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臨床生化檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識培訓(xùn)一、生化基礎(chǔ)知識二、生化儀器基礎(chǔ)知識三、部分生化項(xiàng)目的臨床意義本文檔僅供生化應(yīng)用工程師參考閱覽,更多專業(yè)知識請查閱后附參考文獻(xiàn)。肖自強(qiáng)2014-3-19生化基礎(chǔ)知識生化診斷試劑盒為由一定的化學(xué)品或者酶類組成的多成分混合試劑(Reagent),最終以水溶液的方式與待測物發(fā)生一系列化學(xué)或者生化反應(yīng),通過生成物或反應(yīng)物中某物質(zhì)的吸光度變化,測量待檢測物中某種特定物質(zhì)的含量。生化診斷試劑用于檢測樣本,包括:人體血清(主要)、血漿及尿液中的各種酶類和代謝產(chǎn)物,用于預(yù)測,診斷以及治療監(jiān)測,協(xié)助臨床醫(yī)生診治疾病提供數(shù)據(jù)參考。按功能分為:肝功、血脂、腎功、心肌、代謝、免疫&風(fēng)濕、離子&其他。試劑性能評價(jià)指標(biāo):試劑外觀2批間差3準(zhǔn)確度4精密度5線性(靈敏度)6抗干擾能力(特異性)7穩(wěn)定性試劑檢測原理(朗伯比爾定律):A=Kbc式中,A為吸光度;K為吸收系數(shù),是與入射輻射的波長及吸收物質(zhì)的性質(zhì)有關(guān)的常數(shù);b為液層厚度,單位為cm;c為吸收物質(zhì)的濃度。當(dāng)濃度的單位為mol/L時(shí),K的單位為L/mokcm,稱為摩爾吸收系數(shù),通常用W表示。摩爾吸收系數(shù)W表示物質(zhì)對某一波長的輻射的吸收特性。S愈大,表示物質(zhì)對某波長輻射的吸收力愈強(qiáng),因而分光光度法測定的靈敏度就愈高.理論值與實(shí)測值偏差的解釋:實(shí)測值偏離了朗伯比爾定律。偏離Lambert-Beer定律的因素:1復(fù)合光對Beer定律的偏離:吸收定律要求入射光為單色光,而分光光度計(jì)單色光的純度主要決定于色散元件及光路設(shè)計(jì),即使高精度的儀器,也得不到純單色光,而是波長寬度的復(fù)合光,其結(jié)果導(dǎo)致偏離LambertBeer定律。2雜散光的影響:雜散光(straylight)是進(jìn)入檢測器待測波長以外的光。主要來源于儀器色散元件表面的散射、單色器內(nèi)壁塵埃等。3狹縫寬度的影響:單色器設(shè)有進(jìn)、出口狹縫,狹縫愈窄,單色光愈純,吸光度增加,但輻射能減小,對弱吸收帶的測量有一定影響。定性分析時(shí),為提高分辨能力常采用較小的狹縫,而定量分析時(shí),在靈敏度允許的情況下,宜采用較大狹縫。當(dāng)出、入射狹縫寬度相等時(shí),狹縫寬度引起的誤差最小。4非吸收作用引起的誤差:.散射效應(yīng):光吸收定律只適用于均勻的吸收體系,如待測溶液是混濁的,當(dāng)光通過時(shí),將產(chǎn)生散射效應(yīng)。其結(jié)果使光通過吸收物質(zhì)的光程不固定,散射光的一部分和透射光一起進(jìn)入檢測器,導(dǎo)致偏離Beer定律。因此,免疫比濁法常用多點(diǎn)校準(zhǔn)來做標(biāo)準(zhǔn)曲線。.熒光效應(yīng):分子吸收輻射能后產(chǎn)生的激發(fā)態(tài)分子以重新發(fā)射輻射的方式回到基態(tài)而發(fā)射熒光。由于多數(shù)顯色體系熒光效應(yīng)很小,而且熒光發(fā)射是各向同性,只有一部分沿透射光方向進(jìn)入檢測器,使測量吸光度偏低。一般情況下,熒光效應(yīng)對分光光度法產(chǎn)生的影響較小。目前,多數(shù)光度計(jì)設(shè)有兩個樣品室,對有熒光試樣可置于離檢測器較遠(yuǎn)的樣品室,或在光路中插入適當(dāng)?shù)臑V光片以消除熒光效應(yīng)。5測定過程中產(chǎn)生的誤差:化學(xué)反應(yīng)引起的誤差,人為的誤差等,在此不作詳細(xì)解釋。1.7生化測定方法:臨床化學(xué)自動分析儀所涉及的測定方法包括終點(diǎn)測定法、連續(xù)監(jiān)測法、固定時(shí)間法等。1.8.1生化分析基本術(shù)語概述:1雙波長:由主波長和副波長構(gòu)成的兩個波長,測定樣品采用雙波長可以消除對實(shí)驗(yàn)的影響。主波長是指測定某物質(zhì)時(shí),生成的產(chǎn)物顏色對光吸收的特有波長。副波長是指測定某物質(zhì)時(shí),為消除其他干擾物質(zhì)在主波長造成測定干擾所設(shè)定的波長。2反應(yīng)杯空白:在特定波長下,光通過以蒸餾水或空氣為反應(yīng)體系所測得的吸光度值。3試劑空白:在各特定波長下,光通過以蒸餾水或生理鹽水為樣品和相應(yīng)測定項(xiàng)目試劑構(gòu)成的反應(yīng)體系所測得的吸光度值。4樣品空白:在各特定波長下,光通過以生物樣品和相應(yīng)測定項(xiàng)目不含有引起反應(yīng)的一種或多種成分的試劑構(gòu)成的反應(yīng)體系所測得的吸光度值;或由生物樣品和相應(yīng)測定項(xiàng)目試劑構(gòu)成的反應(yīng)體系產(chǎn)生反應(yīng)最初時(shí)間所測得的吸光度值。5終點(diǎn)法:這是最常用的分析法。因?yàn)樵摲ǔS袠?biāo)準(zhǔn)液,因此又稱比例終點(diǎn)法,是經(jīng)過一定反應(yīng)時(shí)間后,當(dāng)反應(yīng)達(dá)到平衡(終點(diǎn))時(shí)做到的一點(diǎn)分析法。一般是在一定溫度下,試劑與樣品經(jīng)過一定反應(yīng)時(shí)間,被送人比色系統(tǒng),然后檢測吸光度的變化,由微機(jī)系統(tǒng)處理計(jì)算和打印顯示出結(jié)果。其中又分一點(diǎn)終點(diǎn)和兩點(diǎn)終點(diǎn)法。6續(xù)監(jiān)測法:也叫速率法,此法通過測定酶所催化的反應(yīng)速度,間接計(jì)算出酶的含量,稱酶活性測定法。在酶促反應(yīng)過程中,不是任何時(shí)期的反應(yīng)速率都和酶濃度成正比。當(dāng)酶促反應(yīng)剛一開始,底物處于過量狀態(tài),酶與底物開始結(jié)合,生成復(fù)合物(ES),底物濃度開始下降,此時(shí)產(chǎn)物尚未生成。當(dāng)復(fù)合物(ES)分解,生成產(chǎn)物(P),酶促反應(yīng)速度急驟上升,經(jīng)過很短的作用時(shí)間后,產(chǎn)物的生成量或底物的減少量與反應(yīng)時(shí)間成線性關(guān)系,反應(yīng)速度保持恒定不變,這一時(shí)期稱為零級反應(yīng)期。隨酶促反應(yīng)繼續(xù)進(jìn)行,底物不斷消耗,酶促反應(yīng)條件逐漸變化,酶促反應(yīng)速度逐漸減慢,產(chǎn)物生成或底物減少量的變化曲線遂趨平坦,這一時(shí)期稱為一級反應(yīng)期。此時(shí)的反應(yīng)速率常常不能準(zhǔn)確反應(yīng)酶的含量。因此其測光點(diǎn)一般要求取在反應(yīng)達(dá)到平衡前。7兩點(diǎn)速率法:兩點(diǎn)速率法也叫固定時(shí)間法,對測定及標(biāo)準(zhǔn)采用兩個時(shí)間點(diǎn)測定。采用此方法的如肌酐(苦味酸法),目前多數(shù)自動分析儀還是用Jaffe氏反應(yīng)測肌酐,即肌酐能同堿性苦味酸鹽生成紅橙色化合物,這個反應(yīng)特異性不高,因?yàn)榫S生素C、丙酣酸、丙酣、葡萄糖、乙酷醋酸、果糖、氨基馬尿酸、蛋白質(zhì)及其他反應(yīng)產(chǎn)物亦能與堿性苦位酸鹽生成紅色化合物,血清中的這些假肌酐約含25%。但真性肌酐與苦味酸的反應(yīng)為快反應(yīng),假肌酐為慢反應(yīng),因此測試時(shí)測試時(shí)間一般在樣品與堿性苦味酸試劑混合后25秒和1分25秒在500nm處測吸光度變化。兩時(shí)間點(diǎn)的吸光度變化之差,則為特異反應(yīng)肌酐濃度。8普通免疫比濁與膠乳增強(qiáng)免疫比濁法:普通免疫比濁法是抗原與相應(yīng)的抗體直接結(jié)合形成的免疫復(fù)合物,在反應(yīng)液中具有一定的濁度,可由一般分光光度法進(jìn)行透射比濁( )測定,可用于某些蛋白質(zhì)和藥物濃度等的測定。該法須做多點(diǎn)校準(zhǔn),再經(jīng)非線性回歸,求出抗原或抗體的含量。膠乳增強(qiáng)免疫比濁法是將抗體吸附在大小適中、均勻一致的膠乳顆粒上,制成致敏的膠乳顆粒,當(dāng)遇到相應(yīng)抗原時(shí),發(fā)生交聯(lián)反應(yīng),形成抗原抗體復(fù)合物,膠乳顆粒發(fā)生凝集。單個膠乳顆粒在入射光波長之內(nèi)并不阻礙光線透過,兩個及其兩個以上膠乳顆粒凝聚時(shí)則使透過的光減少,其減少的程度與膠乳顆粒凝聚的程度呈正比,即與待測抗原量呈正比,由此可檢測樣本中的特定抗原含量。該法比普通免疫比濁敏感度高,試劑穩(wěn)定,個體免疫復(fù)合物對結(jié)果影響也小,因此結(jié)果穩(wěn)定、可靠,特異性好,精確度高。9參考物的量值溯源性:通過一條具有規(guī)定不確定度的不間斷的比較鏈,使測量結(jié)果或測量標(biāo)準(zhǔn)的值能夠與規(guī)定的參考標(biāo)準(zhǔn),通常是與國家標(biāo)準(zhǔn)或國際標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來的特性。10檢測限:是指檢測系統(tǒng)可檢測出的最低分析物濃度。又稱分析靈敏度。靈敏度與線性范圍:靈敏度與線性范圍有著緊密聯(lián)系,這也是跟生化儀的性能有關(guān)。靈敏度與線性范圍的取舍就要根據(jù)其醫(yī)學(xué)決定水平而定。一般儀器能測的光密度值最大在350。