化學(xué)發(fā)光免疫分析

化學(xué)發(fā)光免疫分析化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)技術(shù)起源Halman在1977年基于放射免疫分析的基本原理，將酶的化學(xué)發(fā)光與免疫反應(yīng)結(jié)合起來，建立了化學(xué)發(fā)光免疫分析方法。(Chemiluminescenceimmunoas)2020/11/32臨床核醫(yī)學(xué)診斷核醫(yī)學(xué)（影像診斷）治療核醫(yī)學(xué)體外分析技術(shù)（放射免疫分析）（化學(xué)發(fā)光免疫分析）2020/11/33什么是化學(xué)發(fā)光？人體內(nèi)的某些化合物分子被氧化后，可以形成激發(fā)態(tài)并返回基態(tài)同時(shí)發(fā)射光子，這就是化學(xué)發(fā)光。化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)技術(shù)是利用發(fā)光信號(hào)測(cè)量?jī)x器測(cè)量光量子的產(chǎn)額。該技術(shù)可以有效的消除樣本的本底干擾，消除樣本對(duì)光信號(hào)的散射，從而獲得更高的檢測(cè)靈敏度。

2020/11/34化學(xué)發(fā)光免疫分析原理：化學(xué)發(fā)光免疫分析化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)免疫反應(yīng)系統(tǒng)2020/11/35免疫反應(yīng)系統(tǒng)：將發(fā)光物質(zhì)（在反應(yīng)劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體）直接標(biāo)記在抗原（化學(xué)發(fā)光免疫分析）或標(biāo)記抗體（免疫化學(xué)發(fā)光分析）上，或用酶作用于發(fā)光底物。2020/11/36化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)：利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)經(jīng)催化劑的催化和氧化劑的氧化，形成一個(gè)激發(fā)態(tài)的中間體，當(dāng)這種激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時(shí)發(fā)射出光子（hv)，利用發(fā)光信號(hào)測(cè)量?jī)x測(cè)量光量子的產(chǎn)額，就可測(cè)知體內(nèi)某些微量生物活性物質(zhì)的含量。2020/11/37化學(xué)發(fā)光免疫分析類型：根據(jù)標(biāo)記物的不同分為三大類：1、化學(xué)發(fā)光免疫分析2、化學(xué)發(fā)光酶免疫分析3、電化學(xué)發(fā)光免疫分析2020/11/38化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)技術(shù)：優(yōu)點(diǎn)：安全，靈敏度高（10-15g/ml），穩(wěn)定性好，重復(fù)性較佳，結(jié)果漂移小，線性較好，準(zhǔn)確度高，操作方便，試劑貨架期長(zhǎng)（半年~1年），浪費(fèi)少，出結(jié)果快速。缺點(diǎn)：儀器價(jià)格昂貴，試劑成本較高，目前有些檢測(cè)項(xiàng)目不能用化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，待開發(fā)。2020/11/39化學(xué)發(fā)光技術(shù)與其他免疫分析技術(shù)比較：

免疫診斷技術(shù)在經(jīng)歷了放射免疫法、酶標(biāo)免疫法、免疫熒光法等方法后，發(fā)展到今天，化學(xué)發(fā)光技術(shù)的出現(xiàn)并臨床應(yīng)用，為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)免疫診斷技術(shù)的發(fā)展奠定了一個(gè)劃時(shí)代的里程碑。

2020/11/310.1、放射免疫法：1、放射免疫法缺陷：同位素半衰期短（125I半衰期60天）及需要特殊水源處理裝置，污染問題、試劑有效期短、出報(bào)告時(shí)間長(zhǎng)（一般要2天）、標(biāo)準(zhǔn)曲線穩(wěn)定性差，但在有些發(fā)達(dá)國家仍在使用，完全能滿足臨床需要。2020/11/3112、酶標(biāo)記免疫分析缺陷：

