高職第十一章維生素類藥物的分析

前言(Preface)維生素是維持人體正常生理機(jī)能所必需的生物活性物質(zhì)；主要用于機(jī)體的能量轉(zhuǎn)移和代謝調(diào)節(jié)；大多數(shù)維生素人體不能合成。40%谷類和麥類主食12%水果18%蔬菜10%肉類、蛋類制品10%乳類制品10%油、脂肪及甜品現(xiàn)在是1頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四公元前3500年:古埃及人發(fā)現(xiàn)能防治夜盲癥的物質(zhì)，也就是后來(lái)的維A;

1600年:醫(yī)生鼓勵(lì)以多吃動(dòng)物肝臟來(lái)治夜盲癥;

1747年:蘇格蘭醫(yī)生林德發(fā)現(xiàn)檸檬能治壞血病，也就是后來(lái)的維C。

1831年:胡蘿卜素被發(fā)現(xiàn);

1905年:甲狀腺腫大被碘治愈;

1912年:波蘭化學(xué)家馮克為維生素命名（Vitamin);

1915年:科學(xué)家認(rèn)為糙皮病是由于缺乏某種維生素而造成的;1916年:維生素B被分離出來(lái);

1917年:英國(guó)醫(yī)生發(fā)現(xiàn)魚(yú)肝油可治愈佝僂病，隨后斷定這種病是缺乏維D引起的。

維生素發(fā)展史現(xiàn)在是2頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四1920年-發(fā)現(xiàn)人體可將胡蘿卜轉(zhuǎn)化為維生素A;

1922年-維E被發(fā)現(xiàn);

1928年-科學(xué)家發(fā)現(xiàn)維B至少有兩種類型;

1933年-維E首次用于治療;

1948年-大劑量維C用于治療炎癥;

1949年-維B3與維C用于治療精神分裂癥;

1954年-自由基與人體老化的關(guān)系被揭開(kāi);

1957年-Q10多酶被發(fā)現(xiàn);

1969年-體內(nèi)超級(jí)抗氧化酶被發(fā)現(xiàn);

1970年-維C被用于治療感冒;

1993年-哈佛大學(xué)發(fā)表維生素E與心臟病關(guān)系的研究結(jié)果。

現(xiàn)被列為維生素的有60余種，對(duì)維持人體健康和促進(jìn)發(fā)育至關(guān)重要的有20余種,其中的14種及其制劑可作為藥物使用！維生素發(fā)展史現(xiàn)在是3頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四維生素分類化學(xué)結(jié)構(gòu)：

醇、酯、酸、胺、醛、酚溶解性：

維生素A

維生素D

維生素E

維生素B

維生素C脂溶性

水溶性

這類藥物的分析方法很多，有生物法、微生物法、化學(xué)法和物理化學(xué)法，但目前常用的分析方法是化學(xué)法或物理化學(xué)法?，F(xiàn)在是4頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四⊙維生素A⊙維生素E⊙維生素C⊙維生素B1主要介紹現(xiàn)在是5頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四

維生素A具有多種生理功能，對(duì)視力、生長(zhǎng)、上皮組織及骨骼的發(fā)育、生育都是必需的。

效用：☆

防止夜盲癥和視力減退，有助于對(duì)多種眼疾的治療（維生素A可促進(jìn)眼內(nèi)感光色素的形成）；☆

有抗呼吸系統(tǒng)感染作用；☆

有助于免疫系統(tǒng)功能正常；生病時(shí)能早日康復(fù)；能保持組織或器官表層的健康；☆有助于祛除老年斑；☆

促進(jìn)發(fā)育，強(qiáng)壯骨骼，維護(hù)皮膚、頭發(fā)、牙齒、牙床的健康；☆外用有助于對(duì)粉刺、膿包、癤瘡，皮膚表面潰瘍等癥的治療；☆

有助于對(duì)肺氣腫、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)癥的治療。⊙第一節(jié)維生素A(VitA)的分析現(xiàn)在是6頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四⊙第一節(jié)

維生素A(VitA)的分析Retinol(VitAalcohol)VAacetateVApolmitate912345678結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

（1）環(huán)己烯+共軛多烯側(cè)鏈；（2）天然VitA側(cè)鏈為全反式；（3）天然來(lái)源主要是魚(yú)肝油，為醋酸酯，棕櫚酸酯等,目前多由人工合成?，F(xiàn)在是7頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四維生素A(VitA)的性質(zhì)A.