0假0設(shè)謀項(xiàng)目的醫(yī)學(xué)決定水平在0~1,0如0果1個單位濃度變化能引起儀器吸光度響應(yīng)量為10,0那0么它能測的濃度范圍為0~3,可5以看出,雖然其靈敏度很高,但在其檢測范圍沒有達(dá)到其醫(yī)學(xué)決定水平,即線性范圍太窄。相反,如果1個單位濃度變化能引起儀器吸光度響應(yīng)量為10,0那么它能測的濃度范圍為0~3,5這0個線性范圍是可以的。因此,靈敏度與線性的評價(jià),要根據(jù)其醫(yī)學(xué)決定水平而定。.常9用校準(zhǔn)方法:終點(diǎn)法或兩點(diǎn)速率法,必須通過使用標(biāo)準(zhǔn)液,建立一條標(biāo)準(zhǔn)曲線;速率法,采用標(biāo)準(zhǔn)液校正可消除系統(tǒng)誤差,也可直接輸入Factor值。校準(zhǔn)類型:空白定標(biāo):以水做標(biāo)準(zhǔn)液,消除試劑本身對測試的干擾;(酶類)兩點(diǎn)定標(biāo):以水作為零點(diǎn),標(biāo)準(zhǔn)液作為另一點(diǎn),建立標(biāo)準(zhǔn)曲線;(Y=AX+B)多點(diǎn)定標(biāo):兩個以上的標(biāo)準(zhǔn)液建立一條標(biāo)準(zhǔn)曲線;(LOGIT-LOG)參0考區(qū)間與醫(yī)學(xué)決定水平:臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果對被檢驗(yàn)者低正常還是異常,有何臨床意義,如何用檢驗(yàn)結(jié)果協(xié)助臨床醫(yī)生診斷和治療,這就涉及到參考區(qū)間和醫(yī)學(xué)決定水平了。參考區(qū)間大多是采用正態(tài)分布的原理制定,以的分布區(qū)間(一土)即為參考區(qū)間的上、下限,少數(shù)用百分位數(shù)來制定參考區(qū)間。不論采用什么方法,總有少數(shù)正常人的測定值落在異常范圍內(nèi)。因此,假性結(jié)果是避免不了的。當(dāng)結(jié)果接近上限或下限時(shí),不要輕易下正常或有病的結(jié)論,要根據(jù)被測者的其他表征綜合判斷或過一段時(shí)間復(fù)查后,再做分析。醫(yī)學(xué)決定水平是由 于年首先提出的。是指臨床上必須采取措施時(shí)的檢測水平。決定性水平是一個閥值,高于該值或低于該值,應(yīng)決定對患者采取適當(dāng)?shù)闹委煷胧at(yī)學(xué)決定水平可在疾病診斷中起著排除或確認(rèn)的作用,對某些疾病進(jìn)行分級或分類,或愈后做出估計(jì),來提醒醫(yī)生在臨床上做出相應(yīng)的處理方式。醫(yī)學(xué)決定水平與參考區(qū)間的區(qū)別在于,它不僅對健康人的數(shù)值進(jìn)行研究,以決定健康人的范圍,同時(shí)還對有關(guān)疾病的不同病情的數(shù)據(jù)進(jìn)行研究,以定出不同的決定性限值,以引導(dǎo)醫(yī)生采取不同的臨床措施。它的應(yīng)用可以克服只使用參考范圍的缺點(diǎn),使一個檢驗(yàn)結(jié)果對病人能起到提供診斷,處理依據(jù)的作用。酶1法檢測基本知識:酶是由活細(xì)胞產(chǎn)生并能在體內(nèi)起催化作用的,一類特殊蛋白質(zhì)。體內(nèi)幾乎所有的代謝反應(yīng)都是在不同的酶催化下進(jìn)行的。酶的催化效率高,對底物有嚴(yán)格的選擇性,酶非常不穩(wěn)定,酶濃度的變化是許多疾病的敏感指針,這是建立和發(fā)展診斷酶學(xué)的依據(jù)。用酶作試劑(工具酶)測定非酶物質(zhì)具有效率高、特異及易于實(shí)現(xiàn)自動分析的特點(diǎn),是目前臨床生化檢驗(yàn)的主流方法。酶促反應(yīng)速度的因素:包括酶的濃度、底物的濃度、激活劑與抑制劑、和溫度等。在研究某一因素對酶促反應(yīng)速度的影響時(shí),反應(yīng)系統(tǒng)中其他因素不變。酶促反應(yīng)中所指速度是初速度,因?yàn)檫@時(shí)的反應(yīng)速度與酶濃度成正比,可以避免產(chǎn)物及其他因素對反應(yīng)速度的影響。在建立定量測定酶活性的方法時(shí),需要研究酶促反應(yīng)的速度及影響此速度的因素,通常稱之為反應(yīng)動力學(xué)。酶.活2力測定酶的含量很低,除免疫學(xué)方法外,不能直接測定其含量,只能測其催化反應(yīng)過程中一定時(shí)間內(nèi)物質(zhì)變化的量,即酶促反應(yīng)速率,或稱酶的活力。要保證只有待測酶的量影響反應(yīng)速率,其他各種影響反應(yīng)速率的因素都在嚴(yán)格控制之下,并保持各測定間的一致性。一)酶促反應(yīng)的過程通過測定底物濃度的下降,或測定產(chǎn)物濃度的上升,可以追蹤酶反應(yīng)過程中底物轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物的過程。通常多測定產(chǎn)物的形成,因?yàn)闇y定產(chǎn)物從零或者從低濃度的增加,比測定高濃度底物的下降更可靠。典型的酶反應(yīng)過程曲線分為幾個時(shí)期。緊隨著加人血清或底物啟動反應(yīng)后,在出現(xiàn)明顯的變化前為延遲期;此期從幾秒到幾分鐘。隨后是底物和產(chǎn)物變化與時(shí)間成直線的時(shí)期,形成產(chǎn)物的速率恒定,此時(shí)期的速率為"反應(yīng)初速度"。此期底物也下降,但實(shí)際上反應(yīng)速度與底物濃無關(guān),對底物濃度而言,酶促反應(yīng)實(shí)際上是零級反應(yīng)。反應(yīng)曲線的直線期時(shí)間長短相差懸殊。緊跟著是反應(yīng)速率持續(xù)下降,進(jìn)入速度依賴于底物濃度的一級反應(yīng)期。在這一期中,底物濃度下降,逆反應(yīng)增加,抑制性產(chǎn)物蓄積,乃至酶本身進(jìn)行性的滅活等因素也起作用。最后,當(dāng)?shù)孜锲鸨M或達(dá)到平衡時(shí),反應(yīng)停止。在零級反應(yīng)期中,測定一定時(shí)間內(nèi)形成產(chǎn)物的量,是以此期中速率維持恒定為條件。否則表觀的反應(yīng)速率將不正比于酶濃度。也就是選擇的監(jiān)測點(diǎn)必須在反應(yīng)速率恒定區(qū)(零級反應(yīng)期)。在正常測定中,為了能縮短延遲期和延長線性期,不僅要適量的底物濃度,還要在試劑中加入某些激活劑和其他的輔助因子。以改善反應(yīng)進(jìn)程曲線。)固定時(shí)間法和連續(xù)監(jiān)測法在我國臨床實(shí)驗(yàn)室中,目前測定酶活性的方法,已從手工操作的固定時(shí)間法及兩點(diǎn)測定法過渡到連續(xù)監(jiān)測法。固定時(shí)間法在反應(yīng)過程中測定一點(diǎn)的吸光度;兩點(diǎn)測定法是在反應(yīng)開始及反應(yīng)經(jīng)一定時(shí)間后,分別測兩點(diǎn)的吸光度,根據(jù)兩點(diǎn)間吸光度的差值,推算酶的活力。固定時(shí)間法和兩點(diǎn)測定法都是在酶和底物孵育一段時(shí)間后測定總的變化。兩點(diǎn)測定法也應(yīng)屬于酶動力學(xué)測定方法,但"動力學(xué)測定法"這一術(shù)語,習(xí)慣上僅指多點(diǎn)測定的動力學(xué)方法,即所謂速率法或連續(xù)監(jiān)測法,不論用手工法或自動法。固定時(shí)間法和兩點(diǎn)測定法可能會有幾種誤差:酶活力非常高的樣品,由于底物消耗速度快,反應(yīng)很快呈現(xiàn)遲緩或停止;有一些反應(yīng)類型延遲期長;某些標(biāo)本的反應(yīng)曲線可能是非線性的;活力高的標(biāo)本,超出了限定的活力測定范圍,若稀釋標(biāo)本可能會引起催化活力不成比例的變化。由于光度計(jì)及方法學(xué)的改進(jìn),可以縮短孵育時(shí)間,增加酶活力測定范圍,縮短延遲期,增加線性期,使固定時(shí)間法仍發(fā)揮重要作用;尤其在中小醫(yī)院實(shí)險(xiǎn)室中更有實(shí)用價(jià)值,甚至一部分生化分析儀也采用了固定時(shí)間法。11酶.法3分析酶法分析即酶作為分析試劑,有利于提高測定結(jié)果的特異性;不需要先將測定的物質(zhì)分離和提純;可以直接分析血清這樣復(fù)雜的濡合物。具有絕對特異性的酶,即只作用于某一種物質(zhì)的酶,特別適合分析用。尿酸氧化酶、尿素酶、葡萄糖氧化酶特異性高。但實(shí)際上不能都如此。因此,必須了解酶對底物的特異性,從而預(yù)料可能發(fā)生的干擾反應(yīng)并設(shè)法糾正。在以酶作分析試劑測定某-物質(zhì)時(shí),也可用偶聯(lián)反應(yīng);而且偶聯(lián)反應(yīng)的特異性可以增加反應(yīng)全過程的特異性。如用己糖激酶 法)葡萄糖,也作用于果糖產(chǎn)生相應(yīng)的磷酸醋但偶聯(lián)的指示反應(yīng)是 。它特異地催化葡萄糖磷酸的反應(yīng),用此酶測定己糖激酶催化反應(yīng)的產(chǎn)物,明顯地提高了偶聯(lián)系統(tǒng)的特異性。)傳統(tǒng)的酶法分析非酶物質(zhì)方法以酶作試劑進(jìn)行分析的方法有兩種。廣泛應(yīng)用的第一種方法,是使反應(yīng)進(jìn)行到完全,使全部底物轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物,稱"終點(diǎn)"法。這是最理想的分析類型。但是,在非理想的平衡時(shí),底物遠(yuǎn)未完全轉(zhuǎn)變。此時(shí)需增加酶或非酶的反應(yīng),以轉(zhuǎn)變或捕獲第一個反應(yīng)的產(chǎn)物,使反應(yīng)在所要求的方向上進(jìn)行到完全。如用乳酸脫氫酶測定乳酸中,形成的丙酣酸,通過加入硫酸阱形成腺而捕獲丙酣酸,使反應(yīng)達(dá)到完全。第二種方法是動力學(xué)法,即間隔一定的時(shí)間測定底物的變化量(=速率)。