血液病項(xiàng)目艾迪康課件

血液產(chǎn)品線市場(chǎng)培訓(xùn)（2012全國(guó)市場(chǎng)部背景介紹

血液病是原發(fā)于造血系統(tǒng)的疾病，或影響造血系統(tǒng)伴發(fā)血液異常改變，以貧血、出血、發(fā)熱為特征的疾病。

出血性疾病貧血癥白細(xì)胞疾病常見(jiàn)血液病造血系統(tǒng)惡性腫瘤MICMFAB形態(tài)學(xué)診斷(Morphology)免疫學(xué)檢查(Immunology)遺傳學(xué)檢查(Cytogenetics)分子生物學(xué)檢查(Molecular)檢測(cè)方法血液病項(xiàng)目市場(chǎng)分析重點(diǎn)項(xiàng)目：骨髓活檢：骨髓涂片的補(bǔ)充，需要病理科才能開(kāi)展，技術(shù)要求高。流式免疫分型：幾乎每個(gè)患者都需要檢測(cè)，適用范圍廣，費(fèi)用高，技術(shù)難度較大。染色體核型分析：白血病患者的必檢項(xiàng)目，耗時(shí)長(zhǎng)，技術(shù)難度大。分子項(xiàng)目：項(xiàng)目種類最多，醫(yī)生了解程度最低，醫(yī)院自行開(kāi)展最少。建議主推融合基因篩查、基因重排，預(yù)后相關(guān)突變。淋巴造血系統(tǒng)常用診斷技術(shù)形態(tài)學(xué):

細(xì)胞學(xué)：外周血、骨髓涂片，淋巴結(jié)穿刺

組織學(xué)：骨髓活檢、淋巴結(jié)活檢免疫學(xué)：

流式細(xì)胞遺傳學(xué)：

核型分析（染色體異常）、熒光原位雜交（FISH）分子生物學(xué)：

PCR(RT-PCR)、DNA測(cè)序（突變）MICM分型和診斷形態(tài)或病理或加細(xì)胞化學(xué)分析受觀察者個(gè)體經(jīng)驗(yàn)及分辨力的限制，一致率僅50-70%；在此基礎(chǔ)上增加免疫組化和/或FCM分析大大增加了分型的準(zhǔn)確率，可達(dá)90%以上；染色體、FISH及基因分析，進(jìn)一步提高分型的準(zhǔn)確率形態(tài)學(xué)

是診斷的基礎(chǔ)，任何淋巴造血系統(tǒng)增生性疾病的診斷都離不開(kāi)形態(tài)學(xué)診斷。形態(tài)學(xué)診斷技術(shù)包括

細(xì)胞學(xué)：外周血、骨髓涂片，淋巴組織穿刺組織學(xué)：骨髓活檢、淋巴組織活檢

醫(yī)院一般開(kāi)展細(xì)胞學(xué)，組織學(xué)需要專門(mén)病理技術(shù)才能開(kāi)展，一般都外送形態(tài)學(xué)-細(xì)胞學(xué)-骨髓涂片形態(tài)學(xué)保存完好，各系、各階段細(xì)胞分辨較容易可能會(huì)出現(xiàn)干抽或稀釋，影響診斷不能觀察骨髓組織的結(jié)構(gòu)及其全貌。不易察覺(jué)早期的腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)。形態(tài)學(xué)-細(xì)胞學(xué)-骨髓活檢常規(guī)做HE染色和網(wǎng)織纖維染色及HGE染色。對(duì)細(xì)胞密度、組織結(jié)構(gòu)、造血成分的比例及分化情況和間質(zhì)情況等進(jìn)行評(píng)估，不存在標(biāo)本稀釋問(wèn)題。腫瘤、骨髓纖維化、一些疾病的分類，特別是骨髓增生性疾病的診斷非常依賴于骨髓活檢。細(xì)胞形態(tài)沒(méi)有細(xì)胞涂片保存好。免疫學(xué)-流式細(xì)胞淋巴瘤、白血病初診時(shí)診斷及分型并對(duì)預(yù)后判斷及治療選擇提供參考可用于微小殘留病變的監(jiān)測(cè)，判斷療效會(huì)出現(xiàn)稀釋情況，與骨髓增生情況不一致

