章微生物優(yōu)秀公開課

第三章

實驗動物微生物學和寄生蟲學第三章重點掌握內(nèi)容1、普通級動物、清潔動物、SPF動物、無菌動物和悉生動物的概念。2、人獸共患病主要病原體的名稱。3、淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎、鼠痘、狂犬病、流行性出血熱等疾病的傳染源、傳播途徑、易感者和癥狀表現(xiàn)。第一節(jié)實驗動物微生物

與寄生蟲控制一、實驗動物傳染病的危害表現(xiàn)形式：顯性感染、隱性感染、病原攜帶狀態(tài)、潛伏感染基本條件：傳染源、傳播途徑、易感動物1.動物及實驗損失2.威脅人類健康3.影響實驗結(jié)果三、清潔動物[clean(CL)animal]是根據(jù)我國國情而設(shè)立的等級動物，除普通級動物應(yīng)排除的病原和寄生蟲外，不攜帶對動物危害大和對科學研究干擾大的病原和寄生蟲，如小鼠肝炎病毒、仙臺病毒等。清潔動物有小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔等動物。犬和猴沒有清潔級。四、無特定病原體動物（SPF動物）[specificpathogenfree(SPF)animal]

通常被稱為SPF動物，除清潔動物應(yīng)排除的病原和寄生蟲外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學實驗干擾大的病原和寄生蟲。如綠膿桿菌等。SPF動物包括小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬和猴等。悉生動物（已知菌動物）

[gnotobiotic(GN)animal]

在無菌動物體內(nèi)人為植入一種或數(shù)種微生物的動物。而依據(jù)植入菌種數(shù)目的不同，又分單菌、雙菌、多菌動物。

無菌動物的應(yīng)用

動物模型研究老年病研究心血管疾病研究免疫學研究腫瘤研究藥理與毒理研究其他六、不同等級實驗動物的微生物和寄生蟲控制標準

（見前面表1--9）七、不同等級實驗動物的比較第二節(jié)實驗動物常見感染性疾病一、實驗動物感染性疾病概念包括：人獸共患病、動物烈性傳染病、一般性疾?。ê纳x疾病）。表現(xiàn)形式：顯性感染、隱性感染、病原攜帶狀態(tài)、潛伏感染等。基本條件：傳染源、傳播途徑、易感動物。人獸共患病——指人類也可感染發(fā)病的一類動物疾病。（一）導(dǎo)致人獸共患病的主要病原體

1.病毒4：淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、狂犬病病毒、獼猴皰疹病毒1型（B病毒）、流行性出血熱病毒。2.細菌5：沙門菌、布魯桿菌、志賀菌、結(jié)核分枝桿菌、鉤端螺旋體。3.真菌1：皮膚病原真菌。4.寄生蟲1：弓形蟲。（二）實驗動物主要烈性傳染病病原體鼠痘病毒（小鼠脫腳病病毒）、兔出血癥（兔瘟）病毒、犬細小病毒（急性出血性腸炎）、犬瘟熱病毒、傳染性犬肝炎病毒。（三）引起實驗動物一般性疾病的病原體1.病毒——小鼠肝炎病毒、仙臺病毒、猴反轉(zhuǎn)錄D型病毒。2.細菌——多殺巴斯德桿菌、泰澤病原體、鼠棒狀桿菌、支原體。3.寄生蟲——多種體內(nèi)寄生蟲。二、病毒性疾?。ㄒ唬┝馨图毎}絡(luò)叢腦膜炎（LCM）是一種人獸共患病，在實驗動物多呈隱性感染，小鼠感染后可不出現(xiàn)癥狀，但可通過胎盤傳給子代。感染該病毒的小鼠，是研究病毒特異性免疫耐受性疾病的理想動物模型。1.病原學

淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒（LCMV）。屬砂粒病毒，呈圓形或橢圓形，單鏈RNA，有囊膜。可在雞胚絨毛尿囊上增殖，但不產(chǎn)生可見痘斑，只有適應(yīng)生長后才產(chǎn)生細胞病變。LCM病毒對乙醚敏感，不耐熱，56℃1h，紫外線或0.1%甲醛都可滅活。2.流行病學（1）傳染源：感染LCM病毒的野小鼠、無癥狀帶病毒小鼠。（2）傳播途徑：接觸帶病毒野小鼠或?qū)嶒炐∈蟮姆置谖?、排泄物、吸血昆蟲傳播，以及胎盤垂直傳播等。（3）易感者：小鼠、猴、豚鼠、大鼠、地鼠、兔、狗等，人亦易感。

3.癥狀在實驗動物多呈隱性感染，小鼠感染后可不出現(xiàn)癥狀。人感染后表現(xiàn)類似流感樣癥狀，嚴重者侵犯中樞神經(jīng)引起腦膜炎等。4.診斷

LCM病毒通常是無癥狀感染。懷疑本病時，可將患病動物的血清、腦脊液或病變組織接種在SPF小鼠腦內(nèi)，SPF小鼠4-5天后死亡。亦可用血清方法檢測LCM病毒抗體。5.預(yù)防與控制嚴格防止野鼠和感染鼠等進入動物室與實驗室。加強血清學監(jiān)測，消滅帶毒病鼠，也非常必要。

（二）鼠痘

鼠痘又稱為小鼠傳染性脫腳病，是由鼠痘病毒感染引起的小鼠烈性傳染病，患病動物往往未出現(xiàn)癥狀即死亡，死亡率高達90%以上。1.病原學

鼠痘病毒屬痘病毒科，雙鏈DNA結(jié)構(gòu)，包膜上有血球凝集素，可凝集雞的紅細胞。鼠痘病毒與其他痘病毒之間的抗原關(guān)系密切，血清學上有明顯的交叉反應(yīng)。鼠痘病毒對干燥、低溫有較強的抵抗力，但可被100℃以上高溫及紫外線迅速殺死。2.流行病學（1）傳染源：病小鼠、無癥狀帶病毒小鼠。

（2）傳播途徑：接觸病鼠患處滲出液、分泌

物及其污染物品。（3）易感動物：小鼠、尤其是A、C3H、DBA/2、BALB/c、CBA等品系。幼鼠和衰老小鼠對本病特別易感，且常呈致死性。但本病在野鼠中較少發(fā)生。

3.癥狀小鼠肢體和尾巴嚴重水腫、潰瘍，最后壞死脫落，故稱脫腳病。4.診斷根據(jù)流行病學、癥狀特征、病毒分離鑒定、血清學檢查可作診斷。血清學檢查方法主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）等。

5.預(yù)防與控制定期作血清學監(jiān)測，防止將傳染源引入動物種群和實驗室，對可疑小鼠要隔離檢疫，證實后應(yīng)消滅整個感染鼠群。一切可能受污染的物品要高壓消毒，房間用福爾馬林等消毒劑熏蒸。接種牛痘疫苗可預(yù)防此病。（三）狂犬病

狂犬病又稱恐水癥，是一種由狂犬病病毒引起的，累及中樞神經(jīng)系統(tǒng)的急性傳染病。動物感染后，一般有兩種表現(xiàn)類型：狂暴型和麻痹型。人感染后出現(xiàn)高度興奮、恐懼不安、畏風、流涎、恐水、吞咽困難、呼吸困難等癥狀，嚴重者癱瘓甚至死亡?？袢?.病原學

狂犬病病毒屬于RNA型的彈狀病毒科，病毒型似子彈，單鏈結(jié)構(gòu)，表面有脂蛋白包膜。病毒對過氧化氫、高錳酸鉀、新潔爾滅、來蘇兒等消毒藥敏感。病毒不耐濕熱：100°C加熱2分鐘以及紫外線照射均能滅活，耐低溫，在4°C下可存活數(shù)月到1年。2.傳染病學（1）傳染源：主要是犬、其次是攜帶病原的貓、豬及牛、馬等家畜和野獸等溫血動物。自然界中，以野生動物如狼、狐、吸血蝙蝠等為主。（2）傳播途徑：主要通過咬傷傳播，也可由帶病毒唾液經(jīng)各種傷口和抓傷、舔傷的黏膜和皮膚入侵。（3）易感者：人、各種畜類，尤其是犬科和貓科的動物。3.癥狀