由酶促反應(yīng)進(jìn)程曲線已知,開始為高底物濃度由酶催化的反應(yīng),首先服從零級反應(yīng),然后隨著底物濃度減低,進(jìn)入一級反應(yīng)期。對于任何一級反應(yīng),反應(yīng)開始后在一給定時(shí)間的底物濃度為是最初的底物濃度,是自然對數(shù)的底,是速率常數(shù)。在到的固定時(shí)間間隔中,底物濃度的變化量△ 與 的相互關(guān)系為△也即在一固定時(shí)間間隔中,底物濃度的變化量正比于底物的初濃度。這是一級反應(yīng)的通性。對于酶的反應(yīng),當(dāng) 《時(shí),米氏方程簡化為K為一級速度常數(shù)。在反應(yīng)過程中的兩個固定時(shí)間,測量與底物濃度性質(zhì)相關(guān)的(如光吸收)的方法為"兩點(diǎn)"動力學(xué)法。從理論上講,這是用酶法測定底物的最準(zhǔn)確的方法;但方法學(xué)上比平衡法要求高,所有影響反應(yīng)速率的因素如、溫度及酶量必須在兩點(diǎn)分析中保持恒定,并準(zhǔn)確定時(shí)。必須用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校正。為保證一級反應(yīng)條件,底物濃度必須低至小于 。酶對底物的要高,以便測出較寬范圍的底物濃度。為增加試劑酶的表現(xiàn)值,可引進(jìn)競爭性抑制劑。此外,被測非酶物質(zhì)作為酶促反應(yīng)激活劑者,則用連續(xù)監(jiān)測法,如無機(jī)離子鉀和鈣的酶法測定。酶循環(huán)法分析非酶物質(zhì)酶循環(huán)法 ,是利用酶的底物特異性放大靶物質(zhì)被測物)以提高靈敏度的測定方法。只循環(huán)靶物質(zhì),減少了樣品存在的其他物質(zhì)對測定的干擾,因此不需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或?qū)Π形镔|(zhì)進(jìn)行提取,而且不需要特殊設(shè)備,是一種很有前途的測定技術(shù)。利用酶循環(huán)法測定的項(xiàng)目主要是總膽汁酸()a二、生化儀器基礎(chǔ)知識2.1檢驗(yàn)科常見全自動生化分析儀:日立:7100、7170、7080、7180、7600,奧林巴斯:AU400、AU640、AU2700、AU5400貝克曼:CX3、4、5、7、9、LX20、DXC800,AU480,AU680,AU5800東芝:TBA-40、TBA-120雅培:2000、C8000、AEROSET拜爾:ADVIA1200、ADVIA1650、ADVIA24002.2下面簡單介紹幾個常用品牌的相關(guān)儀器性能?日立:現(xiàn)在各醫(yī)院所用日立儀器的型號主要為7180、7600,除7080為31個測光點(diǎn)外,其余都為34點(diǎn)。以下為7180儀器主要性能介紹:分析速度:800個測定/小時(shí)(最大),約4.5秒加樣一次可分析項(xiàng)目:86項(xiàng)(帶ISE的話,最大可達(dá)89項(xiàng)),計(jì)算項(xiàng)目8項(xiàng)樣本量:1.5~35.0p1,0.1pl可調(diào)試劑量:20~270p1,印1可調(diào)總反應(yīng)體積:120~300P1,奧林巴斯:奧林巴斯:AU400、AU640、AU2700、AU5400奧林巴斯生化儀已經(jīng)被貝克曼收購,除AU400、AU640、AU2700、AU5400外,還有一款A(yù)U680,其操作界面為貝克曼公司設(shè)計(jì),但主要性能跟以往的AU640基本保持光源燈:保質(zhì)期750小時(shí)比色杯:20只X8組共160只,依據(jù)杯空白值進(jìn)行更換測光系統(tǒng):采用凹面蝕刻光柵的后分光、雙波長測定方式12個波長:340、405、450、480、505、546、570、600、660、700、750、800nm穩(wěn)定性高且可有效補(bǔ)償樣本混濁、溶血、黃疸及電源電壓變動引發(fā)的干擾測定過程:全反應(yīng)監(jiān)測,10分鐘測定34次吸光度值。15分鐘測定53次吸光度值依據(jù)實(shí)驗(yàn)要求選擇相應(yīng)測光點(diǎn)的吸光度值計(jì)算結(jié)果樣本容器:樣本針有液面探測裝置,可使用原始采血管離出血清后直接上機(jī)測定試劑:同一項(xiàng)目最多可加入四步試劑,兩試劑艙位置各45個,溫度5~15℃。

一致。測光點(diǎn)為27個,R2試劑在10~11點(diǎn)加入。以下為AU400/600/640等型號設(shè)參數(shù)需了解的儀器性能:Samplevol(樣品量):2~50,可以按0.5ul為單位增減。Reagent1vol(第一試劑量):25-300,可以按1ul為單位增減。Dilvol(稀釋液-吐水量):一般用濃縮試劑時(shí)才用。Reagent2vol(第二試劑量):25-300,可以按1為單位增減。Dilvol(稀釋液-吐水量):一般用濃縮試劑時(shí)才用。第二試劑是固定的10-11點(diǎn)之間加入的。測定波長共有13種:340,380,410,450,520,540,570,600,660,700,750,800nm。Method(方法學(xué))共六種:End,Rate,Fixed;End1,Rate1,Fixed1。前三種與后三種的差別為:前三種是以試劑為空白的,后三種是以比色杯為空白的。Reaction(反應(yīng)方向):-,+。End與Fixed法不起作用,但是Rate法一定要輸正確。Linearity(線性):Fst,Lst,Rate法才輸入,一般國產(chǎn)試劑30%;進(jìn)口試劑:15%。No-Lag-Time:Rate法才輸入,在讀點(diǎn)期內(nèi),如果反應(yīng)太快,超過線性(Linearity限)儀器會自動用線性比較好的那一段來計(jì)算。試劑空白OD限:Fst指的是0點(diǎn),Lst指的是27點(diǎn)。只對Rate法有用,一般向下的反應(yīng),輸0.9—2.5,向上的反應(yīng)-2.0—0.8。下圖顯示屏幕上的基本顯示模型Sample:Volume3-0uLDilution| 0疝Pre-DilutionRate:Reagents:RIVolumeISOuLDilution| 0uLMinODMaxODR2VolumeTerNo.Dihition0uLNo-Lat-TinieOnboardStabilitxPenod:\SelectfromlistdisplayedbySpacekeyorclickthemouse.ALARMCLEARReactionSlope:Wavelength:Method:Sec.MeasuringPoint1:FirstMeasuringPoint2:LincaritxReagentODLimir:DynamicRausu[end2JiRIRoudne(P)Paramder(AjAiixiliaryCM)Maintenance(UmerjlHogSample:Volume3-0uLDilution| 0疝Pre-DilutionRate:Reagents:RIVolumeISOuLDilution| 0uLMinODMaxODR2VolumeTerNo.Dihition0uLNo-Lat-TinieOnboardStabilitxPenod:\SelectfromlistdisplayedbySpacekeyorclickthemouse.ALARMCLEARReactionSlope:Wavelength:Method:Sec.MeasuringPoint1:FirstMeasuringPoint2:LincaritxReagentODLimir:DynamicRausu[end2JiRIRoudne(P)Paramder(AjAiixiliaryCM)Maintenance(UmerjlHog嬴05/13Z201346.GALB?LXHF -ISECalculatedTests ?LXHF -ISECalculatedTests 1iRange _L 1R1(R11)120uLRl-2■血R2(R2-1)-40uLType\onePri.600-0.100045.10000.001 (?貝克曼:CX3、4、5、7、9、LX20、DXC800,貝克曼儀器是作為急診用的優(yōu)先選擇儀器,其有較高的準(zhǔn)確度,精密度和穩(wěn)定性,抗交叉污染也是一流的,但不適合常規(guī)大量樣本的檢測,其試劑消耗量也是現(xiàn)有儀器中比較大的。貝克曼儀器波長數(shù)為10個,340,380,410,470,520,560,600,650,670,700nm。監(jiān)測時(shí)間不是以周期(點(diǎn))計(jì),而是以秒來計(jì),每8s測一次吸光度。加樣時(shí)間為第0s,第二次灌注時(shí)間為-180s,或9~738s。貝克曼儀器必須用兩個波長測定,否則儀器不運(yùn)行,在設(shè)參數(shù)時(shí)必須符合這一規(guī)律。

