60Co誘變晉大78后代貯藏蛋白亞基相對含量的策略分析

60Co誘變晉大78后代貯藏蛋白亞基相對含量的策略分析目前，世界上人類所得到的蛋白質(zhì)80％來源于植物蛋白，其中16％來源于大豆［1。］大豆是蛋白質(zhì)含量最高的作物之一，栽培大豆蛋白質(zhì)含量一般為40％左右，野生大豆中有的材料蛋白質(zhì)含量高達(dá)55％［2］。大豆種子中的蛋白絕大部分為貯藏蛋白，主要是11和球蛋白。因此，研究11和球蛋白就成為大豆蛋白質(zhì)研究的主要內(nèi)容。im等r和 i等4對11和 組分的亞基進(jìn)行遺傳學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)部分亞基是由顯性基因控制的。研究表明，增加11球蛋白的含量，降低球蛋白的含量，可以提高大豆蛋白的營養(yǎng)品質(zhì)，調(diào)節(jié)11和 球蛋白的比例可以提高大豆的加工品質(zhì)［5。］本研究以誘變后代為材料，對其大豆蛋白亞基相對含量進(jìn)行檢測分析，探討誘變后代大豆品系的蛋白遺傳特性和變異規(guī)律，為通過誘變育種篩選大豆優(yōu)質(zhì)品種提供理論基礎(chǔ)和實(shí)踐依據(jù)。1材料和方法材料本試驗(yàn)所用的材料是山西農(nóng)業(yè)大學(xué)選育的農(nóng)藝性狀好、品質(zhì)優(yōu)良的誘變親本——晉大及其誘變后代： 代。200年利用00劑量率為100R?min）對晉大號的風(fēng)干種子進(jìn)行輻照處理，得到1代共份材料；2010年收獲2弋后，2011年4月0日種植2弋與親本晉大，行長m行距0.5m，株距0.2m，二行區(qū)，重復(fù)3次。在生長期間按照當(dāng)?shù)厮竭M(jìn)行管理，及時中耕鋤草，收獲后統(tǒng)一進(jìn)行大豆貯藏蛋白的電泳分析。代寫論文方法貯藏蛋白的提取及電泳脫脂豆粉的制備：選取籽粒飽滿的大豆種子去皮，置于無菌的三層濾紙間用小鐵錘砸碎后放入研缽中研磨至粉末，分兩份分別放入1.5mL的離心管中，每管中加入1mL乙醚脫脂過夜。脫脂結(jié)束后倒去上清液，風(fēng)干后-20℃保存?zhèn)溆?。貯藏蛋白的提?。?.0脫脂豆粉加20mL50mmo1-L1的ri（值 ，0含0.01mo1?L|B巰基乙醇）提取液，室溫下提取1,離心（10000r-min，20min，4℃），取上清，用1mo1?L1調(diào) 值至4.5，離心（10000r?min，15min，4℃），棄掉上清，得到沉淀，經(jīng)低溫干燥后得到大豆貯藏蛋白。電泳：采用不連續(xù)垂直板狀凝膠電泳，凝膠厚度1,濃縮膠濃度為,電流1 ,分離膠濃度為1，電流3,用考馬斯亮藍(lán) 染色，用蒸餾水漂洗?3次，再用甲醇、冰醋酸溶液(甲醇：冰醋酸：水=1：6：3)在脫色搖床上脫色，直至各亞基條帶清晰，最后冰醋酸固定。電泳完成后用 型凝膠成像分析系統(tǒng)拍照。1 數(shù)據(jù)分析蛋白譜帶用 型凝膠成像分析系統(tǒng)拍照，并用其自帶的軟件進(jìn)行分析，各試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 及 3軟件進(jìn)行分析?！醍厴I(yè)論文□2結(jié)果與分析晉大及其誘變后代貯藏蛋白 譜帶劃分口部分誘變后代的大豆貯藏蛋白質(zhì) 圖譜見圖1、圖，由此可以看出，大豆儲藏蛋白質(zhì)都是由一系列亞基組成，其中包括含量較高的a,,a,p, 3和幾條未命名的譜帶，各條帶在凝膠上可以清晰分辨，含量差異較大。□這與國外的兩個 圖譜中 球蛋白的a,、a、p和11球蛋白的酸性亞基及堿性亞基的帶型位置完全吻合，進(jìn)一步說明本試驗(yàn)的 圖譜劃分是正確的。，.晉，大78及其誘變后代大豆球蛋白各亞基相對含量統(tǒng)計(jì)分析由表1可知，人工誘變晉大后代貯藏蛋白不同亞基含量變異較大，大豆球蛋白中的a,,a,p,y和球蛋白總量平均數(shù)分別為 ，11 31 6,6, ；1大豆11球蛋白中的3亞基、 亞基含量、 亞基和11組分平均含量分別為7.5,61冰7.6,0，冰5.9,53冰.3，。由冰各亞基平均含量分析可知，11球蛋白含量高于球蛋白含量；11組分中各亞基含量 亞基〉亞基〉3亞基；組分中各亞基含量p亞基〉a亞基〉a/亞基〉y亞基。□代寫論文□同時，表1中各個亞基的變異系數(shù)為a'( 3,a( 3、p( )3Y( 7、總球蛋白(323()、亞基()3亞基（）、總球蛋白（）和（3。其中變異系數(shù)最大的為Y亞基，達(dá)到，變異系數(shù)最小的是亞基，為，而且各亞基變異系數(shù)都大于20，%進(jìn)一步說明了誘變后代的不穩(wěn)定性和大豆貯藏蛋白的各個亞基在不同大豆品系間含量變異也很大。晉大及其誘變后代 和組分亞基含量的相關(guān)性分析口對誘變后代 和組分亞基含量的相關(guān)性分析（表2可知，球蛋白與總球蛋白在 水平上呈顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為 ，說明和球蛋白之間彼此制約，此消彼長?？