動物：犬狂暴型、犬麻痹型。

人感染后的臨床表現(xiàn)：恐水、怕風、恐懼不安、咽肌痙攣、進行性癱瘓，甚至死亡。4.診斷典型的癥狀結(jié)合病史，尸檢動物腦組織內(nèi)基氏小體可確診。5.預(yù)防與控制24小時內(nèi)注射狂犬疫苗。對可疑動物要隔離觀察，病死動物應(yīng)予焚毀或深埋處理。捕殺野犬、管理和免疫家犬和家畜（注射獸用狂犬病毒疫苗）。（四）流行性出血熱流行性出血熱為人獸共患?。灰鹪摬〉牟《局饕嬖谟谝吧鷩X類動物。在實驗動物，多呈隱性感染和持續(xù)帶病毒狀態(tài)，可無明顯臨床癥狀和病理改變。1.病原學引起流行性出血熱的病毒屬漢坦病毒，單鏈RNA結(jié)構(gòu)，有囊膜，可凝集鵝的紅血球。該病毒能在多種細胞中生長，且細胞病變不明顯。此病毒對環(huán)境和理化因素的抵抗力較差。

2.流行病學（1）傳染源：主要是野鼠，以黑線姬鼠和褐家鼠為代表，可在實驗大鼠等嚙齒類動物中流行。近年發(fā)現(xiàn)，該病毒可由實驗大鼠傳播給人。黑線姬鼠褐家鼠（2）傳播途徑：該病主要以螨等吸血昆蟲為傳播媒介。含有病毒的血、尿等，污染人的破損處，亦使人患病。（3）易感者：主要是人，其次為大鼠、小鼠、豚鼠、兔等實驗動物。動物感染后可不發(fā)病，而人則發(fā)病。

3.癥狀人感染后出現(xiàn)頭痛、眼眶痛、腰痛等“三痛”癥狀，臉、脖子、胸部紅腫等“三紅”體征，經(jīng)過低血壓期、少尿期甚至尿閉期，最后到多尿期。有發(fā)熱、頭痛等類感冒癥狀，個別病例嚴重時并發(fā)急性心力衰竭，可導(dǎo)致死亡。4.診斷多數(shù)易感動物對該病毒表現(xiàn)為無癥狀感染，其診斷主要靠血清特異性抗體檢測，也可在感染大鼠的肺組織中查出特異性病毒抗原。常用的方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）和免疫熒光抗體試驗等。

5.預(yù)防與控制由于野鼠是本病的主要傳染源和病毒攜帶者，因此消滅野鼠，防止野鼠進入動物飼養(yǎng)室和實驗室是預(yù)防該病的關(guān)鍵措施。定期做血清學檢查具有重要意義。無菌剖腹取胎術(shù)和屏障環(huán)境飼養(yǎng)可根除該病毒感染。

三、細菌性疾病

細菌性疾病的易感性不同，且存在種群、品系、性別、年齡的差異。其細菌性疾病具有不同程度的地域性、流行性、季節(jié)性和感染后免疫性。隨病原菌的毒力、動物的健康狀況及免疫力的不同，其流行性可表現(xiàn)為散發(fā)、暴發(fā)、大流行等形式。

引發(fā)實驗動物感染性疾病的細菌大致可分為人獸共患病病原菌、動物致病菌和條件致病菌三大類。在動物實驗中，條件致病菌對實驗結(jié)果的影響最易被忽視，因而必須嚴格控制。對實驗動物的細菌性疾病一般不主張治療，因為藥物不能根除感染的病原菌，而使治愈動物成為新的傳染源。此外，藥物尚會改變動物的機能，從而影響實驗結(jié)果。因此，預(yù)防才是保證動物質(zhì)量的有效手段。