?拜爾(西門子):,2測4試0速0度小時(shí),比色法時(shí),電解質(zhì)60測0試/小時(shí)。其中有波長:個。測試方法:終點(diǎn)法()、速率法()、兩點(diǎn)速率法()及多點(diǎn)均相免疫分析。微量取樣技術(shù):所有的樣本按 比例進(jìn)行預(yù)稀釋處理(樣品 生理鹽水)一般可作15個項(xiàng)目分析。微量技術(shù)加試劑保證每測試平均試劑體積為80U1-120U1,理論上1mL的試劑能做12.5個測試,最低也能做到8個測試。體現(xiàn)了其最大優(yōu)點(diǎn)就是省試劑?!鯮equestCalibrationMairit.微量技術(shù)加試劑保證每測試平均試劑體積為80U1-120U1,理論上1mL的試劑能做12.5個測試,最低也能做到8個測試。體現(xiàn)了其最大優(yōu)點(diǎn)就是省試劑。■RequestCalibrationMairit.ReagentBultipointCaiSetting;二J"JDPPprobedidnotdetectsampleOae-PomtCalSettingVpIPovnrStandnrdj(processingReac1'1.0000.tingI一]2.3不同型號的生化儀每毫升試劑測試數(shù)是不一樣的,以下是各品牌的理論測試數(shù):■7170:180-380ul5.5T/ml■7060:250-500ul4T/ml■AU400:150-350ul6.6T/ml■BECKMAN:200-330ul5T/ml■TBA-40:120-360ul8.3T/ml■TBA-120:80-360ul12.5T/ml■ADVIA2400:80-120ul12.5T/ml■進(jìn)口儀器4-5人份/毫升;國產(chǎn)儀器3-4人份/毫升三、各生化項(xiàng)目的臨床意義及其檢測原理:3.肝1功能測定項(xiàng)目(15項(xiàng))血清總膽汁酸B膽汁酸是由膽固醇在肝臟中分解代謝所生成的,肝膽、腸、門靜脈都參與膽汁酸的自主循環(huán)過程。膽汁酸主要存在于腸肝循環(huán)系統(tǒng)并通過再循環(huán)起一定的保護(hù)作用。只有一少部分膽汁酸進(jìn)入外周循環(huán)。促進(jìn)膽汁酸肝腸循環(huán)的動力是肝細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)素吸收膽汁酸并將其分泌入膽汁,經(jīng)膽囊誘導(dǎo)的膽囊收縮,小腸的推進(jìn)蠕動,回腸粘膜的主動運(yùn)輸從血液經(jīng)門靜脈流入。血清中膽汁酸的水平是反映肝臟損傷的重要指征,一旦肝細(xì)胞發(fā)生病變,血中膽汁酸濃度極易升高。急性肝炎、慢活肝、肝硬化、肝癌, 結(jié)果明顯升高。與比較,急性肝炎、慢性活肝、都較敏感,但肝硬化、肝癌兩種結(jié)果差異明顯:陽性率高達(dá)5而陽性率僅為0因此, 測定用于監(jiān)測慢性肝病價(jià)值很大。其測定方法簡單,是一項(xiàng)很具實(shí)用價(jià)值的肝功能診斷指標(biāo)。檢驗(yàn)原理血清中的膽汁酸(a羥類固醇)會被a羥類固醇脫氫酶(a )及0硫煙酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型 特異性地氧化,生成酮類固醇,同時(shí)被還原成B硫煙酰胺腺嘌呤二核苷酸還原型 -新生成的酮類固醇在a羥類固醇脫氫酶(a)及|3煙酰胺腺嘌呤二核苷酸還原型 存在下,還原成膽汁酸,同時(shí)氧化成B煙酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化型(D通過酶的循環(huán)反應(yīng),微量膽汁酸的量被放大。在處測定 吸光度的變化值,可求得血清中膽汁酸的含量。谷丙轉(zhuǎn)氨酶/丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 、又稱谷丙轉(zhuǎn)氨酶,主要存在于組織細(xì)胞中,正常狀況下只有極少量釋放入血液中,所以此酶在血清中活性很低。當(dāng)組織發(fā)生病變時(shí),組織細(xì)胞中就大量釋放于血液,使血清中該酶的活性升高。血清中主要來源于肝臟,各種肝炎活動期、肝癌、肝硬化和阻塞性黃疸時(shí)的活性顯著增高,心肌梗塞時(shí)的活性僅有輕度增高。檢驗(yàn)原理:本法為推薦的測定丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的動力學(xué)方法,在速率法測定中酶偶聯(lián)反應(yīng)為:丙氨酸酮戊二酸—丙酮酸谷氨酸丙酮酸 ―乳酸波長下檢測 的氧化速率,吸光度的下降速率與 活性成正比。谷草轉(zhuǎn)氨酶 :天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 ,又稱谷草轉(zhuǎn)氨酶,此酶在組織中分布很廣,如心肌、橫紋肌、肝臟,其中心肌含量最高。心肌梗死后6-1小2時(shí)開始增高,小時(shí)達(dá)最高值, 天恢復(fù)正常。肝炎時(shí), 和一樣明顯升高,急性期由于清除率較慢,往往大于活力?;謴?fù)時(shí)也是較慢, 比值小于1如轉(zhuǎn)氨酶升高,且比值大于常說明有慢性肝炎的可能,肝硬化則比值明顯升高。因此,活性的增高意味著心肌或肝細(xì)胞損害的發(fā)生。檢驗(yàn)原理本法為 推薦的測定天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的動力學(xué)方法,在速率法測定中酶偶聯(lián)反應(yīng)為:天門冬氨酸a酮戊二酸草酰乙酸 谷氨酸草酰乙酸 蘋果酸Y谷氨酰轉(zhuǎn)移酶Y:Y主要用于診斷肝膽疾病。Y明顯增高見于原發(fā)繼發(fā)性肝癌、阻塞性黃疸、膽汁性肝硬化、胰頭癌、肝外膽道癌等。輕度或中度增高見于傳染性肝炎、肝硬化、胰腺炎以及嗜酒和長期服用某些藥物(如苯巴比妥)者,在解釋酶活性增高的原因時(shí)應(yīng)全面考慮。檢驗(yàn)原理 谷氨酰羧基硝基苯胺雙甘氨肽」 谷氨酰雙甘氨肽氨基硝基苯甲酸堿性磷酸酶 :骨骼系統(tǒng)疾患如纖維骨炎、變形性骨炎、成骨不全癥、骨質(zhì)軟化癥、佝僂病、轉(zhuǎn)移性骨瘤和骨折愈合期等可使 活性增高。肝膽疾患如阻塞性黃疸、急性或慢性黃疸型肝炎、肝癌和肝膿腫等,以及甲狀腺功能亢進(jìn)、妊娠后期等均可使 活性增高。而重癥慢性腎炎、兒童甲狀腺功能不全、貧血、惡病質(zhì)等則使 活性下降。檢驗(yàn)原理 推薦的標(biāo)準(zhǔn)化測定方法,其原理是以磷酸對硝基苯酚一為底物,氨基 甲基 丙酮 為磷酸酰基的受體物質(zhì),增進(jìn)酶促反應(yīng)速率。一在堿性溶液中為無色,在催化下,一分裂出磷酸基團(tuán),生起游離的對硝基苯酚一,后者在堿性溶液中轉(zhuǎn)變成醌式結(jié)構(gòu),呈現(xiàn)較深的黃色。在波長 處監(jiān)測吸光度增高速率,計(jì)算活性單位。白蛋白:血清白蛋白在肝臟合成。在營養(yǎng)不良的病人中可看到很低水平的血漿白蛋白。另外,血液稀釋或由于營養(yǎng)不良,肝臟疾病使合成白蛋白能力下降,或由于腎病綜合癥、蛋白丟失性腸道疾病等均可導(dǎo)致低白蛋白。高白蛋白血癥則常見于脫水或血液濃縮。檢驗(yàn)原理在 的酸性條件下,白蛋白作為一種陽離子,結(jié)合陰離子染料溴甲酚綠,生成藍(lán)綠色復(fù)合物,在波長 處有吸收峰。其吸光度與白蛋白濃度成正比,與同樣處理的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)比較,可求得血清中白蛋白的含量??偟鞍祝貉褐兴衷黾?,營養(yǎng)不良和消耗增加,肝臟疾病以及腎病綜合癥等均可導(dǎo)致總蛋白水平下降。脫水癥及免疫球蛋白增加的疾病則可使血清總蛋白水平增高。檢驗(yàn)原理:在堿性溶液中,血清蛋白與二價(jià)銅離子反應(yīng)生成紫色絡(luò)合物(雙縮脲反應(yīng)),顏色深淺與總蛋白的濃度成正比例關(guān)系??偰懠t素T直接膽紅素:膽紅素與重氮化對氨基苯磺酸()反應(yīng)生成一種紅色偶氮染料,在5波長處染料的吸光度與樣本中膽紅素的濃度成正比。水溶性膽紅素葡萄糖醛酸直接與重氮化對氨基苯磺酸反應(yīng),而白蛋白結(jié)合的間接膽紅素只有在促進(jìn)劑作用下才能反應(yīng),總膽紅素=直接膽紅素+間接膽紅素。檢驗(yàn)原理膽紅素與重氮化對氨基苯磺酸()反應(yīng)生成一種紅色偶氮染料,在5波長處染料的吸光度與樣本中膽紅素的濃度成正比。水溶性膽紅素葡萄糖醛酸直接與重氮化對氨基苯磺酸反應(yīng),而白蛋白結(jié)合的間接膽紅素只有在促進(jìn)劑作用下才能反應(yīng),總膽紅素=直接膽紅素+間接膽紅素。a巖藻糖苷酶:是溶酶體酶,其作用是分解巖藻糖甘油結(jié)合物。血清a巖藻糖苷酶( 是肝細(xì)胞肝癌診斷的一個新標(biāo)記物。在甲胎蛋白( 陰性的原發(fā)性肝癌病例中,大約有0?%出現(xiàn)陽性結(jié)果,而且小細(xì)胞肝癌病人血清的陽性率高于。同時(shí)測定與,可使原發(fā)性肝癌的陽性檢出率從單獨(dú)測定的%左右提高到?4。因此,檢測血清活性,對肝癌的早期診斷和肝癌高發(fā)人群的篩查均有重要意義。檢驗(yàn)原理氯硝基苯酚a巖藻吡喃糖苷在酶的水解作用下生成氯硝基苯酚和a巖藻糖,可用速率法監(jiān)測氯硝基苯酚,5波長處的吸光率的上升速率。反應(yīng)速率與a巖藻糖苷酶的含量成正比,可計(jì)算出樣本中a巖藻糖苷酶的活力。5‘核苷酸5‘NT:5'NT是一種特殊的水解酶。能特異性的將次黃嘌呤核苷酸水解為次黃苷和磷酸,此酶廣泛分布在人體和動物的組織中,5’NT經(jīng)肝細(xì)胞膜進(jìn)入膽汁,隨之進(jìn)入血清中,是檢測肝膽疾病的重要指標(biāo)。肝內(nèi)外膽管阻塞,肝癌和伴隨循環(huán)轉(zhuǎn)移的乳房切除術(shù)后的病人此酶升高明顯。診斷肝膽疾病和肝癌,5’NT較其他酶類更敏感。檢驗(yàn)原理:次黃嘌呤核苷酸 5'NT次黃苷磷酸—次黃苷磷酸核苷酸磷酸化酶次黃嘌呤核酸磷酸次黃嘌呤 黃O吟氧化酶尿酸—T 紅色醌類—腺苷脫氨酶D 活性是反映肝損傷的敏感指標(biāo),可作為肝功能常規(guī)檢查項(xiàng)目之一,與或Y 等組成肝酶譜,能較全面地反映肝臟病的酶學(xué)改變。血清中活性的測定可①用于判斷急性肝損傷及殘留病變;②協(xié)助診斷慢性肝病;③有助于肝纖維化的診斷④有助于黃疸的鑒別: 在良惡性難辨的滲出液鑒別診斷上有重要價(jià)值。結(jié)核性胸腹水活性顯著增高,癌性胸腹水不增高。⑤此外,腦脊液檢測可作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病診斷和鑒別診斷的重要指標(biāo),結(jié)核性腦膜炎活性顯著增高,病毒性腦炎不增高,顱內(nèi)腫瘤及中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病稍增高。