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文檔簡介

血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性測定

（改良賴氏法）臨床指標(biāo)的檢測1.掌握血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性測定的基本原理。2.熟悉血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性測定的具體操作方法。3.了解血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性測定的臨床意義?！灸康囊蟆颗R床意義谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GlutamicpyruvicTransaminase，GPT)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AlanineTransaminase，ALT)

ALT(GPT)廣泛存在于機體各種組織中，但在肝細胞中含量最多，當(dāng)肝臟有病變，特別是急性肝炎及肝細胞壞死，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性顯著升高。在肝癌、肝硬變以及膽道疾病時，此酶活性也可中度或輕度增高。在紫外分光光度計中，1ml血清(反應(yīng)溶液總量為3ml)在340nm波長下，用內(nèi)徑為1.0cm的比色皿，在25℃，1分鐘內(nèi)生成的丙酮酸，在乳酸氫酶催化下，使NADH+H+變成NAD+，使光密度下降0.001為1個轉(zhuǎn)氨酶活性單位?？ㄩT氏單位的定義為：丙氨酸+α-酮戊二酸谷氨酸+丙酮酸GPT乳酸氫酶NAD++乳酸NADH+H+丙氨酸+α-酮戊二酸谷氨酸+丙酮酸GPT乳酸氫酶NAD++乳酸NADH+H+改良賴氏法顯色反應(yīng)分光光度法賴氏法沒有制定自身的單位定義，而是以實驗數(shù)據(jù)套用卡門氏單位作表示的。血清中的谷-丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT），在37℃、pH7.4的條件下，可催化基質(zhì)（底物）液中的丙氨酸與α-酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸：【實驗原理】TC血清(ml)0.1—ALT底物液(ml)0.50.5混勻后，置37℃水浴中保溫30分鐘2，4-二硝基苯肼液(ml)0.50.5混勻后，置37℃水浴中保溫30分鐘血清(ml)—0.10.4mol/LNaOH(ml)5.05.02.酶活性測定：測定前將底物緩沖液在37℃水浴中預(yù)溫5分鐘，再按下表操作。

混勻，在室溫中放置10分鐘，以蒸餾水調(diào)零點，用520nm波長比色，讀取光密度。用T-C管的光密度查標(biāo)準(zhǔn)曲線，即得到待測血清中所含ALT的酶活性。參考值：5~25卡門氏單位【臨床意義】肝細胞中含ALT最豐富，因此當(dāng)肝臟疾病致肝細胞受損傷時，ALT即大量釋放入血液，致使血清中ALT活性增高。測定ALT是檢查肝功能的重要指標(biāo)之一。ALT顯著增高見于各種急性肝炎及藥物中毒性肝細胞壞死，中等程度增高見于肝癌、肝硬化、慢性肝炎及心肌梗塞，輕度增高則見于阻塞性黃疸及膽道炎等疾病。骨骼肌損傷、多發(fā)性肌炎亦可引起轉(zhuǎn)氨酶活性升高

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