有專門(mén)血液中心實(shí)驗(yàn)室的醫(yī)院會(huì)自行開(kāi)展，但是抗體種類不夠齊備，或者M(jìn)RD項(xiàng)目不開(kāi)展等情況。可以重點(diǎn)推廣MRD檢測(cè)康圣達(dá)的流式抗體分析不夠全面，MRD假陰性較多。流式細(xì)胞常見(jiàn)問(wèn)題項(xiàng)目選擇：可檢測(cè)各類血液?。ò籽。馨土龉撬柁D(zhuǎn)移），特別適合淋巴系統(tǒng)血液病抗體數(shù)量：20個(gè)抗體（有骨髓涂片或臨床診斷）

30個(gè)抗體（無(wú)任何初步診斷資料）微小殘留檢測(cè)：6個(gè)抗體（有初診資料并且觀察到微小殘留跟蹤標(biāo)記），20個(gè)抗體（無(wú)初診資料或病情有復(fù)發(fā)，經(jīng)過(guò)化療等情況）臨床符合性：一般考慮與形態(tài)學(xué)的符合性，可以考慮加用遺傳學(xué)或分子方法確診急性白血病染色體檢測(cè)的臨床意義染色體畸變可以作為急性白血病緩解和復(fù)發(fā)重要參考，最初治療后異常核型可以消失提示CR，之后重新出現(xiàn)提示白血病復(fù)發(fā)，有新的核型出現(xiàn)，表明有進(jìn)展可以作為標(biāo)志來(lái)驗(yàn)證骨髓移植成功與否最初診斷的核型是急性白血病預(yù)后最有價(jià)值指標(biāo)預(yù)后等級(jí)核型類型AMLALL好t(8;21)、t(15;17)、inv(16)t(12;21)、染色體數(shù)目>50條的超二倍體、dic(9;12)(p11;p12)中正常、+8、+21、+22、11q23異常、del(9q)、del(7q)正常、47-50的超二倍體、t(11;14)差-5、del(5q)、-7、3q異常、復(fù)雜異常亞二倍體、近單倍體、t(9;22)、t(4;11)、t(1;19)、t(8;14)急性白血病核型的預(yù)后分級(jí)融合基因BCR/ABL(P210)-CML/ALLBCR/ABL(P230)-CMLBCR/ABL

(P190)-ALLPML/RARa-M3AML/ETO-M2CBFβ/MYH11X-M4EOMLL重排-M5FLP1L1-PDGFRα-嗜酸細(xì)胞增多癥基因突變JAK-2V617F/539-543突變MPL外顯子10突變血液病類型確診的分子標(biāo)志融合基因篩查適用患者

本篩查項(xiàng)目主要用于篩查ALL、AML、CML、AMMOL、CMML、MDS等血液病病種可能出現(xiàn)的31種融合基因或癌基因，及其融合基因的110余種剪切變異情況。適合無(wú)法確定融合基因類別的初診患者，便于醫(yī)生對(duì)血液病患者進(jìn)行分子標(biāo)志物的確定，并進(jìn)行后續(xù)微小殘留病灶的監(jiān)控。本項(xiàng)目建議配合染色體核型分析一起檢測(cè)，以免由于染色體數(shù)目異?；驍y帶少見(jiàn)融合基因而造成漏診。

蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院對(duì)于初診ALL,AML患者都建議做此項(xiàng)目融合基因篩查項(xiàng)目?jī)?yōu)勢(shì)檢測(cè)項(xiàng)目報(bào)告內(nèi)容艾迪康檢測(cè)ALL、AML組套為19項(xiàng)、25項(xiàng)對(duì)樣本內(nèi)參進(jìn)行定量評(píng)估，以發(fā)現(xiàn)樣本性狀是否合格康圣達(dá)檢測(cè)ALL、AML組套為15項(xiàng)、16項(xiàng)未對(duì)樣本內(nèi)參進(jìn)行定量評(píng)估，以發(fā)現(xiàn)樣本性狀是否合格金域未開(kāi)展/融合基因篩查推廣策略不明診斷患者可推薦31種篩查組套明確AML或ALL方向患者可推薦小組套小組套定價(jià)不超過(guò)1000元套用融合基因物價(jià)AML患者預(yù)后相關(guān)分子標(biāo)志AML患者的預(yù)后評(píng)估指標(biāo)C-kit突變（8號(hào)外顯子和17號(hào)外顯子）NPM1突變FLT3突變（FLT3-ITD突變和FLT3-TKD突變）CEBPA突變MDS患者預(yù)后N-RAS突變