檢驗(yàn)原理:本方法原理反應(yīng)方程式如下:腺苷 1H次黃苷 N次黃苷 __NP次黃嘌呤一磷酸核苷次黃嘌呤 H尿酸 DT醌55酶解腺苷產(chǎn)生次黃苷,再應(yīng)用嘌呤核苷磷酸化酶 N酶解次黃苷產(chǎn)生次黃嘌呤,然后通過黃嘌呤氧化酶 的作用,生成,再在過氧化物酶 作用下生成醌色素。通過測22量55處吸光度上升的速度,計(jì)算的活性大小。膽堿酯酶 H膽堿酯酶可用于有機(jī)磷殺蟲劑和戰(zhàn)爭劑急慢性中毒的診斷。在病情嚴(yán)重的肝炎患者中,約有五分之四的病人膽堿酯酶降低至正常的60,%危重病人可降至正常的10以%內(nèi),甚至完全缺乏。另外,慢性活動型肝炎、肝硬化均可導(dǎo)致膽堿酯酶活力下降。檢驗(yàn)原理:膽堿酯酶催化水解丁酰硫代膽堿酯酶形成膽堿酯酶和丁酸鹽。黃色三價(jià)鐵氰化鉀轉(zhuǎn)化為無色二價(jià)亞鐵氰化鉀,吸光度降低程度與樣本中膽堿酯酶活性成正比關(guān)系。單胺氧化酶A單氨氧化酶廣泛存在于體內(nèi)各組織中,以肝、腎、腦等組織為最多,臨床上常用來觀察肝臟纖維化的程度。據(jù)報(bào)道,在腹腔鏡觀察下肝臟表面的結(jié)節(jié)形成與單氨氧化酶活性相平行,80以%上的肝硬化單氨氧化酶增高。急性肝炎或暴發(fā)性肝炎有壞死時(shí),肝細(xì)胞線粒體大量破壞,單氨氧化酶血濃度上升。檢驗(yàn)原理:基質(zhì)中的芐胺在血清單氨氧化酶()的作用下,生成氨,生成的氨在作用下與a酮戊二酸和輔酶反應(yīng)。通過測定輔酶吸光度下降的變化測定血清 的活性。血氨M血氨是正常體內(nèi)代謝產(chǎn)物。來源于腸道產(chǎn)氨、腎臟泌氨、肌肉產(chǎn)氨等。機(jī)體可通過合成尿素、谷氨酸、谷氨酰胺,以及經(jīng)腎臟排出、肺臟呼出清除多余的氨來保持體內(nèi)含量穩(wěn)定。肝功能衰竭時(shí),肝合成尿素能力下降,或因門體側(cè)支循環(huán),腸道產(chǎn)氨增多直接進(jìn)入體循環(huán),使血氨增高。增高:見于肝昏迷、重癥肝炎、肝腫瘤、休克、尿毒癥、有機(jī)磷中毒、先天性高氨血癥及嬰兒暫時(shí)性高氨血癥。減低:見于低蛋白飲食、貧血等。檢驗(yàn)原理:a本法測定血漿氨具有特異、簡便、快速等優(yōu)點(diǎn)。通過谷氨酸脫氫酶( )的作用,還原成為,從而引起 處吸光度的下降,反應(yīng)所產(chǎn)生的吸光度變化和樣品中氨的含量成正比。測定 處的吸光度變化量,即可計(jì)算出樣品中氨的濃度。.血2脂類測定項(xiàng)目(9項(xiàng))甘油三酯:甘油三酯升高:是冠心病的誘因之一??梢鸸跔顒用}粥樣硬化、心肌梗塞、糖尿病、原發(fā)性高血脂癥、肥胖癥、急性胰腺炎、膽道梗阻、極度貧血等。甘油三酯降低:有嚴(yán)重營養(yǎng)不良,脂肪消化吸收障礙,甲亢等。檢驗(yàn)原理:甘油三酯經(jīng)酯酶水解被測定,生成的過氧化氫,4-氨基安替比林和4-氯酚在過氧化物酶催化下生成醌亞胺。有色物質(zhì)造成吸光度的改變與甘油三酯的濃度成正比。膽固醇O長期的高膽固醇、高飽和脂肪和高熱量飲食,遺傳因素、缺少運(yùn)動、腦力勞動、精神緊張等可使膽固醇升高;遺傳因素、甲亢、營養(yǎng)不良、慢性消耗性疾病等可使膽固醇降低。檢驗(yàn)原理:膽固醇經(jīng)酶水解和氧化被測定。在酚和過氧化物酶存在情況下,過氧化氫和4-氨基安替比林形成有顏色的醌類物質(zhì)。高密度脂蛋白膽固醇 L高密度脂蛋白膽固醇被視為防止冠心病的一種保護(hù)性脂類成分,與低密度脂蛋白膽固醇一起對冠心病的危險(xiǎn)因素進(jìn)行評價(jià)。檢驗(yàn)原理乳糜微粒,極低密度脂蛋白膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇通過與抗人B脂蛋白抗體反應(yīng)被特異性消除和破壞,在過氧化氫酶作用下水解。剩余的高密度脂蛋白膽固醇在加入特異性的表面活化劑后經(jīng)膽固醇脂酶 及膽固醇氧化酶 等特異的酶促反應(yīng)被測定。通過對藍(lán)色結(jié)合物吸光度的測量對應(yīng)得出的濃度。這種方法要比其它檢測方法更加特異。低密度脂蛋白膽固醇 L低密度脂蛋白膽固醇 被認(rèn)為是導(dǎo)致冠心病)的脂質(zhì)成份與高密度脂蛋白膽固醇 )同時(shí)檢測,用于冠心病的診斷和風(fēng)險(xiǎn)評估。檢驗(yàn)原理:本檢測中第一步反應(yīng)通過酶反應(yīng)特異性去除乳糜微粒、極低密度脂蛋白和高密度脂蛋白膽固醇,保護(hù)不與酶進(jìn)行反應(yīng)。第一步: 、 、 _表面活性劑膽甾烯酮脂肪酸過氧化物酶第二步:通過酶反應(yīng)和特殊的表面活性劑測定剩下的低密度脂蛋白膽固醇。通過對藍(lán)色結(jié)合物吸光度的測量,得出的濃度。表面活性劑膽甾烯酮脂肪酸色原過氧化物酶有顏色的醌類物質(zhì)載脂蛋白P載脂蛋白的測定是評價(jià)心血管疾病危險(xiǎn)因素的指標(biāo),對于發(fā)現(xiàn)和診斷載脂蛋白異常,研究載脂蛋白在脂類代謝和動脈粥樣硬化的發(fā)生有重要意義。I和 11一起占蛋白的,因此,血清中1可以代表水平,與呈明顯正相關(guān)。 I降低主要見于高脂血癥、冠心病、腦血管病、 o缺乏癥、家族性低a脂蛋白血癥、魚眼病等。檢驗(yàn)原理:當(dāng)樣品與緩沖液和抗體混合,樣品中的載脂蛋白缺1與試劑中的抗人載脂蛋白缺抗體特異性結(jié)合,形成濁度增加,通過測定濁度的透光率判斷樣品中的載脂蛋白缺1含量。載脂蛋白 :載脂蛋白的測定是評價(jià)心血管病危險(xiǎn)因素的指標(biāo),對于發(fā)現(xiàn)和診斷載脂蛋白異常,研究載脂蛋白在脂代謝和動脈粥樣硬化的發(fā)生有重要意義。是的主要蛋白質(zhì),因此,血清中 主要代表水平,與一成顯著正相關(guān)。高是冠心病的危險(xiǎn)因素,也是較好的動脈粥樣硬化標(biāo)志物。銀屑病患者 也可升高。檢驗(yàn)原理:當(dāng)樣品與緩沖液和抗體混合,樣品中的載脂蛋白脂與試劑中的抗人載脂蛋白脂抗體特異性結(jié)合,形成濁度增加,通過測定濁度的透光率判斷樣品中的載脂蛋白脂含量。脂蛋白() ():是含有獨(dú)自的載脂蛋白的脂蛋白,脂質(zhì)組成結(jié)構(gòu)與極其相似,密度位于低密度脂蛋白和高密度脂蛋白之間。 年發(fā)現(xiàn) 時(shí),因其病理意義不明,未被引起重視。 年發(fā)現(xiàn) 的一級結(jié)構(gòu)與纖溶酶原部分相同,作為動脈粥樣硬化的獨(dú)立因子越來越受到人們的重視。 ()水平的差異是由遺傳因素決定的,受生活方式影響并不大。血清中高濃度的()可用為動脈粥樣硬化和冠心病危險(xiǎn)的一種有意義的指標(biāo)。流行病學(xué)研究表明血清膽固醇正常,而血清脂蛋白()水平超過 的人患冠心病的危險(xiǎn)增加倍。如果和()水平同時(shí)升高其危險(xiǎn)性增加8倍。檢驗(yàn)原理:當(dāng)樣品與緩沖液和抗體混合,樣品中的脂蛋白()與試劑中的抗人脂蛋白()抗體特異性結(jié)合,生成不溶性的沉淀物,引起濁度的增加,通過測定濁度的透光率判斷樣品中的脂蛋白()含量。游離脂肪酸 :游離脂肪酸簡稱 ,存在于人體內(nèi)的脂質(zhì)( )i它是熱量的直接來源:游離脂肪酸是中性脂肪分解成的物質(zhì)。當(dāng)肌肉活動所需能源--肝醣耗盡時(shí),脂肪組織會分解中性脂肪成為游離脂肪酸來充當(dāng)能源使用。所以,游離脂肪酸可說是進(jìn)行持久活動所需的物質(zhì)。增高:常見于肥胖、肢端肥大癥、糖尿病、甲狀腺功能亢進(jìn)、心肌梗死、嚴(yán)重肝病等。降低:常見于甲狀腺功能低下、艾迪生病、腦下垂體功能不全等。檢驗(yàn)原理:游離脂肪酸和輔酶缺在乙酰輔酶缺合成酶的作用下反應(yīng)生成乙酰輔酶缺。乙酰輔酶在乙酰輔酶氧化酶的作用下生成 ,隨后通過 底物在過氧化物酶的作用下生成有色產(chǎn)物, 時(shí)紅色染料的吸光度與樣本中游離脂肪酸的濃度成正比。磷脂 i人體所有細(xì)胞中都含有磷脂,它是維持生命活動的基礎(chǔ)物質(zhì)。磷脂對活化細(xì)胞,維持新陳代謝,基礎(chǔ)代謝及荷爾蒙的均衡分泌,增強(qiáng)人體的免疫力和再生力,都能發(fā)揮重大的作用。血清磷脂的增高見于糖尿病、腎病綜合癥、慢性出血性貧血、肝硬化、肝壞死、膽道阻塞、甲狀腺功能減退、原發(fā)性高血壓、梅毒等;降低見于甲狀腺功能亢進(jìn)、急性感染性發(fā)熱、營養(yǎng)不良性肝硬化等。檢驗(yàn)原理:磷脂在磷脂酶的作用下水解生成膽堿和磷脂酸,膽堿被膽堿氧化酶氧化生成過氧化氫,過氧化氫與氨基安替比林、反應(yīng)生成藍(lán)色染料。此染料在 有最大吸收峰,吸收強(qiáng)度與血清中磷脂含量成正比。.腎3功能測定項(xiàng)目(9項(xiàng))尿素( ):血清尿素升高:正常生理狀況下的高蛋白飲食。病理狀況下的原因之一是由于尿素排泄減少,如腎功能損害引起的腎小球?yàn)V過率降低,結(jié)石、腫瘤、前列腺肥大引起的尿道或輸尿管阻塞使尿量排出減少,低血壓或腎血流減少所致的尿形成減少。病理狀況下另一原因是蛋白分解代謝的增加、可見于長期發(fā)燒、腎上腺皮質(zhì)類固醇分泌的增加、使用皮質(zhì)激素類藥物、胃或十二指腸出血。檢驗(yàn)原理:本法為測定尿素的酶學(xué)方法,反應(yīng)式如下:尿素脲酶谷氨酸a酮戊二酸谷氨酸尿素和水在脲酶作用下生成氨和二氧化碳。產(chǎn)生的氨與a酮戊二酸鹽和 在谷氨酸脫氫酸( )催化下形成谷氨酸鹽和 。其吸光度降低速率與尿素濃度成比例。尿酸(雙試劑)血清中尿酸增高常見于痛風(fēng)。另外核酸代謝增加的白血病多發(fā)性骨髓瘤、紅細(xì)胞增多癥等患者血清中尿酸亦常見增高;其次腎功能降低、鉛中毒、酒精中毒、腫瘤化療、放射治療后和妊娠毒血癥等均可使血清尿酸增高。血清尿酸的減少可見于服用可的松、雙香豆素、丙磺舒等藥物以后。檢驗(yàn)原理尿酸酶水解尿酸,產(chǎn)生的 在過氧化物酶的催化下與,一二氯羥基苯磺酸和氨基安替比林 反應(yīng),形成一種紫紅色醌亞胺。