由來已久，但是始終沒有能夠替代放射免疫。這種依靠比色法或偏振光法的檢測(cè)技術(shù)所受的干擾因素太多，甚至試管的形狀的變化都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，靈敏性、穩(wěn)定性、重復(fù)性均較差（可測(cè)靈敏度為10-8g/ml）。2020/11/3123、熒光免疫分析技術(shù)缺陷：利用特定波長(zhǎng)的入射光將分子轉(zhuǎn)換到激發(fā)態(tài)，然后分子回到基態(tài)并發(fā)射光子。但有以下干擾因素：

1）血清樣本中存在內(nèi)源性熒光帶，會(huì)增強(qiáng)非特異性本底熒光；

2）樣本對(duì)熒光光信號(hào)的散射也干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。2020/11/313化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)技術(shù)臨床應(yīng)用：1、甲狀腺功能類：T3、T4、THS、FT3、FT4、rT3、TG、T-PO新生兒篩查：T4sTSH

2、性腺激素類：HCG、?-HCG、FSH、LH、E2、E3、PRL、P、T、GH等3、腫瘤檢測(cè)：

CEA、AFP、Fe、PSA、CA125、CA153、CA199CA50、CA211、CA7242020/11/3144、心血管：CK-MB、BNP、Tn-I、Myoglobin5、貧血類：鐵蛋白、ViteB12、葉酸6、藥物濃度：地高辛、洋地黃、托普霉素可馬西平、苯巴比妥、等7、糖尿病及代謝：胰島素、C-肽、PTH8、過敏源類：過敏源篩選、總過敏源9、傳染?。焊窝紫盗?、風(fēng)疹、弓形體10、其他：皮質(zhì)醇、還有很多待開發(fā)項(xiàng)目。2020/11/315心血管系統(tǒng):如何能更快更準(zhǔn)確更全面的診斷AMI2020/11/316時(shí)心電圖并不能典型歸類診斷急性心肌梗塞有一定難度一半有不穩(wěn)定胸口窒息痛的病人，入院時(shí)心電圖并不典型。病人再發(fā)梗塞診斷困難導(dǎo)致不能及時(shí)診斷AMI延誤及時(shí)治療、護(hù)理臨床需要盡早準(zhǔn)確診斷AMI方法2020/11/317肌肉組織心肌心肌細(xì)胞特異性標(biāo)志肌鈣蛋白ICT肌鈣蛋白I釋放入血心肌壞死（氨基酸順序40％差異）2020/11/318心肌細(xì)胞肌紅蛋白肌酸激酶MB心肌壞死釋放入血（含量大）血液濃度明顯升高(CK-MB)2020/11/31965432104812162024487296h肌紅蛋白CK-MB肌鈣蛋白濃度急性心肌梗塞后各項(xiàng)指標(biāo)變化2020/11/320肌紅蛋白升高高峰回落肌酸激酶MB肌鈣蛋白I1-2h4-8h6-8h5-12h10-24h12-24h18-30h48-72h5-7d2020/11/321肌紅蛋白的臨床意義早期診斷特異性低靈敏度高急性心梗后最早(1-2h)出現(xiàn)的標(biāo)記最早能排除非急性心梗陰性預(yù)測(cè)率為99%體內(nèi)周期短，對(duì)再發(fā)梗塞特別靈敏肌紅蛋白測(cè)定能有效分辨非急性心梗，使急性心梗病人能盡早得到治療.有效觀察溶栓療效2020/11/322肌鈣蛋白I的臨床意義診斷急性心肌梗塞特異性>98%特異性強(qiáng)、確診率高靈敏度低急性心梗發(fā)病后6h才出現(xiàn)，應(yīng)與肌紅蛋白一同使用肌鈣蛋白I升高即可確診為急性心肌梗塞，及時(shí)得到治療體內(nèi)周期長(zhǎng)，對(duì)外地病人延誤求診亦能診斷對(duì)極輕微的心肌創(chuàng)傷都能檢出2020/11/323胸痛ECG發(fā)病肌鈣蛋白I肌紅蛋白CK-MB急性心梗+–++<8h>8h隨訪+再發(fā)心梗2020/11/324肌紅蛋白注意事項(xiàng)肌酸激酶MB骨骼肌損傷肌紅蛋白升高腎功能衰竭CK-MB

