細(xì)菌的生理學(xué)優(yōu)秀公開課

第2章細(xì)菌的生理BacterialPhysiology基本內(nèi)容細(xì)菌的理化性狀細(xì)菌的營養(yǎng)與生長繁殖細(xì)菌的新陳代謝和能量轉(zhuǎn)換細(xì)菌的人工培養(yǎng)細(xì)菌的分類第一節(jié)細(xì)菌的理化性狀一、細(xì)菌的化學(xué)組成成分水、無機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類、脂質(zhì)、核酸元素碳、氫、氧、氮、磷、硫特有化學(xué)組成肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨基酸、二氨基庚二酸、吡啶二羧酸等二、細(xì)菌的物理性狀光學(xué)性質(zhì)：細(xì)菌為半透明體。當(dāng)光線照射至細(xì)菌，部分被吸收，部分被折射，故細(xì)菌懸液呈混濁狀態(tài)。表面積：細(xì)菌體積微小，相對表面積大，有利于同外界進(jìn)行物質(zhì)交換。帶電現(xiàn)象：蛋白質(zhì)，帶負(fù)電荷與染色、凝集、抑殺菌有關(guān)系半透性：細(xì)菌的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜都有半透性，允許水及部分小分子物質(zhì)通過，有利于吸收營養(yǎng)和排出代謝產(chǎn)物。滲透壓

G+菌20-25個大氣壓，G-菌5-6個,菌體內(nèi)為高滲透壓第二節(jié)細(xì)菌的營養(yǎng)與生長繁殖一、根據(jù)細(xì)菌所利用的能源和碳源的不同，將細(xì)菌分為兩大營養(yǎng)類型——自養(yǎng)菌和異養(yǎng)菌。自養(yǎng)菌(autotroph)：以簡單的無機(jī)物為原料，合成菌體成分?；茏责B(yǎng)和光能自養(yǎng)菌異養(yǎng)菌(heterotroph)：以多種有機(jī)物為原料，合成菌體成分并獲得能量。異養(yǎng)菌包括腐生菌(saprophyte)和寄生菌(parasite)。所有的病原菌都是異養(yǎng)菌，大部分屬寄生菌。二、細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)

細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)有兩方面作用：用于組成細(xì)菌細(xì)胞的各種成分供給細(xì)菌新陳代謝中所需能量

各類細(xì)菌所要求的營養(yǎng)物質(zhì)主要包括水、碳源、氮源、無機(jī)鹽和生長因子等。細(xì)菌生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)

營養(yǎng)成分功效作用碳源糖類合成菌體成分；供給能量氮源氨基酸、蛋白質(zhì)合成菌體成分無機(jī)鹽微量元素磷、硫、鉀、鈉、鈣、鎂、鐵、鈷、鋅、錳、銅等合成菌體成分；維持酶活性；參與能量儲存和轉(zhuǎn)運(yùn)；調(diào)節(jié)滲透壓；某些元素與致病性有關(guān)生長因子維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶、高鐵血紅素、輔酶補(bǔ)充細(xì)菌自身不能合成的有機(jī)營養(yǎng)成分、呼吸輔酶水營養(yǎng)物質(zhì)可溶營養(yǎng)吸收和代謝三、細(xì)菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機(jī)制

被動擴(kuò)散

主動運(yùn)轉(zhuǎn)系統(tǒng)

單純擴(kuò)散

是一種最簡單的物質(zhì)交換方式。細(xì)胞膜兩側(cè)的物質(zhì)靠濃度差(濃度梯度)進(jìn)行分子擴(kuò)散，不需要能量。此種方式無特異性或選擇性，細(xì)胞內(nèi)外溶質(zhì)濃度平衡時，擴(kuò)散便停止，不是物質(zhì)運(yùn)輸?shù)闹饕绞?。?2、水、乙醇等。