肌酐 (苦味酸)肌肉中的磷酸肌酸變成肌酸后,再經(jīng)過脫水生成肌酐肌酐與肌肉組織有密切的關(guān)系,肌酐的生成量可作為判斷肌肉疾病的有用指標(biāo)。另外,尿中肌酐的排泄量與肌肉總量成一定比例,不受飲食和尿量的影響,經(jīng)腎小球?yàn)V過后也不被腎小管重吸收,因此可用來檢測腎小球功能。腎臟疾病初期,一般血清肌酐濃度不升高。直至腎臟實(shí)質(zhì)性損害,如腎功能不全、尿毒癥和腎功能障礙引起血清肌酐濃度升高。檢驗(yàn)原理:肌酐在堿性溶液中與苦味酸形成一種桔紅色絡(luò)合物。該絡(luò)合物的吸光度與樣品中肌酐濃度成正比。肌酐(酶法)肌肉中的磷酸肌酸變成肌酸后,再經(jīng)過脫水生成肌酐肌酐與肌肉組織有密切的關(guān)系,肌酐的生成量可作為判斷肌肉疾病的有用指標(biāo)。另外,尿中肌酐的排泄量與肌肉總量成一定比例,不受飲食和尿量的影響,經(jīng)腎小球?yàn)V過后也不被腎小管重吸收,因此可用來檢測腎小球功能。腎臟疾病初期,一般血清肌酐濃度不升高。直至腎臟實(shí)質(zhì)性損害,如腎功能不全、尿毒癥和腎功能障礙才引起血清肌酐濃度升高。檢驗(yàn)原理:反應(yīng)分兩步,在第一步,存在于標(biāo)本中的內(nèi)源性肌酸被分解生成水,不對本反應(yīng)產(chǎn)生影響。樣本中的肌酐在各種酶的作用下生成紅色的醌色素,根據(jù)比色法測定醌色素的量,從而計(jì)算出肌酐的含量。乙酰B葡萄糖苷酶 是一種在糖蛋白降解代謝中起作用的溶酶體酶。尿中 升高可明確顯示腎臟疾病,同樣可作為某些疾病的腎病監(jiān)測指標(biāo),如腎病綜合癥、血管球性腎炎、毒品引起的中毒性腎損害、糖尿病的腎病變、高血壓及尿路感染等。檢驗(yàn)原理: 水解甲氧基 (2硝基)苯基乙酰氨去氧B氨基葡萄糖苷( )為 甲氧基 42硝基)苯酚。在堿性溶液中 波長處比色測定。光抑素 腎小球?yàn)V過率()是檢測腎功能的最直接的指標(biāo),在腎病早期就出現(xiàn) 的降低。準(zhǔn)確的腎小球?yàn)V過率的檢測能夠反映腎病的進(jìn)程,指導(dǎo)用藥從而避免腎臟功能的損傷。目前,常用肌酐清除率的方法來評價(jià)腎小球?yàn)V過率。血清中的肌酐中度特異,但是靈敏度低,只有當(dāng) 下降到0或更低時(shí)才有顯著升高。并且肌酐的升高受肌肉重量,體表面積,飲食攝入影響很大,也就是說和年齡,性別,身高都會影響肌酐量。胱抑素( )是一種小分子量的胱氨酸蛋白酶抑制劑。所有的有核細(xì)胞都能穩(wěn)定地產(chǎn)生s 幾乎完全被腎小球?yàn)V過,然后由腎小管重吸收,并且腎小管不分泌,也不通過腎小管排泄。 不受炎癥反應(yīng)、性別、肌肉以及年齡變化的影響。所以 是一個非常穩(wěn)定的反映腎小球?yàn)V過率的指標(biāo)檢驗(yàn)原理樣本中的 與超敏化的抗 抗體膠乳顆粒試劑反應(yīng),形成免疫復(fù)合物,在 波長處檢測其吸光度的變化,其變化程度與樣本中的 含量成正比。微球蛋白 G微球蛋白是一種幾乎在所有體細(xì)胞的細(xì)胞膜上部都存在的低分子量( 道爾頓)蛋白質(zhì),游離的B2微球蛋白是細(xì)胞裂解的產(chǎn)物。它是由腎小球分泌的,然后被腎小管細(xì)胞吸收和分解。腎小管功能異常時(shí),血清中 、尿液中的濃度升高。細(xì)胞破碎后,濃度顯著升高,如在急性白血病中血清中的 濃度升高。尿微量白蛋白 微量白蛋白尿是糖尿病腎病最早的臨床表現(xiàn),是心血管發(fā)病率和死亡顯著增高的一個標(biāo)志。早期檢測微量白蛋白尿能夠使個體化的積極治療及早實(shí)施。新近發(fā)表的幾項(xiàng)臨床試驗(yàn)已經(jīng)顯示早期發(fā)現(xiàn)微量白蛋白尿并盡早治療,可以預(yù)防或延緩糖尿病腎病進(jìn)展至終末期腎病的效果。檢驗(yàn)原理:白蛋白與試劑中抗人白蛋白抗體在緩沖液中快速形成抗原抗體復(fù)合物,使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。當(dāng)反應(yīng)液中保持抗體過剩時(shí),形成的復(fù)合物隨抗原量增加而增加,反應(yīng)液的濁度亦隨之增加,與校準(zhǔn)品對照,即可算出未知白蛋白的含量。微球蛋白 a微球蛋白(a)是體內(nèi)有核細(xì)胞合成的一種由個氨基酸殘基組成的糖蛋白。它主要由肝腎合成,在人體液中濃度基本恒定且在較寬的范圍內(nèi)保持穩(wěn)定。血清a-升高多見于原發(fā)性腎小球炎、糖尿病、狼瘡性腎病、間質(zhì)性腎炎, 綜合癥和急慢性腎功能衰竭。而尿中a-的濃度為臨床腎功能測定、腎移植成活、糖尿病腎病、腎功能不全、痛風(fēng)腎、重金屬鎘、汞中毒的臨床診斷提供了重要依據(jù)。檢驗(yàn)原理:標(biāo)本中的a微球蛋白與包被在膠乳顆粒上的抗a微球蛋白產(chǎn)生濁度,其濁度與濃度成正比,在波長下,測定該濁度,與標(biāo)準(zhǔn)血清比較,即能得出樣本血清中的a1微球蛋白含量。視黃醇結(jié)合蛋白視黃醇結(jié)合蛋白是反映機(jī)體營養(yǎng)狀態(tài)的一個靈敏指標(biāo),特別是蛋白質(zhì)-熱卡營養(yǎng)不良。內(nèi)臟的蛋白質(zhì)是作為蛋白質(zhì)-能量營養(yǎng)不良傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo),而根據(jù)營養(yǎng)狀態(tài)視黃醇結(jié)合蛋白能做出更快反應(yīng)。主要在肝臟合成,因此血清中的降低和增加和肝臟疾病有關(guān),并受肝臟疾病的出現(xiàn)和嚴(yán)重程度的影響。在肝病,肝硬化及急、慢性肝炎的血清水平均顯著降低??勺鳛槟I小管損傷的早期診斷指標(biāo)。視黃醇結(jié)合蛋白在尿中穩(wěn)定性強(qiáng),不易分解,不受和血壓干擾。在腎近曲小管損傷時(shí),其尿排量明顯增加,故尿中排量增加可作為腎近曲小管損傷的標(biāo)志物。當(dāng)腎臟濾過功能降低時(shí),血中因貯積而顯示濃度升高。血液或尿液中的濃度可以作為一種理想的腎功能指標(biāo)應(yīng)用于臨床。檢驗(yàn)原理:以膠乳增強(qiáng)免疫比濁法為測定原理,樣品中的視黃醇結(jié)合蛋白和被乳狀液粒吸附的抗體引起抗原抗體反應(yīng),形成免疫復(fù)合物,在波長處檢測其濁度的變化,其變化程度與樣本中的視黃醇結(jié)合蛋白成正比。.心4肌類測定項(xiàng)目(10項(xiàng))肌酸激酶各種類型進(jìn)行性肌萎縮時(shí),血清活性均可升高。神經(jīng)因素引起的肌萎縮如脊髓灰白質(zhì)炎時(shí)活性正常,皮肌炎時(shí)活性可有輕度或中度增高。急性心肌梗塞后3-小8時(shí)就開始增高,可高達(dá)正常上限的10-1倍2,病毒性心肌炎時(shí)也明顯升高,對診斷及預(yù)后有參考價(jià)值。檢驗(yàn)原理:磷酸肌酸 —肌酸葡萄糖磷酸葡萄糖葡萄糖磷酸葡萄糖磷酸葡萄糖酸: 磷酸葡萄糖脫氫酶:肌酸激酶:己糖激酶肌酸激酶同功酶 在急性心肌梗塞?小時(shí)升高,?小時(shí)達(dá)到峰值,小時(shí)恢復(fù)正常。一主要用于診斷急性心肌梗塞。但 對心肌并非完全特異,外科手術(shù)和骨骼疾病時(shí)也會升高。檢驗(yàn)原理本法為測定活性的免疫抑制酶動力學(xué)方法。在抗 單體抗體存在的條件下,標(biāo)本中全部活性和的活性被抑制,而和中亞基的活性則不受影響。由于循環(huán)中活性可忽略不計(jì),將活性測定值乘以倍即得活性。磷酸肌酸葡肌酸葡萄糖 磷酸葡萄糖葡萄糖磷酸葡萄糖磷酸葡萄糖酸羥丁酸脫氫酶 a羥丁酸脫氫酶的活性定義為:當(dāng)用a酮丁酸作為底物時(shí)所獲得的乳酸脫氫酶的活性。 較其他同工酶對a酮丁酸有更大的親合力,因此當(dāng)用a酮丁酸作為底物時(shí),含 多的組織如血清、心肌、紅血球等就具有較高的活性,即。 活性高;而肝、骨胳肌等具有較低的活性,即。 活性低。常用a 來測量血清中 的活性。a與、 、、 一起構(gòu)成了心肌酶譜。檢驗(yàn)原理采用德國臨床化學(xué)協(xié)會 推薦的方法改良而成。樣本中的a羥丁酸脫氫酶催化a氧代丁酸生成a羥丁酸,同時(shí),還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸被氧化為氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸,從而引起 處吸光度的下降,此種變化與樣本中的a羥丁酸脫氫酶活性成正比。乳酸脫氫酶 ()乳酸脫氫酶增高主要見于心肌梗塞、肝炎、肺梗塞、某些惡性腫瘤、白血病等。某些腫瘤轉(zhuǎn)移所致的胸腹水中乳酸脫氫酶活力往往升高。檢驗(yàn)原理采用德國臨床化學(xué)協(xié)會()推薦的方法改良而成。樣本中的乳酸脫氫酶催化乳酸生成丙酮酸,同時(shí),氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸被還原為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸,從而引起4處吸光度的上升,此種變化與樣本中的乳酸脫氫酶活性成正比。4乳酸脫氫酶同工酶 乳酸脫氫酶增高主要見于心肌梗塞、肝炎、肺梗塞、某些惡性腫瘤、白血病等。某些腫瘤轉(zhuǎn)移所致的胸腹水中乳酸脫氫酶活力往往升高。檢驗(yàn)原理采用德國臨床化學(xué)協(xié)會( )推薦的方法改良而成。樣本中的乳酸脫氫酶催化乳酸生成丙酮酸,同時(shí),氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸被還原為還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸,從而引起4處吸光度的上升,此種變化與樣本中的乳酸脫氫酶活性成正比。4同型半胱氨酸 同型半胱氨酸)是蛋氨酸代謝產(chǎn)生的一種含硫氨基酸,的在血中通過二硫鍵與蛋白質(zhì)結(jié)合,只有很少一部分游離同型半胱氨酸參加循環(huán)。水平與心血管疾病密切相關(guān)。