增高2020/11/325甲狀腺功能系列診斷：T3T4TSHTSH-3

FrT3FrT4TupT-poAb2020/11/326

診斷各種甲亢必須具備的儀器設(shè)備:

1、甲狀腺131-I攝取率測(cè)定儀2、各種放射免疫測(cè)定儀或各種全自動(dòng)發(fā)光免疫測(cè)定儀3、甲狀腺功能顯像設(shè)備：（SPECT、γ照相儀）2020/11/327甲亢正確診斷（特別是首診）1、臨床癥狀、體征。2、實(shí)驗(yàn)室檢查：T3、T4、FT3、FT4、sTSH或uTSH、TMAb、TGAb、TPOAb、TRAb……3、131-I攝取試驗(yàn)是必查項(xiàng)目

只靠臨床癥狀、體征及實(shí)驗(yàn)室檢查無法鑒別：碘甲亢、亞甲炎甲亢、亞急性淋巴細(xì)胞性甲炎甲亢、慢甲炎甲亢和醫(yī)源性甲亢。治療和處理是完全不同的。2020/11/3282020/11/329目前臨床上靠一張甲狀腺功能檢查單（T3、FT3、T4、FT4增高和sTSH降低）診斷甲亢是不正確的，化驗(yàn)單只證明患者血中甲狀腺激素增多（甲狀腺毒癥），而碘甲亢、亞甲炎甲亢、亞急性淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎甲亢、慢性淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎、醫(yī)源性甲亢等靠臨床癥狀、體征及化驗(yàn)檢查是無法區(qū)分的，因此，首診病人必須做131-I攝取試驗(yàn)才不會(huì)造成誤診。2020/11/3302020/11/3312020/11/332甲狀腺炎掃描圖2020/11/333正常甲狀腺掃描圖治療1個(gè)半月后2020/11/334治療后檢測(cè)結(jié)果顯示各項(xiàng)指標(biāo)正常2020/11/335治療后恢復(fù)正常2020/11/3362020/11/3372020/11/3382020/11/3392020/11/3402020/11/3412020/11/342臨床常見的甲狀腺疾病種類：1、甲亢：大概分為13種，三大類。2、甲減：分為原發(fā)性、繼發(fā)性。3、甲狀腺炎：分5種。4、甲狀腺腫瘤：良性、惡性。5、甲狀腺腫：青春期、結(jié)節(jié)性甲腫。6、TH不敏感綜合征：三大類。2020/11/343甲狀腺激素不敏感綜合癥：一、全身型：1、甲減型T3、T4、TSH2、代償型T3、T4、TSH二、垂體型：甲亢癥狀明顯：T3、T4、TSH三、外周選擇型：T3、T4、TSH（正常）臨床甲減癥狀2020/11/3442020/11/3452020/11/3462020/11/3472020/11/3482020/11/3492020/11/3502020/11/3512020/11/3522020/11/3532020/11/3542020/11/3552020/11/3562020/11/3572020/11/3582020/11/3592020/11/3602020/11/3612020/11/362總之，化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)技術(shù)（ChemiluminesentImmunoassay,CLIA）是繼酶免技術(shù)（EIA）、放免技術(shù)（RIA）、熒光免疫技術(shù)（FIA）和時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)（TRFIA）之后發(fā)展的一項(xiàng)新興高度敏感的微量測(cè)定技術(shù)。

2020/11/363其具備以下特點(diǎn)：

①高度敏感，極限達(dá)10-17g/mL，遠(yuǎn)高于RIA、EIA、FIA。②特異性強(qiáng)，重復(fù)性好C.V.＜5％。③測(cè)定范圍寬，可達(dá)7個(gè)數(shù)量級(jí)。④試劑穩(wěn)