促進(jìn)擴(kuò)散

某些物質(zhì)如糖或氨基酸與位于細(xì)胞膜的特異性載體蛋白相結(jié)合，而后將其轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞內(nèi)外。具有特異性和選擇性，不需要能量。1.被動擴(kuò)散促進(jìn)擴(kuò)散以細(xì)胞內(nèi)外的濃度梯度為動力，在載體物質(zhì)參與下，物質(zhì)從濃度高的胞外向濃度低的胞內(nèi)擴(kuò)散。（真核微生物）膜載體在膜外與營養(yǎng)物質(zhì)親合力強(qiáng)，與這種物質(zhì)結(jié)合，進(jìn)入細(xì)胞后親合力降低釋放營養(yǎng)物質(zhì)。像渡船一樣，膜外裝貨，膜內(nèi)卸貨，這種擴(kuò)散方式比單純擴(kuò)散速度快。膜內(nèi)外親合力的改變與載體分子構(gòu)型改變有關(guān)。單純擴(kuò)散與促進(jìn)擴(kuò)散的比較2．主動運(yùn)輸(Activetransport)

主動運(yùn)輸是廣泛存在于微生物中的一種主要的物質(zhì)運(yùn)輸方式。（2）Na+-K+-ATP酶系統(tǒng)Na+-K+-ATPase是存在于原生質(zhì)膜上的一種重要離子通道蛋白功能:

利用ATP能量將Na+由細(xì)胞內(nèi)“泵”出胞外,并將K+“泵”入胞內(nèi)。該酶由大小兩個亞基組成（MW:12萬,5.5萬）作用步驟:1.ATP酶(E)在細(xì)胞內(nèi)側(cè)與Na+結(jié)合,同時消耗能量;2.磷酸化ATP酶(E+)構(gòu)象變化將Na+排除胞外,并與K+結(jié)合;3.K+激發(fā)E+脫磷酸化恢復(fù)為E,同時將K+運(yùn)入細(xì)胞.基團(tuán)轉(zhuǎn)位又稱為磷酸烯醇式丙酮酸--磷酸糖轉(zhuǎn)移酶運(yùn)輸系統(tǒng)（PTS），PTS通常由五種蛋白質(zhì)組成，包括酶I、酶II（包括a、b、c三種亞基）和一種低相對分子量的熱穩(wěn)定蛋白質(zhì)（HPr）。（3)基團(tuán)移位(Grouptranslocation)

基團(tuán)移位是另一種類型的主動運(yùn)輸，它與主動運(yùn)輸方式的不同之處在于它有一個復(fù)雜的運(yùn)輸系統(tǒng)來完成物質(zhì)的運(yùn)輸，而物質(zhì)在運(yùn)輸過程中發(fā)生化學(xué)變化。

糖被磷酸化后運(yùn)入膜內(nèi)膜外環(huán)境中的糖先與外膜表面的酶2結(jié)合，再被轉(zhuǎn)運(yùn)到內(nèi)膜表面。這時，糖被P-HPr上的磷酸激活，并通過酶2的作用將糖-磷酸釋放到細(xì)胞內(nèi)。酶2

P-HPr+糖糖-P+HPr酶2是一種結(jié)合于細(xì)胞膜上的蛋白，它對底物具有特異性選擇作用，因此細(xì)胞膜上可誘導(dǎo)出一系列與底物分子相對應(yīng)的酶2。在酶Ⅰ的作用下HPr被激活在酶Ⅱ的作用下P-HPr將磷酸轉(zhuǎn)移給糖基團(tuán)轉(zhuǎn)位的特點(diǎn)：

被吸收物質(zhì)以微生物的代謝能為動力，通過一個復(fù)雜的運(yùn)輸系統(tǒng)從胞外轉(zhuǎn)運(yùn)到胞內(nèi)，并發(fā)生化學(xué)變化。（厭氧細(xì)菌和兼性厭氧細(xì)菌）需氧菌（aerobe）:

厭氧菌（anaerobe）:缺乏呼吸酶

①缺乏氧化還原電勢較高的酶:不能氧化營養(yǎng)物質(zhì)獲得能量

②缺乏過氧化物酶與過氧化氫酶:不能處理代謝中產(chǎn)生的O2－和H2O2

O2－---H2O2---H2O兼性厭氧菌（facultativeanaerobe）:5.滲透壓:少數(shù)細(xì)菌如嗜鹽菌需要在高濃度（3%）的NaCl環(huán)境中生長良好。

4.氣體環(huán)境：氧氣、二氧化碳生物個體物質(zhì)有規(guī)律地、不可逆增加，導(dǎo)致個體體積擴(kuò)大的生物學(xué)過程。生長生物個體生長到一定階段，通過特定方式產(chǎn)生新的生命個體，即引起生命個體數(shù)量增加的生物學(xué)過程。繁殖在高等生物里這兩個過程可以明顯分開，但在低等特別是在單細(xì)胞生物中，由于細(xì)胞小，這兩個過程是緊密聯(lián)系又很難劃分的過程。五、細(xì)菌的生長繁殖

革蘭氏陰性菌無中介體，染色體直接連接在細(xì)胞膜上。復(fù)制產(chǎn)生的新染色體則附著在鄰近的一點(diǎn)上，在兩點(diǎn)之間形成新的細(xì)胞膜，將兩團(tuán)染色體分離在兩側(cè)。最后細(xì)胞壁沿橫膈內(nèi)陷，整個細(xì)胞分裂成兩個子代細(xì)胞。

(二)細(xì)菌群體的生長繁殖群體：生長曲線（growthcurve）:以培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo)，培養(yǎng)物中活菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標(biāo)，可得出一條生長曲線

遲緩期（lagphase）：對數(shù)期（logarithmicphase）：穩(wěn)定期（stationaryphase）：衰退期（declinephase）：小時細(xì)菌數(shù)的對數(shù)衰亡期(diclinephase)穩(wěn)定期(stationaryphase)對數(shù)期(logarithmicphase)細(xì)菌生長曲線(growthcurve)遲緩期(lagphase)遲緩期(Lagphase)將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后，在開始一段時間內(nèi)菌數(shù)不立即增加，或增加很少，生長速度接近于零。也稱延遲期、適應(yīng)期。遲緩期的特點(diǎn)分裂遲緩、代謝活躍1、細(xì)胞形態(tài)變大或增長（一般來說處于遲緩期的細(xì)菌細(xì)胞體積最大）。例如：巨大芽孢桿菌，在遲緩期末，細(xì)胞的平均長度比剛接種時長6倍。細(xì)胞內(nèi)RNA，尤其是rRNA含量增高，合成代謝活躍，核糖體、酶類和ATP的合成加快，易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶。2、對外界不良條件反應(yīng)敏感。細(xì)胞處于活躍生長中，只是分裂遲緩在此階段后期，少數(shù)細(xì)胞開始分裂，曲線略有上升。遲緩期出現(xiàn)的原因微生物接種到一個新的環(huán)境，暫時缺乏足夠的能量和必須的生長因子，種子老化或未充分活化，接種造成損傷等，就需要一段適應(yīng)期。調(diào)整代謝在生產(chǎn)實(shí)踐中縮短遲緩期的常用手段：(1)通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短；(2)利用對數(shù)生長期的細(xì)胞作為種子；(3)盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大；(4)適當(dāng)擴(kuò)大接種量對數(shù)生長期(Logphase)：又稱指數(shù)生長期(Exponentialphase)特點(diǎn)：1、以最大的速率生長和分裂，細(xì)菌數(shù)量呈對數(shù)增加，代時穩(wěn)定。