是心血管疾病發(fā)病的一個重要危險(xiǎn)因子。血液中增高的因?yàn)榇碳ぱ鼙谝饎用}血管的損傷,導(dǎo)致炎癥和管壁的斑塊形成,最終引起心臟血流受阻。高同型半胱氨酸尿癥患者,由于嚴(yán)重遺傳缺陷影響代謝,造成高血癥輕微的遺傳缺陷或族維生素營養(yǎng)缺乏會伴隨中度或輕度的升高,也會增加心臟病的危險(xiǎn)。升高還可引起神經(jīng)管畸形及先天性畸形等出生缺陷類疾病。檢驗(yàn)原理基于小分子捕獲技術(shù)的腺苷同型半胱氨酸水解酶被轉(zhuǎn)化為游離型后,通過與共價(jià)底物反應(yīng),循環(huán)放大,同時(shí)產(chǎn)生腺苷。腺苷立即水解成氨和次黃嘌呤,氨在谷氨酸脫氫酶的作用下,使轉(zhuǎn)化為樣本中的濃度與轉(zhuǎn)化速率成正比4高敏反應(yīng)蛋白 反應(yīng)蛋白()是組織損傷或發(fā)炎刺激時(shí)肝細(xì)胞合成的最敏感的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白之一。外傷、炎癥、囊腫和組織再生等,都會令血清中的在24--2小時(shí)內(nèi)升高,可達(dá)正常值的2倍。它對心肌損傷不具有專一性。雖然傳統(tǒng)意義上的升高主要用于監(jiān)測和查明發(fā)炎的程度,但是幾項(xiàng)研究已經(jīng)報(bào)到了低濃度的升高,( )在預(yù)測心血管外周動脈血管性疾病的危險(xiǎn)性上有重大的意義。它的濃度高于時(shí),意味著有明顯的發(fā)炎產(chǎn)生。臨床不應(yīng)該僅僅從單一結(jié)果下結(jié)論,而是綜合臨床和其它實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來判斷。檢驗(yàn)原理:人血清中高敏反應(yīng)蛋白 與其相應(yīng)抗體在液相中相遇,立即形成抗原抗體復(fù)合物,并形成一定濁度。與通過同樣處理的校準(zhǔn)血清比較,定量檢測出樣品中高敏反應(yīng)蛋白的含量。4肌鈣蛋白 肌鈣蛋白是一種由肌鈣蛋白原肌球蛋白有序構(gòu)成的復(fù)合抑制蛋白,它增強(qiáng)鈣離子對橫紋肌動蛋白酶的活性的敏感性,由此調(diào)節(jié)橫紋肌動和肌球蛋白的相互作用。隨著對心肌肌鈣蛋白 深入研究,無論是對心肌的特異性還是診斷敏感性, 的地位都受到了嚴(yán)重挑戰(zhàn) 被認(rèn)為是目前最好的確定標(biāo)志物,正逐步取代成為的診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”。檢驗(yàn)原理:將特異性抗體結(jié)合于膠乳顆粒表面,樣本與膠乳試劑在緩沖液中混合,樣本中的肌鈣蛋白I與膠乳顆粒表面的抗體結(jié)合,使相鄰的膠乳顆粒彼此交聯(lián),在附近測量溶液濁度的增加,其增加的程度與樣本中的肌鈣蛋白I含量相關(guān)。肌紅蛋白 測定血清肌紅蛋白可作為急性心肌梗死 診斷的早期最靈敏的指標(biāo)。肌紅蛋白增高:見于急性心肌梗死早期、急性肌損傷、肌營養(yǎng)不良、肌萎縮、多發(fā)性肌炎、急性或慢性腎功能衰竭、嚴(yán)重充血性心力衰竭和長期休克等。在心肌梗死后即可增高,但?內(nèi)即恢復(fù)正常。檢驗(yàn)原理:本方法是一種膠乳自動增強(qiáng)免疫比濁法。將特異抗體結(jié)合于膠乳顆粒表面,標(biāo)本與膠乳顆粒在緩沖液中混合,標(biāo)本中的與膠乳顆粒表面的抗體結(jié)合,使相鄰的膠乳顆粒彼此交聯(lián),在附近測量溶液濁度增加,其增加的程度與標(biāo)本中的含量相關(guān)。髓過氧化物酶 髓過氧化物酶是一種重要的含鐵溶酶體,存在于髓系細(xì)胞(主要是中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞)的嗜苯胺藍(lán)顆粒中,是髓細(xì)胞的特異性標(biāo)志,髓過氧化物酶與冠狀動脈疾病冠心病是心血管系統(tǒng)中最常見的疾病,而動脈粥樣硬化又是形成冠心病的重要病理基礎(chǔ),髓過氧化物酶是血管炎癥的標(biāo)志。此外,髓過氧化物酶的含量與糖尿病、腎功能衰竭、心血管疾病、急性冠脈綜合癥也有一定影響。檢驗(yàn)原理:髓過氧化物酶活性的檢驗(yàn)是通過測定總的過氧化物反應(yīng)減去非髓過氧化物反應(yīng)而實(shí)現(xiàn)的,該過程需兩步反應(yīng):第一步,測出樣本與過氧化氫、和苯酚進(jìn)行總過氧化物反應(yīng);第二步,通過將髓過氧化物酶特異性抑制劑加入到反應(yīng)中而測出非髓過氧化物反應(yīng)。然后用總的過氧化物反應(yīng)減去非髓過氧化物反應(yīng)得出髓過氧化物酶活性。.糖即代謝類測定項(xiàng)目(即項(xiàng))3.即.葡1萄糖GL(UGO)D:生理性血糖增高:一般發(fā)生在餐后1-2小時(shí),注射葡萄糖后,情緒緊張時(shí),腎上腺素分泌增多或注射該藥后。病理性高血糖:常見于糖尿病患者;升血糖的激素分泌增加,如垂體前葉功能亢進(jìn)、腎上腺皮質(zhì)功能亢進(jìn)、甲狀腺功能亢進(jìn)、嗜鉻細(xì)胞瘤、胰島a細(xì)胞瘤等;顱內(nèi)壓增高刺激血糖中樞,如顱外傷、顱內(nèi)出血、腦膜炎等;有脫水引起的血糖濃縮,如嘔吐,腹瀉、高熱等。生理性血糖降低:見于饑餓和劇烈運(yùn)動后,口服降糖藥物后;病理性低血糖則見于胰島B細(xì)胞瘤引起的胰島素分泌過多癥;升血糖的激素分泌減少,血糖損失過多。檢驗(yàn)原理:葡萄糖經(jīng)葡萄糖氧化酶氧化,形成的過氧化氫在過氧化物酶催化下與酚和4-氨基安替 比林生成紅色的醌亞胺。葡萄糖()檢驗(yàn)原理葡萄糖經(jīng)己糖激酶 作用轉(zhuǎn)化成葡萄糖磷酸,然后再經(jīng)葡萄糖磷酸脫氫酶 作用在和參與下,轉(zhuǎn)化成磷酸葡萄糖酸和,其吸光度增加與樣品中葡萄糖濃度成正比。葡萄糖—糖化血紅蛋白 紅細(xì)胞的平均壽命為天,在這期間糖化血紅蛋白持續(xù)不斷的形成。由于紅血球中的糖化血紅蛋白含量反映過去4至6周血中葡萄糖的平均含量,并且在紅血球的整個壽命中是穩(wěn)定的,所以糖化血紅蛋白的測量對糖尿病人的長期監(jiān)護(hù)提供非常有價(jià)值的診斷依據(jù)。檢驗(yàn)原理 檢測通過溶解破壞全血樣本釋放大量蛋白酶。此過程中釋放出氨基酸,包含從血紅蛋白B鏈中的甘油纈氨酸。甘油纈氨酸作為酶的底物通過應(yīng)用過氧化物酶催化反應(yīng)特異性測量相配色團(tuán)的濃度。羥丁酸:正常人血液中B羥丁酸含量極少,這是人體利用脂肪氧化供能的正?,F(xiàn)象。但在某些生理情況(饑餓、禁食)或病理情況下(如糖尿?。?,糖的來源或氧化供能障礙,脂動員增強(qiáng),脂肪酸就成了人體的主要供能物質(zhì)。脂肪酸分解代謝產(chǎn)生酮體(-羥丁酸含量最多,約占78,%乙酰乙酸約占20,%丙酮約占2%量超過肝外組織利用的能力,二者之間失去平衡,血中B羥丁酸濃度就會過高,導(dǎo)致酮血癥和酮尿癥。乙酰乙酸和B羥丁酸都是酸性物質(zhì),因此酮體在體內(nèi)大量堆積還會引起代謝性酸中毒。檢驗(yàn)原理:本實(shí)驗(yàn)采用酶動力學(xué)法來測定血液或血清中的 羥丁酸。在 羥丁酸脫氫酶的催化作用下, 羥丁酸被氧化,生成乙酰乙酸,同時(shí) 被還原為,在處有最大吸收峰,其吸光度值與 羥丁酸的濃度呈正相關(guān)。糖化白蛋白:血漿葡萄糖分子中的羰基能與白蛋白分子末端的自由氨基發(fā)生非酶促糖基化反應(yīng),形成不穩(wěn)定的、可逆的醛亞胺,再經(jīng)醛亞胺分子結(jié)構(gòu)的重排反應(yīng)從而形成高分子酮胺結(jié)構(gòu)。是此酶促反應(yīng)結(jié)合的產(chǎn)物。 代表過去周?周血糖水平而主要代表體內(nèi)白蛋白的糖化作用白蛋白在體內(nèi)比較穩(wěn)定,水平也比較穩(wěn)定,白蛋白由于半衰期短?產(chǎn)生比快因此是有效反映患者過去周?周平均血糖水平。檢驗(yàn)原理:在血漿或血清中使對白蛋白有特異性的蛋白酶發(fā)生作用從中生成糖化氨基酸。利用酮胺氧化酶 將糖化氨基酸分解成氨基酸、葡萄糖酮醛和雙氧水生成的雙氧水在過氧化物酶的作用下定量地與發(fā)色色素縮合生成蘭紫色生通過測定蘭紫色色素的吸光度來定量從血清生成的糖化氨基酸。第一步:糖化氨基酸消除反應(yīng)內(nèi)源性糖化氨基酸酮胺氧化酶葡萄糖酮醛氨基酸第二步:糖化白蛋白的糖化氨基酸分析糖化白蛋白蛋白水解酶糖化氨基酸糖化氨基酸酮胺氧化酶葡萄糖酮醛氨基酸—過氧化物酶藍(lán)紫色色素—第三步:白蛋白分析:白蛋白+溴甲酚紫——綠色絡(luò)合物第四步:計(jì)算糖化白蛋白占總白蛋白的比率濃度糖化白蛋白()( X100%)白蛋白濃度果糖胺:果糖胺代表一組糖基化了的血液與組織蛋白質(zhì)。由蛋白質(zhì)的非酶糖化反應(yīng)而形成的糖化蛋白被稱為果糖胺,其形成的量取決于血糖濃度。依血糖水平而形成的果糖胺在1-周3內(nèi)發(fā)生代謝變化,這與大多數(shù)血清蛋白質(zhì)的代謝周期相同,因此果糖胺的濃度反映了在這一段時(shí)間內(nèi)持續(xù)變化著的血糖濃度的均值,測定果糖胺濃度對于糖尿病來說,是一個理想而快速的血糖監(jiān)測指標(biāo)。檢驗(yàn)原理標(biāo)本中加入試劑 試劑緩沖液該比色方法基于在堿性條件下以烯醇形式存在的果糖胺還原為甲醛。在此過程中形成的顏色與濃度成正比。.胰6腺功能(3項(xiàng))a淀粉酶a :血清淀粉酶測定主要用于診斷急性胰腺炎,在急性發(fā)作期,活性明顯升高。尿淀粉酶在發(fā)病后12-2小4時(shí)也會升高。其他急性疾病,如潰瘍病穿孔、急性腹膜炎、腸梗性胰腺炎、胰腺腫瘤以及流行腮腺炎、唾液腺化膿或腺管堵塞時(shí),血清淀粉酶也會有所升高。而對于各種肝臟疾病、肝炎、肝硬化、肝膿腫、肝癌及膽囊炎等,則淀粉酶活性下降。檢驗(yàn)原理a淀粉酶檢測中使用一種新的底物一氯——硝基苯一麥芽丙糖苷( )g該底物直接與淀粉酶反應(yīng)而不需輔酶,從底物中釋放出一氯——硝基苯()。