偳虻鞍着ca亞基、Y亞基在水平上達(dá)極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為 和，與a,亞基在水平上達(dá)顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為 ；球蛋白與亞基和亞基在水平上達(dá)到極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為 和，但是球蛋白與a亞基、Y亞基在0.0水，平上達(dá)到極顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為和；與a亞基、a,亞基、 球蛋白在 水平上達(dá)到極顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為 ， ， ，與亞基、亞基和總在水平上達(dá)到極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為， ， 。由此可知，大豆球蛋白各組分之間相互影響，改變其中任一組分的含量都會直接和間接的影響其它組分。作文/zuowen/□大豆球蛋白 比值分布口從表中可以看出，大豆球蛋白 比值最大值為 ，最小值為，平均值為。然而從圖誘變后代球蛋白 比值分布圖來看， 比值主要分布于 ?之間，為對照， 比值為 ，最高值達(dá)到 ，是人工誘變后代，2號材料，該材料較晚熟，株高適中，有效分枝較多，株型較好，產(chǎn)量也較高，是一個綜合性狀比較好的材料。 比值最低的品種是、、號誘變后代，其單株產(chǎn)量較低，而且 的比值也低，所以其蛋白的營養(yǎng)□開題報告/html/lunwenzhidao/kaitibaogao/□：品質(zhì)不是很好，進(jìn)而說明人工誘變后代大豆品種間 差異較大。□根據(jù)表中 比值的百分比分布可以將誘變后代分為個類群，其中有材料的 比值分布在 ?之間，其中包括的 比值4材料的比值在?之間，還有 材料的 比值小于，以及個蛋白品質(zhì)比要好， 比值大于的材料。這為選育球蛋白含量高或 高的大豆品種提供了一定的依據(jù)?！跽T變后代大豆貯藏蛋白 1 組分與其種子總儲藏蛋白和脂肪含量的相關(guān)性口表所示為誘變后代個品系的總蛋白質(zhì)和脂肪含量結(jié)果， 組分與組分及比值與種子總蛋白和脂肪含量的相關(guān)性見表料結(jié)果表明： 與組分及 比值與誘變后代大豆種子的總蛋白和脂肪含沒有顯著相關(guān)性?！?討論3，大1豆貯藏蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳方法的探討大豆種子富含脂類物質(zhì)，達(dá)20左的右。因此，脫脂的好壞直接影響電泳結(jié)果，脫脂越徹底，電泳圖譜也越清晰、穩(wěn)定。本試驗(yàn)采用乙醚脫脂過夜，基本上消除了脂肪對電泳結(jié)果的影響，效果比較理想。由于在分離膠濃度較低（?）時，組分亞基分辨效果較好；在分離膠濃度較高（3時， 組分蛋白亞基分辨效果較好；在既要考慮分辨率又要考慮 和組分亞基分離綜合效果時，大豆貯藏蛋白亞基電泳分離膠濃度以12為的佳。因此，本試驗(yàn)采取的分離膠濃度以12最的佳。簡歷大全/html/jianli/□3，關(guān)2于亞基含量計(jì)算本試驗(yàn)采用亞基百分含量作為分析數(shù)據(jù)。由于影響 凝膠的因素較多，掃描相同大豆品種兩次 凝膠得到的亞基含量數(shù)據(jù)可能差異很大。大豆貯藏蛋白亞基占大豆貯藏蛋白質(zhì)百分比是大豆品種的遺傳特性，不易受其它因素的影響，即使在兩次電泳時相同亞基占總蛋白含量也是不變的。因此，采用亞基百分含量作為分析數(shù)據(jù)能夠取得比直接采用掃描亞基含量峰面積更可信、更準(zhǔn)確的試驗(yàn)結(jié)果。誘變后代蛋白質(zhì) 組分與組分亞基變異的分析口誘變育種與常規(guī)育種方法相比，具有方法簡便、育種周期短、效果好等特點(diǎn)，變異譜也有很大的差異，不僅擴(kuò)大了選擇范圍，而且提高了選擇效果。由于突變育種所觀察到的性狀通常是單個或少數(shù)基因的性狀，因此，在其保持原有親本特征、改良單一性狀上尤為優(yōu)越材本研究結(jié)果表明， 誘變大豆親本與后代貯藏蛋白亞基組成基本相同，但是各亞基在兩種球蛋白中所占百分量在不同品系間差異較大，變異系數(shù)最大的為Y亞基，達(dá)到 ，變異系數(shù)最小的是亞基，為，而且各亞基變異系數(shù)都大于 0說明 對晉大進(jìn)行誘變，效果非常明顯，誘變后后代具有明顯的遺傳多樣性，變異幅度較大。另外，通過、以及的比值與大豆總蛋白和脂肪含量的相關(guān)性分析表明，它們之間沒有顯著的相關(guān)性，說明通過降低，、組分的含量或者提高，，組、分的含量對大豆的總蛋白和脂肪含量沒有影響，由此說明可以從誘變后代中選育，，、/比，值、高的品種。作文/zuowen/□如果良好的變異能夠在后代中穩(wěn)定遺傳，其在選育出良好營養(yǎng)價值和加工品質(zhì)的大豆新品種具有重大的意義。所以由于本研究是在代的基礎(chǔ)上研究的，到底這些貯藏蛋白的變異能不能夠穩(wěn)定遺傳，還要進(jìn)行進(jìn)一步研究。參考文獻(xiàn)：[，楊]春燕，姚利波，劉兵強(qiáng)，等．國內(nèi)外大豆品質(zhì)育種研究方法與最新進(jìn)展[J．]華北農(nóng)學(xué)報，20