2、細(xì)菌細(xì)胞均衡生長，其個體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均較一致。

3、酶系活躍，代謝旺盛。

是研究微生物基本代謝的良好材料。在生產(chǎn)上用此時期微生物作種子，使微生物發(fā)酵的遲緩期縮短，提高經(jīng)濟(jì)效益。穩(wěn)定生長期(Stationaryphase)：（恒定期或最高生長期）原因：營養(yǎng)物質(zhì)消耗；代謝產(chǎn)物積累；pH及氧化還原電位等的變化。特點(diǎn)：生長速率降低直至零(即細(xì)菌新增殖的細(xì)胞數(shù)等于細(xì)菌死亡數(shù))；培養(yǎng)液中活細(xì)菌數(shù)最高并維持穩(wěn)定；細(xì)菌代謝物積累達(dá)到最高峰；芽孢桿菌這時開始形成芽孢；生產(chǎn)收獲時期。衰亡期(Decline或Deathphase)營養(yǎng)物質(zhì)耗盡和有毒代謝產(chǎn)物的大量積累，細(xì)菌死亡速率超過新生速率，整個群體呈現(xiàn)負(fù)增長。該時期死亡的細(xì)菌以對數(shù)方式增加，但在衰亡期的后期，由于部分細(xì)菌產(chǎn)生抗性也會使細(xì)菌死亡的速率降低，仍有部分活菌存在。特點(diǎn)：1、細(xì)菌代謝活性降低，細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶，產(chǎn)生或釋放出一些產(chǎn)物，如氨基酸、轉(zhuǎn)化酶、外肽酶或抗生素等。

2、細(xì)胞呈現(xiàn)多種形態(tài)，有時產(chǎn)生畸形，細(xì)胞大小懸殊。

3、有些革蘭氏染色反應(yīng)陽性菌變成陰性反應(yīng)等。第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝與能量轉(zhuǎn)換新陳代謝：發(fā)生在活細(xì)胞中的各種分解代謝（catabolism）和合成代謝（anabolism）的總和。

分解代謝：底物分解和轉(zhuǎn)化為能量的過程

合成代謝：所產(chǎn)生的能量用于細(xì)胞組分的合成一、細(xì)菌的能量代謝微生物的產(chǎn)能代謝—物質(zhì)在生物體內(nèi)經(jīng)過一系列的氧化還原反應(yīng),逐步分解并釋放能量的過程（又叫生物氧化）發(fā)酵呼吸有氧呼吸厭氧呼吸。發(fā)酵：以有機(jī)物為受氫體；呼吸：以無機(jī)物為受氫體。有氧呼吸：其中以分子氧為受氫體；厭氧呼吸：以其他無機(jī)物（硝酸鹽、硫酸鹽等）為受氫體。a:預(yù)備性反應(yīng)b:氧化還原反應(yīng)底物水平磷酸化底物水平磷酸化EMP途徑意義：為細(xì)胞生命活動提供ATP和NADH

1、EMP途徑（Embden-Meyerhofpathway）(2)HMP途徑(己糖一磷酸途徑、戊糖磷酸途徑)從6-磷酸-葡萄糖開始，即在單磷酸己糖基礎(chǔ)上開始降解的，故稱為單磷酸己糖途徑。HMP途徑與EMP途徑有著密切的關(guān)系，HMP途徑中的3-磷酸-甘油醛可以進(jìn)入EMP途徑—磷酸戊糖支路。HMP途徑的一個循環(huán)的最終結(jié)果是一分子葡萄糖-6-磷酸轉(zhuǎn)變成一分子甘油醛-3-磷酸、3個CO2、6個NADPH。一般認(rèn)為HMP途徑不是產(chǎn)能途徑，而是為生物合成提供大量還原力（NADPH）和中間代謝產(chǎn)物。HMP途徑特點(diǎn)6葡萄糖-6-磷酸+12NADP++6H2O

