




版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
C57BL/6簡(jiǎn)要描述:最常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)小鼠,經(jīng)常簡(jiǎn)稱為B6C57或者小鼠。性狀描述:毛色為黑色,常作為“標(biāo)準(zhǔn)”的近交系。常見(jiàn)用途:⑴用于多種免疫學(xué)、遺傳學(xué)研究,包括移植、感染等動(dòng)物模型。⑵常作為背景小鼠,對(duì)其進(jìn)行基因敲除、轉(zhuǎn)基因等遺傳修飾,從而提供標(biāo)準(zhǔn)的遺傳背景。BALB/C簡(jiǎn)要描述:是實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的免疫功能不太完善的小鼠。性狀描述:毛色為白色,對(duì)致癌因子敏感,卵巢、腎上腺和肺部腫瘤、白血病發(fā)生率較高。常見(jiàn)用途:⑴用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤的制備。⑵免疫學(xué)研究,如移植的供受鼠等。BM12簡(jiǎn)要描述:是C57BL/6近交系小鼠自發(fā)形成的一個(gè)近交系小鼠,在MHCII類分子中有3個(gè)氨基酸的突變。性狀描述:與C57BL/6基本相同,對(duì)EAE等自身免疫性疾病具有抗性。常見(jiàn)用途:用于慢性排斥反應(yīng)研究的供鼠。免疫學(xué)研究中常用的小鼠品系第一頁(yè),共23頁(yè)。常見(jiàn)的小鼠品系A(chǔ)LR:與NOD小鼠具有共同祖先的小鼠,白色,兩者有70%的基因組完全相同,但MHC不相同。對(duì)I型糖尿病具有很強(qiáng)的誘導(dǎo)耐受。常用于NOD的對(duì)照小鼠。雜交鼠:由兩個(gè)近交系雜交獲得后代,性狀不穩(wěn)定。小鼠遺傳操作未進(jìn)行徹底的小鼠。NOD:簡(jiǎn)要描述:非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠,最常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)小鼠,公認(rèn)的自身免疫性糖尿?。↖型糖尿?。?。性狀描述:白色,從第9周開(kāi)始,即會(huì)有胰腺炎癥狀,之后雌鼠會(huì)有較高的概率得I型糖尿病。常見(jiàn)用途:⑴I型糖尿病遺傳、發(fā)病機(jī)制研究。⑵其它相關(guān)的自身免疫性疾病研究,如干燥綜合癥等。第二頁(yè),共23頁(yè)。1、器官移植模型2、自身免疫性疾病模型3、超敏反應(yīng)模型4、腫瘤模型免疫研究常見(jiàn)的小鼠動(dòng)物模型第三頁(yè),共23頁(yè)。腎移植模型異位心臟移植模型小腸移植模型骨髓移植模型肝移植模型皮膚移植模型胰腺(胰島)移植模型慢性排斥(BM12)器官移植模型第四頁(yè),共23頁(yè)。1、自發(fā)型I型糖尿病動(dòng)物模型NOD小鼠2、誘導(dǎo)型I型糖尿病動(dòng)物模型:藥物(STZ、Alloxan、環(huán)磷酰胺等)誘導(dǎo)破壞小鼠胰島3、自發(fā)型系統(tǒng)性紅斑狼瘡小鼠BXSB4、誘導(dǎo)型系統(tǒng)性紅斑狼瘡小鼠慢性移植物抗宿主自身免疫性疾病模型第五頁(yè),共23頁(yè)。5、自發(fā)型類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎SKG小鼠6、誘導(dǎo)型類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎Ⅱ型膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎大鼠模型,佐劑性關(guān)節(jié)炎(adjuvantarthritis,AA)模型,其它誘導(dǎo)模型7、誘導(dǎo)小鼠EAE;模擬人多發(fā)性硬化癥/急性播散性腦脊髓炎。髓鞘少突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白35-55(MOG35-55)多肽免疫;髓鞘堿性蛋白(MBP)免疫疫;髓鞘蛋白脂質(zhì)蛋白(PLP)免疫;脊髓組織勻漿免疫等自身免疫性疾病模型第六頁(yè),共23頁(yè)。超敏反應(yīng)模型氣道高敏感反應(yīng)模型:腹腔注射卵清白蛋白致敏,然后通過(guò)霧化吸入造模。皮膚過(guò)敏反應(yīng)模型:過(guò)繼輸入抗二硝基苯酚(DNP)的IgGE單克隆抗體,使小鼠被動(dòng)致敏,然后以二硝基氟代苯(DNFB)刺激產(chǎn)生過(guò)敏反應(yīng)。第七頁(yè),共23頁(yè)。腫瘤模型移植瘤實(shí)驗(yàn):將人移植入BalB/C、祼鼠、C57BL/6、Rag1等小鼠體內(nèi)。誘導(dǎo)癌/腫瘤模型:使用二乙基亞硝胺(diethylnitrosamine,DEN)等誘癌劑灌胃及自由飲水,長(zhǎng)期誘導(dǎo)可產(chǎn)生肝癌模型。第八頁(yè),共23頁(yè)。1、基因敲除小鼠2、基因敲入小鼠3、基因捕獲小鼠4、轉(zhuǎn)基因小鼠5、條件性基因表達(dá)小鼠6、條件性基因敲除小鼠基因修飾小鼠第九頁(yè),共23頁(yè)。載體構(gòu)建基本知識(shí)二、pIRES2-EGFP-rtTAAdvanced構(gòu)建使用引物將rtTAAdvancedCDS區(qū)克隆出來(lái),然后以XhoI/BglII雙酶切,將其克隆入pIRES2-EGFP載體的XhoI/BamHI位點(diǎn)中。