10年OS：69%化療復(fù)發(fā)：33%10年OS：37%化療復(fù)發(fā)：50%10年OS：11%化療復(fù)發(fā)：78%

預(yù)后分層相關(guān)基因突變檢測(cè)推廣策略：組套推廣組套價(jià)格可適當(dāng)降低，可參照31種融合基因篩查價(jià)格檢測(cè)項(xiàng)目艾迪康C-kit（8號(hào)外顯子和17號(hào)外顯子）、NPM1、FLT3（FLT3-ITD、FLT3-TKD）、CEBPA康圣達(dá)C-kit/D816V（17號(hào)外顯子一個(gè)位點(diǎn)）、NPM1、FLT3-ITD、CEBPA，可組套檢測(cè)金域C-kit（8號(hào)外顯子和17號(hào)外顯子）、NPM1、FLT3（FLT3-ITD、FLT3-TKD），無(wú)組套TCR和IgH重排項(xiàng)目有5-10%的患者無(wú)法通過(guò)常規(guī)方法辨別其淋巴系統(tǒng)的增生是惡性增生還是反應(yīng)性增生。正常淋巴細(xì)胞在成熟過(guò)程中重排是多克隆性的，但惡性腫瘤（＞98%）表現(xiàn)為單克隆性Ig和/或TCR基因重排。適用患者及適應(yīng)癥：疑似淋巴瘤患者的良惡性鑒別診斷。淋系白血病患者的鑒別診斷及微小殘留跟蹤檢測(cè)。目標(biāo)科室：血液科、腫瘤科、病理科現(xiàn)有檢測(cè)方法及相關(guān)技術(shù)PCR結(jié)合毛細(xì)管電泳技術(shù)（Genescan）：分辨率高，不易產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性PCR結(jié)合聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)

ABL激酶區(qū)突變伊馬替尼的長(zhǎng)期服用導(dǎo)致部分患者，特別是CML急變期（AP-CML）的患者，發(fā)生伊馬替尼的耐藥，其耐藥發(fā)生率在20-30%。耐藥主要由ABL激酶區(qū)突變引起，可導(dǎo)致藥物療效下降或失效。適用患者：伊馬替尼，尼洛替尼及達(dá)沙替尼治療BCR-ABL陽(yáng)性CML、ALL患者，建議定期檢測(cè)，盡早發(fā)現(xiàn)耐藥。檢測(cè)范圍：BCR-ABL融合基因ABL激酶區(qū)52個(gè)位點(diǎn)ABL激酶區(qū)突變與TKI耐藥的關(guān)系SaraRedaelli,et.al,JCO,

