過(guò)快，形成的結(jié)晶顆粒小或成無(wú)定形粉末。第六十三頁(yè)，共76頁(yè)。3.促進(jìn)結(jié)晶的方法：1.可用玻棒磨擦器壁，或加入晶種，揮去部分溶劑的方法促進(jìn)析晶。2.采用混合溶劑的方法結(jié)晶。3.制備結(jié)晶衍生物。如生物堿制成鹽，羰基化合物制成乙?；衔?，內(nèi)酯開(kāi)環(huán)成鹽等。第六十四頁(yè)，共76頁(yè)。4.結(jié)晶純度的判斷結(jié)晶外觀的色澤是否均勻、晶形一致程度是否具有一定的熔點(diǎn)和較小的熔距薄層色譜或紙色譜技術(shù)，經(jīng)數(shù)種不同的展開(kāi)系統(tǒng)展開(kāi)是否均能得到單一近圓形的斑點(diǎn)來(lái)判斷結(jié)晶的純度。必要時(shí)，可制備衍生物，采用高效薄層色譜、氣相色譜、高效液相色譜來(lái)進(jìn)一步確定結(jié)晶的純度。第六十五頁(yè)，共76頁(yè)。第五節(jié)其他分離技術(shù)

鹽析法透析法分餾法第六十六頁(yè)，共76頁(yè)。一、透析法原理：是利用提取液中小分子物質(zhì)或能在水、乙醇提取液中解離成離子的物質(zhì)可通過(guò)透析膜，而大分子物質(zhì)不能通過(guò)透析膜（如多糖、蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、樹(shù)脂等不能通過(guò)透過(guò)透析膜）性質(zhì)，借以達(dá)到分離的目的。第六十七頁(yè)，共76頁(yè)。第六十八頁(yè)，共76頁(yè)。應(yīng)用：此法常用于分離純化皂苷、蛋白質(zhì)、多肽、多糖等大分子成分，以除去無(wú)機(jī)鹽、單糖、雙糖等小分子雜質(zhì)。常用的透析膜（需根據(jù)分離成分的分子量大小來(lái)選擇）（1）動(dòng)物膀胱膜（2）火棉膠膜（3