實(shí)驗(yàn)植物的組織培養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)11植物的組織培養(yǎng)現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三大多綠色開(kāi)花植物靠種子繁殖（有性繁殖），不用種子繁殖（無(wú)性繁殖）的方法有：組織培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)繁殖扦插嫁接壓條

無(wú)性繁殖現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三組織培養(yǎng)就是取一部分植物組織（外植體），如葉、芽、莖、根、花瓣或花粉等，在無(wú)菌條件下接種在三角瓶中的瓊脂培養(yǎng)基上，給予一定的溫度和光照，使之產(chǎn)生愈傷組織，或進(jìn)而生根發(fā)芽。一、組織培養(yǎng)概述1.概念現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三2、植物組織培養(yǎng)的原理是什么？植物細(xì)胞具有全能性，即生物體的細(xì)胞，具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的能力。3.植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程:離體的植物器官、組織、細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化根芽植物體生長(zhǎng)發(fā)育現(xiàn)在是4頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三植物組織培養(yǎng)過(guò)程示意圖煙草植株根細(xì)胞培養(yǎng)形成愈傷組織發(fā)育成幼胚長(zhǎng)成幼苗成熟植株現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三4.植物組織培養(yǎng)條件:含有全部營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無(wú)菌環(huán)境、適合的PH、適時(shí)光照等。細(xì)胞分裂素多，生長(zhǎng)素少誘導(dǎo)芽的生成細(xì)胞分裂素少，生長(zhǎng)素多誘導(dǎo)根的生成細(xì)胞分裂素適中，生長(zhǎng)素少愈傷組織只生長(zhǎng)不分化細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素比例合適誘導(dǎo)根芽的分化現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三二、實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基配制外植體的選取消毒接種培養(yǎng)移栽和栽培等?，F(xiàn)在是7頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三1、實(shí)驗(yàn)材料（1）MS培養(yǎng)基：大量元素：C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg微量元素：Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、I、Co有機(jī)成分：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等（3）發(fā)芽培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基+BA+NAA+瓊脂+蒸餾水（2）萘乙酸NAA、芐基腺嘌呤BA（4）生根培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基+NAA+瓊脂+蒸餾水現(xiàn)在是8頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三2、步驟1.取外植體超凈臺(tái)上將無(wú)菌幼苗(無(wú)菌水沖洗)切段，每段至少1張葉片2.生芽培養(yǎng)生芽培養(yǎng)基中，放入1-3段切段（莖一部分插入培養(yǎng)基），蓋上封口膜。日光燈下保持18~25℃的溫度培養(yǎng)，每天光照不少于14.5h。3.生根培養(yǎng)2~3周后，將叢狀苗在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，在上述條件下繼續(xù)培養(yǎng)?，F(xiàn)在是9頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三5.定植將苗轉(zhuǎn)移到土中培養(yǎng)。4.適應(yīng)鍛煉將苗轉(zhuǎn)移至草炭土或蛭石中繼續(xù)生長(zhǎng)，用玻璃罩或塑料布保持80％以上的濕度，2~3天后打開(kāi)減低濕度進(jìn)行鍛煉，直到將罩全部打開(kāi)處于自然濕度下為止。現(xiàn)在是10頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三幼苗外植體叢芽生根鍛苗消毒接種愈傷組織胚狀體定植

植株生根培養(yǎng)生芽培養(yǎng)現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三1.不同植物、不同組織的生根和生芽是否都可使用與本實(shí)驗(yàn)相同的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素濃度？2.本實(shí)驗(yàn)用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，為什么？不相同天然激素都有相應(yīng)的使之分解的酶，所以使用時(shí)間短，而人工合成的，沒(méi)有分解酶，作用時(shí)間長(zhǎng)，效果顯著。課后題現(xiàn)在是12頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類(lèi)。4.同LB培養(yǎng)基相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？3.如果在自然界取植物樣本進(jìn)行組織培養(yǎng)，你認(rèn)為應(yīng)采取什么措施保證樣本不被污染?（1）操作環(huán)境清潔（2）植物樣本的潔凈（3）操作敏捷迅速現(xiàn)在是13頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三脫分化：將來(lái)自已分化組織的已停止分裂的細(xì)胞從植物體部分的抑制性影響下解脫出來(lái)，恢復(fù)細(xì)胞的分裂活性。再分化:經(jīng)脫分化的組織或細(xì)胞在一定的培養(yǎng)條件下可有轉(zhuǎn)變?yōu)楦鞣N不同細(xì)胞類(lèi)型的能力。愈傷組織現(xiàn)在是15頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三1、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時(shí)帶入4、環(huán)境不清潔污染途徑現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三污染的預(yù)防措施（一）防止外植體帶菌（二）保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌（三）操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程（四）保證接種與培養(yǎng)環(huán)境清潔現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三思考：以下培養(yǎng)基出現(xiàn)的現(xiàn)象反應(yīng)了什么問(wèn)題？生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素高利于根和愈傷組織的形成適中利于根芽的分化現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3、接種的無(wú)菌操作（酒精、酒精燈——灼燒）4、無(wú)菌箱中的培養(yǎng)；5、移栽到消過(guò)毒的環(huán)境中生存一段時(shí)間。在整個(gè)操作過(guò)程中，是如何來(lái)實(shí)現(xiàn)無(wú)菌環(huán)境的？現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有22頁(yè)\編輯于星期三植物