5葡萄糖-6-磷酸+12NADPH+12H++12CO2+PiHMP途徑的總反應(yīng)三羧酸循環(huán)（Tricarboxylic

acid

cycle，TCA）或檸檬酸循環(huán)。在絕大多數(shù)異養(yǎng)微生物的呼吸代謝中起關(guān)鍵作用。其中大多數(shù)酶在真核生物中存在于線粒體內(nèi)膜中，在細(xì)菌中存在于細(xì)胞膜中。Krebs有氧呼吸：三羧酸循環(huán)主要產(chǎn)物：C3CO~CoANADH+4HFADHGTP3CO（底物水平）12ATP2ATPATPCH321.丙酮酸脫氫酶復(fù)合體2.檸檬酸合成酶3.順烏頭酸酶4.順烏頭酸酶5.異檸檬酸脫氫酶6.-酮戊二酸脫氫酶8.琥珀酸脫氫酶9.延胡索酸酶10.蘋果酸脫氫酶三羧酸循環(huán)的總反應(yīng)式為：乙酰CoA+3NAD++FAD+GDP+Pi+2H2O2CO2+3NADH+FADH2+GTP+CoA+2H+循環(huán)有以下特點(diǎn)：（1）乙酰CoA與草酰乙酸縮合形成檸檬酸，使兩個C原子進(jìn)入循環(huán)。在以后的兩步脫羧反應(yīng)中，有兩個C原子以CO2的形式離開循環(huán)，相當(dāng)于乙酰CoA的2個C原子形成CO2。

（2）在循環(huán)中有4對H原子通過4步氧化反應(yīng)脫下，其中3對用以還原NAD+生成3個NADH+H+,1對用以還原FAD,生成1個FADH2。（3）由琥珀酰CoA形成琥珀酸時，偶聯(lián)有底物水平磷酸化生成1個GTP,1GTP1ATP。（4）循環(huán)中消耗兩分子水。（5）3NADH9ATP，1FADH2

2ATP，再加上1個GTP。1分子乙酰CoA通過TCA循環(huán)被氧化，可生成12分子ATP。4.厭氧呼吸:

專性厭氧菌沒有需氧電子傳遞鏈和完整的三羧酸循環(huán)，1分子葡萄糖經(jīng)厭氧糖酵解只能產(chǎn)生2分子ATP，最終以外源的無機(jī)氧化物(CO2