紫外吸收＊具有共軛多烯側(cè)鏈—紫外吸收；＊最大吸收波長(zhǎng)在325-328nm，隨VA存在狀態(tài)以及所用的溶劑，最大吸收波長(zhǎng)的位置有所不同。B.溶解性：＊不溶于水＊溶于乙醚，氯仿，異丙醇，環(huán)己烷，脂肪和油。C.不穩(wěn)定性（易發(fā)生脫氫、脫水、聚合反應(yīng)）D.與SbCl3作用—Carr-Price反應(yīng)

CHCl3

★鑒別

★含量測(cè)定現(xiàn)在是8頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四維生素A(VitA)的鑒別試驗(yàn)

鑒別？(1)SbCl3反應(yīng)Carr-price反應(yīng)加飽和無(wú)水SbCl3無(wú)醇CHCl3溶液TLC法(2)(3)紫外-可見(jiàn)分光光度法藍(lán)色紫紅色→VA與三氯化銻(SbCl3)中存在的親電試劑氯化高銻（SbCl5）作用形成不穩(wěn)定的藍(lán)色正碳離子?，F(xiàn)在是9頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四維生素A的無(wú)水乙醇-鹽酸溶液在326nm波長(zhǎng)處有單一吸收峰，將該溶液加熱后再測(cè)定，在348，367，389nm處出現(xiàn)3個(gè)尖銳吸收峰。這是維生素A在鹽酸催化下加熱，發(fā)生脫水反應(yīng)所致。紫外-可見(jiàn)分光光度法現(xiàn)在是10頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四確認(rèn)醇或酯，是醋酸酯或其他酸酯.▲例：VA和其標(biāo)準(zhǔn)品用環(huán)己烷溶解展開(kāi)劑：環(huán)己烷—乙醚（80：20）板：硅膠G顯色：SbCl3T.S.（藍(lán)色斑點(diǎn)）Rf：VA醇0.08VA醋酸酯0.41VA棕櫚酸酯0.75薄層色譜法現(xiàn)在是11頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四含量＝？HPLC法熒光法VitA的無(wú)水乙醇溶液能產(chǎn)生綠色熒光?？蓽y(cè)定血液或動(dòng)物組織中VitA含量SbCl3比色法加SbCl3無(wú)水CHCl3溶液，在618~620nm波長(zhǎng)處有最大吸收，符合Beer定律。(3)(2)(1)(4)UV法(三點(diǎn)校正法)維生素A(VitA)的含量測(cè)定專屬性差、顯色不穩(wěn)定、受水分和溫度影響大現(xiàn)在是12頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四UV法(三點(diǎn)校正法)1.概述＊共軛多烯的結(jié)構(gòu)—具有特征的紫外吸收。＊維生素A中稀釋用油和有關(guān)雜質(zhì)—結(jié)構(gòu)相似,在維生素A最大吸收波長(zhǎng)附近也有吸收，對(duì)測(cè)定產(chǎn)生干擾。＊Morton和Stubbs等人提出了三點(diǎn)校正法。2.原理（根據(jù)、假定）

＊雜質(zhì)吸收在310-340nm內(nèi)呈直線，且隨波長(zhǎng)的增大吸收度變?。?/p>

＊物質(zhì)對(duì)光的吸收有加和性?，F(xiàn)在是13頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四UV法(三點(diǎn)校正法)現(xiàn)在是14頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四VitA含量表示生物效價(jià)：國(guó)際單位IU(internationalUnit)效價(jià)(I.U./g):每克供試品中所含VitA的國(guó)際單位數(shù)按WHO規(guī)定

VitA醋酸酯

VitA醇效價(jià)(I.U./g)0.344×106

0.300×106

1gpure

VA

VitA醋酸酯≈0.344×106IU

VitA含量測(cè)定第一法（直接測(cè)定法）：適用于酯式維生素A的測(cè)定第二法（皂化法）：消除植物油干擾，適合VA醇?，F(xiàn)在是15頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四VitaminE⊙第二節(jié)

維生素E(VitE)的分析

存在于豆類、蔬菜、麥胚油中與生育有關(guān)，防治習(xí)慣性流產(chǎn)、不育癥、牙周炎等；也用于心血管疾患、脂肪肝，新生兒硬腫癥的輔助治療。

有還原性，可作抗氧劑現(xiàn)在是16頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四⊙第二節(jié)

維生素E(VitE)的分析R1R2﹡﹡VitE(dl-α-TocopherylAcetate)消旋-α-生育酚醋酸酯結(jié)構(gòu)特征：1、具有苯并二氫吡喃結(jié)構(gòu)，苯環(huán)上有1個(gè)乙?；姆恿u基，易被水解、氧化；2、脂溶性維生素。3、有四種異構(gòu)體，其中α型活性最強(qiáng)乙?；恿u基現(xiàn)在是17頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四VitE鑒別Identification(1)(4)(2)(3)硝酸反應(yīng)(無(wú)水乙醇＋硝酸，750C顯橙紅色)UV法(284)GC法三氯化鐵反應(yīng)