引物序列為:rtTA_XhoI_F:ATCGCTCGAGCCGCCACCATGTCTAGACTGGACAAGAGCAAArtTA_BglII_R:ATCGAGATCTTACTTAGTTACCCGGGGAGCATGTCA第十頁(yè),共23頁(yè)。基因表達(dá)基本知識(shí)DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)上調(diào)控基因表達(dá)的元件(基因表達(dá)盒結(jié)構(gòu))promoter5’-UTRpromoterenhancerUTRexonPolyAsignalingenhancer3’-UTRChromosomesequence第十一頁(yè),共23頁(yè)?;蚯贸∈蟮谑?yè),共23頁(yè)?;蛐揎桬S細(xì)胞的獲得及囊胚注射基因敲除小鼠第十三頁(yè),共23頁(yè)。2、基因敲除純合小鼠的獲得第十四頁(yè),共23頁(yè)?;蚯萌胄∈驨eorw.tallelefloxallele1IIIIIIw.t.sequenceVectorsequenceloxPsiteFRTsiteTypingprimerTypingprimerexon第十五頁(yè),共23頁(yè)。基因捕獲小鼠效果類似于基因敲除第十六頁(yè),共23頁(yè)。MBD2基因敲除小鼠
b-geo
w.t.allele
1
2
w.t.sequence
Vectorsequence
mutantallele
Typingprimer
Typingprimer
exon
1
3
b-geo
3
Sequencenotindicated
targetingvector
A
第十七頁(yè),共23頁(yè)。轉(zhuǎn)基因小鼠靶標(biāo)基因表達(dá)盒DNA第十八頁(yè),共23頁(yè)。條件性基因表達(dá)小鼠PCAGloxPCATloxPHGHPApBR322oriAmpPacIpCAG-CAT-X7100bpMBD2cDNA在MBD2CDS兩端PCR加入PacI酶切位點(diǎn)PacIPacIPacI酶切,T4連接酶連接PCAGCATMBD2loxPloxPPacIPacIABCPCAGMBD2loxPPacIPacIDEloxPCAT+Cre介導(dǎo)重組Cre-loxP系統(tǒng)第十九頁(yè),共23頁(yè)。Tet-on表達(dá)系統(tǒng)第二十頁(yè),共23頁(yè)。條件性基因敲除小鼠Cre-loxP及FLP-FRT技術(shù)Cre、FLP是重組酶,loxP、FRT是重組位點(diǎn)第二十一頁(yè),共23頁(yè)。圖1:誘導(dǎo)型平滑肌特異性敲除Dicer1基因的小鼠基因型。1A:Dicer1的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),主要包含4個(gè)結(jié)構(gòu)域,任一個(gè)結(jié)構(gòu)域的缺失均能導(dǎo)致microRNA不能成熟;1B:兩側(cè)包含loxP位點(diǎn)的Dicer基因結(jié)構(gòu)圖,兩個(gè)同向loxP位于Dicer基因22號(hào)外顯子的兩側(cè),該外顯子對(duì)應(yīng)于前一個(gè)RNAIII結(jié)
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 特教生自我表達(dá)-克服障礙展現(xiàn)獨(dú)特價(jià)值
- 2024年CPMM高端考生試題及解答
- 裝飾施工質(zhì)量升級(jí)-解決方案與實(shí)施方法透析
- 2024年CPMM常見(jiàn)題型及試題及答案
- 2024年CPSM考試高效復(fù)習(xí)策略及試題及答案
- 餐廳服務(wù)流程培訓(xùn)資料
- 2024年SCMP語(yǔ)文關(guān)鍵試題及答案
- 2025年勞務(wù)作業(yè)承包合同
- 2025年中國(guó)冷拉低碳鋼絲項(xiàng)目投資可行性研究報(bào)告
- 2025年中國(guó)冰箱專用冰磚市場(chǎng)調(diào)查研究報(bào)告
- 2023年鄭州黃河文化旅游發(fā)展有限公司招聘考試真題
- 中國(guó)出口新動(dòng)能和企業(yè)外貿(mào)信心指數(shù)報(bào)告 202411
- 城鎮(zhèn)燃?xì)饨?jīng)營(yíng)安全重大隱患判定及燃?xì)獍踩芾韺n}培訓(xùn)
- 神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)生進(jìn)修匯報(bào)課件
- 充電樁巡查記錄表
- 2024年浙江省中考?xì)v史真題(解析版)
- 2024年江蘇省南京外國(guó)語(yǔ)丘班、南京一中數(shù)理人才班特長(zhǎng)生招生數(shù)學(xué)試卷
- 2024年稅務(wù)系統(tǒng)職業(yè)技能競(jìng)賽試題庫(kù)-非稅收入管理
- 4.1.1 小數(shù)的意義(課件)-2023-2024學(xué)年四年級(jí)下冊(cè)數(shù)學(xué)人教版
- DL∕T 1631-2016 并網(wǎng)風(fēng)電場(chǎng)繼電保護(hù)配置及整定技術(shù)規(guī)范
- 人工智能創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)課程智慧樹(shù)知到期末考試答案章節(jié)答案2024年佳木斯大學(xué)
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論