2009,VOL27(3)469-471分子檢測(cè)常見(jiàn)問(wèn)題標(biāo)本取材量不足：檢測(cè)最低白細(xì)胞數(shù)為10的6次方個(gè)細(xì)胞檢測(cè)內(nèi)參偏低：目前原因未知結(jié)果臨床不符：分子檢測(cè)覆蓋范圍問(wèn)題，其他情況一般假陰性較少M(fèi)ICM整合報(bào)告CML的MICM綜合診斷病理形態(tài)學(xué)外周血涂片骨髓涂片骨髓病理初診形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)診斷；治療中的療效監(jiān)測(cè)（是否達(dá)到形態(tài)學(xué)CR）免疫學(xué)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)初診免疫學(xué)鑒別確診及病人殘留病灶特征抗原標(biāo)記確定；治療中急變期以及加速期急性白血病快速鑒別診斷細(xì)胞遺傳學(xué)染色體核型分析FISH初診CML的確診（ph染色體）；治療中急變期以及加速期異常核型演變分子生物學(xué)RT-PCR測(cè)序初診CML的BCR-ABL融合基因基線定量；JAK-2鑒別診斷治療中BCR-ABL定量，ABL激酶突變與格列衛(wèi)耐藥AML的MICM綜合診斷病理形態(tài)學(xué)外周血涂片骨髓涂片骨髓病理初診形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)診斷，區(qū)分M3；治療中療效監(jiān)測(cè)（是否達(dá)到形態(tài)學(xué)CR）免疫學(xué)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)初診免疫學(xué)鑒別確診及病人殘留病灶特征抗原標(biāo)記確定；治療中MRD監(jiān)測(cè)細(xì)胞遺傳學(xué)染色體核型分析FISH初診特征染色體核型標(biāo)志檢測(cè)，輔助確診；患者預(yù)后分層；治療中遺傳學(xué)緩解程度的監(jiān)測(cè)分子生物學(xué)RT-PCR測(cè)序多重PCR初診融合基因基線定量；融合基因篩查；AML患者的預(yù)后分層突變治療中融合基因檢測(cè)ALL的MICM綜合診斷病理形態(tài)學(xué)外周血涂片骨髓涂片骨髓病理初診形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)診斷；治療中療效監(jiān)測(cè)（是否達(dá)到形態(tài)學(xué)CR）免疫學(xué)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)初診免疫學(xué)鑒別確診及病人殘留病灶特征抗原標(biāo)記確定；治療中MRD監(jiān)測(cè)細(xì)胞遺傳學(xué)染色體核型分析FISH初診特征染色體核型標(biāo)志檢測(cè)，輔助確診；患者預(yù)后分層；治療中遺傳學(xué)緩解程度的監(jiān)測(cè)分子生物學(xué)RT-PCR測(cè)序多重PCR初診融合基因基線定量；融合基因篩查；TCR、IgH重排治療中融合基因檢測(cè)；ABL激酶突變與格列衛(wèi)耐藥CLL的MICM綜合診斷病理形態(tài)學(xué)外周血涂片骨髓涂片骨髓病理初診形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)診斷；治療中療效監(jiān)測(cè)（是否達(dá)到形態(tài)學(xué)CR）免疫學(xué)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)初診免疫學(xué)鑒別確診及病人殘留病灶特征抗原標(biāo)記確定；治療中MRD監(jiān)測(cè);ZAP-70（預(yù)后分層）細(xì)胞遺傳學(xué)染色體核型分析FISH初診特征染色體核型標(biāo)志檢測(cè)；患者預(yù)后分層；治療中遺傳學(xué)緩解程度的監(jiān)測(cè)分子生物學(xué)RT-PCR測(cè)序初診IgVH突變（預(yù)后分層）MDS的MICM綜合診斷病理形態(tài)學(xué)外周血涂片骨髓涂片骨髓病理初診形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)診斷，特別是骨髓纖維化狀況等；治療中療效監(jiān)測(cè)（是否達(dá)到形態(tài)學(xué)CR）免疫學(xué)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)初診免疫學(xué)鑒別確診及病人殘留病灶特征抗原標(biāo)記確定；AA與MDS鑒別診斷治療中MRD監(jiān)測(cè)細(xì)胞遺傳學(xué)染色體核型分析FISH初診特征染色體核型標(biāo)志檢測(cè)，輔助確診；治療中遺傳學(xué)緩解程度的監(jiān)測(cè)分子生物學(xué)RT-PCR測(cè)序多重PCR初診預(yù)后分層（N-RAS）MPN的MICM綜合診斷病理形態(tài)學(xué)外周血涂片骨髓涂片骨髓病理初診形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)診斷；治療中療效監(jiān)測(cè)（是否達(dá)到形態(tài)學(xué)CR）免疫學(xué)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)初診免疫學(xué)鑒別確診及病人殘留病灶特征抗原標(biāo)記確定；治療中MRD監(jiān)測(cè)細(xì)胞遺傳學(xué)染色體核型分析FISH初診特征染色體核型標(biāo)志檢測(cè)；治療中遺傳學(xué)緩解程度的監(jiān)測(cè)分子生物學(xué)RT-PCR測(cè)序多重PCR初診特異性分子標(biāo)記檢測(cè)（JAK-2