、SO42-

、NO3-）作為受氫體的一類產(chǎn)能效率低的特殊呼吸。

二、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物

（一）生化反應(yīng)：主要用于鑒別不同的細(xì)菌糖發(fā)酵試驗(yàn)：V-P試驗(yàn)：甲基紅試驗(yàn)：枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)：吲哚試驗(yàn)：硫化氫試驗(yàn)：尿素酶試驗(yàn)：細(xì)菌的分解代謝及其產(chǎn)物——常見的生化反應(yīng)對糖的發(fā)酵甲基紅試驗(yàn)單糖發(fā)酵試驗(yàn)VP試驗(yàn)對蛋白質(zhì)的發(fā)酵吲哚試驗(yàn)硫化氫試驗(yàn)枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)?zāi)蛩孛冈囼?yàn)其他試驗(yàn)不同細(xì)菌分解糖類的能力和代謝產(chǎn)物不同。例如大腸埃希菌能發(fā)酵葡萄糖和乳糖；而傷寒沙門菌可發(fā)酵葡萄糖，但不能發(fā)酵乳糖。大腸埃希菌有甲酸脫氫酶，能將葡萄糖發(fā)酵生成的甲酸進(jìn)一步分解為CO2和H2，故產(chǎn)酸并產(chǎn)氣；而傷寒沙門菌缺乏該酶，發(fā)酵葡萄糖僅產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。1.糖酵解試驗(yàn)：糖酵解試驗(yàn)：++—?dú)馀莶话l(fā)酵產(chǎn)酸不產(chǎn)氣產(chǎn)酸又產(chǎn)氣大腸桿菌傷寒桿菌傷寒桿菌大腸埃希菌和產(chǎn)氣桿菌均能發(fā)酵葡萄糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，兩者不能區(qū)別。但產(chǎn)氣桿菌能使丙酮酸脫羧生成中性的乙酰甲基甲醇，在堿性溶液中被氧化生成二乙酰，二乙酰與含胍基化合物反應(yīng)生成紅色化合物，是為VP試驗(yàn)陽性。大腸埃希菌不能生成乙酰甲基甲醇，故VP試驗(yàn)陰性.2.VP（Voges-Proskauer）試驗(yàn)VP試驗(yàn)：葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇二乙酰紅色（+）OH-+含胍基化合物—+脫羧大腸桿菌：產(chǎn)氣桿菌：產(chǎn)氣桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，脫羧后生成中性的乙酰甲基甲醇，故培養(yǎng)液pH>5.4，甲基紅指示劑呈桔黃色，是為甲基紅試驗(yàn)陰性。大腸埃希菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，培養(yǎng)液pH≤4.5，甲基紅指示劑呈紅色，則為甲基紅試驗(yàn)陽性。3.甲基紅(methylred)試驗(yàn)：甲基紅(methylred)試驗(yàn)：葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇（紅色）（—）（+）大腸桿菌：產(chǎn)氣桿菌：當(dāng)某些細(xì)菌（如產(chǎn)氣桿菌）利用銨鹽作為唯一氮源，并利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源時，可在枸櫞酸鹽培養(yǎng)基上生長，分解枸櫞酸鹽生成碳酸鹽，并分解銨鹽生成氨，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，是為該試驗(yàn)陽性。大腸埃希菌不能利用枸櫞酸鹽為唯一碳源，故在該培養(yǎng)基上不能生長，是為枸櫞酸鹽試驗(yàn)陰性。4.枸櫞酸鹽利用(citrateutilization)試驗(yàn)：枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)：（+）（—）枸櫞酸鹽（碳源）銨鹽（氮源）氨培養(yǎng)基變?yōu)閴A性蘭色（+）碳酸鹽大腸桿菌：產(chǎn)氣桿菌：有些細(xì)菌如大腸埃希菌、變形桿菌、霍亂弧菌等能分解培養(yǎng)基中的色氨酸生成吲哚（靛基質(zhì)），經(jīng)與試劑中的對二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈紅色，是為吲哚試驗(yàn)陽性。5.吲哚(indol)試驗(yàn)：吲哚(indol)試驗(yàn)：（—）（+）色氨酸吲哚（靛基質(zhì)）玫瑰吲哚（紅色）+二甲基氨基苯甲醛大腸桿菌：產(chǎn)氣桿菌：IMViC：常用于腸道桿菌的鑒定吲哚(indol)、甲基紅(methylred)

、VP及枸櫞酸鹽利用(citrateutilization)試驗(yàn)的合稱.例如大腸桿菌為“++--”

產(chǎn)氣桿菌為“--++”有些細(xì)菌如沙門菌、變形桿菌等能分解培養(yǎng)基中的含硫氨基酸（如胱氨酸、甲硫氨酸）生成硫化氫，硫化氫遇鉛或鐵離子生成黑色的硫化物。6.硫化氫試驗(yàn)：6.硫化氫試驗(yàn)：（—）（+）含硫氨基酸硫化氫硫化鐵或硫化鉛（黑色，+）+鐵離子或鉛離子沙門菌變形桿菌有尿素酶，能分解培養(yǎng)基中的尿素產(chǎn)生氨，使培養(yǎng)基變堿，以酚紅為指示劑檢測為紅色，是為尿素酶試驗(yàn)陽性。7.尿素酶試驗(yàn)：尿素酶試驗(yàn)：（—）（+）尿素氨培養(yǎng)基變堿性（紅色，+）變形桿菌尿素酶(二)合成代謝產(chǎn)物及其醫(yī)學(xué)意義

1.熱原質(zhì)（pyrogen）2.毒素與侵襲性酶（toxinsandinvasiveenzymes）3.色素（pigments）4.抗生素（antibiotics）5.細(xì)菌素（bacteriocins）6.維生素（vitamin）