加KOH醇試液，加熱，加水、乙醚，取乙醚液再加2,2'-聯(lián)吡啶的乙醇溶液和FeCl3的乙醇液，應(yīng)顯血紅色?！魃?Fe2+2,2'-聯(lián)吡啶血紅色Fe3+現(xiàn)在是18頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四（二）生育酚的檢查

硫酸鈰溶液（0.01mol/L）生育酚

+

2Ce4+

→2Ce3+

+

對(duì)－生育醌原理指示劑：二苯胺（亮黃→灰紫）（反應(yīng)摩爾比1:2）（一）酸度游離醋酸VitE的雜質(zhì)檢查ChP滴定液：現(xiàn)在是19頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四現(xiàn)在是20頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四氣相色譜法ChP（2005）

內(nèi)標(biāo)法加校正因子

內(nèi)標(biāo)物正三十二烷

固定相硅酮（OV—17）

檢測(cè)器氫火焰離子化檢測(cè)器FID系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求理論塔板數(shù)按維生素E峰計(jì)算應(yīng)不低于500，維生素E峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于2n≥500R≥2特點(diǎn)準(zhǔn)確、靈敏度高、專屬性好現(xiàn)在是21頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四Thiamine

Hydrochloride鹽酸硫胺⊙第三節(jié)

維生素B1(VitB1)的分析VitaminB1治療腳氣病、多發(fā)性神經(jīng)炎和胃腸道疾病存在于米糠、麥麩和酵母中現(xiàn)在是22頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四易溶于水不溶于乙醚UV吸收(mmax246nm)沉淀反應(yīng)碘化汞鉀或硅鎢酸等反應(yīng)生成堿性中遇氧化劑(鐵氰化鉀)產(chǎn)生有熒光的硫色素鑒別試驗(yàn)TLC

維生素B1結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與鑒別硫色素反應(yīng)

VB1特有硝酸鉛反應(yīng)生成黑色硫化鉛沉淀氯化物反應(yīng)氨基嘧啶環(huán)噻唑環(huán)因本品為鹽酸鹽噻唑環(huán)在堿性介質(zhì)中可被高鐵氰化鉀等氧化劑氧化，然后與嘧啶環(huán)上的-NH2縮合生成具有熒光的硫色素，后者易溶于異丁醇中顯強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光，該反應(yīng)又稱為硫色素?zé)晒夥磻?yīng)。為維生素B1所特有分子結(jié)構(gòu)中含有雜環(huán)，易與生物堿沉淀劑(碘化鉍鉀、碘化汞鉀、苦味酸等)，硅鎢酸，雷氏鹽等作用形成組成恒定的沉淀維生素B1在堿性加熱條件下反應(yīng)放出H2S,與Pb(Ac)2試液形成黑色PbS↓現(xiàn)在是23頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四VitB1含量＝?Assay非水堿量法冰HAc和Hg(Ac)2HClO4滴定毛細(xì)管電泳法硫色素?zé)晒夥?VB1專屬反應(yīng))

紫外可見(jiàn)分光光度法(max246nm)酸性染料比色法

鹽酸硫胺與酸性染料(溴麝香草酚藍(lán))形成鹽，在420nm處測(cè)A值。高效液相法123654片劑、注射液原料簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確含量測(cè)定Assay現(xiàn)在是24頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四⊙第三節(jié)

維生素C(VitC)的分析VitaminC防治壞血病，預(yù)防冠心病，大量靜脈注射用于克山病的治療參與機(jī)體代謝，可幫助酶將膽固醇轉(zhuǎn)化為膽酸而排泄，減低毛細(xì)管的脆性，增加機(jī)體抵抗力(L-抗壞血酸Ascorbicacid)現(xiàn)在是25頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四L-抗壞血酸L-去氫抗壞血酸L-二酮古羅糖酸有生物活性有生物活性無(wú)生物活性-2H+2HH2OOH-(H+)現(xiàn)在是26頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四二烯醇強(qiáng)還原性弱酸性手性CUVmax243nm維生素C結(jié)構(gòu)與性質(zhì)溶于水，不溶于氯仿或乙醚旋光性糖類性質(zhì)水解性現(xiàn)在是27頁(yè)\一共有29頁(yè)\編輯于星期四VitC鑒別15432UV法溶于鹽酸中(max243nm)AgNO3反應(yīng)(Ag)2,6-二