（一）沙門菌病

實驗動物的沙門菌病為人獸共患病，主要由鼠傷寒沙門菌和腸炎沙門菌引起。1.病原學沙門菌屬革蘭氏陰性短桿菌，無芽孢、有鞭毛、能運動。該菌不發(fā)酵乳糖和蔗糖，不凝固半乳糖，不液化明膠，不產(chǎn)生靛基質(zhì)。在營養(yǎng)瓊脂上生長良好。2.流行病學（1）傳染源：攜帶鼠傷寒沙門菌和腸炎沙門菌的野鼠、蒼蠅、病鼠等。（2）傳播途徑：糞便污染墊料、飼料、飲用水后經(jīng)消化道感染。（3）易感者：大鼠、小鼠、豚鼠、兔。

3.癥狀主要表現(xiàn)為食少和腹瀉，急性暴發(fā)型可導(dǎo)致動物迅速死亡。4.診斷根據(jù)癥狀及細菌培養(yǎng)鑒定可診斷，如果能從動物體液、器官組織中分離出該菌，說明該菌已在動物體內(nèi)廣泛播散。5.預(yù)防與控制嚴防野鼠、防止蒼蠅、糞便污染、隔離和淘汰病鼠。

（二）支原體病支原體又稱菌形體、霉形體，是一種介于病毒和細菌之間的多形微生物。它可引起實驗動物、家畜、家禽和人類發(fā)生有關(guān)疾病。危害實驗動物的支原體有肺支原體、溶神經(jīng)支原體、關(guān)節(jié)炎支原體等。1.病原學

支原體為革蘭氏陰性，高度多態(tài)且大小不一，無細胞壁，而僅在細胞質(zhì)表面有三層細胞膜；在合適的瓊脂培養(yǎng)基上可以形成約0.5mm直徑的荷包蛋形菌落。2.流行病學（1）傳染源：攜帶病原體或已知患病的小鼠、大鼠。（2）傳播途徑：帶菌母鼠舔仔鼠、氣溶膠傳播，經(jīng)污染籠具間接接觸等。（3）易感動物：小鼠、大鼠。

3.癥狀肺支原體可引起化膿性鼻炎和慢性肺炎等呼吸系統(tǒng)疾??；有時并發(fā)中耳炎、內(nèi)耳炎引起實驗動物“歪頭病”，患鼠頭斜于患側(cè)轉(zhuǎn)圈走，提起鼠尾使之倒立，患鼠身體迅速旋轉(zhuǎn)；肺支原體感染生殖道可致死胎或不育。

溶神經(jīng)支原體導(dǎo)致小鼠旋轉(zhuǎn)病，可出現(xiàn)頭部震顫、身體翻滾等癥狀，關(guān)節(jié)炎支原體主要侵襲大鼠，引起多發(fā)性關(guān)節(jié)炎。4.診斷

分離培養(yǎng)支原體，間接血凝試驗、補體結(jié)合試驗，酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）等血清學方法，有助于確診。

5.預(yù)防與控制淘汰病鼠，使用屏障系統(tǒng)飼養(yǎng)。四、寄生蟲疾病

實驗動物寄生蟲病按寄生部位可分為體內(nèi)寄生蟲（原蟲、蠕蟲）和體外寄生蟲（昆蟲）兩大類。動物寄生蟲的種類繁多，感染較為普遍，且難以根除。既影響動物的質(zhì)量，干擾實驗結(jié)果，又威脅飼養(yǎng)和科研人員的健康。

弓形蟲病

弓形蟲病又稱毒漿原蟲病，為人獸共患體內(nèi)寄生蟲病，由襲地弓形蟲引起。1.病原學

襲地弓形蟲依其不同發(fā)育階段有滋養(yǎng)體、包囊、裂殖體、配子體和卵囊、滋養(yǎng)體和包囊出現(xiàn)在中間宿主和終宿主貓的體內(nèi)，而裂殖體、配子體和卵囊則只出現(xiàn)在終宿主貓的體內(nèi)。2.生活史

貓吞食含弓形蟲包囊的動物組織或成熟的卵囊后，包囊內(nèi)的滋養(yǎng)體或卵囊內(nèi)的子孢子即進入貓的消化道，并侵入腸上皮細胞進行繁殖，經(jīng)