波長下監(jiān)測吸光度的變化。吸光度變化速率與樣本中淀粉酶活性成正比。胰淀粉酶 :血清中胰淀粉酶測定主要用于診斷急性胰腺炎。在急性發(fā)作期淀粉酶活性顯著增高。尿中胰淀粉酶在發(fā)病后12-小2時(shí)4也會升高。而對于各種肝臟疾病,如肝炎、肝硬化、肝癌及膽囊炎等,則淀粉酶活力下降。檢驗(yàn)原理:+月夷淀粉酶?N1-葡萄糖苷酶 k脂肪酶 :胰腺是人體最主要來源。血清脂肪酶對急性胰腺炎的診斷有很大幫助。臨床研究證實(shí),其靈敏度為? ,特異性為?,而淀粉酶的靈敏度為?9特異性為? 4血清脂肪酶活性測定對急性胰腺炎診斷的靈敏度及特異性均優(yōu)于淀粉酶活性測定。血清增高常見于急性胰腺炎及胰腺癌,偶見于慢性胰腺炎。急性胰腺炎時(shí),血清淀粉酶增加的時(shí)間較短,而血清活性上升可持續(xù)?天。腮腺炎未累及胰腺癌時(shí), 通常在正常范圍。止匕外,總膽管結(jié)石或癌、腸梗阻、十二指腸穿孔等有時(shí)亦可增高。檢驗(yàn)原理:采用1該淀鄰-二月桂宗甘油-3戌-二酸-(6’-甲基試鹵靈)-酯在堿性條件下在脂肪酶的催化下分解成鄰二月桂宗甘油,戌二酸和甲基試鹵靈,在下。根據(jù)產(chǎn)物的甲基試鹵靈生成速率測定脂肪酶活性。3.營7養(yǎng)(3項(xiàng))前白蛋白:血清前白蛋白是血清蛋白質(zhì),其主要生理功能是運(yùn)輸甲狀腺素和維生素A并具有胸腺激素活性,可通過促進(jìn)淋巴細(xì)胞的成熟來增加機(jī)體的免疫力。肝癌,肝硬化,慢性活動性肝炎,堵塞性黃疸患者均顯著降低,使早期肝功能損傷的指標(biāo)。營養(yǎng)不良和急性感染的病人也可降低。檢驗(yàn)原理:當(dāng)樣品與緩沖液和抗體混合,樣品中的前白蛋白與試劑中的抗人前白蛋白抗體特異性結(jié)合,生成不溶性的沉淀物,引起濁度的增加,通過測定濁度的透光率判斷樣品中的前白蛋白含量。轉(zhuǎn)鐵蛋白R轉(zhuǎn)鐵蛋白( )連接上鐵離子后可以防止鐵中毒以及通過腎臟的損失。水平升高,常見于缺鐵性貧血,妊娠,雌激素的控制和脂肪性腎病。水平下降常見于遺傳缺陷,睪丸激素控制,感染,急性炎癥,某些類型腎炎,腫瘤,血色素缺失,急性瘧疾和營養(yǎng)不良。檢驗(yàn)原理:人體中的轉(zhuǎn)鐵蛋白與試劑中抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體在緩沖液中形成抗原抗體復(fù)合物,使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。當(dāng)反應(yīng)液中保持抗體過剩時(shí),形成的復(fù)合物隨抗原量增加而增加,反應(yīng)濁度亦隨之增加,在 以終點(diǎn)法監(jiān)測吸光度變化,與標(biāo)準(zhǔn)品對照,即可計(jì)算出未知蛋白的含量。鐵蛋白:鐵蛋白是公認(rèn)的反映儲存鐵是否充足的最敏感指標(biāo)。在缺鐵早期,體內(nèi)儲存的鐵含量減少,即可導(dǎo)致鐵蛋白降低。此時(shí),還沒有缺鐵的紅細(xì)胞生成,更沒有血紅蛋白的減少。此時(shí)如能及時(shí)糾正缺鐵,對健康的影響相對較小。對可能存在鐵缺乏的婦女和兒童,應(yīng)經(jīng)常監(jiān)測鐵蛋白水平。病理性降低:缺鐵性貧血;營養(yǎng)不良。病理性升高:慢性疾病引起的貧血;再生障礙性貧血、鐵粒幼紅細(xì)胞貧血和慢性溶血性貧血;特發(fā)性血色素沉著癥(血色?。?;多次輸血的病人。檢驗(yàn)原理:使用抗鐵蛋白抗體包被的膠乳顆粒,和樣品中的鐵蛋白進(jìn)行抗原-抗體反應(yīng)。反應(yīng)完成后,用透射比濁法檢測吸光度的變化反映鐵蛋白的濃度。3.凝8血(2項(xiàng))二聚體 :二聚體是纖維蛋白單體經(jīng)活化因子X交聯(lián)后,再經(jīng)纖溶酶水解所產(chǎn)生的一種特異性降解產(chǎn)物,是一個特異性的纖溶過程標(biāo)記物。二聚體來源于纖溶酶溶解的交聯(lián)纖維蛋白凝塊。纖溶蛋白降解產(chǎn)物中,唯二聚體交聯(lián)碎片可反映血栓形成后的溶栓活性。因此理論上,二聚體的定量檢測可定量反映藥物的溶栓效果、及可用于診斷、篩選新形成的血栓。心肌梗死、腦梗死、肺栓塞、靜脈血栓形成、手術(shù)、腫瘤、彌漫性血管內(nèi)凝血、感染及組織壞死等均可導(dǎo)致二聚體升高。檢驗(yàn)原理:試劑中包含膠乳顆粒與抗二聚體的單克隆抗體結(jié)合。膠乳顆粒在 產(chǎn)生吸收,當(dāng)和樣本中的二聚體發(fā)生凝集,在 吸光度上升,吸光度上升決定于二聚體的濃度。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可以檢測出樣本中二聚體含量。纖維蛋白原:人纖維蛋白原是人體凝血系統(tǒng)的重要成分之一,纖維蛋白原在體內(nèi)經(jīng)凝血酶作用轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白發(fā)揮其凝血和止血功能,并參與體內(nèi)一系列病理、生理過程,如炎癥組織損傷修復(fù)等,其增加往往是機(jī)體的一種非特異性反應(yīng),常見于毒血癥,肺炎,輕型肝炎,膽囊炎,肺結(jié)核等感染及腎病綜合癥,風(fēng)濕熱,惡性腫瘤,風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,腦血栓,腦梗死,心肌梗死等無菌性炎癥,另外如外科手術(shù),放射治療,月經(jīng)期及妊娠期見于纖維蛋白原輕度增高。檢驗(yàn)原理:樣本中纖維蛋白原與試劑中相應(yīng)的抗體在溶液中相結(jié)合,立即形成抗原-抗體復(fù)合物,并形成一定的濁度。該濁度的高低在一定量抗體存在時(shí)與抗原的含量成正比,通過與同樣處理的校準(zhǔn)液比較,計(jì)算未知樣本中纖維蛋白原的含量。3.胃9腸功能:(2項(xiàng))胃蛋白酶原I胃蛋白酶原是胃液中胃蛋白酶的無活性前體,分為胃蛋白酶原I和胃蛋白酶原n兩種亞群。胃蛋白酶原I來源于胃底腺的主細(xì)胞和頸粘液細(xì)胞。胃蛋白酶原n則來源于全胃腺(胃賁門腺、胃底腺、胃竇幽門腺)和遠(yuǎn)端十二指腸 氏腺,前列腺和胰腺也產(chǎn)生少量胃蛋白酶原n,胃粘膜合成的胃蛋白酶原n約為總量的 .合成后的胃蛋白酶原大部分進(jìn)入胃腔,在酸性胃液作用下活化成胃蛋白酶,只有少量(約1%)胃蛋白酶原透過胃粘膜毛細(xì)血管進(jìn)入血循環(huán)。血清胃蛋白酶原水平反映了不同部位胃粘膜的形態(tài)和功能: 是檢測胃泌酸腺細(xì)胞功能的指針,胃酸分泌增多 升高,分泌減少或胃粘膜腺體萎縮 降低; 與胃底粘膜病變的相關(guān)性較大(相對于胃竇粘膜),其升高與胃底腺管萎縮、胃上皮化生或假幽門腺化生、異型增值有關(guān); 比值進(jìn)行性降低與胃粘膜萎縮進(jìn)展相關(guān)。因此,聯(lián)合測定 和 比值可起到胃底腺粘膜“血清學(xué)活檢”的作用。檢驗(yàn)原理:以膠乳增強(qiáng)免疫比濁法為測定原理,樣品中的 和被乳狀液粒吸附的的抗體引起抗原抗體反應(yīng),形成免疫復(fù)合物,在 波長處檢測其濁度的變化,其變化程度與樣本中的 成正比。胃蛋白酶原:胃蛋白酶原1是胃液中胃蛋白酶的無活性前體,分為胃蛋白酶原I和胃蛋白酶原n兩種亞群。胃蛋白酶原I來源于胃底腺的主細(xì)胞和頸粘液細(xì)胞。胃蛋白酶原n則來源于全胃腺(胃賁門腺、胃底腺、胃竇幽門腺)和遠(yuǎn)端十二指腸 氏腺,前列腺和胰腺也產(chǎn)生少量胃蛋白酶原n,胃粘膜合成的胃蛋白酶原n約為總量的.合成后的胃蛋白酶原大部分進(jìn)入胃腔,在酸性胃液作用下活化成胃蛋白酶,只有少量(約1)%胃蛋白酶原透過胃粘膜毛細(xì)血管進(jìn)入血循環(huán)。血清胃蛋白酶原水平反映了不同部位胃粘膜的形態(tài)和功能:是檢測胃泌酸腺細(xì)胞功能的指針,胃酸分泌增多升高,分泌減少或胃粘膜腺體萎縮降低;與胃底粘膜病變的相關(guān)性較大(相對于胃竇粘膜),其升高與胃底腺管萎縮、胃上皮化生或假幽門腺化生、異型增值有關(guān); 比值進(jìn)行性降低與胃粘膜萎縮進(jìn)展相關(guān)。因此,聯(lián)合測定和比值可起到胃底腺粘膜“血清學(xué)活檢”的作用。.1免0疫&風(fēng)濕類測定項(xiàng)目(8項(xiàng))免疫球蛋白:床意義:免疫球蛋白的測定是一種表征免疫缺乏癥和骨髓瘤的重要手段。它在免疫系統(tǒng)的急性和慢性感染方面也占據(jù)重要地位。占血清中總免疫球蛋白到5的單體結(jié)構(gòu)形式類似于。有的是以多聚體形式存在,具有抵抗病原體細(xì)菌的破壞作用。分泌型功能比較重要,通常存在于淚液、汗液、唾液、乳汁及支氣管分泌物中。的增加見于急性甲型肝炎、慢性攻擊性肝炎、肝后性或隱性肝硬化、主動性酒精肝、慢性感染、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、多重皮膚病、混合性關(guān)聯(lián)組織疾病等。降低常見于獲得性先天免疫缺陷癥、腸道疾病的蛋白質(zhì)流失及皮膚燒傷。檢驗(yàn)原理:當(dāng)樣品與緩沖液和抗體混合,樣品中的免疫球蛋白意試劑中的抗人免疫球蛋白意抗體特異性結(jié)合,生成不溶性的沉淀物,引起濁度的增加,通過測定濁度的透光率判斷樣品中的免疫球蛋白意含量。免疫球蛋白 : 是在人體血清中占主導(dǎo)地位的免疫球蛋白,它占到總的,具有吞噬作用,能有效地激活補(bǔ)體活化途徑,從而中和毒素,移除致病抗原。 的測定對免疫缺陷和骨髓瘤的判定十分重要,其水平的升高常見于慢性感染和慢性發(fā)炎。 是唯一能通過胎盤的免疫球蛋白,因而對胎兒抵御感染有著特殊的重要性。機(jī)體對外來細(xì)菌和毒素的免疫應(yīng)答生成,分為 、 、 、四種類型,多克隆 升高預(yù)示有,慢性心臟疾病,感染,囊腫性纖維化。單克隆 升高發(fā)生于骨髓瘤,下降見于先天性亞型缺失癥,也見于腸道蛋白質(zhì)流

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