1、熱原質(zhì)（pyrogen)，又稱致熱原

概念：是細(xì)菌合成的一種注入人體或動物體內(nèi)能引起發(fā)熱的物質(zhì)。熱源質(zhì)體溫上升

特點(diǎn)：耐高溫消除方法：250℃高溫干烤；用吸附劑和特殊石棉濾板可吸附液體中的熱原質(zhì)；蒸餾法除之。2.毒素與侵襲性酶

毒素：包括內(nèi)毒素和外毒素，是細(xì)菌重要的致病物質(zhì)。

內(nèi)毒素(endotoxin)：G-菌細(xì)胞壁的脂多糖，菌體死亡崩解后游離出來；

外毒素(exotoxin)：多數(shù)G+菌和少數(shù)G-菌在生長繁殖過程中釋放到菌體外的蛋白質(zhì)，毒性強(qiáng)于內(nèi)毒素。侵襲性酶：亦為細(xì)菌重要的致病物質(zhì)，能損傷機(jī)體組織，促使細(xì)菌的侵襲和擴(kuò)散。3.色素某些細(xì)菌能產(chǎn)生不同顏色的色素，有助于鑒別細(xì)菌，有兩類：水溶性色素和脂溶性色素金黃色紅色檸檬色白色4.抗生素：某些微生物在代謝過程中產(chǎn)生一些能抑制或殺死某些其他微生物或腫瘤細(xì)胞的物質(zhì)，稱抗生素。5.細(xì)菌素：某些菌株產(chǎn)生的一類具有抗菌作用的蛋白質(zhì)，其作用范圍比抗生素狹窄，僅對與產(chǎn)生菌有親緣關(guān)系的細(xì)菌有殺傷作用。6.維生素：細(xì)菌在代謝過程中能產(chǎn)生一些維生素，除供自身所用外，還能分泌到周圍環(huán)境。一、培養(yǎng)細(xì)菌的方法

第四節(jié)細(xì)菌的人工培養(yǎng)1.提供必要的營養(yǎng)物質(zhì)和生長環(huán)境（酸堿度、滲透壓、溫度和氣體環(huán)境）2.選擇合適的接種和培養(yǎng)方法，常用兩種方法，即分離培養(yǎng)和純培養(yǎng)。二、培養(yǎng)基：由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)物質(zhì)。(一)根據(jù)培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成和用途不同，分以下幾類：1.基礎(chǔ)培養(yǎng)基(basicmedium)——含多數(shù)細(xì)菌生長繁殖所需的基本營養(yǎng)成分，也是配制特殊培養(yǎng)基的基礎(chǔ)。肉湯培養(yǎng)基2.增菌培養(yǎng)基(enrichmentmedium)：加入適合某些細(xì)菌生長而不利于其他細(xì)菌生長的營養(yǎng)物質(zhì)。

通用增菌培養(yǎng)基：專用增菌培養(yǎng)基（選擇性增菌培養(yǎng)基）：+基礎(chǔ)培養(yǎng)基+其他細(xì)菌生長所需生長因子或微量元素

3.選擇培養(yǎng)基(selectivemedium)——在培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì)，使之抑制某些細(xì)菌生長，而有利于另一些細(xì)菌的生長。

4.鑒別培養(yǎng)基(differentialmedium)——用于培養(yǎng)和區(qū)分不同細(xì)菌種類的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中加入了一些特定的作用底物和指示劑。5.厭氧培養(yǎng)基(anaerobicmedium)——專供厭氧菌的分離、培養(yǎng)和鑒別。常用：庖肉培養(yǎng)基(cookedmeatmedium)基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基石蠟普通肉渣+庖肉培養(yǎng)基(二)根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)，培養(yǎng)基可分：液體培養(yǎng)基+1.5-2.5%瓊脂固體培養(yǎng)基:細(xì)菌的分離培養(yǎng)0.3-0.5%瓊脂半固體培養(yǎng)基：用于大量繁殖細(xì)菌+動力檢查三、細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長情況1.在液體培養(yǎng)基中的生長情況菌膜菌沉淀均勻渾濁對照2.